Does supplementation of vitamin C, reduced glutathione or their association in semen extender reduce oxidative stress in bovine frozen semen? / A suplementação de vitamina C, glutationa reduzida ou sua associação no diluidor de sêmen reduz o estresse oxidativo no sêmen congelado bovino?

The aim of this study was to evaluate the addition of vitamin C, reduced glutathione and the association thereof to the bovine semen cryopreservation extender. The ejaculate from nine bulls were divided into four fractions, each corresponding to a treatment, namely: control group-semen diluted with Tris-yolk extender; vitamin C group-semen diluted in Tris-yolk extender supplemented with vitamin C (2.5mmol/mL); glutathione group-semen diluted in Tris-yolk extender supplemented with reduced glutathione (2.5mmol/mL) and associated group-semen diluted in Tris-yolk extender supplemented with vitamin C (1.25mmol/mL) and reduced glutathione (1.25mmol/mL). Afterwards, the semen was packed into French straws and submitted to cryopreservation using automated equipment. After cryopreservation, the semen was thawed and evaluated considering sperm motility, morphology, plasma membrane, acrosome, mitochondrial potential and oxidative stress, as well as the thermo resistance test. Extender's supplementation with the association of vitamin C and reduced glutathione showed benefic effects on sperm motility and preservation of plasma and acrosomal membranes during semen cryopreservation, being also the group that showed higher values of reactive oxygen species. Thus, the association of both antioxidants contributed to the preservation of sperm cells in every analyzed characteristic, suggesting its use on bovine semen cryopreservation.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a adição de vitamina C, glutationa reduzida e sua associação ao diluidor de criopreservação de sêmen bovino. O ejaculado de nove touros foi dividido em quatro frações, cada uma correspondendo a um tratamento, a saber: grupo controle - sêmen diluído em Tris-gema; grupo vitamina C - sêmen diluído em Tris-gema, suplementado com vitamina C (2,5mmol/mL); grupo glutationa - sêmen diluído em Tris-gema, suplementado com glutationa reduzida (2,5mmol/mL) e grupo sêmen associado - diluído em Tris-gema, suplementado com vitamina C (1,25mmol/mL) e glutationa reduzida (1,25mmol/mL ). Posteriormente, o sêmen foi envasado em palhetas francesas e submetido à criopreservação por meio de equipamento automatizado. Após a criopreservação, o sêmen foi descongelado e avaliado quanto à motilidade espermática, à morfologia, à membrana plasmática, ao acrossoma, ao potencial mitocondrial e ao estresse oxidativo, bem como pelo teste de resistência térmica. A suplementação de extensor com a associação de vitamina C e glutationa reduzida mostrou efeitos benéficos sobre a motilidade espermática e a preservação das membranas plasmática e acrossomal durante a criopreservação de sêmen, sendo também o grupo que apresentou maiores valores de espécies reativas de oxigênio. Assim, a associação de ambos os antioxidantes contribuiu para a preservação dos espermatozóides em todas as características analisadas, sugerindo sua utilização na criopreservação de sêmen bovino.(AU)

Antioxidant effect on viability of boar semen cooled to 15°C / Influência de antioxidantes na viabilidade do sêmen suíno resfriado a 15°C

This study aimed to evaluate the addition of Vitamin C, reduced Glutathione and trolox on sperm characteristics of pork refrigerated semen. Six pigs were collected through the technique of gloved hand (10 ejaculates/animals). The semen was diluted in MR-A®. After the previous evaluations, the treatments were added: Control group: diluent only; Vitamin C Group: 200µM/mL Vitamin C; Trolox Group: 200µM/mL Trolox; Glutathione group: 2.5mM/ml Reduced glutathione. The semen was stored in thermal boxes and placed inside the refrigerator at 15oC and evaluated at D0, 12, 48, 72 hours. After 30 hours of incubation, each treatment was divided into two equal fractions and the same concentration of antioxidants was added in one of the parts. The results show that reduced glutathione supplementation preserves sperm motility after 24 hours but also has a higher percentage of acrosome intact in the presence of this antioxidant. There was no effect of adding a second dose of the antioxidants. In conclusion, the addition of reduced Glutathione to the swine semen diluent is a promising alternative for better preservation of sperm characteristics and the addition of the second dose of antioxidants during storage is detrimental to semen.(AU)

Este estudo tem como objetivo avaliar a adição da vitamina C, da glutationa reduzida e do trolox sobre características espermáticas do sêmen refrigerado de suínos. Seis cachaços foram coletados pela técnica de mão enluvada (10 coletas/animal). O sêmen foi diluído em MR-A®. Após as avaliações prévias, os tratamentos foram adicionados: grupo controle: apenas diluidor; grupo vitamina C: 200µM/mL de vitamina C; grupo trolox: 200µM/mL de trolox; grupo glutationa: 2.5mM/mL de glutationa reduzida. O sêmen foi armazenado em caixas térmicas e alocado dentro do refrigerador a 15oC e avaliado nos tempos zero, 12, 48 e 72 horas . Após 30 horas de incubação, cada tratamento foi dividido em duas frações iguais e adicionou-se a mesma concentração de antioxidantes em uma das partes. Os resultados demonstram que a suplementação de glutationa reduzida preserva a motilidade espermática após 24 horas, bem como tem maior percentual de acrossoma intacto na presença desse antioxidante. Não houve efeito ao se adicionar uma segunda dose dos antioxidantes. Em conclusão, o acréscimo da glutationa reduzida ao diluidor de sêmen suíno é uma alternativa promissora para melhor preservação das características espermáticas, e a adição da segunda dose dos antioxidantes durante o armazenamento é prejudicial ao sêmen.(AU)

Composição corporal de cálcio e fósforo do útero gestante e da glândula mamária de ovelhas Santa Inês / Calcium and phosphorus content in gravidic uterus and mammary gland of Santa Inês breed ewes

Ovelhas Santa Inês com gestação simples e múltipla foram alimentadas com dietas formuladas para atender a 100% - grupo não restrito - e 85% - grupo restrito - das suas necessidades de energia metabolizável (EM) e proteína bruta (PB). Os animais foram abatidos aos 140 dias de gestação para a retirada do útero da glândula mamária e do útero gestante, os quais foram analisados para o conteúdo de cálcio e de fósforo em função dos tratamentos. A restrição nutricional não influenciou as concentrações de cálcio e fósforo no feto e no útero gestante. Foi observado um aumento de 11,68 gramas de cálcio e de 6,37 gramas de fósforo para cada quilograma de massa fetal produzido aos 140 dias de gestação. As concentrações de cálcio e de fósforo do útero e das membranas foram mais baixas nas ovelhas gestantes submetidas à restrição nutricional. O número de fetos e o manejo nutricional não resultaram em alterações na concentração nem no conteúdo de cálcio e fósforo nos fluidos fetais. O conteúdo de cálcio e de fósforo no útero gestante teve como principal fator de variação o tamanho da massa fetal produzida.

Santa Inês breed ewes with single and multiple gestations were fed diets to meet 100% - Group ad libitum - and 85% - restricted group - of metabolizable energy (ME) and crude protein (CP) needs. The animals were slaughtered at 140 days of gestation for the removal of the gravidic uterus and mammary gland which were analyzed for calcium and phosphorus content. The nutritional restriction did not influence the calcium and phosphorus concentrations in the fetus and the pregnant uterus. The calcium and phosphorus content in the gravidic utero increased 11.68 grams and 6.37 grams for each kilogram of fetal mass produced at 140 days of gestation respectively. The calcium and phosphorus concentration in the uterus and membranes were lower in pregnant ewes subjected to nutritional restriction. The number of fetuses and nutritional management did not result in changes in the concentration or amount of calcium and phosphorus in fetal fluids. The calcium and phosphorus content in the gravidic uterus had the fetal weight as main variation factor.

In vitro anthelmintic effect of Melia azedarach L. and Trichilia claussenii C. against sheep gastrointestinal nematodes.

The control of parasitic diseases in small ruminants is mainly done with the use of synthetic anthelmintics. However, incorrect and indiscriminate use of these products has caused the emergence of parasite resistance. Plants with anthelmintic activity are used in folk veterinary medicine, but it is necessary to investigate and scientifically validate low-cost phytotherapeutic alternatives for future use to control gastrointestinal nematodes in small ruminants by family farmers. Thus, the aim of this study was to evaluate the in vitro anthelmintic effect of plant extracts from Melia azedarach and Trichilia claussenii by the egg hatch test (EHT) and larval development test (LDT) against sheep gastrointestinal nematodes. The hexane extract of M. azedarach fruits was extracted through cold percolation and the methanol extract of T. claussenii leaves was obtained by extraction at room temperature in solvents in order of increasing polarity. The efficacy results were analyzed using the Probit program of SAS. The M. azedarach extract showed a LC(50) of 572.2 µg/mL and LC(99) of 1137.8 µg/mL in the EHT, and LC(50) of 0.7 µg/mL and LC(99) of 60.8 µg/mL in the LDT. In turn, the T. claussenii extract presented a LC(50) of 263.8 µg/mL and LC(99) of 522.5 µg/mL in the EHT and LC(50) of 1.1 µg/mL and LC(99) of 26.4 µg/mL in the LDT. Comparing the extracts of the species from the Meliaceae family, T. claussenii showed greater anti-parasite potential in vitro than M. azedarach. However, studies on the isolated compounds, toxicity and administration forms to animals are also needed to validate low-cost alternative herbal remedies for use to control gastrointestinal nematodes by family farmers.