Desenvolvimento de ensaio imunométrico para a dosagem sérica da subunidade alfa dos hormônios glicoproteicos / Development of an immunoflurometric assay for serum alfa subunit of the glycoprotein hormones

RESUMO

Tendo como base um anticorpo monoclonal e um policlonal, desenvolvemos um ensaio imunofluorométrico para a medida de subunidade alfa no soro. O anticorpo monoclonal contra subunidade alfa, empregado para captura, foi produzido a partir de um camundongo imunizado contr LH e apresenta reatividade cruzada contra as formas íntegras dos hormônios glicoproteicos. Já o anticorpo policlonal foi produzido em coelho imunizado com subunidade alfa livre e apresenta baixa reatividade cruzada com os hormônios íntegros. Para a revelaçäo da ligaçäo do policlonal à subunidade capturada pelo monoclonal, empregamos um monoclonal anti-IgG de coelho marcado com európio. O ensaio apresenta reatividade cruzada de 2,8 por cento com hCG, 3,2 por cento com FSH, 6,4 por cento com TSH e 9,4 por cento com LH. A sensibilidade é da ordem de 50 ng/L, com perfil de imprecisäo mostrando um erro intraensaio inferior a 10 por cento entre os valores 100 e 20.000 ng/L. O coeficiente de variaçäo interensaio mostrou-se inferior a 14 por cento dentro da faixa de valores encontrados. A definiçäo de valores normais foi feita a partir de uma populaçäo normal de 66 adultos, 33 homens e 33 mulheres na menacme, onde encontramos valores entre 70 e 902 ng/L, com mediana de 236 ng/L. Em 14 mulheres mnenopausadas econtramos valores entre 1.498 e 3.919ng/L. A aplicaçäo do ensaio em 33 pacientes com diagnóstico de tumor hipofisário (11 acromegálicos, 15 prolactinomas, 6 tumores "näo secretores" e 1 tumor produtor de TSH) mostrou valores elevados em 11 pacientes