Protocolo da extraçäo de DNA de material parafinado para análise de microssatélites em leiomioma / DNA extraction from paraffin material protocol in order to analyse microssatellites in uterine leiomyoma

RESUMO

É apresentada a padronizaçäo de protocolo de extraçäo de DNA de material parafinado para análise da instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos säo desparafinizados por banhos de xilol a 65ºC, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extraçäo de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com soluçäo Promega, digestäo de proteínas por proteinase K, precipitaçäo com proteínas com soluçäo Promega e precipitaçäo do DNA com ETOH 70 por cento gelado e ressuspendido com soluçäo Promega. Este protocolo resulta em um DNA viável para uso na reaçäo em cadeia da polimerase (PCR)