False positive reaction due to endogenous biotin activity in glandular epithelium of decidua
Braz. j. microbiol
; 36(2): 109-113, Apr.-June 2005. ilus, tab
Article
em En
| LILACS
| ID: lil-421711
Biblioteca responsável:
BR32.1
RESUMO
Sondas marcadas com biotina foram utilizadas neste trabalho para deteccão de infeccão viral por hibridizacão in situ em tecidos fixados com formalina e embebidos em parafina de 11 casos obtidos de abortamento. Sondas para citomegalovírus humano (HCMV), parvovírus B19 humano (B19) e adenovírus humano tipo 2 (HAd2), foram marcadas com biotina-11-dUTP através da reacão de nick-translation. Estreptavidina conjugada com fosfatase alcalina (SAP) seguida por solucão de 4-nitro-azul de tetrazolio/5-bromo-4-cloro-3-indolil fosfato (NBT/BCIP) foram utilizadas para deteccão da biotina após a reacão de hibridizacão. Reacão positiva foi observada no núcleo de células do epitélio glandular da decídua tanto no controle positivo quanto no negativo em tecidos de primeiro e segundo trimestre gestacional. Esta reacão não foi inibida com solucão bloqueadora da atividade endógena de fosfatase alcalina e persistiu mesmo com a omissão das sondas. O uso de controles negativos permitiu revelar atividade endógena de biotina nuclear em epitélio glandular da decídua, responsável por reacões falso positivas em sistemas de deteccão estreptavidina-biotina (StrepABC). Os resultados obtidos neste estudo fortemente recomendam que a deteccão de ADN por hibridizacão in situ em endométrio gestacional seja feita com outro sistema de deteccão que não o StrepABC.
Texto completo:
1
Índice:
LILACS
Assunto principal:
Biotina
/
Técnicas In Vitro
/
Hibridização In Situ
/
Infecções por Citomegalovirus
/
Epitélio
Limite:
Humans
Idioma:
En
Revista:
Braz. j. microbiol
Assunto da revista:
MICROBIOLOGIA
Ano de publicação:
2005
Tipo de documento:
Article