Uso de una conantokina y anticuerpos policlonales para identificar la subunidad NR2B del receptorn-metil-d-aspartato / The use of conantokin and polyclonal antibodies to identify the NR2B subunit of the n-methyl-d-aspartate receptor
Rev. MVZ Córdoba
; 15(3): 2147-2157, sept.-dic. 2010.
Article
em Es
| LILACS
| ID: lil-621926
Biblioteca responsável:
CO140
RESUMEN
Objetivo. Proponer una metodología de identificación de la subunidad NR2B, mediante el uso de conantokina G, así como una adecuada extracción de la subunidad NR2B. Materiales y métodos. Se ensayaron dos metodologías para la extracción de la subunidad NR2B de cerebro de rata adulta, la primera buscó la extracción de la subunidad a partir de la membrana mediante la utilización del detergente deoxicolato de sodio y la segunda, garantizó primero la solubilización y eliminación de proteínas citoplasmáticas para luego realizar la extracción de la subunidad mediante el uso del mismo detergente, a partir del pellet generado en la centrifugación del extracto obtenido. Adicionalmente se biotiniló la conantokina G para evaluar su eficiencia en la identificación de la subunidad y comparar los resultados con los obtenidos por metodologías tradicionales como DOT-BLOT, WESTERN-BLOT, ELISA e Inmunohistoquímica. Resultados. La segunda metodología mostró mayor extracción de NR2B por lo que se seleccionó para la realización de los extractos posteriores. Los ensayos de identificación con la conantokina biotinilada evidenciaron interferencia en el reconocimiento, haciéndose necesaria la identificación de la presencia de la subunidad NR2B mediante el uso de anticuerpos policlonales en los ensayos mencionados. Conclusiones. Se propone que hay un impedimento de tipo estérico en el marcaje de la conantokina con la biotina lo que no favorece la interacción de este péptido con la subunidad.
Palavras-chave
Texto completo:
1
Índice:
LILACS
Assunto principal:
Biotina
/
N-Metilaspartato
/
Cérebro
Tipo de estudo:
Diagnostic_studies
Limite:
Animals
Idioma:
Es
Revista:
Rev. MVZ Córdoba
/
Revista MVZ Córdoba
/
Revista Mvz Cordoba (Online)
Assunto da revista:
MEDICINA VETERINARIA
Ano de publicação:
2010
Tipo de documento:
Article