Análise ultra-estrutural de embriöes bovinos da raça Nelore / Ultra-structural analysis of Nelore embryos / Análisis ultra-estructural de embriones bovinos de la raza Nelore

RESUMO

O conhecimento da ultra-estrutura de embriöes bovinos, dentro das diferentes sub-espécies permite estabelecer características inerentes a cada uma delas, possibilitando o desenvolvimento de métodos eficientes para estocagem e conservaçäo desses embriöes. Diante disso,17 embriöes bovinos, da raça Nelore, foram preparados para análise ultra-estrutural, sob microscopia eletrônica. O processamento dos embriöes foi realizado no Departamento de Reproduçäo Animal da UNESP-Jaboticabal. Para tanto, os embriöes foram lavados sucessivas vezes para remoçäo do SFB, utilizado no meio de transporte, fixados em soluçäo de glutaraldeído a 1 por cento em tampäo cacodilato de sódio 0,15M e pH 7,6, desidratados em soluçöes com concentraçöes crescentes de álcool etílico, pré-incluídos, incluídos em cápsulas BEEM (Better equipment for electron microscopy), contendo resina EPON-812, submetidos em estufa à temperatura de 60§C por 72 horas, para polimerizaçäo, e seccionados. Devido às pequenas dimensöes, os embriöes inicialmente foram submetidos a secçöes semifinas(0,5µm), para que a linha de corte propiciasse visualizaçäo do trofoblasto(TF) e massa celular interna(MCI). Após a triagem dos cortes, realizaram-se secçöes ultrafinas (60-70nm), que foram colhidas em grades de cobre, coradas com acetato de uranila e citrato de chumbo e observadas ao microscópio eletrônico. Dos embriöes processados 64,71 por cento foram selecionados para análise ultra-estrutural. Observou-se que as células dos embriöes analisados apresentavam-se semelhantes às descriçöes para blastocistos de bovinos Bos taurus indicus. O trofoblasto era formado por células alongadas que constituíam duas partes distintas; o trofoblasto mural, que delimitava a blastocele, e o trofoblasto polar, que recobria as células da massa celular interna. Suas células estavam intimamente ligadas por complexos juncionais, seguidos por desmossomos. As superfícies externas dessas células eram cobertas por microvilosidades proeminentes, com filamentos axiais, enquanto suas superfícies internas apresentavam-se lisas, com junçöes comunicantes (do tipo gap) com as células da MCI. Possuíam organelas usuais como mitocôndrias, lisossomos, ribossomos e poliribossomos, retículo endoplasmático liso e rugoso e complexo de Golgi com forma e número variados. Observam-se também gotas lipídicas e numerosas vesículas. As células da MCI eram cubiformes, ligadas umas as outras por junçöes desmossômicas, apresentando coloraçäo...