Development of low-density oligonucleotide microarrays for detecting mutations causing wilson’s disease.

Background & objectives: Wilson’s disease (WD) is an autosomal recessive disorder caused by mutations in ATP7B, a copper transporter gene, leading to hepatic and neuropsychiatric manifestations due to copper accumulation. If diagnosed early, WD patients can be managed by medicines reducing morbidity and mortality. Diagnosis of this disease requires a combination of tests and at times is inconclusive due to overlap of the symptoms with other disorders. Genetic testing is the preferred alternative in such cases particularly for individuals with a family history. Use of DNA microarray for detecting mutations in ATP7B gene is gaining popularity because of the advantages it offers in terms of throughput and sensitivity. This study attempts to establish the quality analysis procedures for microarray based diagnosis of Wilson’s disease. Methods: A home-made microarrayer was used to print oligonucleotide based low-density microarrays for addressing 62 mutations causing Wilson’s disease reported from Indian population. Inter- and intra- array comparisons were used to study quality of the arrays. The arrays were validated by using mutant samples generated by site directed mutagenesis. Results: The hybridization reaction were found to be consistent across the surface of a given microarray. Our results have shown that 52 °C post-hybridization wash yields better reproducibility across experiments compared to 42 °C. Our arrays have shown > 80 per cent sensitivity in detecting these 62 mutations. Interpretation & conclusions: The present results demonstrate the design and evaluation of a low-density microarray for the detection of 62 mutations in ATP7B gene, and show that a microarray based approach can be cost-effective for detecting a large number of mutations simultaneously. This study also provides information on some of the important parameters required for microarray based diagnosis of genetic disorders.

Doença de Wilson: apresentação clínica, diagnóstico e tratamento / Wilson's disease: clinical presentation, diagnosis and treatment

A doença de Wilson é um erro inato do metabolismo do cobre causado por uma mutação no gene ATP7B, responsável por seu transporte. É uma doença de herança autossômica recessiva, caracterizada pela deposição excessiva de cobre principalmente no fígado e no cérebro. Clinicamente, os pacientes apresentam manifestações hepáticas, neurológicas e psiquiátricas. O diagnóstico pode ser feito quando as seguintes características estiverem presentes: anéis de Kayser-Fleischer na córnea, diminuição dos níveis plasmáticos de ceruloplasmina e sintomas neurológicos típicos. A prevenção de danos permanentemente severos depende do reconhecimento e diagnóstico precoces pelo médico, seguidos de tratamento apropriado. A doença de Wilson pode ter prognóstico excelente, desqe que o tratamento seja feito durante toda a vida.

Wilson's disease is an inborn error of copper metabolismo caused by a mutation to the cooper-transporting gene ATP7B. This disease has an autosomal recessive mode of inheritance, and is characterized by excessive cooper deposition, predominantly in the liver and brain. Clinically, patients usually present hepatic, neurologic or psychiatric manifestations. The diagnosis can be done when these symptoms are present: Kayser-Fleischer rings, low serum ceruloplasmin levels and typical neurological symptoms. The prevention of severe permanente damage depends upon early recognition and diagnosis by the physician, followed by appropriate anticopper treatment. Wilson's disease it can have an excellent prognosis since that treatment either for all the life.

Acquired hepatocerebral degeneration in Hepatitis C infection

Patients with chronic liver disease [CLD] often have neurological sequelae, of which hepatic encephalopathy is the most frequent and reversible. Rare irreversible complications of CLD are acquired [non Wilsonian] hepatocerebral degeneration [AHCD] and hepatic myelopathy [HM]. To our knowledge, AHCD has rarely been reported in patients with hepatitis C virus [HCV] infection. We report a patient with HCV infection who developed AHCD and resulted in serious complications

Enfermedad de Wilson / Wilsonïs disease

La enfermedad de Wilson (EW) es un defecto autosómico recesivo del transporte celular del cobre desde el hígado. Hasta la fecha, se han identificado más de 100 mutaciones en el gen de EW, siendo más común la sustitución His 1069Gln, que puede presentarse en más de 40 por ciento de los casos. La reducción en la excreción biliar lleva a la acumulación de cobre, inicialmente en el hígado y luego en otros tejidos, particularmente el cerebro. Los depósitos tisulares de cobre causan variados síntomas y signos que reflejan deterioro hepático, neurológico, hematológico y renal. Los pacientes con EW frecuentemente se presentan como enfermedad hepática o con síntomas neuropsiquiátricos. Aún en ausencia de historia familiar, la EW debe ser sospechada cuando aparecen estos síntomas sin otra explicación, particularmente en pacientes jóvenes. A pesar de los avances en terapéutica médica, aún se observan significativas tasas de mortalidad en algunos grupos de pacientes con EW

Doença de Wilson ("forma hepática") em regiäo endêmica para esquistossomose mansoni: apresentaçäo clínica de 25 pacientes / Wilson's disease (\"hepatic form\") in a region endemic for mansoni schistosomiasis: the clinical presentation of 25 patients

No Brasil, com populaçao jovem e regioes onde a esquistossomose mansoni é endêmica, a doença de Wilson pode nao ser diagnosticada em pacientes erroneamente rotulados como portadores de esquistossomose hepatoesplênica ou hepatointestinal. Vinte e cinco portadores de doenças de Wilson com hepatopatia (14 homens e 11 mulheres) foram investigados em Belo Horizonte; a média de idade foi 13,7 anos (3 a 22). Dezenove tinham hepatomegalia (76 por cento) e nove esplenomegalia (36 por cento). Vinte e dois (88 por cento) tinham cirrose. O anel de Kaiser-Fleisher foi detectado em 15 (60 por cento). Quatro (16 por cento) tinham evidentes distúrbios neurológicos. Onze (44 por cento) tinham ascite e igual número, icterícia variável. Noventa e um vírgula três por cento e 92 por cento tinham níveis séricos de ceruloplasmina e cobre, respectivamente, diminuídos. Oitenta e quatro vírgula dois por cento tinham excreçao urinária de cobre em 24 horas aumentada; nos sete em quem foi dosado o cobre hepático, os valores estavam elevados. Seis de nove tinham excreçao de cobre urinário após 24 horas de uso de penicilina ("teste da penicilamina") aumentada em pelo menos 10 vezes. Três dentre 19 pacientes (15,8 por cento) tinham ovos de Schistosoma mansoni nas fezes, prevalência comum na populaçao. Suas biopsias mostravam cirrose inativa, sem alteraçoes de esquistossomose mansoni. Quatorze dos pacientes (56 por cento) poderiam ser erroneamente diagnosticados como portadores de esquistossomose hepatointestinal ou hepatoesplênica, tendo, na verdade, doença de Wilson associada ou nao a esquistossomose intestinal assintomática e, portanto, perdendo a chance de um tratamento precoce. O acompanhamento de 22 pacientes foi de 52 meses (1 a 96). Oito (36,3 por cento) faleceram, quatro por hemorragia digestiva alta, três por insuficiência hepática terminal e um com insuficiência hepática fulminante. A maioria, incluindo os falecidos, abandonou o uso da penicilamina ou a usava de modo irregular, sobretudo pelo custo elevado. Um paciente de 17 anos foi submetido com sucesso a transplante de fígado em 1989.

Enfermedad de Wilson: Experiencia clínica y revisión del tema

La enfermedad de Wilson es una enfermedad en la cual excesivas cantidades de cobre se acumulan en el cuerpo; inicialmente en el hígado y luego en otros órganos como el cerebro y ojo. la forma más común de la enfermedad se presenta insidiosamente, con laxitud, fatiga y anorexia, progresando crónicamente hacia la hipertensión portal, ascitis y falla hepática. El diagnonóstico de la enfermedad se hace mediante la presencia del anillo Kayser-Fleischer y el hallazgo de una concentración de ceruplasmina sérica menor 20 mg por ml. Cuando existe dificultad en el diagnóstico, la concentración de cobre hepático o la incorporación de cobre radioactivo, hacen el diagnóstico. La concentración tóxica de cobre en el cuerpo puede ser removida y prevenida su acumulación, utilizando D-penicilamina, tetramina o Zinc. En algunos casos el tratamiento quirúrgico, decompresión o transplante, se reserva para cierto tipo de pacientes. Presentamos una completa y actualizada revisión del tema, así como parte de nuestra experiencia clínica en el Hospital San Juan de Dios