Down-Regulation of Cellulose Synthase Inhibits the Formation of Endocysts in Acanthamoeba

Acanthamoeba cysts are resistant to unfavorable physiological conditions and various disinfectants. Acanthamoeba cysts have 2 walls containing various sugar moieties, and in particular, one third of the inner wall is composed of cellulose. In this study, it has been shown that down-regulation of cellulose synthase by small interfering RNA (siRNA) significantly inhibits the formation of mature Acanthamoeba castellanii cysts. Calcofluor white staining and transmission electron microscopy revealed that siRNA transfected amoeba failed to form an inner wall during encystation and thus are likely to be more vulnerable. In addition, the expression of xylose isomerase, which is involved in cyst wall formation, was not altered in cellulose synthase down-regulated amoeba, indicating that cellulose synthase is a crucial factor for inner wall formation by Acanthamoeba during encystation.

Experimental encephalitis caused by Taenia crassiceps cysticerci in mice / Encefalite experimental causada por cisticercos de Taenia crassiceps em camundongos

OBJECTIVES: To present the experimental model of neurocysticercosis (NCC) caused by Taenia crassiceps cysticerci, to describe the inflammatory process, susceptibility, or resistance of BALB/c and C57BL/6 mice to this infection, and to describe the host-parasite relationship. METHODS: The animals were intracranially inoculated with initial stage T. crassiceps cysticerci. They were euthanized at 7, 30, 60, and 90 days after the inoculation. Their encephala were removed for the histopathologic analysis, classification of the parasites, and inflammatory lesions. RESULTS: Experimental NCC was observed on both mice lineages. BALB/c mice presented inflammatory lesions with greater intensity, inducing necrosis on late stage parasites, and with an acute inflammation pattern, while C57BL/6 mice showed greater capability on provoking early necrosis in the cysticerci, which showed a chronic inflammation pattern. CONCLUSIONS: This experimental model induced NCC on mice with characteristic inflammation and lesions. C57BL/6 mice were able to induce precocious necrosis of the parasites presenting inflammatory lesions with lower intensity.

OBJETIVOS: Apresentar o modelo experimental de neurocisticercose (NCC) com cisticercos de Taenia crassiceps, descrever a inflamação, suscetibilidade e resistência em camundongos BALB/c e C57BL/6, caracterizando melhor a relação parasito-hospedeiro. MÉTODOS: Os animais foram inoculados intracranialmente com cisticercos de T. crassiceps em estádio inicial e eutanasiados aos 7, 30, 60 e 90 dias após a infecção. Retiraram-se os encéfalos para análise histopatológica, classificação dos parasitos e lesões inflamatórias. RESULTADOS: Foi possível induzir NCC nas duas linhagens de camundongos utilizados como modelo experimental. Os animais BALB/c apresentaram lesões inflamatórias mais intensas do que os camundongos C57BL/6 e induziram nos parasitos necrose na fase tardia com padrão inflamatório agudo. Os C57BL/6 mostraram-se mais hábeis em provocar necrose precocemente nos cisticercos, mas com padrão inflamatório crônico. CONCLUSÕES: Este modelo experimental induziu NCC nos animais com inflamações e lesões. Os camundongos C57BL/6 foram hábeis em induzir precocemente necrose nos parasitos, apresentando lesões inflamatórias com menor intensidade.

Neospora caninum as causative agent of bovine encephalitis in Brazil / Neospora caninum como agente causal de encefalite bovina no Brasil

For supporting the Brazilian bovine encephalitis surveillance program this study examined the differential diagnosis of Neospora caninum in central nervous system (CNS) by histological analysis (HE staining), immunohistochemistry (IHC), and nested-PCR using a set of primers from the Nc5 region of the genomic DNA and ITS1 region of the ribosomal DNA. A sample of 302 cattle presenting neurological syndrome and negative for rabies, aged 0 to 18 years, from herds in 10 Brazilian states was evaluated for N. caninum from January 2007 to April 2010. All specimens tested negative with IHC and nested-PCR using primers from the ITS1 region of ribosomal DNA, while two positive cases (0.66%) were found using primers from the Nc5 region of genomic DNA: a 20 month-old male and a 72 month-old female, both from São Paulo State. Only the male presented severe multifocal necrotizing encephalitis associated with mononuclear cell infiltration, a pathognomonic lesion caused by parasites of the family Sarcocystidae, and only this case was associated with N. caninum thus representing 0.33% positivity. Future studies should explore the association of IHC and nested-PCR with real-time PCR, a quantitative method that could be standardized for improving the detection of N. caninum in bovine CNS specimens.

Este estudo contribuiu para o programa de vigilância epidemiológica de encefalite bovina no Brasil realizando o diagnóstico diferencial de Neospora caninum no sistema nervoso central (SNC) por análise histológica (coloração HE), imunohistoquímica (IHC) e nested-PCR utilizando-se primers da região Nc5 do DNA genômico e da região ITS1 do DNA ribossomal. Um total de 302 amostras de bovinos com síndrome neurológica, negativos para raiva, na faixa etária de zero a 18 anos, provenientes de rebanhos de 10 estados brasileiros foi avaliada para N. caninum no período de janeiro/2007 a abril/2010. Todas as amostras foram negativas na IHC e na nested-PCR usando-se primers da região ITS1 do DNA ribossomal, enquanto dois casos (0,66%) foram positivos à nested PCR, usando-se primers da região Nc5 do DNA genômico: um macho de 20 meses de idade e uma fêmea de 72 meses de idade, ambos do Estado de São Paulo. Apenas o macho apresentou severa encefalite multifocal necrotizante associada com infiltrado inflamatório mononuclear, lesão patognomônica causada por parasitas da família Sarcocystidae, mostrando que apenas este caso de encefalite foi associado à infecção por N. caninum, representando 0,33% de positividade. Sugere-se em estudos futuros utilizar também a PCR em tempo real para detecção do parasito.

Acanthamoeba encephalitis.

Central nervous system infection with free-living amoebae is rare. We present a fatal case of Acanthamoeba encephalitis in a 63-year-old female from India where acanthamoebae were demonstrated and cultured from CSF. In spite of treatment with amphotericin B, fluconazole and rifampicin the patient did not survive. Amoebic infection should be suspected in a patient of encephalitis of unexplained aetiology as timely diagnosis can lead to a favourable outcome.

Ventriculitis: a rare case of primary cerebral toxoplasmosis in AIDS patient and literature review

Cerebral toxoplasmosis remains the most important neurological opportunistic infection and the most common cause of intracerebral mass lesion in patients with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). We report a case of an adult AIDS patient with an atypical pattern of toxoplasma encephalitis, presenting with ventriculitis and obstructive hydrocephalus without any focal parenchymal lesion.

Infecciones por amebas de vida libre. Comentarios históricos, taxonomía y nomenclatura, protozoología y cuadros anátomo-clínicos / Infections caused by free-living amebas: historical commentaries, taxonomy and nomenclature, protozoology and clinicopathologic features

Infections caused by free-living amebae constitute one of emergent opportunistic infections with greatest medical interest. Although infrequently, they have been described in almost all world, its diagnosis depends on a high index of suspicion, especially in morpho-pathologic and laboratory studies. Exciting historical features of infections due to free-living amebae, its taxonomy and the present nomenclature are briefly reviewed. An analysis of the protozoology of the most frequent agents is done and, based on the author's own experience and the published one, already established anatomo-clinical entities are described: the primary amebic meningoencephalitis, granulomatous amebic encephalitis, Acanthamoeba keratitis, cutaneous acanthamoebiasis, disseminated infection and other rare isolated locations.

Encefalitis amebiana granulomatosa por Balamuthia mandrillaris. Primer caso diagnosticado en Chile / Granulomatous amebic encephalitis caused by Balamuthia mandrillaris: first case diagnosed in Chile

Se presenta el caso de un lactante de sexo masculino de 7 meses de vida con una historia de varias semanas de evolución caracterizada por convulsiones, fiebre y cambios conductuales. Hospitalizado, la tomografía axial computada de cerebro mostró lesiones multifocales de algunos mm a 4 cm de diámetro, sin efecto de masa, y una biopsia de las mismas reveló una encefalitis necrotizante con arteritis necrótica fibrinoide. A pesar del tratamiento, las lesiones progresaron y el niño falleció. La necropsia demostró una extensa encefalitis necrotizante, multifocal, con arteritis necrótica fibrinoide, algunos signos de organización, y la presencia de elementos parasitarios con caracteres de trofozoitos y quistes de amebas de vida libre del género Acanthamoeba o Balamuthia. Además, se constató una hipoplasia- displasia del timo y signos de schok. Los elementos encontrados corresponden al cuadro descrito como encefalitis amebiana granulomatosa y el agente encontrado fue tipificado, (Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, USA) correspondiendo a la especie Balamuthia mandrillaris.

Isolation and characterization of a cDNA encoding a mammalian cathepsin L-like cysteine proteinase from Acanthamoeba healyi

We have cloned a cDNA encoding a cysteine proteinase of the Acanthamoeba healyi OC-3A strain isolated from the brain of a granulomatous amoebic encephalitis patient. A DNA probe for an A. healyi cDNA library screening was amplified by PCR using degenerate oligonucleotide primers designed on the basis of conserved amino acids franking the active sites of cysteine and asparagine residues that are conserved in the eukaryotic cysteine proteinases. Cysteine proteinase gene of A. healyi (AhCP1) was composed of 330 amino acids with signal sequence, a proposed pro-domain and a predicted active site made up of the catalytic residues, Cys(25), His(159), and Asn(175). Deduced amino acid sequence analysis indicated that AhCP1 belongs to ERFNIN subfamily of C1 peptidases. By Northern blot analysis, no direct correlation was observed between AhCP1 mRNA expression and virulence of Acanthamoeba, but the gene was expressed at higher level in amoebae isolated from soil than those from clinical samples. These findings raise the possibility that Ahcp1 protein may play a role in protein metabolism and digestion of phagocytosed bacteria or host tissue debris rather than in invasion of amoebae into host tissue.

Descripción de un caso de aborto bovino asociado a infección por Neospora sp en México / Description of a case of bovine abortion associated to Neospora sp infection in México

En el siguiente informe se describe un caso de aborto bovino asociado a neosporosis en México. El feto fue remitido para su estudio al Departamento de Patología de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autónoma de México. El feto fue expulsado al quinto mes de gestación, siendo macho y de raza Holstein. En el estudio microscópico se encontró encefalitis no supurativa con múltiples focos de necrosis y gliosis, además de un quiste parasitario oval de pared gruesa de 21 x 22 mm. Varias secciones de tejido nervioso desparafinadas se examinaron para estudio inmunohistoquímico, utilizando anticuerpos anti Neospora caninum encontrándose grupos de taquizoitos extracelulares asociados a las áreas de gliosis. También se encontró miocarditis y hepatitis no supurativa discreta. Se cree que este es el primer caso descrito en México de aborto bovino asociado a lesiones características y a la presencia de estructuras parasitarias correspondientes a Neospora sp. Sin embargo, es necesario realizar más estudios anatomopatológicos e inmunológicos para poder determinar la prevalencia y la significancia de aborto bovino asociado a neosporosis en México

Encefalitis amebiana granulomatosa en una paciente no inmunodeprimida: un hecho excepcional / Granulomatous amebic encephalitis in a non-immunosuppressed patient

La infección humana por amebas de vida libre es muy rara y en general grave. Las amebas de los géneros Naegleria determinan una meningoencefalitis aguda fulminante, y las del género Acanthamoeba una enfermedad subaguda granulomatosa que con más frecuencia se observa en pacientes inmunodeprimidos. Se estudió una paciente de medio rural, sin antecedentes patológicos, sin elementos de inmunosupresión,que ingresa con un cuadro de un mes de evolución, con crisis convulsivas. En la TAC presentó un proceso expansivo fronto-parietal. Se intervino quirúrgicamente con ese diagnóstico. La biopsia extemporánea informó proceso inflamatorio en bloque. El estudio anátomo patológico en diferido, mostró un proceso inflamatorio crónico granulomatoso necrotizante con escasa supuración, con microorganismos con formas quísticas y trofozoíticas entre 15 y 30 micras, que con las técnicas especiales son compatibles con amebas de vida libre. Se realizó el diagnóstico de Encefalitis Amebiana Granulomatosa (EAG). Esta entidad es muy rara y generalmente afecta a pacientes inmunodebilitados y es excepcional en pacientes inmunocompetentes. El tratamiento puede ser médico-quirúrgico o, quirúrgico con exéresis en bloque. Cuando el diagnóstico es precoz y es unifocal se puede obtener una excelente evolución, como en este caso

Spontaneous granulomatous amebic encephalitis: report of four cases from Thailand.

Granulomatous amebic encephalitis (GAE), or meningoencephalitis caused by Acanthamoeba sp and leptomyxid amebae are uncommon CNS infections that usually occur in an immunocompromised host. From 1990 to 1992, 4 patients with GAE were treated at Siriraj Hospital, Bangkok. One case was diagnosed antemortem, from a brain biopsy. The other three cases were diagnosed as GAE postmortem. Pathological findings included acute and subacute granulomatous inflammation with extensive cerebral necrosis, angiitis, fibrinoid necrosis and fibrin thrombi. One patient had a chronic skin ulcer in which free-living amebic trophozoites were found. No visceral involvement was observed. All patients developed "spontaneous" GAE, but we suspect an undiagnosed abnormality in cell mediated immunity or a deficient humoral immune response.

Histopathological and immunohistochemical study of the brain and heart in the chronic cardiac form of Chagas' disease / Estudo histopatológico e imuno-histoquímico do encéfalo e coração na forma crônica cardíaca da doença de Chagas

Fez-se o estudo histopatológico e imuno-histoquímico sistematizado do encáfalo e coraçäo de 50 pacientes com forma crônica cardíaca de doenca de Chagas. A técnica imuno-histoquímica empregada foi o método da peroxidase-antiperoxidase adaptado para a demonstraçäo de formas amastigotas do T. cruzi. O exame histológico e imuno-histoquímicodo encáfalo revelou, em 4 casos (8//), encefalite em focos múltiplos, näo sistematizados. Num dos casos o processo era recente, em atividades, contendo parasitas. Nos outros três casos as lesöes eram de menor intensidade, com fenômenos exsudativos discretos, sugerindo tratar-se de processo em extinçäo ou já inativo. A pesquisa de parasitas nestes três casos, mesmo com o uso da imunoperoxidase, foi negativa, O estudo histolófico e imuno-histoquímico do coraçäo mostrou, além da miocardite crônica em focos múltiplos acompanhada de fibrose endomisial, amastigotas em 7 casos (14//). A ausência de parasitas e de processo inflamatório no encéfalo da grande maioria dos chagásicos crônicos, contrastando com o achado constante de lesöes inflamatórias e o encontro ocasional de amastigotas no miocárdio destes mesmos pacientes, permite afirmar, de modo semelhante a outros autores, que näo há base histopatológica para que se possa admitir a existência da forma crônica nervosa da doença de Chagas

Poliartrite crônica com afecçäo cutânea disseminada: diagnóstico diferencial e evoluçäo com infecçäo terminal por Toxoplasma gondii / Chronic polyarthritis with disseminated cutaneous disease: differential diagnosis and course with terminal infection caused by Toxoplasma gondii

Descreve-se um caso de poliartrite crônica simétrica aditiva, de grandes e pequenas articulaçöes, com acometimento axial lombar, associado à psoríase, coriorretinite, conjuntivite, úlceras do trato gastrintestinal, fator reumatóide em altos títulos e radiologia sugestiva de artrite reumatóide. Esses dados säo discutidos, concluindo-se a impossibilidade de se chegar a um único diagnóstico, mas sim a hipóteses diagnósticas de Artrite Psoriásica ou Artrite Reumatóide com Psoríase ou Síndrome de Reiter. Em sua evoluçäo apresentou quadro séptico que culminou em óbito e à necropsia foi demonstrada disseminaçäo encefálica de toxoplasmose latente associada à septicemia por Klebsiella pneumonie. É ressaltada a disseminaçäo de infecçöes crônicas em pacientes com doenças que imunedeprimem, em especial a toxoplasmose em colagenoses e neoplasias malignas