Arracacia xanthorrhiza Bancr compounds decrease β-actin, hypoxia-inducible factor-1 and nitric oxide production in HeLa cells / Los componentes de la Arracacia xanthorrhiza Bancr disminuyen las producciones de la actina β, del factor-1 inducible por la hipoxia y del óxido nítrico en células Hela

Abstract The treatment of cancer patients with anti-cancer drugs is often accompanied by the presence of undesirable side effects. The use of natural plant derivatives alone, or in conjunction with existing anti-neoplastic drugs, has been suggested to obtain better results and decrease these side effects. Nitric oxide (NO•), the hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1), and decreased concentration of actin play important roles in cancer progression. The beneficial effects of polyphenols in various organ disorders including cancer has been reported. The aim of this study was to determine the effect of Arracacia xanthorrhiza Bancr extracts, white (WAXB) and red (RAXB) variants (compounds rich in polyphenols) on the concentrations of β-actin, NO• and HIF-1 in Hela cells cultures, to uncover possible anti-neoplastic effects. Extracts from the plant leaves were added to Hela cell cultures at a concentration of 10-3 mg/mL, and after 24 hours of culture, the concentrations of β-actin, NO• and HIF-1 were determined by immunohistochemical, biochemical and western blot assays. Both extracts reduced the concentrations of β-actin, NO• and HIF-1 (p<0.001), similar to the methotrexate effect. These results suggest an antineoplastic effect of the studied plant extracts and highlight the possibility of their use in the treatment of neoplasms.

Resumen El tratamiento de pacientes con cáncer utilizando drogas-antineoplásicas presenta problemas relacionados con efectos colaterales indeseables. Se ha sugerido el uso de derivados de plantas naturales solas, o en combinación con drogas antineoplásicas existentes para obtener mejores resultados y disminuir los efectos colaterales. Así mismo, se ha reportado que el óxido nítrico (NO•), el factor-1 inducible por hipoxia (HIF-1) y la disminución de la expresión de la actina tienen un papel en la progresión del cáncer. También se ha reportado los efectos beneficiosos de lo polifenoles en varios desordenes orgánicos, incluyendo el cáncer. El objetivo de este estudio fue determinar los efectos de los extractos procedentes de la Arracacia xanthorrhiza Bancr blanca (AXBB) y la variedad roja (AXBR) (compuestos ricos en polifenoles) en las concentraciones de la actina-beta, el NO• y el HIF-1 en cultivo de células Hela, para destacar sus posibles efectos antineoplásicos. A los cultivos de células Hela se les agregaron los extractos de las hojas de AXBB o AXBR (10-3 mg/mL, concentración final) y después de 24 horas de cultivo se determinaron las concentraciones de la actina-beta, el NO• y el HIF-1 por métodos inmunohistoquímicos, bioquímicos y western blot. Ambos extractos disminuyeron las concentraciones de la actina-beta, el NO• y el HIF-1 (p<0,001) de una manera similar al efecto del metotrexato. Estos resultados sugieren un efecto antineoplásico de estos extractos y destacan la posibilidad de ser usados para el tratamiento de las neoplasias.

Actin filaments altered distribution in wheat (Triticum aestivum) "Bending Root" to respond to enhanced Ultraviolet-B radiation / Distribuição alterada dos filamentos de actina no trigo (Triticum aestivum) "Raiz dobrada" para responder à radiação ultravioleta B aprimorada

Abstract Plants adjust their shoot growth to acclimate to changing environmental factors, such as to enhanced Ultraviolet-B (UV-B) radiation. However, people have ignored that plant roots can also respond to UV-B light. Here, we find the morphology curled wheat roots under UV-B radiation, that we call, "bending roots." The curly region is the transition zone of the root after observed at the cellular level. After exposed to enhanced UV-B radiation for 2 d (10.08 KJ/m2/d), cell size decreased and actin filaments gathered in wheat roots. We also find that H2O2 production increased and that content of the indole-3-acetic acid (IAA) increased remarkably. The pharmacological experiment revealed that actin filaments gathered and polymerized into bundles in the wheat root cells after irrigated H2O2 and IAA. These results indicated that actin filaments changed their distribution and formed the "bending root," which was related to H2O2 production and increase in IAA. Overall, actin filaments in wheat root cells could be a subcellular target of UV-B radiation, and its disruption determines root morphology.

Resumo As plantas ajustam o crescimento da parte aérea para se adaptarem a fatores ambientais variáveis, como o aumento da radiação ultravioleta B (UVB). No entanto, as pessoas ignoram que as raízes das plantas também podem responder à luz UVB. Neste estudo, verificamos a morfologia das raízes enroladas de trigo sob radiação UVB, o que chamamos de "raízes dobradas". A região encaracolada é a zona de transição da raiz no nível celular. Depois de exposição à radiação UVB aprimorada por 2 dias (10,08 KJ/m2/d), o tamanho das células diminuiu, e os filamentos de actina se reuniram. Também constatamos que a produção de H2O2 aumentou e que o conteúdo do ácido indol-3-acético (IAA) aumentou notavelmente. O experimento farmacológico revelou que os filamentos de actina se reuniram e polimerizaram em feixes nas células da raiz de trigo após irrigação com H2O2 e IAA. Esses resultados indicam que os filamentos de actina alteraram sua distribuição e formaram a "raiz dobrada", relacionada à produção de H2O2 e ao aumento do IAA. No geral, os filamentos de actina nas células da raiz de trigo podem ser um alvo subcelular da radiação UVB, e sua interrupção determina a morfologia da raiz.

Ultrastructural clarification of the peripherally located actin network in the myelinated axons / Aclaración ultraestructural de la red de actina localizada periféricamente en los axones mielinizados

SUMMARY: Despite the existence of a large amount of actin in the axons, the concentration F-actin was quite low in the myelinated axons and almost all the F-actin were located in the peripheries of the myelinated axons. Until now, the ultrastructural localization of F-actin has still not been reported in the myelinated axons, probably due to the lack of an appropriate detection method. In the present study, a phalloidin-based FITC-anti-FITC technique was adopted to investigate the subcellular localization of F-actin in the myelinated axons. By using this technique, F-actin is located in the outer and inner collars of myelinated cytoplasm surrounding the intermodal axon, the Schmidt-Lanterman incisures, the paranodal terminal loops and the nodal microvilli. In addition, the satellite cell envelope, which encapsulates the axonal initial segment of the peripheral sensory neuron, was also demonstrated as an F-actin-enriched structure. This study provided a hitherto unreported ultrastructural view of the F-actin in the myelinated axons, which may assist in understanding the unique organization of axonal actin cytoskeleton.

RESUMEN: A pesar de la existencia de una gran cantidad de actina en los axones, la concentración de F-actina era bastante baja en los axones mielinizados y casi la totalidad de F-actina se localizaba en las periferias de los axones mielinizados. A la fecha aún no se ha reportado la localización ultraestructural de F-actina en los axones mielinizados, probablemente debido a la falta de un método de detección apropiado. En el presente estudio, se adoptó una técnica FITC-anti-FITC basada en faloidina para investigar la localización subcelular de F-actina en los axones mielinizados. Mediante el uso de esta técnica, la F-actina se localiza en los collares externo e interno del citoplasma mielinizado que rodea el axón intermodal, a las incisiones de Schmidt-Lanterman,a las asas terminales paranodales y a las microvellosidades nodales. Además, la envoltura de la célula satélite, que encapsula el segmento axonal inicial de la neurona sensorial periférica, también se demostró como una estructura enriquecida con F-actina. Este estudio proporcionó una vista ultraestructural de la F-actina en los axones mielinizados, que puede ayudar a comprender la organización única del citoesqueleto de actina axonal.

Leiomiomatosis vulvovaginal: reporte de un caso y revisión bibliográfica / Vulvo-Vaginal Leiomyomatosis: Case Report and Review of the Literature

Resumen ANTECEDENTES: Los leiomiomas son los tumores pélvicos más frecuentes en la mujer; sin embargo, su localización vaginal es excepcional. Suelen ser asintomáticos y encontrarse como un hallazgo clínico. En los últimos 20 años solo se han reportado 85 casos, y solo dos han sido recurrentes. OBJETIVO: Reportar un caso de miomatosis vaginal recurrente en una paciente histerectomizada y revisar la bibliografía al respecto. CASO CLÍNICO: Paciente de 58 años, histerectomizada, con una tumoración vaginal. El reporte histopatológico informó una proliferación fusocelular, debidamente delimitada, dispuesta en haces entrecruzados. Los núcleos eran alargados, monomorfos y de extremos romos. El estroma era escaso y colagénico. No se observaron atipias citonucleares ni necrosis. El estudio inmunohistoquímico de la lesión con actina de anticuerpos antimúsculo liso y desmina se reportó positivo. Se diagnosticó miomatosis vulvovaginal recurrente. Se trató mediante resección quirúrgica. CONCLUSIÓN: Los leiomiomas vulvovaginales son extremadamente raros y la bibliografía al respecto es poca; su recurrencia es verdaderamente excepcional. De ahí la importancia de la publicación de estos casos, que aporta información que pueden tomar en cuenta otros clínicos al momento del diagnóstico.

Abstract BACKGROUND: Leiomyomas are the most frequent pelvic tumors in women; however, their vaginal location is unusual. They are usually asymptomatic and present as a clinical finding. In the last 20 years only 85 cases have been reported, and only two have been recurrent. OBJECTIVE: To report a case of recurrent vaginal myomatosis in a hysterectomized patient and review the literature. CLINICAL CASE: A 58-year-old hysterectomized patient with a vaginal tumor. The histopathologic report reported a fusocellular proliferation, properly delimited, arranged in crisscross bundles. The nuclei were elongated, monomorphous and blunt ended. The stroma was sparse and collagenous. No cytonuclear atypia or necrosis were observed. Immunohistochemical study of the lesion with anti-smooth muscle antibody actin and desmin was reported positive. Recurrent vulvovaginal myomatosis was diagnosed. It was treated by surgical resection. CONCLUSION: Vulvovaginal leiomyomas are extremely rare, and the literature is sparse; their recurrence is truly exceptional. Hence the importance of publishing these cases, providing information to be considered by other clinicians at the time of diagnosis.

Diferencias fenotípicas de fibroblastos gingivales en sujetos con hiperplasia gingival idiopática frente a sujetos periodontalmente sanos: estudio piloto / Phenotypic differences of gingival fibroblasts in subjects with idiopathic gingival hyperplasia versus periodontally healthy subjects: a pilot study

Objetivo: identificar, describir y diferenciar las características fenotípicas de los fibroblastos gingivales (FGs) en pacientes con hiperplasia gingival idiopática (HGI) e individuos periodontalmente sanos. Métodos: los FGs fueron aislados a partir de tejido gingival de individuos periodontalmente sanos (n=2) y pacientes con HGI (n=2). Los FGs se cultivaron en el medio DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) a 37°C con 5% de CO2. La identificación y localización de la actina, vimentina y mitocondrias en FGs fue realizada y evaluada microscópicamente mediante inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales. La capacidad de migración de los FGs en los pacientes con HGI e individuos sanos también fue estudiada. Resultados: todos los FGs fueron mononucleares, fusiformes y con prolongaciones citoplasmáticas visibles. La faloidina permitió identificar una densa red de actina en los FGs de pacientes con HGI, contrariamente a los FGs de individuos periodontalmente sanos. La vimentina y mitocondrias fueron identificadas en los FGs de individuos sanos y pacientes con HGI sin ninguna alteración en su expresión y localización. La migración de la monocapa de los FGs indicó una actividad de migración celular importante en los FGs de los pacientes con HGI, en relación a los FGs de los individuos periodontalmente sanos. Conclusión: los FGs de pacientes con HGI conservan características fenotípicas celulares similares a los FGs de individuos periodontalmente sanos. Sin embargo, los FGs de pacientes con HGI simulan tener una mayor capacidad migratoria que amerita ser explorada en futuros trabajos de investigación.

Objective: To identify and to describe the phenotypic characteristics of gingival fibroblasts from patients with idiopathic gingival hyperplasia (IGH) and periodontally healthy individuals. Methods: Gingival fibroblasts (GFs) were isolated from gingival tissue from periodontally healthy individuals (n=2) and patients with IGH (n=2). The GFs were grown in DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) at 37°C with 5% CO2. The identification and location of actin, vimentin and mitochondria in GFs were performed and evaluated microscopically by immunofluorescence with monoclonal antibodies. The migration capacity of GFs from IGH and healthy individuals was also studied. Results: All the GFs were mononuclear, fusiform and with visible cytoplasmic extensions. The phalloidin allowed to identify a dense actin network in the GFs of patients with IGH, contrary to the GFs of periodontally healthy individuals. Vimentin and mitochondria were identified in the GFs of healthy individuals and patients with IGH without any alteration in their expression and location. Monolayer migration of GFs indicates significant cell migration activity in the GFs of patients with IGH in relation to the GFs of periodontally healthy individuals. Conclusion: GFs from patients with IGH retain cellular phenotypic characteristic similar to GFs from periodontally healthy individuals. However, the GFs of patients with IGH simulate having a greater migratory capacity that deserves to be explored in future research works.

Supervivencia de células fibroblásticas humanas en ausencia de suplementación / Survival of Human Fibroblastic Cells in the Absence of Supplementation

Resumen Introducción. Los fibroblastos gingivales (FGs) son células del tejido conjuntivo gingival que han tomado en los últimos años una relevancia promisoria por su probable utilización en la terapia celular, dadas sus capacidades de multipotencialidad y de autorrenovación. Objetivo. Conocer y describir el impacto de la ausencia en la suplementación de Suero Fetal Bovino (SFB) en la supervivencia de fibroblastos gingivales en cultivos. Materiales y métodos. Fibroblastos gingivales fueron aislados de tejido gingival de pacientes sanos y cultivados en medios de cultivos DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) en ausencia y suplementados con 0.2% de SFB a 37°C en una atmósfera húmeda con 5% de CO2. Se llevó a cabo una evaluación morfológica, de supervivencia y proliferación de los FGs, así como la identificación mediante la técnica de inmunofluorescencia de marcadores del citoesqueleto celular como la actina y mitocondrias. Resultados. Los FGs cultivados en ausencia y con suplementación de 0.2% de SFB evidenciaron una forma fusiforme, con núcleos ovalados y numerosas prolongaciones citoplasmáticas durante el tiempo de cultivo. Un leve aumento en la proliferación de FGs fue observado en aquellas células en contacto con el medio DMEM+0.2% de SFB comparadas con el medio donde estuvo ausente la suplementación. El inmunomarcaje de la actina y las mitocondrias dejó en evidencia que la ausencia y suplementación a 0.2% de SFB no afectó su localización en los FGs evaluados. Conclusión. Los fibroblastos gingivales sobreviven y proliferan en ausencia de SFB, conservando sus características morfológicas celulares.

Abstract Introduction. Gingival fibroblasts (GF) are cells of gingival connective tissue that have taken promising relevance in recent years due to their probable use in cell therapy, given their multipotencial and self-renewal capabilities. Objective. To know and to describe the impact of the absence of Fetal Bovine Serum (FBS supplementation on the survival of gingival fibroblasts in cultures. Materials and methods. Gingival fibroblasts were isolated from gingival tissue of healthy patients and cultured in DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) culture media in absence and supplemented with 0.2% FBS at 37 ° C in a humid atmosphere with 5% CO2. A morphological evaluation, survival and proliferation of GF were carried out, as well as the identification by the immunofluorescence technique of cellular cytoskeleton markers such as actin and mitochondria. Results. The GF grown in the absence and with supplementation of 0.2% FBS showed a fusiform shape, with oval nuclei and numerous cytoplasmic extensions during the culture time. A slight increase in the proliferation of GF was observed in those cells in contact with the DMEM medium +0.2% FBS compared to the medium where the supplementation was absent. Immunostaining of actin and mitochondria showed that the absence and supplementation to 0.2% of FBS did not affect its location in the evaluated. Conclusion. Gingival fibroblasts survive and proliferate in the absence of FBS, preserving their cellular morphological characteristics.

Morfología neuronal en el trastorno del espectro autista / Neuronal morphology in autism spectrum disorder

RESUMEN: El trastorno del espectro autista (TEA) abarca un grupo de trastornos multifactoriales del neurodesarrollo caracterizados por una comunicación e interacción social deteriorada y por comportamientos repetitivos y estereotipados. Múltiples estudios han revelado que en el TEA existen disfunciones sinápticas, en la cual la morfología y función neuronal son sustratos importantes en esta patogenia. En esta revisión comentamos los datos disponibles a nivel de anormalidades neuronales en el TEA, enfatizando la morfología de las dendritas, espinas dendríticas y citoesquelo de actina. Las dendritas y espinas dendríticas, ricas en actina, forman la parte postsináptica de la mayoría de las sinapsis excitadoras. En el TEA, los datos obtenidos apuntan a una desregulación en el crecimiento y desarrollo dendrítico, así como una alteración en la densidad de las espinas dendríticas. Lo anterior, se ve acompañado de alteraciones en la remodelación y composición del citoesqueleto neuronal. Para comprender mejor la fisiopatología del TEA, es necesario mayor información sobre cómo los cambios morfofuncionales de los actores que participan en la sinapsis impactan en los circuitos y el comportamiento.

SUMMARY: Autism Spectrum Disorder (ASD) is a group of multifactorial neurodevelopmental disorders, characterized by impaired communication and social interaction skills, and by repetitive and stereotyped behaviors. Multiple studies report that there are synaptic dysfunctions in ASD, in which important substrates such as morphology and neuronal function are involved in this pathogenesis. In this review we discuss the data available at the level of neuronal abnormalities in ASD, and emphasize the morphological aspects of dendrites, dendritic spines, and actin cytoskeleton. Actin-rich dendrites and dendritic spines shape the postsynaptic part of the most excitatory synapses. In ASD, the data points to a dysregulation in dendritic growth and development, as well as an alteration in the density of dendritic spines. This is accompanied by alterations in the remodeling and composition of the neuronal cytoskeleton. In order to better understand the pathophysiology of ASD, further information is needed on how the elements of synaptic morphofunctional changes impact circuits and behavior.

Cultivo de células epiteliales dentales: impacto del suero fetal bovino / Culture of dental epithelial cells: impact of fetal bovine serum

RESUMEN Objetivo. Describir la influencia del Suero Fetal Bovino (SFB) en la supervivencia, crecimiento y expresión de organelas celulares en las células epiteliales dentales de rata. Materiales y métodos. Cultivos de células epiteliales dentales de rata fueron llevados a cabo a 37°C en una atmosfera húmeda, en ausencia y a una concentración de 10% de SFB. Una evaluación morfológica fue realizada durante la proliferación y confluencia de las células en cultivo. Dobles marcajes por inmunofluorencia fueron efectuados haciendo uso de anticuerpos anti-actina, anti-TOMM20 y anti-LAMP1. Resultados. Se evidenciaron células epiteliales dentales circulares u ovoides con núcleos voluminosos durante la proliferación y confluencias de manera similar en las células cultivas en presencia y ausencia de SFB. La carencia de SFB impactó negativamente la proliferación de las células epiteliales. No fueron observadas alteraciones en la localización de los inmunomarcajes anti-actina, anti-TOMM20 y anti-LAMP1 en las dos condiciones de cultivos experimentales. Conclusiones. La supresión del SFB en el cultivo de células epiteliales dentales de rata disminuyó la supervivencia, proliferación y sugiere no tener un impacto sobre las organelas evaluadas.

ABSTRACT Objective. Describe the influence of Fetal bovine serum (FBS) on the survival, growth and expression of cellular organelles in rat dental epithelial cells. Material and methods. Cell cultures of rat dental epithelial cells were carried out at 37°C in a humid atmosphere, in the absence and at a concentration of 10% FBS. Morphological evaluation was performed during the proliferation and confluence of cell in culture. Double immunofluorescence labels were made using anti-Actin, anti-TOMM20A, and anti-LAMP1 antibodies. Results. Circular or ovoid dental epithelial cells with bulky nuclei were evidenced during proliferation and confluences in a similar manner in culturing cells in the presence and absence of FBS. The lack of FBS negatively impacts the proliferation of epithelial cells. No alterations were observed in the localization of the anti-actin, anti-TOMM20 and anti-LAMP1 immunomarkers in both conditions of experimental cultures. Conclusion. FBS suppression in rat dental epithelial cells decreased survival, proliferation and suggests not having an impact on the organelles evaluated.

LA PÉRDIDA DE FUNCIÓN DE LA QUINASA DEPENDIENTE DE CICLINA 5 (CDK5) ALTERA EL CITOESQUELETO Y REDUCE LA INFECCIÓN in vitro POR EL VIRUS DEL DENGUE 2 / The loss of function of Cyclin-Dependent Kinase 5 (CDK5) alters the Cytoskeleton and decrease the in vitro Dengue Virus-2 infection

RESUMEN La quinasa dependiente de ciclina 5 (CDK5) regula diversas funciones en neuronas, células endoteliales y epiteliales, entre ellas la dinámica del citoesqueleto. Así mismo, se ha reportado que componentes del citoesqueleto, tales como, filamentos de actina y microtúbulos juegan un rol importante durante la infección por el virus dengue (DENV). El objetivo del presente trabajo fue evaluar por dos métodos, inhibición química y silenciamiento génico, la participación de CDK5 durante la infección por DENV-2. La actividad antiviral de roscovitina fue evaluada usando ensayos de Unidades Formadoras de Placa (PFU). La eficiencia de transfección y el silenciamiento de CDK5, empleando miARNs artificiales, se determinó por citometría de flujo. El efecto sobre la proteína de envoltura viral y elementos del citoesqueleto se evidenció mediante microscopia avanzada de fluorescencia y análisis de imágenes. Roscovitina mostró actividad antiviral en etapas pre y post-infectivas en una forma dependiente de la dosis. El tratamiento con roscovitina y miRCDK5 mostró ser efectivo reduciendo la cantidad de CDK5 en células no infectadas. En células infectadas y transfectadas con miRCDK5, así como tratadas con el inhibidor, se observó una reducción significativa de la proteína de envoltura viral; sin embargo, no se encontró reducción significativa de CDK5. Además, el tratamiento con roscovitina indujo cambios celulares morfológicos evidentes en células infectadas. Los resultados indican la potencial participación de CDK5 durante la infección por DENV-2, posiblemente mediando la traducción proteica o la replicación del genoma viral a través de la regulación de la dinámica del citoesqueleto. Se requieren datos adicionales para esclarecer la mecanística del fenómeno usando métodos alternativos.

ABSTRACT Cyclin-Dependent Kinase 5 (CDK5) regulates several functions in neurons, endothelial, and epithelial cells, including the cytoskeleton dynamics. Likewise, it has been reported that some cytoskeleton elements, such as actin filaments and microtubules, play an essential role during Dengue virus (DENV) infection. This work aimed to evaluate the role of CDK5 during DENV-2 infection by two methods, chemical inhibition, and gene silencing. The antiviral activity of roscovitine was evaluated using Plaque Forming Units (PFU) assay. The transfection efficiency and knockdown of CDK5, using artificial miRNAs, was carried out by flow cytometry. The effect on the viral envelope protein and cytoskeleton elements was evidenced by advanced fluorescence microscopy and image analysis. Roscovitine showed antiviral activity in pre and post-infection stages in a dose-dependent manner. Treatment with roscovitine and miRCDK5 decrease the amount of CDK5 in uninfected cells. In cells infected and transfected with miRCDK5, as well as treated with the inhibitor, a significant reduction of the viral envelope protein was observed; however, no significant reduction of CDK5 was found. Also, evident morphological cellular changes were observed during the treatment with roscovitine in infected cells. The results indicate the potential participation of CDK5 during DENV-2 infection, possibly mediating protein translation or replication of the viral genome through the cytoskeletal dynamics regulation. Additional data are required to clarify the mechanistic of these phenomena using alternative methods.

Más Allá de La Filogenética: Evolución Darwiniana de La Actina / Beyond Phylogenetics: Darwinian Evolution of Actin

Resumen La actina es una proteína que se polimeriza para formar citoesqueletos y cuya función es estabilizar y dirigir el movimiento de las paredes celulares. Es una de las proteínas más estables, habiendo evolucionado poco a partir de algas y levaduras, y muy poco desde los peces. Aquí analizamos la evolución de la actina usando las teorías modernas de las interacciones de conformación proteína-agua, y cómo estas han evolucionado para optimizar las funciones de la proteína. Llegamos a la conclusión de que el fracaso del análisis filogenético para identificar positivamente la evolución darwiniana de las proteínas ha sido causado por las limitaciones técnicas propias del siglo XX. Estas limitaciones pueden ser superadas mediante el escalamiento termodinámico y el promedio modular ambos llevados a niveles técnicos del siglo XXI. Los resultados para la actina son especialmente llamativos y reflejan estructuras duales estables, globulares y polimerizadas.

Abstract Actin polymerizes to form cytoskeletons which stabilize and direct motion of cellular walls. It is one of the most stable proteins, having evolved little from algae and yeast, and very little from fish. Here we analyze actin evolution using modern theories of water-protein shaping interactions, and how these have evolved to optimize protein functions. We conclude that the failure of phylogenetic analysis to identify positive Darwinian evolution has been caused by 20th century technical limitations. These are overcome using 21st century thermodynamic scaling and modular averaging. The results for actin are especially striking, and reflect dual stable structures, globular and polymerized.

Leiomyosarcoma in a cockatiel / Leiomiossarcoma em calopsita

ABSTRACT: Cockatiels (Nymphicus hollandicus) are exotic birds thatoriginated from Australia.Because of their beauty and learning ability, they are one of the most popular pet birds among the Psittaciformes. The objective of this study was to report a case of leiomyosarcoma on the humeral musculature of the left wing of a cockatiel (Nymphicus hollandicus). The animal was admitted to the Wildlife Rehabilitation Center (NURFS-CETAS) of the Universidade Federal de Pelotas withswelling in the humeral region of the left wing. During surgery, the animal died and was transferred to the Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária (LRD-UFPel). During histopathological evaluation (hematoxylin and eosin routine technique) of the tumor, spindle neoplastic cells were observed, arranged in interlaced bundles amongst degenerate and normal muscle fibers. Using immunohistochemistry, neoplastic cells were positively immunostained for vimentin and alpha smooth muscle actin. Based on of clinical-pathological and immunohistochemical findings, leiomyosarcoma was diagnosed.

RESUMO: As calopsitas (Nymphicus hollandicus) são aves exóticas originárias da Austrália. Devido a beleza e capacidade de aprendizado são uma das principais aves utilizadas como animal de companhia. O objetivo deste trabalho foi relatar um caso de leiomiossarcoma, na musculatura umeral da asa esquerda de uma calopsita. O animal deu entrada no Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre (NURFS-CETAS) da Universidade Federal de Pelotas (UFPel), por apresentar aumento de volume na região umeral da asa esquerda. Durante o procedimento cirúrgico o animal veio a óbito, sendo encaminhado ao Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária (LRD-UFPel). Na avaliação histopatológica (Técnica de rotina Hematoxilina e Eosina) da massa tumoral foram observadas células neoplásicas fusiformes, arranjadas em feixes entrelaçados, em meio a fibras musculares degeneradas e normais. Na imunohistoquímica verificou-se imunomarcação positiva das células neoplásicas para vimentina e alfa actina, de músculo liso. Diante dos achados clínico-patológicos e imunohistoquímicos determinou-se o diagnóstico de leiomiossarcoma. O diagnóstico definitivo deste neoplasma requer analise imunohistoquímica.

Localization and changes of tyrosine phosphorylated proteins and ß actin in epididymis of rats treated with valproic acid / Localización y cambios de las proteínas tirosina fosforiladas y la ß actina en epidídimos de ratas tratadas con ácido valproico

Tyrosine phosphorylated proteins have been localized and identified in male reproductive tissues such as testis and capacitated/ acrosome reacted sperm except epididymis. The changes of such proteins are associated with decreased sperm quality of valproic acid treatment. This study aimed to investigate the presence and alterations of protein phosphorylation in epididymal epithelium and fluid of rats treated VPA. Sixteen adult male rats were divided into control and VPA-treated groups (n=8/ each). Treated rats were injected with VPA (500 mg/ kgBW, intraperitoneally) for 10 consecutive days. At the end of experiment, the monoclonal antiphosphotyrosine (clone 4G10) was used for immunohistochemistry to probe tyrosine phosphorylated proteins and also to examine the expression of such proteins using immuno-Western blotting in epididymal tissue and fluid. The result showed that positive reactivity of phosphorylated proteins was clearly observed in cytoplasmic principle cells, nuclei of apical & basal cells and sperm mass surrounded with epididymal fluids. The profiles of phosphorylated proteins in epididymal fluid were 182, 127, 80, 70, 57, 45, 34, and 31 kDas, respectively. Interestingly, VPA affected the changes of phosphorylated proteins and β actin in head, body, and tail epididymal fluids. We conclude that tyrosine phosphorylated proteins were detected in epididymal epithelium and fluid. The expressions of those proteins and actin were altered under VPA treating.

Las proteínas tirosina fosforiladas han sido localizadas e identificadas en tejidos reproductores masculinos tales como testículos y espermatozoides, capacitados a nivel acrosómico, excepto en el epidídimo. Los cambios de estas proteínas están asociadas con una disminución de la calidad del esperma en el tratamiento con ácido valproico (AVP). Este estudio tuvo como objetivo investigar la presencia y las alteraciones de la fosforilación de proteínas en el epitelio epididimal y en el fluido espermático de ratas tratadas con AVP. Dieciséis ratas macho adultas se dividieron en dos grupos: control y tratadas con AVP (n = 8 / cada uno). A las ratas tratadas se les inyectó AVP por vía intraperitoneal (500 mg / kg de peso corporal) durante 10 días consecutivos. Al final del experimento, se realizó inmunohistoquímica con la anti-fosfotirosina monoclonal (clon 4G10) para sondear las proteínas tirosina fosforiladas y también para examinar la expresión de tales proteínas usando inmunotransferencia Western, en tejido y fluido epididimarios. El resultado mostró reactividad positiva de proteínas fosforiladas en células citoplásmicas principales, en los núcleos de las células apicales y basales y en la masa de esperma rodeada por fluidos epididimarios. Los perfiles de proteínas fosforiladas en el fluido epididimal fueron 182, 127, 80, 70, 57, 45, 34 y 31 kDas, respectivamente. El AVP provocó cambios en las proteínas fosforiladas y en la β actina de los fluidos epididimarios de cabeza, cuerpo y cola del epidídimo. Concluimos que las proteínas tirosina fosforiladas se detectaron en el epitelio y el fluido epididimarios. Las expresiones de esas proteínas y de la β actina se alteraron bajo tratamiento con AVP.

Lean vs. obese mice: the ventral prostate revisited / Ratones magros vs. ratones obesos: revisión de la próstata ventral

Obese mice (C57BL/6J-ob/ob) do not express leptin and develops hyperphagia, decreased energy expenditure, obesity, hyperglycemia, hyperinsulinemia, hypothermia, and infertility. Obesity causes reproductive dysfunction with negative impacts on prostatic structure and fertility. We aimed to compare the structure and molecular aspects of the ventral prostate between of lean and obese (ob/ob) mice. Three months old male lean and obese mice had their prostates dissected and prepared for light microscopy and immunofluorescence. In comparison to the lean mouse, the obese mouse showed a substantial structural modification in the ventral prostate starting with an atrophy of the prostate ventral lobe. Histologically, the acini showed a reduction in size, and in the lumen, we found a mixed secretion PAS positive and negative. Epithelial changes consisted of a hypertrophied acinar epithelium with intraepithelial neoplasia focuses. Also, we observed a marked expression of PCNA and Caspase3 in the epithelium indicating even cellular proliferation as cell death. The stroma showed a high activity of the extracellular matrix remodeling with marked deposition of collagen fibers and smooth muscle cells. Around the ventral region, we observed an increase in the presence of adipose tissue. The expressions of interleukin 6 and tumor necrosis factor alpha were present in the ventral prostate of the obese mice indicating inflammation. In conclusion, obesity negatively modulates prostate in ob/ob mice, directly affecting cellular and structural mechanisms necessary for the maintenance of prostate and reproductive structure.

Los ratones obesos (C57BL / 6J-ob / ob) no expresan leptina y desarrollan hiperfagia, disminución del gasto energético, obesidad, hiperglucemia, hiperinsulinemia, hipotermia e infertilidad. La obesidad causa disfunción reproductiva con impacto negativo sobre la estructura prostática y la fertilidad. El objetivo de nuestro trabajo consistió en comparar la estructura y los aspectos moleculares de la próstata ventral en ratones magros y obesos (ob/ob). Se disecaron las próstatas de ratones machos obesos, de tres meses de edad, y fueron preparadas para visualizarlas por microscopía óptica e inmunofluorescencia. En comparación con el ratón magro, el ratón obeso mostró una sustancial modificación estructural en la próstata ventral comenzando con una atrofia del lóbulo ventral de la próstata. Histológicamente, los acinos mostraron una reducción de tamaño, y en el lumen, encontramos una secreción mixta PAS positiva y negativa. Los cambios epiteliales consistieron en un epitelio acinar hipertrofiado con focos de neoplasia intraepitelial. Además, se observó una marcada expresión de PCNA y Caspase3 en el epitelio, que indica tanto la proliferación celular como la muerte celular. El estroma mostró una alta remodelación de la matriz extracelular con marcada deposición de fibras de colágeno y células de músculo liso. Alrededor de la región ventral, se observó un aumento en la presencia de tejido adiposo. Las expresiones de interleuquina 6 y factor de necrosis tumoral alfa estaban presentes en la próstata ventral de los ratones obesos indicando inflamación. En conclusión, la obesidad modula negativamente la próstata en los ratones ob/ob, afectando directamente los mecanismos celulares y estructurales necesarios para el mantenimiento de la estructura de la próstata y la reproducción.

Actin filaments altered distribution in wheat (Triticum aestivum) Bending Root to respond to enhanced Ultraviolet-B radiation

Abstract Plants adjust their shoot growth to acclimate to changing environmental factors, such as to enhanced Ultraviolet-B (UV-B) radiation. However, people have ignored that plant roots can also respond to UV-B light. Here, we find the morphology curled wheat roots under UV-B radiation, that we call, bending roots. The curly region is the transition zone of the root after observed at the cellular level. After exposed to enhanced UV-B radiation for 2 d (10.08 KJ/m2/d), cell size decreased and actin filaments gathered in wheat roots. We also find that H2O2 production increased and that content of the indole-3-acetic acid (IAA) increased remarkably. The pharmacological experiment revealed that actin filaments gathered and polymerized into bundles in the wheat root cells after irrigated H2O2 and IAA. These results indicated that actin filaments changed their distribution and formed the bending root, which was related to H2O2 production and increase in IAA. Overall, actin filaments in wheat root cells could be a subcellular target of UV-B radiation, and its disruption determines root morphology.

Resumo As plantas ajustam o crescimento da parte aérea para se adaptarem a fatores ambientais variáveis, como o aumento da radiação ultravioleta B (UVB). No entanto, as pessoas ignoram que as raízes das plantas também podem responder à luz UVB. Neste estudo, verificamos a morfologia das raízes enroladas de trigo sob radiação UVB, o que chamamos de raízes dobradas. A região encaracolada é a zona de transição da raiz no nível celular. Depois de exposição à radiação UVB aprimorada por 2 dias (10,08 KJ/m2/d), o tamanho das células diminuiu, e os filamentos de actina se reuniram. Também constatamos que a produção de H2O2 aumentou e que o conteúdo do ácido indol-3-acético (IAA) aumentou notavelmente. O experimento farmacológico revelou que os filamentos de actina se reuniram e polimerizaram em feixes nas células da raiz de trigo após irrigação com H2O2 e IAA. Esses resultados indicam que os filamentos de actina alteraram sua distribuição e formaram a raiz dobrada, relacionada à produção de H2O2 e ao aumento do IAA. No geral, os filamentos de actina nas células da raiz de trigo podem ser um alvo subcelular da radiação UVB, e sua interrupção determina a morfologia da raiz.

Primary hepatic leiomyosarcoma. A case report / Leiomiosarcoma hepático primario. Reporte de un caso

Primary hepatic leiomyosarcoma is extremely rare among cases of liver tumors in adults, with an incidence of 0.1 and 1%. This paper describes the case of a 55 year-old man with a clinical evolution of five months consisting of abdominal pain, a large hard lump, weight loss, shortness of breath and fever. A three-phase computed tomography (CT) showed a hypercaptive mass at its periphery during hypodense arterial phase at its center, located in segments VI and VI, without a plane of separation of the liver. Due to the symptoms, the patient underwent an exploratory laparotomy, finding a cerebroid mass of 40 x 40 cm; a lumpectomy without hepatectomy was performed, leaving free surgical margins. The diagnosis was largely made through a histopathological assessment, finding stromal multinucleated pleomorphic forms, desmin (+), SMA (smooth muscle actin) and MSA (muscle specific actin) (+), Ki67 (+) and negative for S100 (protein S100) and CD117 antibody, which confirmed the high grade pleomorphic leiomyosarcoma diagnosis. The patient was discharged 16 days after admission once his condition improved, and was referred to the oncology department for adjuvant chemotherapy. Given the size of the mass, the prognosis was bleak, which left surgery as the only option to offer survival expectations through regulated or "atypical" hepatectomies along with safety margins and liver transplantation. With this in mind, the first option was chosen; six months after surgery, with clinical improvement and adjuvant therapy, the patient, still with unfavorable prognosis, remained stable attending multidisciplinary medical management controls.

l leiomiosarcoma hepático primario es un tumor extremadamente raro entre los casos de tumores hepáticos en adultos, presentan-do una incidencia de 0.1 y 1%. En este artículo se presenta el caso de un hombre de 55 años con cuadro clínico de cinco meses de evolución que consiste en dolor abdominal, presencia de masa dura, no móvil, de gran tamaño, pérdida de peso, disnea y fiebre. La tomografía axial computarizada (TAC) trifásica mostró masa hipercaptante en su periferia durante fase arterial hipodensa en su centro, localizada en segmentos VII y VIII, sin plano de separación del hígado. Debido a su sintomatología, el paciente fue intervenido quirúrgicamente por laparatomía exploratoria, hallándose masa cerebroide de 40 x 40cm, razón por la cual se practicó una tumorectomía sin hepatectomía, dejando bordes quirúrgicos libres. El diagnóstico se realizó, en gran parte, mediante evaluación histopatológica, observándose estroma con formas multinucleadas pleomórficas, desmina (+), SMA (actina de musculo liso) y MSA (actina músculo específica) (+), Ki67 (+) y negativo para S100 (proteína S100) y anticuerpo CD117, lo que confirmó el diagnóstico de leiomiosarcoma pleomórfico de alto grado. Una vez presentó una notoria mejoría, el paciente fue dado de alta a los 16 días de su ingreso y fue derivado al servicio de oncología para su adyuvancia con quimioterapia. Dado el tamaño de la masa encontrada, el pronóstico fue poco alentador, lo que hizo que el tratamiento quirúrgico fuera la única opción que ofreciera expectativas de supervivencia mediante hepatectomías regladas o "atípicas" con márgenes de seguridad e incluso trasplante hepático. Teniendo en cuenta lo anterior, se optó por la primera opción; tras seis meses de la cirugía, observándose mejoría clínica, además del tratamiento adyuvante, el paciente, aún con pronóstico desfavorable, permanecía estable, asistiendo a controles bajo manejo médico multidisciplinario

Alterações renais gênero-dependentes em ratos com insuficiência renal crônica / Gender-dependet renal alterations in rats with chronic renal failure

A insuficiência renal crônica (IRC) é caracterizada por alterações glomerulares secundárias aos mecanismos adaptativos ocasionados por perda de néfrons funcionantes. Alterações na hemodinâmica glomerular, proliferação celular, influxo de células inflamatórias, desequilíbrio na síntese de proteínas da matriz extracelular glomerular (MECG) e perda da seletividade de carga e/ou tamanho da membrana basal glomerular têm sido apontados como mecanismos envolvidos na expansão mesangial e conseqüente glomeruloesclerose. A participação dos hormônios sexuais na função renal e na evolução da insuficiência renal crônica tem sido sugerida. Os glicosaminoglicanos, especialmente o heparan sulfato (HS), têm sido associados à seletividade glomerular de macromoléculas. O remodelamento podocitário precoce e a proteinuria (PTN) se relacionam com a progressão da IRC. Neste contexto, o acúmulo de MECG, proliferação de miofibroblastos e PTN têm sido apontados como mediadores precoces que precedem as lesões glomerulares e túbulo-intersticiais. Neste estudo, avaliamos as alterações renais precoces (30 dias de IRC) gênero-dependentes em ratos (M) e ratas (F) Wistar submetidos à redução de 5/6 da massa renal (IRC) e à castração (c). Os animais foram divididos em 10 grupos: Controles (C) (CM, CF, CMc, CFc) e sham (CM sham, CF sham); e aqueles submetidos à nefrectomia 5/6: IRCM, IRCF, IRCMc, IRCFc. Os animais foram castrados com 5 semanas e submetidos à nefrectomia 5/6 com 7 semanas de idade. Resultados significativos mostraram que os machos com IRC apresentaram maior PTN, acompanhada de maior comprometimento mesangial, imunomarcação positiva para α-actina e maior concentração de heparan sulfato (HS) comparados com as fêmeas IRC (p<0,05). Estas alterações foram reduzidas nos machos castrados. A análise da morfologia podocitária mostrou raras regiões onde ocorreram alterações podocitárias nos grupos IRC. O conjunto de dados sugere que o hormônio masculino pode participar na manutenção...

Chronic renal failure (CRF) is characterized by adaptive mechanisms secondary to the loss of functioning nephrons. Glomerular hemodynamics alterations, cellular proliferation, inflammatory cells influx, imbalance between synthesis and degradation of the glomerular extracellular matrix (GECM) and loss of charge and/or size selectivity of the glomerular basal membrane are pointed as mechanisms leading to mesangial expansion and glomerulosclerosis. Additionally, participation of gender related hormones on renal function and progression of CRF have been suggested. We evaluated the effect of castration in renal alterations in males (M) and females (F) Wistar rats, after 30 days of 5/6 reduction of renal mass (CRF). The animals were castrated (c) at 5 weeks old and 7 weeks old 5/6 and sham nephrectomy were done. Groups: Control (C) CM, CM sham, CMc, CF, CF sham, CFc, CRFM, CRFMc, CRFF, CRFFc. CRFM group showed higher proteinuria followed by increased mesangial expansion and α-actin immunostaining. Concomitant higher concentration of heparan sulfate (HS) was also observed when compared to CRFF (p<0.05). These alterations were reduced in CRFMc group. Podocyte morphology analysis through electronic microscopy showed few disorders of foot processes in CRF groups Overall, CRFF group showed fewer alterations compared to males, and a reduction of HS was observed in association with PTN. Castration did not change this profile in female rats. Data suggest that male hormones may participate in the maintenance of the mesangial equilibrium and that PTN collaborated with the mesangial expansion process. Additionally, the higher concentration of HS in CRFM suggest that the remodeling process of the GECM, included a synthesis of de novo HS, that presented a functioning defect, compromising the glomerular filtration barrier and, ultimately corroborated with the loss of its selectivity and consequently with a higher PTN. This set of results leads us to conclude that PTN appears...

Participação da GTPase Rho na dinâmica do complexo juncional apical e do citoesqueleto de actina na progressão do câncer colorretal

A desmontagem do complexo juncional apical (CJA), que compreende as junções aderentes (JAs) e junções tight (JTs), e a reorganização do citoesqueleto de actina são etapas iniciais da progressão do câncer colorretal (CCR). Subsequentemente, as células adquirem um fenótipo migratório e invasivo, no entanto, os mecanismos moleculares que modulam esses eventos iniciais permanecem desconhecidos. O objetivo do presente estudo foi identificar as vias de sinalização envolvidas na regulação da dinâmica do CJA e do citoesqueleto de actina durante a progressão do CCR. Células de adenocarcinoma de cólon humano Caco-2, utilizadas como modelo de CCR, foram submetidas ao ensaio de retirada do cálcio do meio extracelular e ao tratamento com ácido lisofosfatídico (LPA), um ativador da GTPase Rho. Pré-tratamentos com inibidores específicos de vias de sinalização foram também utilizados nos diferentes ensaios. Na primeira etapa do estudo, verificamos que a retirada do cálcio extracelular ocasionou redistribuição das proteínas do CJA, conforme mostrado por imunofluorescência e immunoblotting usando frações solúveis e insolúveis em Triton X-100; perda da funcionalidade das JTs, como visto pelo decréscimo na resistência elétrica transepitelial (RET) e microscopia eletrônica de transmissão utilizando o traçador vermelho de rutênio; alterações no citoesqueleto de actina na região perijuncional e na distribuição das fibras de estresse, observados por microscopia confocal; e ativação localizada das GTPases Rho e Rac. Todos esses efeitos foram mediados por uma via de sinalização envolvendo a ativação de PKA e Rho-ROCK. Na segunda parte do estudo, observamos que o tratamento com LPA ocasionou redistribuição das proteínas do CJA e redução da expressão de E-caderina bem como reorganização do citoesqueleto de actina perijuncional, e aumento na formação de fibras de estresse. Além disso, o LPA causou: aumento da migração, mas não da invasão celular, como mostrado pelas técnicas do wound healing e de invasão em matrigel, respectivamente; formação de adesões focais, analisada pelo aumento da fosforilação da quinase de adesão focal (FAK) e imunofluorescência; ativação da GTPase Rho, mas não de Rac, conforme o ensaio de pull-down; e aumento do crescimento independente de ancoragem. Esses resultados mostram que o LPA modula as JAs, o citoesqueleto de actina e a migração celular através de uma via de sinalização que integra Rho-ROCK e Src-FAK. Em conclusão, juntos esses resultados mostram um papel central da via de sinalização Rho-ROCK na modulação do CJA e do citoesqueleto de actina durante a progressão do CCR, via que pode constituir um novo e alternativo alvo terapêutico no tratamento deste tipo de câncer

A desmontagem do complexo juncional apical (CJA), que compreende as junções aderentes (JAs) e junções tight (JTs), e a reorganização do citoesqueleto de actina são etapas iniciais da progressão do câncer colorretal (CCR). Subsequentemente, as células adquirem um fenótipo migratório e invasivo, no entanto, os mecanismos moleculares que modulam esses eventos iniciais permanecem desconhecidos. O objetivo do presente estudo foi identificar as vias de sinalização envolvidas na regulação da dinâmica do CJA e do citoesqueleto de actina durante a progressão do CCR. Células de adenocarcinoma de cólon humano Caco-2, utilizadas como modelo de CCR, foram submetidas ao ensaio de retirada do cálcio do meio extracelular e ao tratamento com ácido lisofosfatídico (LPA), um ativador da GTPase Rho. Pré-tratamentos com inibidores específicos de vias de sinalização foram também utilizados nos diferentes ensaios. Na primeira etapa do estudo, verificamos que a retirada do cálcio extracelular ocasionou redistribuição das proteínas do CJA, conforme mostrado por imunofluorescência e immunoblotting usando frações solúveis e insolúveis em Triton X-100; perda da funcionalidade das JTs, como visto pelo decréscimo na resistência elétrica transepitelial (RET) e microscopia eletrônica de transmissão utilizando o traçador vermelho de rutênio; alterações no citoesqueleto de actina na região perijuncional e na distribuição das fibras de estresse, observados por microscopia confocal; e ativação localizada das GTPases Rho e Rac. Todos esses efeitos foram mediados por uma via de sinalização envolvendo a ativação de PKA e Rho-ROCK. Na segunda parte do estudo, observamos que o tratamento com LPA ocasionou redistribuição das proteínas do CJA e redução da expressão de E-caderina bem como reorganização do citoesqueleto de actina perijuncional, e aumento na formação de fibras de estresse. Além disso, o LPA causou: aumento da migração, mas não da invasão celular, como mostrado pelas técnicas do wound healing e de invasão em matrigel, respectivamente; formação de adesões focais, analisada pelo aumento da fosforilação da quinase de adesão focal (FAK) e imunofluorescência; ativação da GTPase Rho, mas não de Rac, conforme o ensaio de pull-down; e aumento do crescimento independente de ancoragem. Esses resultados mostram que o LPA modula as JAs, o citoesqueleto de actina e a migração celular através de uma via de sinalização que integra Rho-ROCK e Src-FAK. Em conclusão, juntos esses resultados mostram um papel central da via de sinalização Rho-ROCK na modulação do CJA e do citoesqueleto de actina durante a progressão do CCR, via que pode constituir um novo e alternativo alvo terapêutico no tratamento deste tipo de câncer

Estudo da imunoexpressão de rankl e opg, do índice angiogênico (CD34) e da presença de miofibroblastos (SMA) em ceratocistos odontogênicos isolados e associados à síndrome de gorlin / Study of rankl and opg immunoreactivity of the angiogenic index (CD34) and the presence of myofibroblasts (SMA) and isolated in odontogenic keratocysts associated with gorlin syndrome

Os ceratopistos odontogênicos se destacam em relação a outras lesões císticasodontogênicas pelo comportamento clínico potencialmente agressivo e por se apresentarem! associados, em alguns casos, à síndrome de Gorlin. Estudos têm sugerido que os ceratocistossindrômicos, em comparação às lesões isoladas, possuem maior capacidade de crescimento einfiltração e maior tendência à recorrência. O objetivo do presente trabalho consistiu emanalisar, por meio de imuno-histoquímica, as expressões do ligante do receptor ativador dofetor nuclear KB (RANKL) e da osteoprotegerina (OPG), o índice angiogênico (CD34) e apresença de miofibroblastos (a-SMA), em ceratocistos isolados primários e recorrentes eceratocistos associados à síndrome de Gorlin. A amostra foi composta por 30 ceratocistosisolados (22 primários e 8 recorrentes) e 22 ceratocistos sindrômicos. A expressão de RANKLe OPG foi avaliada no epitélio e na cápsula fibrosa das lesões, estabelecendo-se o percentualde células imunopositivas, de acordo com os escores: 0 (< 10% das células positivas), 1 (11%- 50% das células positivas), 2 (51% - 75% das células positivas) e 3 (> 76% das célulaspositivas). Além disso, os casos foram categorizados, segundo a proporção RANKL/ OPG,em: RANKL > OPG, RANKL < OPG e RANKL = OPG. O índice angiogênico foi analisadopor meio da contagem dos microvasos imunomarcados pelo anticorpo anti-CD34, em 5campos (200x). Para a avaliação dos miofibroblastos, foram quantificadas as célulasimunorreativas ao anticorpo anti-a-SMA, em 10 campos (400x). A análise das expressões deRANKL e OPG, no revestimento epitelial e na cápsula fibrosa, não revelou diferençassignificativas entre os grupos (p > 0,05). Em relação à proporção RANKL/ OPG norevestimento epitelial, grande parte das lesões isoladas primárias (54,5%) e sindrômicas(59,1%) exibiu proporção RANKL < OPG e proporção RANKL = OPG, respectivamente (p >0,05)...

Avaliação de parametros funcionais e morfologicos da ação da angiotensina II sobre segmentos de tubulos proximais isolados e conservados em soluções de euro-collins e belzer / Funcional and morphological behavior of preserved PCT during treatment using angiotensin II and Losartan

Introdução: A qualidade da conservação obtida em um órgão e a duração do armazenamento seguro são dependentes do tipo de solução e tempo de conservação, estando sujeitas a intercorrências imprevisíveis. Em virtude disso, o parênquima renal e, particularmente, o túbulo contornado proximal (TCP), local onde ocorre necrose tubular aguda (NTA), são susceptíveis às mudanças na homeostase funcional do órgão, durante a conservação e durante a reperfusão pós-implante. O TCP reabsorve cerca de 70% de Na+ e H2O filtrados; sua membrana apical tem células especializadas com microvilosidades para aumentar a área de transporte unidirecional de solutos do lúmen para o sangue. O principal componente estrutural da bordadura em escova, filamentos de F-actina, interage com uma variedade de proteínas transmembranas, inclusive moléculas transportadoras de íons. Esta função é regulada por parâmetros fisiológicos e hormonais, sendo a Angiotensina II (AII) uma das principais envolvidas com o citoesqueleto de actina e proteínas associadas, mediada principalmente por seus receptores AT1. Métodos: Neste trabalho, túbulos isolados de fragmentos frescos e de fragmentos conservados por períodos de 1 e 24h nas soluções de Euro - Collins (ECO) e de Belzer (UW) foram tratados com AII, losartan e AII+losartan, para medida do volume de absorção de fluido (Jv=nl. min_1. mm-1 (microperfusão in vitro), e medida da intensidade (média) de pixel da fluorescência dos receptores AT1 e do citoesqueleto de actina (imunoistoquímica). Resultados: a) Demonstrou-se que AII (10-12M) estimula absorção fluida (Jv), que é diminuída com losartan (10-6M) em TCP frescos e também em TCP conservados em soluções...

Introduction: Depending on the preservation quality and duration, considering the solution composition and the preservation method, unexpected intercurrences may occur. In consequence, the renal parenchyma and particularly the proximal convoluted tubule (PCT), site where the acute tubular necrosis (NTA) occurs, are susceptible to changes in the organ functional homeostasis during preservation in the post implantation reperfusion period. The PCT reabsorbs approximately 70% of filtered Na+ and H2O, and its apical membrane has specialized cells with microvilli to increase the area of unidirectional solute transport from the lumen to the blood. The major structural component of brush border microvilli is the filamentous F-actin, which has been shown to interact with a variety of transmembrane proteins, including ion transport molecules. This function is regulated by physiological and hormonal parameters, such as angiotensin II (AII) interacting with actin cytoskeleton and associated proteins, mediated mainly through type I receptors (AT1R). After via different signaling pathways having been triggered, the varied functions are started, including fluid absorption (Jv), which is directly related to the actin cytoskeleton. Methods: Fresh (no preserved) and tubules preserved for 1h and 24hrs in Euro-Collins (EC) and Belzer (UW) solutions, treated with AII, losartan and AII+losartan, evaluated by "in vitro" microperfusion technique (fluid absorption (Jv=nl. min-1. mm-1), and by immunohistochemical technique (AT1 receptor measurement and actin cytoskeleton). Results: a) Our results showed that AII (10-12M) (physiological concentration) stimulates...

Espiroadenoma ecrino de presentación inusual en párpado / Eccrine spiradenoma of inusual presentation on the eyelid

Reportamos el caso de un espiroadenoma ecrino en una paciente de 90 años de edad, que empezó un año antes de la consulta con una lesión en el párpado. Se trata de un tumor benigno de la glándulas sudoríparas que es raro en el párpado. Al principio pensamos en otro tumor, como el carcinoma sebáceo, por su rápido crecimiento. La posibilidad de un tumor de glándulas sudoríparas debiera considerarse en el diagnóstico de tumores palpebrales.

We report a case of an eccrine spiradenoma in a 90 years old woman, who began a year before with the lesion on the eyelid. It is a begin sweat gland tumor, that is rare on the eyelid. At the beginning we thougth in an other tumor, like sebaceous carcinoma for its quick growth. The possibility of sweat gland tumor should be kept in mind in the diagnosis of eyelid tumours.