Characterization of Mycoplasma penetrans and Mycoplasma fermentans immunodominant proteins

Micoplasmas são procariotos diminutos, desprovidos de parede celular e envoltos por uma membrana lipoproteica cujo pequeno genoma sintetiza a maioria das moléculas necessárias para crescimento e replicacão. Dentre as dezesseis espécies isoladas do homem, Mycoplasma pneumoniae, agente causador da pneumonia atípica primária, e as espécies do trato urogenital como Mycoplasma hominis,Ureaplasma urealyticum e Ureaplasma parvum têm definido seu papel patogênico. M. penetrans e M. fermentans, espécies associadas ao HIV, têm sido investigadas principalmente em laboratórios de pesquisa. Considerando a importância dos micoplasmas nas doencas humanas e a peculiar variacão antigênica observada em tais espécies, foram caracterizadas, neste estudo, as lipoproteínas associadas a membranas (LAMP) de Mycoplasma penetrans e Mycoplasma fermentans. Para definir peptídeos com possível valor diagnóstico, empregamos as técnicas de ELISA e de Western blot usando soros de gestantes cujas amostras cervicais foram positivas por PCR. Por meio do ELISA foram observados anticorpos IgG anti-LAMP-M. fermentans em 57,5 per center e IgM em 74,5 per center das amostras. As três amostras PCR positivas para M. penetrans apresentaram anticorpos IgG anti-LAMP-M. penetrans e uma amostra positiva para IgM. IgA não foi detectada em nenhuma das espécies. A análise da LAMP, por Western blot, revelou como principais proteinas imunoreativas: 35, 38, 42, 61 and 103 kDa para M. penetrans e 29, 38, 41, 61, 78 and 95 kDa de M. fermentans. Dentre estas podemos considerar p35 específica para M. penetrans e p29, M. fermentans.Tais proteinas são promissoras como marcadores em diagnóstico.

Detecçäo de Mycoplasma genitalium, M. fermentans e M. penetrans em pacientes com sintomas de uretrite e em indivíduos infectados pelo HIV-1 no Brasil / Detection of Mycoplasma genitalium, M. fermentans and M. penetrans in patients with symptoms of urethritis and in HIV-1 infected persons in Brazil

Neste trabalho investigamos a prevalência de três espécies de micoplasma recémðidentificadas como patógenos humanos, M. genitalium, implicado em casos de uretrite näoðgonocócica, e M. fermentans e M. penetrans, isolados de pacientes imunodeprimidos, e das duas espécies mais freqüentes no trato geniturinário, M. hominis e U. urealyticum. Foram estudados 110 pacientes com sintomas de uretrite (grupo A) e 106 indivíduos infectados pelo HIVð1 (grupo B). M. genitalium foi detectado em 10,9 por cento das amostras de raspado uretral do grupo A, e em 1,9 por cento das amostras de raspado uretral e 0,9 por cento e 5,7 por cento das amostras de raspado uretral dos grupos A e B, respectivamente. M. penetrans foi detectado em 6,6 por cento das amostras de urina somente do grupo B. M. hominis e U. urealyticum tiveram taxas de infecçäo de 0,9 por cento e 14,5 por cento no grupo A, e de 7,5 por cento e 18,9 por cento no grupo B, respectivamente. A relevante prevalência da infecçäo por estas novas espécies, em comparaçäo aos micoplasmas mais conhecidos do trato urogenital, sugere que a magnitude do papel destes microrganismos no âmbito das doenças sexualmente transmissíveis (DST) e da infecçäo pelo HIV pode estar sendo subestimada em nossa populaçäo

Immunoperoxidase for the detection of antibodies in cerebrospinal fluid in neurocysticercosis: use of Cysticercus cellulosae and Cysticercus longicollis particles fixed on microscopy slides

A cepa ORF de Cysticercus longicollis (Cl) representa importante modelo para estudo de antigenos heterologos no imunodiagnostico da neurocisticercose (NC). Foi padronizada a tecnica de imunoperoxidase (IP) empregando suspensao antigenica particulada. Amostras de liquido cefalorraquiano (LCR) foram incubadas sobre o antigeno fixado em laminas de microscopia, o conjugado empregado foi anti-IgG-Peroxidase, a reacao enzimatica iniciou-se ao cobrirem-se as laminas com solucao cromogena (Diaminobenzidina/H2O2). Apos lavagens em agua destilada, a lamina foi corada com verde malaquita a 2 por cento em agua. De 21 LCR de pacientes com NC, 19 (90,5 por cento) foram reativos e 8 (100 por cento) LCR do grupo controle foram nao reativos. Os resultados do teste IP-Cl ensaiando 127 LCR de pacientes com suspeita de NC mostrou 89,7 por cento de concordancia com o teste ELISA empregando extrato salino de Cysticercus cellulosae (Cc) e 94,2 por cento de concordancia com o teste IP-Cc

Efeitos clastogenicos causados por varios sorotipos de Ureaplasma urealyticum e especies do genero Mycoplasma sobre culturas temporarias de linfocitos / Clastogenic effects caused by serotypes of Ureaplasma urealyticum and species of the genus Mycoplasma on linphocytes temporary cultures

Os efeitos clastogenicos causados por diferentes cepas Ureaplasma urealyticum e por cepas do genero Mycoplasma foram avaliados in vitro, utilizando-se culturas temporarias de linfocitos humanos. Os resultados obtidos neste modelo experimental in vitro, revelaram haver comportamentos diferentes entre os varios sorotipos de Ureaplasma urealyticum e entre especies do genero Mycoplasma. Essas diferencas observadas in vitro poderao de alguma forma contribuir para melhor compreensao dos efeitos da colonizacao desses microorganismos em humanos

Mycoplasma hominis e ureaplasma urealyticum: pesquisa no material cervical de gestantes / Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum: research in pregnants cervical mucus specimens

Foram feitas pesquisas de Mycoplasma hominis e de Ureaplasma urealyticum em material cervical de gestantes. A identificaçäo de Ureaplasma urealyticum baseou-se nas provas bioquímicas das atividades da urease e da fosfatase e na observaçäo da morfologia colonial característica. Mycoplasma hominis foi caracterizado pela observaçäo da morfologia colonial de "ovo-frito", pelo comportamento bioquímico frente às seguintes provas: utilizaçäo da arginina, determinaçäo da atividade da fosfatase, reduçäo do tetrazólio em aerobiose e anaerobiose, utilizaçäo da glicose, produçäo de filmes e "spots", e foi identificado sorologicamente através das reaçöes de inibiçäo metabólica e de imunodifusäo dupla. Todos os micoplasmas isolados foram inicialmente submetidos à prova de sensibilidade à digitonina, 1,5% em soluçäo alcoólica, antes de serem submetido às provas de identificaçäo. Dois grupos de gestantes foram estudados: grupo de risco, constituído de 37 gestantes que possuíam histórico anterior de alteraçöes perigestacionais tais como: abortos, natimortos, prematuros, etc... e grupo controle constituído por 37 gestantes com gestaçöes anteriores normais. As taxas de colonizaçäo encontradas foram:73,0% de Ureaplasma urealyticum e 21,6% de Mycoplasma hominis no grupo de risco; no grupo controle os resultados foram: 65,0% de Ureaplasma urealyticum e 16,2% de Mycoplasma hominis. Estatisticamente as diferenças entre os dois grupos näo foram significantes (delta = 5%)

Modificaçäo e padronizaçäo de meios de transporte e cultivo de micoplasmas genitais: Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum / Modification and standardization of transport and culture media for genital mycoplasmas: Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum

Foram padronizados meios de transporte e de cultivo de micoplasmas genitais objetivando principalmente o cultivo do Mycoplasma hominis e do Ureaplasma urealyticum. Tais meios basearam-se principalmente nos preconizados por Shepard e também pelo Laboratory of Diagnosis of Mycoplasma Infections, (LDMI) aos quais foram introduzidas algumas modificaçöes com a finalidade de possibilitar a sua utilizaçäo na rotina laboratorial em nosso meio. A pesquisa desses microrganismos foi feita em material cervical de 74 gestantes. As amostras clínicas foram transportadas em meio líquido (MLTr) e cultivadas em meio líquido para ureaplasma (MLU) e meio líquido de arginina (MLA) para micoplasmas genitais que se utilizam da arginina como fonte energéntica, dentre eles o Mycoplamsa hominis. Os meios utilizados nas condiçöes aqui padronizados mostram-se bastante eficientes para a finalidade proposta, uma vez que nas gestantes as taxas de colonizaçäo encontradas para micoplasmas foram comparáveis com as citadas na literatura internacional