Caracterización fenotípica de células epiteliales limbales humanas expandidas in vitro / In vitro phenotypic characterization of human limbal epithelial cells

RESUMEN

Introducción: Las células epiteliales limbales humanas (CELhu) han sido utilizadas en la clínica para promover la rápida reepitelización en enfermedades de la superficie ocular con la finalidad de restaurar la integridad del epitelio corneal. Sin embargo, esta técnica aún no ha sido desarrollada en nuestro país. El objetivo de este estudio fue desarrollar una técnica de cultivo de CELhu in vitro y caracterizar su fenotipo. Material y métodos: Las células fueron obtenidas de tejido limbal, cultivadas en medio KSFM y analizadas para la expresión de vimentina, K, K19, p63 y K12 por citometría de flujo e inmunofluorescencia. Resultados: El fenotipo de las células cultivadas fue vimentina+K+K19+p63+K12-. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que bajo estas condiciones de cultivo, las CELhu mantuvieron el fenotipo de célula pluripotencial. Esta técnica de cultivo podría ser utilizada con propósitos clínicos en nuestro país.

ABSTRACT

INTRODUCTION: Human limbal epithelial cells (huLEC) have been used for clinical purposes in ocular surface diseases to promote rapid re-epithelisation and restore corneal epithelium integrity. However, in Mexico this technique has not been fully developed. This study was conducted to characterize the huLEC phenotype expanded in vitro using a cell culture technique. MATERIAL AND METHODS: Cells were obtained from limbal tissue, cultured in KSFM medium and analyzed for the expression of vimentin, K, K19, p63, K12, by flow cytometry and immuno-fluorescence. RESULTS: The phenotype of cultured cells was vimentin+K+K19+ p63+K12-. CONCLUSIONS: Our results suggest that under these culture conditions huLEC maintained their stem cell phenotype. This culture technique could be used for clinical purposes in Mexico.