Aplicación de PCR a partir de cultivo en la identificación de subespecies del complejo Mycobacterium Tuberculosis / The use of culture-based PCR for the identification of subspecies of the mycobacterium tuberculosis complex

Los métodos diagnósticos clásicos de tuberculosis (TB) se basan en la utilización de baciloscopía y cultivo. La identificación del agente etiológico desde la positivización del cultivo requiere entre 10 y 15 días, mientras que el empleo de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) disminuye el tiempo a 24 h, lo que permite no solo identificar las subespecies del complejo Mycobacterium tuberculosis (CMTB) sino también diferenciarlas de otras especies ambientales clínicamente importantes (MOTT) facilitando el diagnóstico y tratamiento. El objetivo del presente trabajo fue determinar la utilidad de la PCR en la identificación temprana de las micobacterias pertenecientes al CMTB, a partir de cultivos positivos, de pacientes con sospecha de TB, atendidos en un hospital pediátrico de alta complejidad, durante un período de cuatro años. A cada muestra, se le realizó baciloscopía y cultivo en medio líquido. A los cultivos positivos, una inmunocromatografía lateral (TBIDR) y luego PCR. El 4,6% del total de muestras (510/11.162) pertenecientes a 198 pacientes presentó cultivos positivos. Cuatrocientos veintiseis (84%) correspondieron a muestras respiratorias. El rendimiento de la baciloscopía directa fue del 41% (194/470). Cuatrocientos treinta y ocho (86%) resultaron M. tuberculosis, 21 (4%) Mycobacterium bovis, 7 (1%), M. bovis-BCG y 44 (9%) MOTT. La utilización de medios de cultivos líquidos junto con el empleo de PCR favorecen una rápida orientación microbiológica y constituye una estrategia útil para optimizar el manejo clínico de estas infecciones, desde el punto de vista terapéutico y epidemiológico, especialmente en pediatría (AU)

Classical diagnostic methods for tuberculosis (TB) are based on the use of smear microscopy and culture. The identification of the etiological agent from positive culture requires 10 to 15 days, while the use of the polymerase chain reaction (PCR) reduces the time to 24 h, which allows not only to identify the subspecies of the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) but also to differentiate them from clinically important environmental mycobacteria other than tuberculosis (MOTT), facilitating diagnosis and treatment. The aim of this study was to determine the usefulness of PCR in the early identification of mycobacteria belonging to the MTC, from positive cultures of patients with suspected TB seen in a pediatric tertiary hospital over a 4-year period. For each sample, smear microscopy and culture in liquid medium was performed. Positive cultures were subjected to lateral immunochromatography (TBIDR) and then PCR. Of the total number of samples (510/11,162) belonging to 198 patients, 4.6% showed positive cultures; 426 (84%) were respiratory samples. The direct smear microscopy yield was 41% (194/470). Overall, 438 (86%) were found to be M. tuberculosis, 21 (4%) Mycobacterium bovis, 7 (1%), M. bovis-BCG, and 44 (9%) MOTT. The use of liquid culture media together with the use of PCR favors a rapid microbiological orientation and is a useful strategy to optimize the clinical management of these infections, from a therapeutic and epidemiological point of view, especially in children (AU)

Infecciones por Chlamydia trachomatis en una unidad de cuidados intensivos neonatales / Chlamydia trachomatis infections in a neonatal intensive care unit

Las infecciones por Chlamydia trachomatis han aumentado su prevalencia, especialmente en jóvenes embarazadas. Esto adquiere relevancia en pediatría por el elevado riesgo de transmisión vertical al neonato y su potencial gravedad en el lactante. Estas infecciones requieren de un alto índice de sospecha, por cuadro clínico atípico y signos radiológicos inespecíficos. Los métodos diagnósticos convencionales presentan limitaciones para su detección. Las técnicas moleculares son las recomendadas por su elevada sensibilidad, especificidad y rapidez, lo cual permite una terapéutica adecuada y oportuna. En este estudio, desarrollado en una unidad de cuidados intensivos neonatales de un hospital de alta complejidad durante 12 años, se describieron las características de la población, su presentación clínica y evolución. La detección microbiológica se realizó por métodos moleculares. Se incluyeron 29 pacientes (p) con infección por C. trachomatis (3,9% del total de muestras enviadas),13 p con infección respiratoria y 16 p con compromiso ocular. La mediana de edad fue de 19 días al momento del diagnóstico y el 65% de las gestantes tenía <25 años. Veinticuatro p (83%) eran recién nacidos a término y 23 p (79%) previamente sanos. Nueve p (31%) presentaron fiebre al momento del ingreso y 12 (41%) eosinofilia. De los 13 p con enfermedad respiratoria, 9 (69%) consultaron por tos y 11 (85%) con hipoxemia, con requerimientos de oxígeno en 8 (61%), asistencia respiratoria mecánica en 3 (23%) y uno (16%) requirió ECMO. Los hallazgos radiológicos mostraron un patrón intersticial inespecífico. Nueve p (31%) presentaron coinfección y uno falleció asociado a influenza A (AU)

The prevalence of Chlamydia trachomatis infections has increased, especially among young pregnant women. This is of particular relevance in pediatrics due to the high risk of motherto-child transmission and the potential severity of the infection in infants. A high index of suspicion is required for these infections due to the atypical clinical features and non-specific radiological signs. The usefulness of conventional diagnostic methods is limited. Molecular techniques are recommended because of their high sensitivity, specificity, and speed, allowing for adequate and timely treatment. In this 12-year study conducted in a neonatal intensive care unit of a tertiary-care hospital, patient characteristics, clinical presentation, and outcome are described. Microbiological detection was performed using molecular methods. Twenty-nine patients with C. trachomatis infection (3.9% of the total samples submitted), of whom 13 had respiratory tract infection and 16 ocular involvement, were included. The median age at diagnosis was 19 days and 65% of the mothers were <25 years old. Twenty-four p (83%) were term newborns and 23 patients (79%) were previously healthy. On admission, 9 patients (31%) had fever and 12 (41%) had eosinophilia. Of the 13 patients with respiratory tract involvement, 9 (69%) consulted for cough and 11 (85%) had hypoxemia, requiring oxygen in 8 (61%), mechanical ventilation in 3 (23%), and ECMO in 1 (16%). Radiological findings showed a nonspecific interstitial pattern. Nine patients (31%) presented with coinfection, one of whom died due to an associated influenza A infection (AU)

Evolución de las infecciones por Pneumocystis Jirovecii en el Hospital de Pediatría Juan P. Garrahan / Evolution of Pneumocystis Jirovecii infections at Hospital de Pediatría Juan P. Garrahan

Pneumocystis jirovecii es un hongo oportunista, causante de neumonía en huéspedes inmunocomprometidos. Es una infección grave con elevada tasa de mortalidad en pacientes oncohematológicos y receptores de trasplante de células progenitoras hematopoyéticas. La administración de corticosteroides es el principal factor de riesgo para adquirir esta infección. Actualmente las infecciones ocurren en aquellos pacientes que no reciben adecuada profilaxis. Las técnicas de diagnóstico molecular son las recomendadas por su elevada sensibilidad, especificidad y rapidez. La frecuencia global de P. jirovecii en pacientes inmunocomprometidos de nuestro hospital, durante el período evaluado fue de 4,8%, con una mortalidad global del 20%. Como factores de mal pronóstico se reportan la presencia de coinfecciones y la necesidad de asistencia respiratoria mecánica. Es importante la sospecha precoz en pacientes de riesgo, confirmada con un diagnóstico preciso mediante métodos moleculares para una intervención adecuada y oportuna (AU)

Pneumocystis jirovecii is an opportunistic fungus, causing pneumonia in immunocompromised hosts. It is a severe infection with a high mortality rate in oncology/hematology patients and hematopoietic stem cell transplant recipients. The administration of corticosteroids is the main risk factor for acquiring this infection. Currently infections occur in patients who do not receive adequate prophylaxis. Molecular diagnostic techniques are recommended because of their high sensitivity, specificity, and speed. In the study period, the overall incidence of P. jirovecii in immunocompromised patients at our hospital was 4.8%, with an overall mortality rate of 20%. Factors of a poor prognosis are the presence of coinfections and the need for mechanical respiratory assistance. Early suspicion in high-risk patients is important to confirm the diagnosis through molecular studies and start adequate and early treatment (AU)

Optimización y validación de un método de PCR en tiempo real para el diagnóstico de Pneumocystis jirovecii en muestras respiratorias de pacientes pediátricos / Optimization and validation of a real-time PCR method for the diagnosis of Pneumocystis jirovecii in respiratory samples of pediatric patients

Pneumocystis jirovecii (PCP) es un hongo oportunista, que causa neumonía en pacientes con un sistema inmunitario seriamente comprometido. La prevalencia de la enfermedad disminuyó dramáticamente con la introducción de la terapia antirretroviral combinada (HAART) y actualmente las infecciones ocurren en aquellos pacientes que no reciben adecuada profilaxis o no la completan. Es una enfermedad grave con elevada tasa de mortalidad (30-60%) en pacientes oncohematológicos y receptores de trasplante de células progenitoras hematopoyéticas (HSCT), pero prevenible con profilaxis adecuada, por lo que el reconocimiento temprano de los pacientes en riesgo es crítico. El diagnóstico de certeza es de laboratorio ya que los hallazgos clínicos son inespecíficos y las imágenes no son patognomónicas de este agente. Actualmente las técnicas moleculares como la PCR en tiempo real son las metodologías recomendadas ya que poseen elevada sensibilidad, especificidad, rapidez y eficiencia. En el presente estudio se optimizó un método de PCR en tiempo real con iniciadores dirigidos al gen del ARNr de la subunidad grande mitocondrial, en formato dúplex junto con el gen constitutivo RNAsa P. El método demostró ser muy sensible y rápido para el diagnóstico clínico de PCP, con una concordancia қ: 0,789 con el método convencional de PCR anidada que emplea como target a la región espaciadora transcrita interna (ITS) del gen del ARNr de PCP, a la vez de ser mucho menos laborioso y con menor riesgo de contaminación, lo que permite el manejo de un alto número de muestras clínicas (AU)

Pneumocystis jirovecii (PCP) is an opportunistic fungus causing pneumonia in severely immunocompromised patients. Prevalence of the disease has dramatically decreased after the introduction of combined antiretroviral therapy (HAART) and currently these infections occur in patients who do not receive adequate prophylaxis or do not complete treatment. PCP is a severe disease with a high mortality rate (30-60%) in oncology-hematology patients and hematopoietic stem-cell transplantation (HSCT) recipients, but is preventable with adequate prophylaxis. Therefore, early recognition of at-risk patients is essential. Laboratory studies are the gold standard for the diagnosis as clinical findings are unspecific and imaging studies are not pathognomonic for this agent. Currently, molecular techniques, such as real-time PCR, are the methodology of choice because of their high sensitivity, specificity, speed, and efficiency. In this study, a real-time PCR method was optimized with primers targeting the gene of the mitochondrial large subunit rRNA in a duplex format together with the constitutive gene RNAsa P. The method showed to be very sensitive and fast for the clinical diagnosis of PCP, with a concordance of қ: 0.789 with the conventional nested PCR method targeting the internal transcribed spacer (ITS) region of the rRNA gene of PCP, and is much easier to perform with a lower contamination risk allowing a high through-put of clinical samples (AU)

Optimización de un método de PCR en tiempo real para el diagnóstico de infecciones por Mycoplasma pneumoniae / Optimization of a real-time PCR method for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae infections

A Mycoplasma pneumoniae se lo ha descrito como causante de diversas patologías, pero la más frecuente es la neumonía de la comunidad, en la que puede asociarse a otros patógenos. Afecta pincipalmente a niños de edad escolar y adultos jóvenes, aunque en las últimas décadas es frecuente hallarlo también en niños menores de 5 años. El daño celular ocurre sobre el epitelio de bronquios y bronquiolos por acumulación de peróxido de hidrógeno y radicales superóxido producidos durante su metabolismo celular. Recientemente se ha reportado que en estos eventos patogénicos también participa una citotoxina conocida como CARDS toxin (community-acquired respiratory distress syndrome) que la bacteria expresa como factor de virulencia, ya que induce una importante respuesta inflamatoria celular. Los métodos moleculares son más sensibles y rápidos que los métodos de diagnóstico tradicionales y se consideran de elección. No obstante, para lograr un diagnóstico óptimo, se aconseja la combinación de estos métodos junto con los serológicos. En el presente estudio se optimiza un método de PCR en tiempo real con iniciadores dirigidos a la región del gen que codifica la CARDS toxin. El método demostró ser muy sensible y rápido para el diagnóstico clínico de M. pneumoniae, con una concordancia қ: 0,95 con el método convencional de PCR anidada que emplea como target al gen que codifica para la citoadhesina P1. A su vez es mucho menos laborioso e implica un menor riesgo de contaminación, lo que permite el manejo de un alto número de muestras clínicas (AU)

Mycoplasma pneumoniae has been described as the cause of different infections, the most common of which is communityacquired pneumonia, possibly associated with other pathogens. Community-acquired pneumonia mainly affects school-age children and young adults, although over the past decades the disease has also been found in children under 5 years of age. Cell damage occurs on the epithelium of the bronchi and bronchioles due to accumulation of hydrogenous peroxide and superoxide radicals produced during cell metabolism. Recently, it has been reported that in these pathogenic events a cytotoxin known as CARDS toxin (community-acquired respiratory distress syndrome) participates, expressed by the bacteria as a factor of virulence, as it induces an important inflammatory cell response. The molecular methods are more sensitive and faster than the traditional diagnostic methods, and are considered the methods of choice; however, for an optimal diagnosis, a combination of these methods together with serological studies is recommended. In the current study, a real-time PCR method with markers targeted to the region of the gene encoding the CARDS toxin was optimized. The method showed to be very sensitive and fast for the clinical diagnosis of M. pneumoniae, with a қ agreement of 0.95 with the conventional nested PCR method that uses the gene encoding cytoadhesin P1 as a target. Additionally, the new method is much easier with a lower risk of contamination, which allows management of a large number of clinical samples (AU)

Tamizaje de infecciones por virus Epstein Barr en muestras de sangre mediante el uso de una PCR en tiempo real previo a la cuantificación de la carga viral / Screening for Epstein Barr virus infections in blood samples using real-time PCR previous to viral load quantification

El desorden linfoproliferativo postrasplante es una de las complicaciones más importantes producidas por el virus Epstein Barr (EBV) en pacientes trasplantados de órganos sólidos y de médula ósea ya que afecta la sobrevida del paciente y del injerto. En estos pacientes se han reportado altos niveles de carga viral en sangre periférica que preceden al desarrollo del desorden linfoproliferativo postrasplante. Por esto el monitoreo de la carga viral (CV) permite detectar pacientes en riesgo a desarrollar esta patología para iniciar una terapia preventiva. El objetivo de este trabajo fue desarrollar una técnica de PCR en tiempo real cualitativa (RT PCR) que permitiera ser utilizada como prueba de tamizaje previo a la determinación de CV EBV. De esta manera se podrían minimizar el costo que implicaría la utilización de un método cuantitativo comercial para todas las muestras que ingresaran al monitoreo viral. Teniendo en cuenta el desempeño de la RT PCR desarrollada, se estableció Ct ≤ 37 como valor límite para evitar amplificación inespecífica y seleccionar las muestras candidatas a la determinación de CV EBV. Dicho punto de corte presentó una sensibilidad diagnóstica relativa de 80%, una especificidad diagnóstica relativa de 85%, un valor predictivo positivo (VPP) de 53% y un valor predictivo negativo (VPN) de 95%. Para ello se consideró que valores de CV EBV< 4000 copias/ml sangre eran bajas o no presentaban riesgo de desarrollar complicaciones. El límite de detección LoD 95% fue de 280 copias de EBV/ml sangre (66 ­ 1184, IC 95%). Esta técnica demostró tener una buena performance analítica, ser de fácil implementación y el punto de corte seleccionado nos permitió realizar un buen tamizaje de muestras de pacientes trasplantados que resultaban ser candidatas a la determinación de CV, con la consiguiente disminución de costos (AU)

Post-transplant lymphoproliferative disorder is one of the main complications caused by the Epstein Barr virus (EBV) in solidorgan and bone-marrow transplantation patients affecting survival of both the patient and the graft. High levels of viral load (VL) in peripheral blood preceding the development of posttransplant lymphoproliferative disorder have been reported in these patients. Therefore, VL monitoring allows detection of patients who are at risk of developing this disease to start preventive treatment. The aim of this study was to develop a qualitative real-time PCR technique to use as an early screening test to determine EBV VL. This test may minimize costs related to the use of a commercial quantitative method for all the samples that enter for viral screening. Considering the performance of the RT PCR method developed, a Ct ≤ 37 was established as the cut-off limit to avoid unspecific amplification and select the samples that are candidates for EBV VL determination. This cut-off point had a relative diagnostic sensitivity of 80%, a relative diagnostic specificity of 85%, a positive predictive value (PPV) of 53% and a negative predictive value (NPV) of 95%. Thus, an EBV VL< 4000 copies/ml blood was considered to be low and not to be a risk for developing complications. The 95% limit of detection was 280 copies of EBV/ml blood (66­1184, 95%CI). The technique showed to be of good analytical performance and easy implementation. The cut-off point allowed a good screening of the samples of transplanted patients to detect those who are candidates for VL determination at a lower cost (AU)

Brote de Ralstonia mannitolilytica a partir de bacteriemias asociadas a catéteres implantables y semiimplantables en un hospital pediátrico / Outbreak of Raistonia mannitolilytica by implantable and semi-implantable catheter-related bacteremia in a pediatric hospital

Ralstonia mannitolilytica junto con Ralstonia pickettii han sido asociadas con brotes hospitalarios relacionados con la contaminación de algún dispositivo o fluido. El objetivo de este trabajo fue describir un brote por R. mannitolilytica a partir de bacteriemias asociadas a catéteres implantables y semiimplantables ocurrido en un hospital pediátrico de alta complejidad y evaluar la utilidad del empleo de métodos moleculares para su investigación.Se detectó la presencia de bacilos gram negativos no fermentadores, con igual antibiotipo, en hemocultivos y retrocultivos a partir de dos pacientes que tenían catéteres implantables y estaban atendidos en una misma área del hospital. Se realizaron estudios microbiológicos de muestras de frascos de heparina, soluciones de dextrosa y soluciones antisépticas con resultado negativo. Algunos pacientes tuvieron signos y/o síntomas clínicos de bacteriemia al habilitar los catéteres para su uso. Se citaron para su estudio a todos los pacientes que habían tenido un procedimiento de apertura y cierre de catéter durante las fechas cercanas a los hallazgos en hemocultivos (N expuestos = 45). Ocurrieron 17 casos (infectados), a partir de los cuales se analizaron 23 aislamientos, en los que se pudo documentar la presencia de R. mannitolilytica (23 aislamientos). Por métodos moleculares se determinó que los aislamientos provenientes de muestras de pacientes involucrados en el brote se encontraban estrechamente relacionados y podrían representar una misma cepa o clon. Por evidencia circunstancial se consideró a la "solución heparínica de cierre" como fuente posible del brote (AU)

Both Ralstonia mannitolilytica and Ralstonia pickettii have been associated with hospital outbreaks due to device or fluid contamination. The aim of this study was to describe an implantable- or semi-implantable-catheter-related bacteremia outbreak by R. mannitolilytica in a tertiary-care hospital and to assess the usefulness of molecular analysis for the identification of the organism. Non-fermenting gram-negative bacilli, with identical antibiotypes, were detected in hemocultures of two patients with implantable catheters in the same hospital area. Microbiological studies of heparin and dextrose and antiseptic solution vials were negative. Some of the patients had clinical signs and/or symptoms of bacteremia when the catheter was prepared for use. All patients who underwent a procedure of accessing or locking the port of the catheter around the time of the positive hemoculture findings were contacted (N exposed = 45). Seventeen infections were detected, of which 23 isolates were analyzed. The presence of R. mannitolilytica was recorded in 23 isolates. Molecular analysis showed that the isolates from the samples of the patients involved in the outbreak were closely related and might represent the same strain or clone. Circumstantial evidence suggested that the heparin-lock solution may have been the source of the outbreak (AU)

Utilización de un método molecular para la detección de kingella kingae en muestras osteoarticulares / The Use of a molecular method for the detection of Kingella kingae in bone and joint samples

Kingella kingae es un agente causal de infecciones osteoarticulares especialmente en niños menores de 4 años. En este trabajo se ha realizado un estudio comparativo entre un método molecular [reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real y dos métodos microbiológicos habitualmente empleados para el estudio de las infecciones osteoarticulares. Sólo se obtuvo resultado positivo para K. kingae por el método de PCR en 3 de las 60 muestras analizadas. Los pacientes evolucionaron sin secuelas aparentes con tratamiento antibiótico. Es importante destacar, como ya lo han hecho otros autores, que adicionando métodos moleculares se puede aumentar sensiblemente la recuperación de este patógeno.

Vigilancia nacional de tos convulsa, coqueluche o pertussis: experiencia del hospital Garrahan y de los laboratorios nacionales de referencia / National vigilance program for whooping cough or pertussis: Experience of the Garrahan Hospital and national reference laboratories

Pertussis es una enfermedad particularmente grave en menores de 1 año. No sólo no se ha podido erradicar pese al uso de vacunas por más de cincuenta años, sino que en la actualidad ha reemergido. En junio del 2010 se registró uno de los mayores brotes de coqueluche de los Estados Unidos, con 910 casos confirmados. En la Argentina se ha venido registrando un aumento significativo de casos de pertussis. En este trabajo se presentan datos nacionales y de nuestro hospital confirmados por cultivo y/o métodos moleculares (PCR). Durante el período 2008-2010 se registraron anualmente en nuestro país entre 600 y 1.000 casos con sintomatología compatible y en el Hospital Garrahan entre 110 y 150. La confirmación se concretó en alrededor de 24% de los casos nacionales y entre un 7% y un 36,4% en el hospital. Los datos obtenidos en los laboratorios nacionales de referencia muestran un registro actual que vuelve a alcanzar los valores del 2008, luego de un descenso en el 2009. En el Hospital Garrahan, un aumento relativo en el número de casos sospechosos no confirmados podría estar vinculados a cuadros respiratorios compatibles con pertussis producidos por otros agentes etiológicos. Más allá de las variaciones anuales se puede observar la vigencia de esta enfermedad en la Argentina. Desde el punto de vista de la prevención es importante destacar que muchos de estos niños no habían recibido el esquema de vacunación completo (la mayoría de los casos se registró en menores de 6 meses). (AU)

Pertussis is a especially severe illness in infants. The use of vaccines during more than 50 years could not eradicate this illness, that now it has reemerged. In June 2010 one of the greatest outbreaks of coqueluche was recorded in the United States, with 910 confirmed cases. In Argentina, a significant increase of pertussis cases was recorded. In the present study both national and hospital data is presented, including cases confirmed by culture and/or molecular methods (PCR). During 2008-2010 between 600 and 1,000 cases were recorded in our country, and between 110 and 150 at the Hospital Garrahan. Confirmation was done in almost 24% of national cases and between 7% and 36.4% in the hospital. Data obtained by national reference laboratories showed that cases decreased from 2007 to 2008, to regain similar numbers in 2009. In the Hospital Garrahan a relative increase of non-confirmed suspected cases could be related to respiratory syndromes due to other agents but compatible with pertussis. Beyond annual fluctuations the prevalence of this illness in Argentina can be observed. From the prevention point of view it is very important to highlight that many of these children have not received the complete vaccination scheme (most of cases have been recorded in less than 6-month-old children) (AU)

Enfermedad por adenovirus en niños receptores de trasplante alogénico de células progenitoras hematopoyéticas / Adenovirus disease in children undergoing allogeneic hematopoietic stem cell transplantation

Introducción: Las infecciones virales son una causa conocida de morbi-mortalidad en pacientes receptores de trasplante alogénico de células progenitoras hematopoyéticas (TACPH). Los avances en la prevención y tratamiento de la infecciones por los virus del grupo Herpes obliga a centrar la atención en virus emergentes como el Adenovirus (Adv). Objetivos: Analizar la incidencia, evolución y factores de riesgo de la enfermedad por Adv en pacientes pediátricos trasplantados en un mismo centro. Métodos: Cohorte retrospectiva. Se analizaron los TACPH realizados entre abril/94 y abril/10. Se comparó la frecuencia de enfermedad por Adv antes y después del inicio del programa de TACPH con donantes no relacionados, en el año 2008. Resultados: n TCPH: 303. Incidencia enfermedad por Adv: 18p (5,4%), según período: 1994-2007: 2,8% vs 2008-2010: 18,9% (p<0,001). Pacientes con Adv: 61% varones, mediana edad: 8 años (r 0,6 - 18), días del trasplante: 55 (r 4- 295). La enfermedad por Adv tuvo una mortalidad del 22% y fue causa del 5,6% de la mortalidad relacionada con el trasplante. Los factores de riesgo para enfermedad por Adv fueron el antecedente de TACPH no relacionado (OR 6,6 IC95% 1,6-27,8) y la enfermedad por CMV (OR 12,3 IC95% 3,4- 44,5). Doce pacientes con viremia y/o enfermedad grave por Adv que recibieron tratamiento con Cidofovir (75%) tuvieron toxicidad renal moderada-severa y 33% de mortalidad por Adv. Conclusión: La enfermedad por Adv representa una causa importante de morbi-mortalidad en el TACPH. Los pacientes con factores de riesgo requieren estrategias de diagnóstico temprano y tratamiento oportuno (AU)

Introduction: Viral infections are a well-known cause of morbidity and mortality in patients who underwent allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (AHSCT). Advances in the prevention and treatment of herpes virus infections have led to increased focus on other emerging viruses such as the adenovirus (ADV). Objectives: To analyze the incidence, evolution, and risk factors for ADV disease in pedia - tric patients who underwent AHSCT in a single center. Methods: All patients who underwent HSCT between April 1994 and April 2010 were retrospectively analyzed. Incidence rates of ADV disease before and after the introduction of the program of AHSCT from non-related donors in 2008 were compared. Results: HSCT n = 303. Incidence of ADV disease: 18p (5.4%), 1994-2007: 2.8% vs 2008-2010: 18.9% (p<0,001). Patients with ADV: 61% boys, mean age: 8 years (r 0.6 - 18), mean days after transplantation: 55 (r 4- 295). Mortality due to ADV disease was 22% and ADV was de cause of 5.6% of transplant-related mortality. Risk factors for disease due to ADV were AHSCT from a non-related donor (OR 6.6 CI 95% 1.6-27.8) and CMV disease (OR 12.3 CI 95% 3.4- 44.5). Twelve patients with viremia and/or severe disease due to ADV who received treatment with Cidofovir (75%) developed moderate- to-severe kidney toxicity and mortality due to ADV was 33%. Conclusion: ADV disease is an important cause of morbidity and mortality in AHSCT. At-risk Patients require early diagnostic strategies and adequate treatment (AU)

Impacto de 10 años de vigilancia de colonización con enterococos resistentes a vancomicina (ERV) en un hospital pediátrico de alta complejidad / 10 year impact of monotoring colozation with vancomycin resistant enterococci (VRE) in a tertiary care pediatric hospital

Se demostro que la vigilancia activa de colonización con enterococos resistentes a vancomicina (ERV) resulta costo-efectiva y que es capaz de limitar la presencia de esos patógenos en los hospitales. El objetivo de este trabajo fue evaluar el impacto de una forma de vigilancia menos estricta a través de los resultados de los estudios de prevalencia de un día y del número anual de pacientes infectados con ERV. En los cortes de prevalencia, se estudiaron todos los pacientes hospitalizados en días determinados, a través de hisopados rectales cultivados en medio BEAA con 6 ug/ml de vancomicina (VAN). También se estudiaron todos los aislamientos de enterococos provenientes de materiales clinicamente significativos a lo largo de los años. La resistencia a VAN fue confirmada por difusión, Etest y PCR especifica para lo genes vanA, vanB, o van C. La relación clonal fue establecida por electroforesis en campos pulsados cor cortes con la enzima Smal. El porcentaje de colonización rectal de ERV en los cortes de prevanlencia no registró un aumento significativo entre 2002 y 2007 (p > 0.05). La diversidad clonal mostró una baja tendencia hacia la diseminación intrahospitalaria de los ERV. El número de bacteriemias por ERV se mantuvo en niveles aceptables y la mayoria de las infecciones estuvieron localizadas en el tracto urinario. Concluyendo, el número de pacientes colonizados aumentó en forma sostenida pero sin diferencias significativas entre los distintos años. El número de pacientes severamente infectados con ERV hasta el momento ha sido escaso. Esto pareceria indicar que la estrategia elegida ha resultado efectiva.

Streptococcus pyogenes: vigilancia de su resistencia a los antibióticos en un hospital pediátrico / Streptococcus pyogenes: surveillance of resistance to antimicrobial at a pediatric hospital

En varios países del mundo comenzaron a aislarse en forma creciente cepas de Streptococcus pyogenes resistentes a eritromicina. Este trabajo tuvo por objeto verificar la sensibilidad a penicilina, lincosamidas y macrólidos de los estreptococos del grupo A aislados en nuestro hospital entre 1989 y 1994. Se estudió un total de 373 cepas aisladas principalmente de exudados faríngeos por el método de dilución en medio sólido. Ninguna cepa resultó resistente a penicilina y sólo en 1989 se aislaron cepas resistentes a eritromicina (1,6 por ciento para ese año). Las dos cepas resistentes presentaron un patrón de sensibilidad compatible con el mecanismo MLS inducible. En conclusión, S. pyogenes continúa siendo uniformemente sensible a penicilina mientras que tanto la eritromicina como los nuevos macrólidos y las lincosamidas mantienen su efectividad in vitro como para seguir siendo considerados como alternativas para el tratamiento de infecciones estreptocócicas en nuestro medio