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Rapid identification of Mycobacterium tuberculosis in cultures by molecular and immunological methods / Identificação rápida de Mycobacterium tuberculosis em culturas por método molecular e método imunológico
Souza, Mariana Quaresma de; Busatto, Caroline; Reis, Ana Julia; Silva, Ana Bárbara Scholante; von Groll, Andrea; Silva, Pedro Eduardo Almeida da; Ramis, Ivy Bastos.
  • Souza, Mariana Quaresma de; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
  • Busatto, Caroline; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
  • Reis, Ana Julia; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
  • Silva, Ana Bárbara Scholante; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
  • von Groll, Andrea; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
  • Silva, Pedro Eduardo Almeida da; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
  • Ramis, Ivy Bastos; Universidade Federal do Rio Grande. Rio Grande. BR
J. Health Biol. Sci. (Online) ; 10(1): 1-5, 01/jan./2022. ilus
Article in English | LILACS | ID: biblio-1411474
ABSTRACT

Objective:

The study aimed to evaluate molecular and immunological methods and to propose a workflow using them for tuberculosis (TB) diagnosis routine.

Methods:

A cross-sectional retrospective study was performed, including 121 liquid cultures from a TB laboratory located in the extreme south of Brazil. All cultures were positive for Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) by in-house Polymerase Chain Reaction (PCR) using DNA extracted by the CTAB method (PCR-CTAB) for IS6110 detection. These cultures were subjected to faster tests than this one, the immunological MPT64 assay and the PCR using DNA extracted by thermal lysis method (PCR-TL), and these were evaluated for MTBC identification using PCR-CTAB as a reference method.

Results:

The sensitivity of MPT64 assay and PCR-TL to identify MTBC in positive cultures by PCR-CTAB were 73.6% (89/121) and 98.3% (119/121), respectively. We proposed a workflow based on the use of MPT64 assay in liquid cultures suggestive of MTBC, and in case of a negative result, we suggest the performance of PCR-TL. The PCR-CTAB is suggested only if faster tests are negative.

Conclusions:

Methods capable of confirming MTBC in cultures should continue to be standardized, tested, and optimized to meet the ideal requirements of simplicity, quickness, and effectiveness. The molecular and immunological methods evaluated have differences in the execution and detection of MTBC in cultures, but they are rapid tools for laboratory TB diagnosi
RESUMO

Objetivos:

O estudo objetivou avaliar métodos molecular e imunológico e propor um fluxo de trabalho utilizando-os para a rotina de diagnóstico da tuberculose (TB).

Métodos:

Foi realizado um estudo transversal retrospectivo, incluindo 121 culturas líquidas de um laboratório de TB localizado no extremo sul do Brasil. Todas as culturas foram positivas para o complexo Mycobacterium tuberculosis (CMTB) por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) in-house para detecção do IS6110, usando DNA extraído pelo método CTAB (PCR-CTAB). Essas culturas foram submetidas a testes mais rápidos que este, o ensaio imunológico MPT64 e a PCR com DNA extraído pelo método de lise térmica (PCR-LT), e estas foram avaliadas para identificação de CMTB usando PCR-CTAB como método de referência.

Resultados:

A sensibilidade do ensaio MPT64 e da PCR-LT para identificar o CMTB em culturas positivas pela PCRCTAB foi de 73,6% (89/121) e 98,3% (119/121), respectivamente. Propusemos um fluxo de trabalho baseado no uso do ensaio MPT64 em culturas líquidas sugestivas de CMTB e, em caso de resultado negativo, sugerimos a realização de PCR-LT. Sugere-se a PCR-CTAB apenas se os testes mais rápidos forem negativos.

Conclusões:

Os métodos capazes de confirmar o CMTB em culturas devem continuar sendo padronizados, testados e otimizados para atender aos requisitos ideais de simplicidade, rapidez e eficácia. Os métodos molecular e imunológico avaliados apresentam diferenças na execução e detecção do CMTB em culturas, mas são ferramentas rápidas para o diagnóstico laboratorial da TB.
Subject(s)


Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Mycobacterium tuberculosis Type of study: Diagnostic study / Observational study / Prevalence study Language: English Journal: J. Health Biol. Sci. (Online) Journal subject: Ciˆncias da Sa£de / Disciplinas das Ciˆncias Biol¢gicas Year: 2022 Type: Article Affiliation country: Brazil Institution/Affiliation country: Universidade Federal do Rio Grande/BR

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