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Anal Bioanal Chem ; 408(26): 7321-7, 2016 Oct.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-27236313

RESUMO

A novel label-free electrochemical strategy for nucleic acid detection was developed by using gold electrodes coated with mesoporous silica thin films as sensing interface. The biosensing approach relies on the covalent attachment of a capture DNA probe on the surface of the silica nanopores and further hybridization with its complementary target oligonucleotide sequence, causing a diffusion hindering of an Fe(CN)6 (3-/4-) electrochemical probe through the nanochannels of the mesoporous film. This DNA-mesoporous silica thin film-modified electrodes allowed sensitive (91.7 A/M) and rapid (45 min) detection of low nanomolar levels of synthetic target DNA (25 fmol) and were successfully employed to quantify the endogenous content of Escherichia coli 16S ribosomal RNA (rRNA) directly in raw bacterial lysate samples without isolation or purification steps. Moreover, the 1-month stability demonstrated by these biosensing devices enables their advanced preparation and storage, as desired for practical real-life applications. Graphical abstract Mesoporous silica thin films as scaffolds for the development of novel label-free electrochemical genosensors to perform selective, sensitive and rapid detection of target oligonucleotide sequences. Application towards E. coli determination.


Assuntos
Técnicas Eletroquímicas/métodos , Escherichia coli/genética , Ácidos Nucleicos Imobilizados/química , Hibridização de Ácido Nucleico/métodos , RNA Bacteriano/análise , RNA Ribossômico/análise , Dióxido de Silício/química , Técnicas Biossensoriais/instrumentação , Técnicas Biossensoriais/métodos , DNA/análise , DNA/genética , Técnicas Eletroquímicas/instrumentação , Eletrodos , Desenho de Equipamento , Escherichia coli/isolamento & purificação , Infecções por Escherichia coli/microbiologia , Humanos , Ácidos Nucleicos Imobilizados/genética , Porosidade , RNA Bacteriano/genética , RNA Ribossômico/genética
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