Qualitative and quantitative ultrastructural analysis of the mitochondria from adrenal gland cortex under the action of viperidae family snake venoms / Análisis ultrastructural cualitativo y cuantitativo de la mitocondria de la glándula adrenal bajo la acción de los venenos de serpientes de la familia viperidae

SUMMARY: The Viperidae venoms are composed of a mixture of constituents with enzymatic and non-enzymatic actions, which act on ultrastructural components of cells and tissues. Here, the number of mitochondria, mitochondrial area and the number of mitochondrial cristae from adrenal glands cortex treated with snake venoms were tested after 3, 6 and 24 hours of venom injections. The mitochondria quantitative changes showed a statistically significant decrease, in the number of mitochondria past 3, 6 and 24 h. There was an increase in the mitochondrial area after 6 h, where Crotalus vegrandis venom did not present significant differences with Crotalus pifanorum or Bothrops venezuelensis venoms. After 24 h, there was an escalation of mitochondrial area in all tested venoms. The number of mitochondrial cristae after 3 h did not present important differences with the control treatment. After 6 h, the number of mitochondrial cristae initiated to decrease under the activities of the 3 venoms action, until 24 h of observation. In the qualitative observations it was possible to witness an intense damage of the mitochondria, with loss and swelling of membranes, disappearance of cristae and the appearance of myelin figures, which started at 3 h after the Crotalus and Bothrops venoms injections. These damages probably were due to cytotoxic effects of phospholipases, metalloproteases and/or other proteolytic activities present in Viperidae snake venoms, being more evident in Crotalus venoms. As far as we know, these results define a novel finding that suggest that Viperidae snake venoms are extremely toxic to mammalian mitochondria.

RESUMEN: Los venenos de Viperidae tienen acciones enzimáticas y no enzimáticas, que actúan sobre la estructura celular. Aquí se probaron, a las 3, 6 y 24 horas de la inyección del veneno, el número de mitocondrias, el área mitocondrial y el número de crestas mitocondriales de la corteza de las glándulas adrenales. Los cambios cuantitativos de las mitocondrias mostraron una disminución en el número de mitocondrias a las 3, 6 y 24 h. Hubo un aumento en el área mitocondrial a las 6 h, donde el veneno de la serpiente Crotalus vegrandis no presentó diferencias significativas con los venenos de Crotalus pifanorum o Bothrops venezuelensis. Después de 24 h, hubo un aumento del área mitocondrial en todos los venenos. El número de crestas mitocondriales a las 3 h no presentó alteraciones o diferencias importantes con el tratamiento de control. Después de 6 h, el número de crestas mitocondriales comenzó a disminuir bajo la acción de los 3 venenos, hasta las 24 h de observación. En las observaciones cualitativas se observó un daño intenso de las mitocondrias, con pérdida y edema de las membranas, desaparición de las cristae y aparición de figuras mielínicas, que comenzó a las 3 h después de las inyecciones de veneno de Crotalus y Bothrops. Estos daños se debieron factiblemente a los efectos citotóxicos de componentes proteolíticos de los venenos. Creemos que estos resultados definen un nuevo y original hallazgo, que sugiere que los venenos de serpiente Viperidae son extremadamente tóxicos para las mitocondrias de mamíferos.

Suppression of cardiomyocyte functions by ß-CTX isolated from the Thai king cobra (Ophiophagus hannah) venom via an alternative method

Beta-cardiotoxin (ß-CTX), the three-finger toxin isolated from king cobra (Ophiophagus hannah) venom, possesses ß-blocker activity as indicated by its negative chronotropy and its binding property to both ß-1 and ß-2 adrenergic receptors and has been proposed as a novel ß-blocker candidate. Previously, ß-CTX was isolated and purified by FPLC. Here, we present an alternative method to purify this toxin. In addition, we tested its cytotoxicity against different mammalian muscle cell types and determined the impact on cardiac function in isolated cardiac myocyte so as to provide insights into the pharmacological action of this protein. Methods: ß-CTX was isolated from the crude venom of the Thai king cobra using reverse-phased and cation exchange HPLC. In vitro cellular viability MTT assays were performed on mouse myoblast (C2C12), rat smooth muscle (A7r5), and rat cardiac myoblast (H9c2) cells. Cell shortening and calcium transient dynamics were recorded on isolated rat cardiac myocytes over a range of ß-CTX concentration. Results: Purified ß-CTX was recovered from crude venom (0.53% w/w). MTT assays revealed 50% cytotoxicity on A7r5 cells at 9.41 ± 1.14 µM (n = 3), but no cytotoxicity on C2C12 and H9c2 cells up to 114.09 µM. ß-CTX suppressed the extend of rat cardiac cell shortening in a dose-dependent manner; the half-maximal inhibition concentration was 95.97 ± 50.10 nM (n = 3). In addition, the rates of cell shortening and re-lengthening were decreased in ß-CTX treated myocytes concomitant with a prolongation of the intracellular calcium transient decay, indicating depression of cardiac contractility secondary to altered cardiac calcium homeostasis. Conclusion: We present an alternative purification method for ß-CTX from king cobra venom. We reveal cytotoxicity towards smooth muscle and depression of cardiac contractility by this protein. These data are useful to aid future development of pharmacological agents derived from ß-CTX.(AU)

Caracterización bioquímica y biológica del veneno de la serpiente Neotropical Macagua (Bothrops Colombiensis) de la región de Barlovento, estado Miranda, Venezuela / Biological and biochemical characterization of the Neotropical Macagua (Bothrops colombiensis) snake venom from Barlovento region, Miranda state, Venezuela

Introducción: el veneno de B. colombiensis no es solamente un elemento tóxico; en su composición existen múltiples componentes, que tienen un gran potencial terapéutico, principalmente en el tratamiento de patologías de la trombosis y la coagulación. Objetivos: estudiar una mezcla de venenos de Bothrops colombiensis de una ubicacion geográfica de Venezuela, a fin de hacer un barrido de sus actividades hemostáticas, que permitirá posteriormente purificar y caracterizar moléculas con actividad antitrombótica y anticoagulantes, entre otras, con potencial terapéutico. Métodos: el veneno a estudiar, es una mezcla de ellos obtenidos de serpientes provenientes de la Región de Barlovento, estado Miranda, Venezuela. Se caracterizó bioquímicamente por cromatografias de exclusión molecular, cromatografía de fase reversa C18 y por electroforesis a través de SDS­PAGE; y biológicamente por medio de actividades relacionadas con la hemostasia. Se analizaron los perfiles en relación a las actividades fibrinolítica, proteolítica sobre polvo azul y cadena ß de insulina, procoagulante, hemorrágica y letal. Resultados: la actividad hemorrágica, definida como la Dosis Hemorrágica Mínima fue de 8,7 mg/kg. La letalidad, definida como la Dosis Letal cincuenta fue 8,7 mg/kg. El veneno presentó actividad procoagulante y fibrinolítica. Las fracciones mostraron actividad fibrinolítica y proteolítica sobre polvo azul de ocultamiento y sobre la cadena ß de insulina. Conclusiones: las características biológicas de los componentes de este veneno le confieren un enorme potencial terapéutico, ya que contiene una alta actividad fibrinolítica y anticoagulante. Estos compuestos una vez purificados y caracterizados podrían explorarse como coadyuvantes en procesos trombolíticos, dado que disuelven coágulos de fibrina y degradan fibrinógeno, evitando episodios de retrombosis(AU)

Introduction: This paper is a screening of multiple toxic activities, of which some will be potentially useful for the management of coagulation pathologies. Objetives: A pool of Bothrops colombiensis venoms from a specific geographical location was studied, in order to carry out a hemostatic activities screening, allowing then to purify and characterise molecules with antithrombotic and anticoagulant activity, among others, which could have therapeutic potential. Methods: The venom was chromatographically by molecular exclusion and reverse phase C18 and SDS -PAGE characterized; its hemostatic activity was also established. Snakes were from the region of Barlovento, Miranda state, Venezuela. Profiles of fibrinolytic, proteolytic, procoagulant, hemorrhagic and lethal activities were analyzed. Hemorrhagic activity was 8.7 mg/kg. The LD50 was 8.7 mg/kg. The venom showed strongly procoagulant activity. Both, crude venom as fractions showed high fibrinolytic activity. The majority of the eluted fractions showed significant proteolytic activity in azure blue powder and on ß chain of insulin. Conclusions: The biological characteristics of the components of this venom confer enormous therapeutic potential because they contain a high fibrinolytic and anticoagulant activity. Most of these proteinases, once purified and characterized, could be explored as thrombolytic agents given that dissolves fibrin clots or prevent their formation(AU)

Biochemical and biological characterisation of lancehead (Bothrops venezuelensis Sandner 1952) snake venom from the Venezuelan Central Coastal range / Caracterización bioquímica y biológica del veneno de la serpiente "tigra mariposa" (Bothrops venezuelensis Sandner 1952) de la región central de la Cordillera de la Costa Venezolana

Se aislaron fracciones del veneno de Bothrops venezuelensis que demuestran ser un espectro abundante de proteínas con actividades variadas (coagulante, hemorrágica, fibrinolítica, proteolítica y de función plaquetaria), para el análisis de sus propiedades físico-químicas y biológicas, el veneno fue fraccionado por cromatografía de exclusión molecular, corrido en una electroforesis en gel y realizada una batería de ensayos biológicos. La DL50 del veneno de B. venezuelensis fue 6,39 mg/kg de peso corporal, fue determinada inyectando intraperitonealmente en ratones, diluciones seriadas de veneno de B. venezuelensis. Se colectaron doce fracciones a partir del veneno de B. venezuelensis mediante cromatografía de exclusión molecular. Las fracciones 1-5 y 7-9 tenían actividad hemorrágica. Todas las fracciones, con la excepción de las fracciones 3 y 6, tenían actividad fibrinolítica. Ninguna de las fracciones tuvo actividad de gelatinasa significativa, y sólo fracciones 4-6 demostraron actividad en polvo azul de ocultamiento. Con la excepción de las fracciones 1 y 4 , todas hidrolizaron la cadena β de la insulina. Cada fracción del veneno, así como el veneno crudo mostraron actividad procoagulante, cuando se probó en un analizador Sonoclot. Las fracciones 1, 3 , 5 y 9 inhibieron la función plaquetaria. En este estudio se señalan actividades biológicas de un veneno poco estudiado (B. venezuelensis) y sus fracciones. Al detectar actividades hemorrágicas, fibrinolíticas, procoagulantes, proteolíticas y de inhibición de la función plaquetaria. Este estudio preliminar abre el camino para la identificación de moléculas específicas que podrían tener potencial terapéutico en hemostasia y cáncer, que vienen siendo estudiados en nuestro grupo.

Venom fractions isolated from Bothrops venezuelensis were shown to contain a broad spectrum of proteins with varied activities. This study describes venom fractions with coagulant, haemorrhagic, fibrinolytic, proteolytic and antiplatelet activities, and analyses their physico-chemical properties and biological activities via molecular exclusion chromatography, gel electrophoresis and a bioassay battery. The LD50, determined by injecting intraperitoneally serial dilutions of B. venezuelensis venom into mice, was 6.39 mg/kg body weight. Twelve fractions were collected from B. venezuelensis venom using molecular exclusion chromatography. Of these, fractions 1-5 and 7-9 showed haemorrhagic activity, and all fractions except 3 and 6 showed fibrinolytic activity. However, none of the fractions had significant gelatinase activity, and only fractions 4-6 demonstrated activity on hide powder azure. With the exception of fractions 1 and 4, all fractions hydrolysed the insulin B-chain. In addition, all fractions as well as the crude venom showed strong procoagulant activity when tested using a Sonoclot Analyzer. Fractions 1, 3, 5 and 9 inhibited platelet function. In this study we have described the activities of the crude venom and its size-fractions from the scarcely studied B. venezuelensis. Haemorrhagic, fibrinolytic, procoagulant and proteolytic activities, and the inhibition of platelet function were detected. This preliminary study paves the way for the identification of specific molecules in B. venezuelensis venom that could have therapeutic potential for cancer and aberrant haemostasis treatment.

CORAL SNAKE ANTIVENOM PRODUCED IN CHICKENS (Gallus domesticus) / Antiveneno de serpiente coral producido en gallinas (Gallus domesticus)

The production of anti-snake venom from large mammal's blood has been found to be low-yielding and arduous, consequently, antivenom immunoglobulins for treatment are achieved regularly as polyvalent serum. We have standardized an undemanding technique for making purified immunoglobulin IgY antivenom consisting of polyclonal antibodies against coral snake venom in the egg yolk of immunized hens. We have adapted a reported process of antibody purification from egg yolks, and achieved 90% antibody purity. The customized technique consisted of the removal of lipids from distilled water-diluted egg yolks by a freeze–thaw sequence. The specific immunoglobulins were present in the egg yolk for up to 180 days postimmunization. Therefore, by means of small venom quantities, a significant amount of immunoglobulins were found in an adequately purified state (The obtained material contained about 90% pure IgY). The antigen binding of the immunoglobulins was detected by a double immunodiffusion test. Titers of antibodies in the yolk were estimated with a serum protection assay (Median effective dose = ED50) (ED50= 477 mg/kg). Given that breeding hens is economically feasible, egg gathering is noninvasive and the purification of IgY antibodies is quick and easy, chicken immunization is an excellent alternative for the production of polyclonal antibodies. To the best of our knowledge, this is the first coral snake antivenom prepared in birds.

La producción de antiveneno de serpiente usando sangre de grandes mamíferos se ha encontrado que es de bajo rendimiento y de trabajo arduo, en consecuencia, las inmunoglobulinas antiveneno para el tratamiento se obtienen generalmente, como suero polivalente. Hemos estandarizado una técnica poco exigente para la fabricación de inmunoglobulina purificada IgY, que consistió en generar anticuerpos policlonales contra el veneno de la serpiente coral en huevos de gallinas inmunizadas. La técnica consistió en la eliminación de lípidos de las yemas del huevo, diluidas en agua y en una secuencia de congelación-descongelación. Las inmunoglobulinas específicas estuvieron presentes en la yema de huevo hasta 180 días después de la inmunización. La unión del antígeno a las inmunoglobulinas se detectó mediante un ensayo de inmunodifusión doble. Los títulos de anticuerpos en la yema fueron estimados con un ensayo de protección (dosis efectiva media = ED50). Dado que las gallinas reproductoras son económicamente viables, la recolección de huevos es no invasiva y la purificación de anticuerpos IgY es rápida y fácil, la inmunización de la gallina es una excelente alternativa para la producción de anticuerpos policlonales. A nuestro entender, esta es el primer anti-veneno contra serpiente de coral preparado en aves.

Neutralization of bitis parviocula (Ethiopian mountain adder) venom by the south african institute of medical research (SAIMR) antivenom / Neutralização do veneno de Bitis parviocula (serpente da Montanha da Etiópia) pelo antiveneno do Instituto Africano de Pesquisa Médica (SAIMR)

BACKGROUND: The Ethiopian mountain adder (Bitis parviocula) is a viperid known only from a few locations in southwestern Ethiopia. METHODS: a total of 30 µg of B. arietans and B. parviocula venoms were run on a 10-20 percent Tricine gel. To assay lethality dose fifty (LD50), five groups of eight mice for each venom were used. Hemorrhagic activity for crude venom was tested. Fibrinogenolytic activity of crude venom was measured using (2.5 mg/mL) of fibrinogen solution and (0.03 mg/mL) of crude venom. Gelatinase activity of the venom was tested on a Kodak X-OMAT TM film. Crude venoms of B. parviocula and B. arietans were tested for their abilities to affect clotting time, clotting rate and platelet function on whole human blood. RESULTS: The (SAIMR) antivenom was confirmed in this study to neutralize the lethal activity of venom from Bitis parviocula. The ED50s of SAIMR antivenom on B. parviocula and B. arietans neutralized half of 18.2 and 66.7 mg of venom, respectively. The hemorrhagic activities (MHDs) of B. parviocula and B. arietans were 0.88 and 1.7 µg, respectively. Bitis arietans and B. parviocula venoms degradated α and β chains at different times. The γ chains remained unaffected. Bitis parviocula venom did not exhibit gelatinase activity, while B. arietans had a MGD of 6.9 µg. At 3 mg/mL, the crude venoms of B. parviocula and B. arietans did not significantly affect clotting time or clotting rate. CONCLUSIONS: The SAIMR antivenom is very effective in neutralizing the venom of B. parviocula and should be considered in treating envenomations by these snakes.

BACKGROUND: Serpente das Montanhas da Etiópia (Bitis parviocula) é um viperídeo conhecido somente em poucas localizações do sudoeste da Etiópia. MÉTODOS: Um total de 30 µg de veneno de B. arietans e B. parviocula foram corridos em gel de 10 a 20 por cento de tricina. Para se estabelecer a quinquagésima dose de letalidade (LD50) foram usados cinco grupos de oito camundongos para cada veneno. A atividade hemorrágica para o veneno cru foi testada. A atividade fibrogenolítica do veneno cru foi medida usando 2,5 mg/mL de solução de fibrinogênio e 0,03 mg/mL de veneno cru. A atividade de gelatinase do veneno foi testada em um filme KODAK X-OMAT TM. Venenos crus de B. parviocula e B. arietans foram testados no que diz respeito à sua capacidade de afetar o tempo de coagulação, a velocidade de coagulação e a função plaquetogênica em sangue humano total. RESULTADO: o antiveneno SAIMR foi confirmado neste estudo no que diz respeito à neutralização da atividade letal do veneno de Bitis parviocula. ED50s do antiveneno SAIMR sobre a B. parviocula e B. arietans neutralizou metade de 18,2 e 66,7 mg respectivamente do veneno. As atividades hemorrágicas (MHDs) de B. parviocula e B. arietans foram respectivamente 0,88 e 1,7 µg. Os venenos de B. arietans e B. parviocula degradaram cadeias α e β em tempos diferentes. A cadeia Γ permaneceu não afetada. O veneno da B. parviocula não mostrou atividade de gelatinase, enquanto o de B. arietans teve um MGD de 6,9 µg. A nível de 3 mg/mL os venenos crus de B. parviocula e B. arietans não afetaram significantemente o tempo e a velocidade de coagulação. CONCLUSÕES: O antiveneno SAIMR é bastante efetivo para neutralizar o veneno da B. parviocula e deveria ser considerado para o tratamento de envenenamentos por estas serpentes.

Intensa reacción alérgica en paciente mordido por la hormiga negra (Odontomachus bauri) / Intense allergic reaction in a patient stung by the black ant (Odontomachus bauri)

INTRODUCCIÓN: en países del área tropical y subtropical las picaduras de hormiga eran generalmente benignas, autolimitadas; sin embargo, en la actualidad se describe un mayor número de casos, que se desarrollan con cuadros alérgicos graves que pueden evolucionar hasta el choque anafiláctico o urticarias severas. MÉTODOS: un adulto joven con una reacción alérgica moderada para una picadura de hormiga es revisado y comentado en cuanto a su importancia biomédica. Se trata del segundo accidente descrito en la literatura causado por la hormiga Odontomachus bauri, lo cual acentúa su importancia epidemiológica futura. Se hace una descripción de los signos y síntomas clínicos de una reacción alérgica, así como de algunos aspectos biológicos de la hormiga. El paciente fue tratado con succinato sódico de hidrocortisona (100 mg/stat) y el antihistamínico sistémico loratadina. CONCLUSIONES: las reacciones alérgicas a consecuencia de reacciones de picadura de himenóptera se están haciendo un problema creciente en muchos países, es importante que las autoridades médicas se hagan conscientes de sus manifestaciones dermatológicas y sistémicas, que aquejan a algunos de los pacientes picados o mordidos por hormigas.

INTRODUCTION: ant stings in nations located in the tropical and subtropical regions were generally benign and not frequent; however, at present a higher number of cases develop serious allergic reactions that may evolve into anaphylactic shock or severe urticaria. METHODS: review of the case of a young man suffering moderate allergic reaction to ant stings and comments on the biomedical importance of this event. This is the second accident described in literature and associated with Odontomachus bauri ant, which stresses its epidemiological weight in the future. The clinical signs and symptoms of an allergic reaction together with some biological aspects of the ant were described. The patient was treated with hydrocortisone sodium succynate (100mg/stat) and systemic antihistaminic drug Loratadina. CONCLUSIONS: allergic reactions as a result of hymenoptera stings is becoming a growing problem in many countries; therefore it is essential that the medical authorities be aware of the dermatological and systemic manifestations affecting some patients stung by ants.

Neurotoxic activity and ultrastructural changes in muscles caused by the brown widow spider Latrodectus geometricus venom / Actividad neurotóxica y cambios ultraestructurales en musculos causados por el veneno de la araña viuda marrón Latrodectus geometricus

Brown widow spider (Latrodectus geometricus) venom (BrWSV) produces few local lesions and intense systemic reactions such as cramps, harsh muscle pains, nausea, vomiting and hypertension. Approximately 16 protein bands under reducing conditions and ~ 14 bands under non-reducing conditions on a 12.5% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis were observed. Neurotoxic clinical manifestations were confirmed in vivo, while proteolytic activity was demonstrated on gelatine film. Severe ultrastructural damages in mice skeletal muscles were observed at 3, 6, 12 and 24 h postinjection with at total of 45 µg of venom protein. Infiltration of eosinophils and ruptures of the cellular membranes were observed in the muscles along with swelling of the nuclear cover and interruption of the collagen periodicity. Altered mitochondrias and autophage vacuoles, nuclear indentation and mitochondria without cristae, slight increment of intermyofibrillar and subsarcolemic spaces and myelinic figures formation were also observed. In the capillary, endothelial membrane unfolding into the lumen was noticed; along with myelinic figures compatible with a toxic myopathy. Swollen sarcotubular systems with lysis of membrane, intense mitochondria autophagia and areas without pinocytic vesicles were observed. Swollen mitochondria surrounded by necrotic areas, myofibrillar disorganization and big vacuolas of the sarcotubular system, degenerated mitochondrium with formation of myelinic figure was seen. Glycogenosomes with small particulate, muscle type glycogen was noticed. Autophagic vacuole (autophagolysosomes) and necrotic areas were also noticed. These damages may be due to interactive effects of the multifactorial action of venom components. However, Latrodectus geometricus venom molecules may also be utilized as neuro therapeutic tools, as they affect neuronal activities with high affinity and selectivity. To our knowledge, the present study...

El veneno de la araña viuda marrón (Latrodectus geometricus) produce pocas lesiones locales pero intensas reacciones sistémicas, tales como calambres, dolores musculares severos, nauseas, vómitos e hipertensión arterial. Se observaron ~ 16 bandas de proteina bajo condiciones reducidas y ~14 bandas bajo condiciones no reducidas en electroforesis en geles de poliacrilamida al 12.5%. Las manifestaciones neurotóxicas clínicas fueron confirmadas in vivo, mientras que la actividad proteolítica fue demostrada en una placa de gelatina. Los músculos de ratón se estudiaron durante las 3, 6, 12 y 24 horas después de ser inyectados con 45 µg de proteina de veneno. Los músculos fueron seriamente dañados por este veneno. Se demostró una infiltracción de células eosinofílicas y rupturas de membranas celulares en tejido muscular, al mismo tiempo un fuerte incremento de la membrana nuclear y una interrupción de la periodicidad del colágeno. Se observaron daños en la mitocondria y sin cristaes, vacuolas autofágicas e indentación nuclear. Se notó un aumento de la luz de los espacios intermiofibrilares y subsarcolemicos. En los capilares fue visible un desdoblamiento de la membrana endotelial hacia el lúmen vascular. Del mismo modo, fue visto un hinchamiento del sistema sarcotubular con lisis de las membranas; intensa autofagia de mitocondrias y áreas sin vesículas pinocíticas. Fue además observado, glucogenosomas con glucogeno particulado. Se observaron vacuolas autofágicas (autofagolisosomas) y áreas de necrosis. Estos daños podrían ser atribuídos a los efectos interactivos de una acción multifactorial de los componentes del veneno.

A low-cost method to test cytotoxic effects of Crotalus vegrandis (Serpentes: Viperidae) venom on kidney cell cultures

La patogénesis de la lesion renal ha sido relacionada a la miolisis, hemólisis, hipotensión y/o el efecto directo del veneno. Tanto el cultivo primario o el cultivo celular continuo proveen una alternativa in vitro para la evaluación cuantitativa de la toxicidad de venenos de serpiente. El veneno crudo de Crotalus vegrandis fue fraccionado por una cromatografía de exclusión molecular. La toxicidad del veneno crudo de C. vegrandis, sus fracciones hemorrágicas y neurotóxicas fueron evaluadas en células renales primarias de ratón y una línea continua de células Vero mantenidas in vitro. Las células fueron aisladas de la corteza renal murina y se cultivaron en placas de 96 pozos con medio Dulbecco (DMEM). Allí fueron tratadas con el veneno crudo y sus fracciones. Las células de la corteza renal murina tuvieron una morfología de células epiteliales y la mayoría se tiñeron con un anticuerpo anti-músculo actina. La citotoxicidad fue evaluada por el método colorimétrico del tetrazolium. La viabilidad de las células fue menor en las células tratadas con el veneno crudo, seguida por la fracción hemorrágica y neurotóxica, con un CT50 de 4.93, 18.41 y 50.22 µg/mL, respectivamente. Los cultivos de células Vero parecieron ser más sensibles con un CT50 de 2.9 y 1.4 µg/mL para el veneno crudo y el pico hemorrágico, respectivamente. Los resultados de este estudio muestran la potencialidad de usar sistemas de cultivo celular para evaluar la toxicidad de los venenos.