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1.
J Agric Food Chem ; 64(8): 1770-6, 2016 Mar 02.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-26886573

RESUMEN

Hydroperoxide lyase (HPL, E.C. 4.1.2.) is the major enzyme in the biosynthesis of natural volatile aldehydes and alcohols in plants, however, little was known about HPL in tea plants (Camellia sinensis). A unique cDNA fragment was isolated by suppressive subtractive hybridization (SSH) from a tea plant subjected to herbivory by tea geometrid Ectropis obliqua. This full length cDNA acquired by RACE was 1476 bp and encoded 491 amino acids. DNA and protein BLAST searches showed high homology to HPL sequences from other plants. The His-tag expression vector pET-32a(+)/CsHPL was constructed and transferred into Escherichia coli Rosetta (DE3). The expression product of recombinant CsHPL in E. coli was about 60 kDa. The enzyme activity of CsHPL was 0.20 µmol·min(-1)·mg(-1). Quantitative RT-PCR analysis indicated CsHPL was strongly up-regulated in tea plants after Ectropis obliqua attack, suggesting that it may be an important candidate for defense against insects in tea plants.


Asunto(s)
Aldehído-Liasas/genética , Camellia sinensis/enzimología , Clonación Molecular , Sistema Enzimático del Citocromo P-450/genética , Hojas de la Planta/enzimología , Proteínas de Plantas/genética , Aldehído-Liasas/química , Aldehído-Liasas/metabolismo , Secuencia de Aminoácidos , Animales , Camellia sinensis/química , Camellia sinensis/genética , Camellia sinensis/parasitología , Sistema Enzimático del Citocromo P-450/química , Sistema Enzimático del Citocromo P-450/metabolismo , Regulación de la Expresión Génica de las Plantas , Datos de Secuencia Molecular , Mariposas Nocturnas/fisiología , Hojas de la Planta/química , Hojas de la Planta/genética , Proteínas de Plantas/química , Proteínas de Plantas/metabolismo , Alineación de Secuencia
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