Micromorfología y ultraestructura de las anteras y los granos de polen en diez genotipos élite de Theobroma cacao (Malvaceae) / Micromorphology and ultrastructure of anthers and pollen grains in ten elite genotypes of Theobroma cacao (Malvaceae)

Resumen Introducción: A pesar de que T. cacao es una especie importante a nivel mundial por la producción de cacao, es poco lo que se conoce sobre la micromorfología y estructura de las anteras y los granos de polen. Objetivos: Describir y analizar la estructura y micromorfología de las anteras y los granos de polen de 10 genotipos élite de esta importante especie tropical. Métodos: Se tomaron más de 30 anteras de flores en antesis de los 10 genotipos élite de T. cacao del banco de germoplasma ex situ del Centro de Investigaciones Suiza-Agrosavia (Rionegro, Santander-Colombia). El material se procesó de acuerdo con los protocolos estándar para embeber y seccionar en parafina. Las secciones obtenidas (3 μm) se tiñeron con azul de Safranina-Alcian para discriminar estructuras con paredes primarias y secundarias y polifenoles totales. Además, se usó la técnica PAS-Amidoblack para diferenciar entre polisacáridos estructurales y de reserva, así como proteínas. Para la determinación de esporopolenina y polifenoles se usó la tinción azul de toluidina y finalmente para descripciones adicionales se aplicó la tinción azul alcián-PAS-hematoxilina. Las observaciones se realizaron mediante microscopio fotónico y microscopio de epifluorescencia. Para la observación con microscopía electrónica de barrido (MEB), las anteras con los granos de polen se fijaron y deshidrataron en 2.2 dimetoxipropano, luego se desecaron hasta un punto crítico y finalmente se recubrieron con oro. Resultados: Las anteras son bitecas y están sostenidas por un largo filamento formado por un estrato epidérmico, tejido parenquimatoso y un haz vascular. La dehiscencia ocurre longitudinalmente a través del estomio. La pared de la antera madura está formada por una capa epidérmica monoestratificada, una capa de células endoteliales con engrosamientos fibrilares lignificados y se pueden apreciar restos celulares del tapete y abundantes orbículas recubriendo la cavidad de los microesporangios. Los tejidos epidérmicos y parenquimatosos de las anteras almacenan polifenoles. Las orbículas son generalmente esféricas, psiladas y exhiben las mismas reacciones de tinción y fluorescencia que la exina de los granos de polen. Los granos de polen son mónades, isopolares, pequeños (16-19 µm) con amb circular, esferoidales, tricolpados con colpos medianos o cortos (5-10 µm) con membrana ornamentada, semitectatos, reticulados, heterobrochados, las paredes del retículo ornamentadas o no, con microgránulos de diferente tamaño o escabrados. Los análisis estadísticos mostraron que existen diferencias significativas en el tamaño de los granos de polen (P ˂ 0.05). Se observa que los granos de polen más pequeños son los del genotipo TCS 19 (16.890 µm) y se diferencian del resto de genotipos, y entre estos no se observan diferencias significativas. Solo dos genotipos (SCC 19 y SCA 6) presentaron polenkit y solo uno tiene paredes perforadas (SCA 6). Conclusiones: La estructura y micromorfología de las anteras de T. cacao son similares a las descritas para otras Malvaceae. Así mismo, los granos de polen mostraron variaciones de tamaño, ornamentación de las paredes y del lumen del retículo y presencia de polenkit. Sin embargo, no se observó relación entre las variaciones de los caracteres micromorfológicos analizados en los granos de polen y los modelos de compatibilidad polínica reportados para estos genotipos.

Abstract Introduction: Despite the fact that T. cacao is an important species worldwide for cocoa production, little is known about the micromorphology and structure of anthers and pollen grains. Objectives: To describe and analyze the structure and micromorphology of the anthers and pollen grains of 10 elite genotypes of this important tropical species. Methods: More than 30 anthers of flowers in anthesis were taken of the 10 elite genotypes of T. cacao from the ex situ germplasm bank of the Suiza-Agrosavia Research Center (Rionegro, Santander-Colombia). The anthers with the pollen grains were fixated and processed according to the standard protocols for embedding and sectioning in paraffin. Sections obtained (3 μm thick) were stained with Safranin-Alcian blue to discriminate structures with primary and secondary walls and total polyphenols. Additionally, the samples were also stained with the PAS-Amidoblack technique was used to differentiate between structural and reserve polysaccharides as well as proteins. Toluidine blue staining was used for the determination of sporopollenin and polyphenols and finally Alcian blue-PAS-Hematoxylin staining was applied for additional descriptions. Observations were made using photonic microscopy and epifluorescence microscopy. For observation with scanning electron microscopy (SEM) the anthers with the pollen grains were fixed and dehydrated in 2.2 Dimethoxypropane, then desiccated to critical point and finally coated with gold. Results: The anthers are dithecal and supported by a long filament made up of an epidermal stratum, parenchymal tissue, and a vascular bundle. The dehiscence occurs longitudinally through the stomium. The anther wall is made up of a monostratified epidermal layer, followed by a layer of endothecial cells with lignified fibrillar thickenings, cellular remnants of tapetum and abundant orbicules can be seen covering the cavity of the microsporangia. The epidermal and parenchymal tissues of the anthers are abundant in polyphenols. Orbicules are generally spherical, psilated, and these exhibit the same staining and fluorescence reactions as exine from pollen grains. The pollen grains are monades, isopolar, small (16-19 µm) with circular amb, spheroidal, tricolpate with medium or short colpi (5-10 µm) with sculptured membrane, semitectate, reticulated, heterobrochate, sculptured or non- sculptured walls, with microgranules of different size or scabrate. The statistical analyzes showed that there are significant differences in the size of the pollen grains (P ˂ 0.05). It is observed that the smallest pollen grains are those of the TCS 19 genotype (16.890 µm) and are different from the other genotypes, and among these there are no significant differences. Only two genotypes (SCC 19 and SCA 6) showed pollenkit and only one has perforated walls (SCA 6). Conclusions: The structure and micromorphology of the anthers of T. cacao are similar to those described for other Malvaceae. Likewise, the pollen grains showed variations in size, ornamentation of the sporoderm and the lumen of the reticulum and the presence of pollenkitt. However, no relationship was observed between the micromorphological characters analyzed in the pollen grains and the pollen compatibility models reported for these genotypes.

Imunoexpressão da Yes-Associated Protein (YAP) em hiperceratoses e displasias epiteliais orais / Immunoexpression of Yes-Associated Protein (YAP) in hyperkeratosis and oral epithelial dysplasia

A busca por um biomarcador que auxilie na predição de risco de transformação maligna das desordens orais potencialmente malignas (DOPMs) representa um grande desafio, já que pode auxiliar no manejo precoce e adequado dos pacientes. Este estudo avaliou a imunoexpressão da Yes-Associated Protein (YAP) em lesões intraorais leucoplásicas, eritroplásicas ou leucoeritroplásicas, com diagnóstico histopatológico de hiperceratose ou displasia epitelial oral (DEO), correlacionando essa imunoexpressão com o grau de severidade morfológica dessas lesões. A amostra foi composta por 20 casos de hiperceratoses e 53 casos de DEOs, além de 10 casos de mucosa oral normal (grupo controle). Para a avaliação do grau de displasia, foram utilizadas as gradações da OMS (EL-NAGGAR et al., 2017) e o Sistema Binário (KUJAN et al., 2006), sendo o perfil imunoistoquímico da proteína YAP avaliado por meio de escores, que variaram entre 0 e 3, com base em sua localização intracelular (citoplasmática ou nuclear) e por sua distribuição no tecido epitelial. Para a análise entre os parâmetros estudados foram realizados os testes estatísticos Qui-quadrado de Pearson, Exato de Fisher, além de testes não paramétricos, (nível de significância de 95%). Displasias leves foram enquadradas (100%) no baixo risco de transformação maligna, enquanto as moderadas dividiram-se entre baixo (47%) e alto risco (53%), sendo as displasias severas, em sua maior parte (71%), classificadas como de alto risco (p < 0,001). O grupo controle exibiu imunomarcação de escore 0 (80%), as hiperceratoses e displasias leves (em 80% das vezes) exibiram escore 1, já nas displasias moderadas (63%) e severas (79%), foram predominantes os escores 2 e 3; com padrão de imunomarcação nuclear associado ao alto risco de transformação maligna sugerido pelo Sistema binário (p = 0,002). A imunoexpressão da YAP foi semelhante entre hiperceratoses e displasias leves, o que deve suscitar maior atenção dos profissionais frente aos casos de hiperceratose, além disto a expressão da YAP aparenta dicotomizar as DOPMs entre as lesões com baixo risco de transformação maligna e as lesões com alto risco, o que pode sugerir no futuro, sua utilização como potencial marcador preditivo de progressão destas lesões (AU).

The search for a biomarker that helps to predict the risk of malignant transformation of oral potentially malignant disorders (OPMDs) represents a great challenge, as it can help in the early and adequate management of patients. This study evaluated the immunoexpression of Yes-Associated Protein (YAP) in intraoral leukoplastic, erythroplastic or leukoerythroplastic lesions, with histopathological diagnosis of hyperkeratosis or oral epithelial dysplasia (OED), correlating this immunoexpression with the degree of morphological severity of these lesions. The sample consisted of 20 cases of hyperkeratosis and 53 cases of OED, in addition to 10 cases of normal oral mucosa (control group). To assess the degree of dysplasia, the WHO grading (EL-NAGGAR et al., 2017) and the Binary System (KUJAN et al., 2006) were used, and the immunohistochemical profile of the YAP protein was evaluated through scores, which ranged from 0 to 3, based on their intracellular location (cytoplasmic or nuclear) and their distribution in the epithelial tissue. For the analysis of the studied parameters, Pearson's Chi-square and Fisher's Exact statistical tests were performed, in addition to non-parametric tests (significance level of 95%). Mild dysplasias were classified (100%) in the low risk of malignant transformation, while the moderate ones were divided between low (47%) and high risk (53%), with severe dysplasias, for the most part (71%), classified as high risk (p < 0.001). The control group exhibited score 0 of immunostaining (80%), hyperkeratosis and mild dysplasias (80% of booth) exhibit score 1, whereas in moderate (63%) and severe dysplasia (79%), the predominant scores was 2 and 3; with a pattern of nuclear immunostaining associated with the high risk of malignant transformation suggested by the Binary System (p = 0.002). The immunoexpression of YAP was similar between hyperkeratosis and mild dysplasias, which should attract greater attention from professionals in cases of hyperkeratosis. Furthermore, the expression of YAP appears to dichotomize OPMDs between lesions with low risk of malignant transformation and lesions with high risk, which may suggest, in the future, its use as a potential predictive marker of the progression for these lesions (AU).

Morfoanatomía e histoquímica de Hypericum juniperinum (Hypericaceae)

Hypericum es un género que pertenece a la familia Hypericaceae, conformado por 469 especies de hierbas, árboles y arbustos. Dos secciones en particular, Brathys y Trygynobrathys, son parte integral de la flora de Páramo. Hypericum tiene una amplia variedad de metabolitos que están asociados con múltiples actividades farmacológicas, y específicamente en H. juniperinum se han reportado propiedades antidepresivas relacionadas con la presencia de flavonoides y compuestos fenólicos. El objetivo de esta investigación fue relacionar las estructuras anatómicas con los metabolitos detectados por métodos histoquímicos presentes en los órganos vegetativos y reproductivos de Hypericum juniperinum recolectados en el Páramo colombiano. Los órganos aéreos (tallos, hojas y flores) de Hypericum juniperinum se recolectaron en la vereda Arbolocos del municipio de Cuitiva, Boyacá (código voucher No.589611, COL). Para el análisis anatómico, los órganos de H. juniperinum se procesaron con técnicas de fijación, incorporación en parafina, corte en microtomo y tinción con azul de astra y fucsina básica. Para el análisis histoquímico se realizaron cortes a mano alzada con tinciones específicas para lípidos, compuestos fenólicos, alcaloides y pectinas. La anatomía de los órganos de H. juniperinum debe entenderse en el contexto de las condiciones de vida del Páramo. Las hojas son altamente xeromorfas ya que son cartáceas, arrosetadas, convolutas y verticales, con parénquima en empalizada biestratificado, paredes engrosadas, cutícula gruesa y cera epicuticular en ambas epidermis foliares, estomas en el lado abaxial con cámara epidérmica. Sin embargo, tiene algunas características mesomórficas, como las vainas parenquimáticas de los haces vasculares y el parénquima esponjoso suelto. Hypericum juniperinum presenta glándulas translúcidas en hojas, cáliz y gineceo, y carece de las glándulas negras típicas de la sección Hypericum a la que pertenece la planta medicinal Hypericum perforatum. El análisis histoquímico mostró lípidos en los canales de la hoja, parénquima radial del tallo y en algunas estructuras florales. Los compuestos fenólicos se detectaron a lo largo de la hoja, en el floema del tallo y en las anteras. Hypericum juniperinum carece de alcaloides y presenta pectinas en el parénquima de la vaina que rodea el haz vascular de la hoja. El presente trabajo contribuye a relacionar los metabolitos con su distribución en los tejidos de esta especie nativa. Además, la anatomía mostró que H. juniperinum tiene características de una planta de Páramo. La descripción que se proporciona aquí podría utilizarse como una monografía preliminar de plantas del género Hypericum con propiedades terapéuticas prometedoras.

Hypericum is a genus that belongs to the Hypericaceae family, with has 469 species of herbs, trees and shrubs. Two sections in particular, Brathys and Trygynobrathys are an integral part of the Paramo flora. Hypericum genus has a wide variety of metabolites that are associated with multiple pharmacological activities, and specifically in H. juniperinum antidepressant properties related to the presence of flavonoids and phenolic compounds have been reported. The objective of this research is to relate the anatomical structures with the metabolites detected by histochemical methods present in the vegetative and reproductive organs of Hypericum juniperinum collected in the Colombian Paramo. The aerial organs (stems, leaves and flowers) of Hypericum juniperinum were collected in the village Arbolocos of the municipality of Cuitiva, Boyacá (voucher code No. 589611, COL). For the anatomical analysis, the organs of H. juniperinum were processed with fixation techniques, incorporation in paraffin, cutting in microtome and staining with Astra-blue and basic fuchsin; for the histochemical analysis freehand cuts were made with specific stains for lipids, phenol compounds, alkaloids and pectins. The anatomy of the organs of H. juniperinum should be understood in the context of the living conditions of the Paramo. Leaves are highly xeromorphic as they are chartaceous, rosette-shaped, convolute and upright, with parenchyma in bistratified palisade, thickened walls, thick cuticle and epicuticular wax in both foliar epidermis, stomata on the abaxial side and with epidermal chamber. However, it has some mesomorphic characteristics such as parenchymatic bundle sheath and loose spongy parenchyma. Hypericum juniperinum has translucent glands in leaves, calyx and gynoecium, and lacks black glands typical of the Hypericum section belonging to the medicinal plant Hypericum perforatum. Histochemical analysis showed lipids in leaf canals, radial parenchyma of the stem and in some floral structures. Phenolic compounds were detected along the leaf, in the phloem of the stem and in the anthers. Hypericum juniperinum lacks alkaloids and presents pectins in the parenchyma of the sheath surrounding the vascular bundle of the leaf. The present work contributes by relating the metabolites with their distribution in the tissues of this native species. In addition, the anatomy of H. juniperinum has characteristics of the Paramo plants. Description given here could be used as a preliminary monograph of plants from the Hypericum genus with promising therapeutic properties.

Efeitos da terapia fotodinâmica com aluminio - cloro ftalocianina sobre a peroxidação lipídica e produtos antioxidantes em tecidos inflamados animais / Effects of Photodynamic therapy aluminum - chloro phthalocyanine on lipid peroxidation products and antioxidant in animal tissues inflamed

A terapia fotodinâmica (TFD) envolve a administração de um agente fotossensibilizador (FS) seguida pela aplicação do laser, com comprimento de onda adequado, resultando em uma sequência de processos fotoquímicos e fotobiológicos, que geram espécies reativas de oxigênio (EROs). Este estudo avaliou, os efeitos da TFD com nanoemulsão de alumínio-cloro ftalocianina (AlClFc) sobre os níveis de malondildeído (MDA), glutationa (GSH), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), que representam indicadores envolvidos no estresse oxidativo e defesas antioxidantes. Para tanto, o estudo utilizou 120 ratas da espécie Rattus norvegicus, raça Wistar, distribuídas em 5 grupos experimentais: Saudáveis (S), com doença periodontal (DP), com doença periodontal e tratamento com o FS (F), com doença periodontal e tratamento com o laser (L) e com doença periodontal e tratamento com TFD (FL). Foi utilizado um modelo experimental de doença periodontal (DP) induzida por ligadura. Após sete dias, da indução da DP, foram instituídos os tratamentos, conforme os grupos. No grupo tratado, com TFD, foi aplicado 40μl do FS (5μM), seguida da irradiação do laser diodo fosfeto de índio-gálio-alumínio (InGaAlP - 660nm, 100J/cm2). As ratas sofreram eutanásia no 7º e no 28º dia, após o tratamento. Os espécimes teciduais foram removidos para análises histológicas, ensaios bioquímicos e imuno-histoquímica. Os resultados histológicos exibiram, alterações inflamatórias, desorganização do tecido conjuntivo e perda óssea alveolar, nos grupos com DP induzida. Os ensaios demonstraram, que os níveis de MDA estavam mais elevados, nos grupos com DP induzida, que no grupo saudável. Não existindo diferenças estatísticas significantes (p>0,05). Níveis elevados de GSH foram encontrados nas ratas saudáveis, com diferenças estatísticas significativas, nos grupos L (p=0,028) e FL (p=0,028), quando comparados com o grupo DP. Imuno-histoquimicamente, a SOD apresentou maior imunomarcação nos grupos L e FL, comparados ao grupo saudável. Sem diferenças estatísticas significativas (p>0,05). GPx mostrou imunomarcação significativamente menor no grupo DP, comparado ao saudável (p=0,05) e no grupo F, comparado ao DP (p<0,05). Os resultados apresentados sugerem discreta participação da TFD mediada por nanoemulsão contendo AlClFc no estresse oxidativo. O protocolo utilizado, neste experimento, demonstrou maior influência da TFD sobre os mecanismos antioxidantes.

Photodynamic therapy (PDT) consists of a non-toxic photosensitizing agent (FS) administration followed by a laser source resulting in a sequence of photochemical and photobiological processes that generate reactive oxygen species (ROS) that damaging cells. The present work evaluated the effects of PDT nanoemulsion-aluminum chloride phthalocyanine (AlClFc) mediated on malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) levels, which represent indicators involved in oxidative stress and antioxidant defenses. For this purpose, this study used 120 female rats of the Rattus norvegicus species, Wistar race, divided into 5 groups: Healthy (H), with periodontal disease (PD), with periodontal disease and treatment with FS (F), with periodontal disease and treatment with the laser (L); and periodontal disease and treatment with PDT (FL). An experimental model for represent periodontal disease (PD) was induced by ligature (split-mouth). Seven days later the induction of PD, the treatments were instituted according to the groups. In the group treated with PDT was applied 40μl FS (5μM) followed by laser irradiation diode InGaAlP (660nm, 100J / cm2). The rats were sacrificed on the 7th and 28th day after treatment and tissue specimens were removed and subjected to histological, immunohistochemical methods and enzymatic colorimetric measurements with detection by UV / VIS spectroscopy. Inflammatory changes, connective tissue disorganization and alveolar bone loss were displaying in groups with PD induced. The enzyme dosages showed that MDA levels were higher in PD induced groups, with no statistically significant differences (p> 0.05). High levels of GSH were found in groups L (p = 0.028) and FL (p = 0.028) compared with PD group, with statistically significant differences. Immunohistochemistry for SOD showed higher immunostaining in L and FL groups, compared to the PD group without statistically significant differences (p> 0.05). GPx showed lower immunoreactivity in the DP group when compared to the other groups and statistically significant differences were observed between the DPxL groups (p <0.05). TFD administered in this experiment did not induce elevation of MDA levels significantly increased the GSH levels and showed intense immunostaining pada SOD and GPx, showing that this therapy does not accentuated lipid peroxidation, however, it was able to induce effects on the antioxidant defenses processes. The LBI therapy appeared to show photomodulatory promoting effects reduction of the MDA levels, increasing GSH levels and with intense immunostaining for SOD and GPx, demonstrating that laser therapy induced antioxidant effects.

Efeitos da terapia fotodinâmica com aluminio – cloro ftalocianina sobre a peroxidação lipídica e produtos antioxidantes em tecidos inflamados animais / Effects of Photodynamic therapy aluminum - chloro phthalocyanine on lipid peroxidation products and antioxidant in animal tissues inflamed

A terapia fotodinâmica (TFD) envolve a administração de um agente fotossensibilizador (FS) seguida pela aplicação do laser, com comprimento de onda adequado, resultando em uma sequência de processos fotoquímicos e fotobiológicos, que geram espécies reativas de oxigênio (EROs). Este estudo avaliou, os efeitos da TFD com nanoemulsão de alumínio-cloro ftalocianina (AlClFc) sobre os níveis de malondildeído (MDA), glutationa (GSH), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), que representam indicadores envolvidos no estresse oxidativo e defesas antioxidantes. Para tanto, o estudo utilizou 120 ratas da espécie Rattus norvegicus, raça Wistar, distribuídas em 5 grupos experimentais: Saudáveis (S), com doença periodontal (DP), com doença periodontal e tratamento com o FS (F), com doença periodontal e tratamento com o laser (L) e com doença periodontal e tratamento com TFD (FL). Foi utilizado um modelo experimental de doença periodontal (DP) induzida por ligadura. Após sete dias, da indução da DP, foram instituídos os tratamentos, conforme os grupos. No grupo tratado, com TFD, foi aplicado 40μl do FS (5μM), seguida da irradiação do laser diodo fosfeto de índio-gálio-alumínio (InGaAlP - 660nm, 100J/cm2). As ratas sofreram eutanásia no 7º e no 28º dia, após o tratamento. Os espécimes teciduais foram removidos para análises histológicas, ensaios bioquímicos e imuno-histoquímica. Os resultados histológicos exibiram, alterações inflamatórias, desorganização do tecido conjuntivo e perda óssea alveolar, nos grupos com DP induzida. Os ensaios demonstraram, que os níveis de MDA estavam mais elevados, nos grupos com DP induzida, que no grupo saudável.

Não existindo diferenças estatísticas significantes (p>0,05). Níveis elevados de GSH foram encontrados nas ratas saudáveis, com diferenças estatísticas significativas, nos grupos L (p=0,028) e FL (p=0,028), quando comparados com o grupo DP. Imuno-histoquimicamente, a SOD apresentou maior imunomarcação nos grupos L e FL, comparados ao grupo saudável. Sem diferenças estatísticas significativas (p>0,05). GPx mostrou imunomarcação significativamente menor no grupo DP, comparado ao saudável (p=0,05) e no grupo F, comparado ao DP (p<0,05). Os resultados apresentados sugerem discreta participação da TFD mediada por nanoemulsão contendo AlClFc no estresse oxidativo. O protocolo utilizado, neste experimento, demonstrou maior influência da TFD sobre os mecanismos antioxidantes. (AU)

Photodynamic therapy (PDT) consists of a non-toxic photosensitizing agent (FS) administration followed by a laser source resulting in a sequence of photochemical and photobiological processes that generate reactive oxygen species (ROS) that damaging cells. The present work evaluated the effects of PDT nanoemulsion-aluminum chloride phthalocyanine (AlClFc) mediated on malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) levels, which represent indicators involved in oxidative stress and antioxidant defenses. For this purpose, this study used 120 female rats of the Rattus norvegicus species, Wistar race, divided into 5 groups: Healthy (H), with periodontal disease (PD), with periodontal disease and treatment with FS (F), with periodontal disease and treatment with the laser (L); and periodontal disease and treatment with PDT (FL). An experimental model for represent periodontal disease (PD) was induced by ligature (split-mouth). Seven days later the induction of PD, the treatments were instituted according to the groups. In the group treated with PDT was applied 40μl FS (5μM) followed by laser irradiation diode InGaAlP (660nm, 100J / cm2). The rats were sacrificed on the 7th and 28th day after treatment and tissue specimens were removed and subjected to histological, immunohistochemical methods and enzymatic colorimetric measurements with detection by UV / VIS spectroscopy. Inflammatory changes, connective tissue disorganization and alveolar bone loss were displaying in groups with PD induced. The enzyme dosages showed that MDA levels were higher in PD induced groups, with no statistically significant differences (p> 0.05). High levels of GSH were found in groups L (p = 0.028) and FL (p = 0.028) compared with PD group, with statistically significant differences. Immunohistochemistry for SOD showed higher immunostaining in L and FL groups, compared to the PD group without statistically significant differences (p> 0.05).

GPx showed lower immunoreactivity in the DP group when compared to the other groups and statistically significant differences were observed between the DPxL groups (p <0.05). TFD administered in this experiment did not induce elevation of MDA levels significantly increased the GSH levels and showed intense immunostaining pada SOD and GPx, showing that this therapy does not accentuated lipid peroxidation, however, it was able to induce effects on the antioxidant defenses processes. The LBI therapy appeared to show photomodulatory promoting effects reduction of the MDA levels, increasing GSH levels and with intense immunostaining for SOD and GPx, demonstrating that laser therapy induced antioxidant effects (AU)

Anatomía e histoquímica de Tarenaya hassleriana (cleomaceae), especie de interés medicinal / Anatomy and histochemistry of Tarenaya hassleriana (cleomaceae), an interesting medicinal species

La decocción de la planta de Tarenaya hassleriana es utilizada en la región del Río de La Plata por sus propiedades como rubefaciente, digestiva, y antiescorbútica. El objetivo del estudio fue investigar caracteres de la hoja y tallo para identificar esta especie a partir de muestras enteras o fragmentadas. Se emplearon técnicas habituales de microscopia óptica y análisis histoquímico para identificar almidón, sustancias lipofílicas, fenólicas y mirosina. Los caracteres diagnósticos fueron: en la hoja, folíolos con venación eucamptódroma, con estomas anomocíticos presentes en ambas caras; tricomas glandulares uniseriados y pluriseriados, con cabezas unicelulares y pluricelulares conteniendo sustancias lipofílicas; mesofilo dorsiventral; en el tallo, la corteza primaria formada por varias capas de colénquima tangencial seguido de parénquima; el cilindro vascular secundario rodea la médula sólida, en cuyo parénquima se halló almidón, cristales poliédricos y esferocristales. Se detectaron idioblastos de mirosina en la epidermis y parénquimas de la hoja y el tallo. Los parámetros micrográficos descriptos garantizan una correcta identificación de T. hassleriana.

Plant decoction of Tarenaya hassleriana is used as a traditional medicine in the Río de La Plata area. It has rubefacient, digestive, and antiscorbutic properties. The aim of this study was to investigate leaf and stem microcharacters to identify this species from whole or fragmented samples. The usual techniques of optical microscopy were employed. Histochemical tests for starch, lipophilic substances, phenolic substances, and mirosina were used. The main differential traits were: leaflets with eucamptodromous venation, amphistomatic with anomocytic stomata type; uniseriate and pluriseriate glandular trichomes, with unicellular and pluricellular heads containing lipophilic substances; dorsiventral mesophyll; stem with a primary cortex formed by tangential collenchyma followed by parenchyma; the secondary vascular cylinder surrounding the pith with starch, polyhedral microcrystals and spherocrystals. Idioblast of myrosin were detected in the epidermis and parenchyma of leaves and stems. The micrographic parameters described ensure a correct identification of T. hassleriana.

Histochemical Evaluation of the Vessel Wall Destruction and Selectivity After Treatment with Intense Pulsed Light in Capillary Malformations.

BACKGROUND: Among the different approaches for improving the effectiveness in the treatment of Capillary Malformations type Port Wine Stain (CM type PWS) are the intense pulsed light sources. There are few clinical studies prove useful in the treatment of CM. Furthermore, no studies have been published yet demonstrating the histological effects of IPL in CM. OBJECTIVES: To assess the histological effects of pulsed light in capillary malformations type port wine stain. We wanted to compare epidermal, dermal and vessel wall damage after treatment with different combinations of IPL parameters. MATERIAL AND METHODS: Fifty-five post-treatment biopsies were performed in 15 consenting patients with CM and stained with nitroblue-tetrazolium chloride (NBTC). Patients had not been treated previously. RESULTS: Fifteen patients with CM, with a median age of 39 years-old were enrolled in this study. In this series, the patients with the most severe epidermal damage were those with a darker phototype. Pink CM were especially resistant to treatment, even using high fluences, short pulse durations and stacking pulses. Longer intra- and interpulse delays were effective in purple CM, achieving adequate vessel destruction. CONCLUSIONS: IPL devices provide a vast amount of treatment possibilities and further studies are necessary to optimize therapeutic approaches to CM. In this study we have observed the histological effects of different pulses on the MC type PWS.

Reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico tratados com aspirado de medula óssea associado ou não a terapia com laser em baixa intensidade: estudo imunoistoquímico em calvárias de ratos / Bone healing in critical-size defects treated with bone marrow aspirate combined or not with low-level laser therapy: an immunohistochemical study in rat calvaria

Este estudo imunoistoquímico avaliou a influência do aspirado de medula óssea (AMO) associado ou não à terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) no processo de reparo de defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 64 ratos foram aleatoriamente distribuídos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. No Grupo AMO, o defeito preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu irradiação com laser (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo ou AMO, respectivamente, e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 15 e 30 dias pós-operatórios. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para detecção do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), proteína óssea morfogenética-2 (BMP-2), osteopontina (OPN) e osteocalcina (OCN). Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação para VEGF. As células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas foram quantificadas. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Aos 15 dias pós-operatórios, o Grupo LLLT apresentou números de células OPN-positivas e OCN-positivas significativamente maiores que o Grupo C; o Grupo AMO apresentou números de células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas e OPN-positivas significativamente maiores do que os grupos C e LLLT, além de número de células OCN-positivas significativamente maior que o controle; o Grupo AMO/LLLT apresentou imunomarcação para VEGF e números de células Runx2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas significativamente maiores que o Grupo C. Aos 30 dias pós-operatórios, o Grupo LLLT apresentou imunomarcação para VEGF e números de células OPN-positivas e OCN-positivas significativamente...

This immunohistochemical study evaluated the influence of bone marrow aspirate (BMA) combined or not with low-level laser therapy (LLLT) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSDs) in rat calvaria. 64 rats were randomly divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In Group BMA, the defect was filled with BMA. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot or BMA respectively, and irradiated again. Animals were euthanized at either 15 or 30 days postoperative. Vascular endothelial growth factor (VEGF), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), runt-related transcription factor-2 (Runx2), bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), osteocalcin (OCN) and osteopontin (OPN) immunohistochemical staining were performed. A semi-quantitative method was used to evaluate VEGF immunolabeling. PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells were quantified. Data were statistically analyzed. At 15 days postoperative, Group LLLT presented a significantly higher number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a significantly higher number of PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive and OPN-positive cells than groups C and LLLT, and a significantly higher number of OCN-positive cells than control; Group BMA/LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of Runx2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells than Group C. At 30 days postoperative, Group LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a higher number of Runx2-positive, BMP-2-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA/LLLT presented a significantly higher number of PCNA-positive, BMP-2-positive...

Avaliação da influência do plasma rico em plaquetas, da terapia com laser em baixa intensidade ou da associação de ambos na cicatrização de defeitos de fenestração periodontal em ratos: estudo histoquímico e imunoistoquímico / Influence of platelet-rich plasma, low-level laser therapy or their combination on the healing of periodontal fenestration defects in rats: a histochemical and immunohistochemical study

Este estudo avaliou, histoquimicamente e imunoistoquimicamente, a influência do plasma rico em plaquetas (PRP), da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) ou da associação de ambos na cicatrização de defeitos de fenestração periodontal (DFP) em ratos. DFP foram criados cirurgicamente na mandíbula de 80 ratos. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos: 1) C (controle) e 2) PRP - defeitos preenchidos com coágulo sanguíneo ou PRP, respectivamente; 3) LLLT e 4) PRP/LLLT - defeitos receberam aplicação da LLLT, foram preenchidos com coágulo sanguíneo ou PRP, respectivamente e irradiados novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 10 ou 30 dias pós-operatórios. As fibras colágenas imaturas e maduras foram avaliadas por análise histoquímica e suas porcentagens calculadas. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), osteocalcina (OCN), osteopontina (OPN) e fosfatase alcalina (ALP). Células Runx2-positivas foram quantificadas. Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação de OCN, OPN e ALP. Os dados foram analisados estatisticamente. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas nas porcentagens de fibras colágenas imaturas e maduras dos grupos experimentais quando comparadas ao grupo controle. Aos 10 dias, os grupos PRP e PRP/LLLT apresentaram número de células Runx2-positivas significativamente maior que o controle; o grupo PRP/LLLT apresentou padrões de imunomarcação de OCN e OPN significativamente maiores que o controle e não houve diferenças estatisticamente significativas no padrão de imunomarcação de ALP. Aos 30 dias, diferenças estatisticamente significativas não foram observadas nos padrões de imunomarcação de OCN, OPN e ALP entre os grupos experimentais. Conclui-se que a associação PRP/LLLT apresentou maior nível de maturação dos tecidos periodontais mineralizados quando comparada ao controle em defeitos de fenestração em ratos.

This study histochemically and imunoistochemically evaluated the influence of platelet-rich plasma (PRP), low-level laser therapy (LLLT), or their combination on the healing of periodontal fenestration defects (PFD) in rats. PFD were surgically created in the mandible of 80 rats. The animals were randomly divided into 4 groups: 1) C (Control) and 2) PRP - defects were filled with blood clot or PRP, respectively; 3) LLLT and 4) PRP/LLLT - defects received laser irradiation, were filled with blood clot or PRP, respectively, and then irradiated again. Animals were euthanized at either 10 or 30 days post-operative. Immature and mature collagen fibers were histochemically evaluated and their percentages were calculated. Runtrelated transcription factor 2 (Runx2), osteocalcin (OCN), osteopontin (OPN) and alkaline phosphatase (ALP) immunohistochemical staining were performed. Runx2-positive cells were quantified. A semi-quantitative method was used to evaluate OCN, OPN, and ALP immunolabeling pattern. Data were statistically analyzed. Statistically significant differences were not observed in the percentages of immature and mature collagen fibers when each experimental group was compared to control. At 10 days, PRP and PRP/LLLT groups presented a significantly higher number of Runx2-positive cells than control; PRP/LLLT presented significantly higher OCN and OPN immunolabeling than control; and statistically significant differences were not observed in the ALP immunolabeling. At 30 days, statistically significant differences were not observed in the OCN, OPN and ALP immunolabeling among the experimental groups. It was concluded that PRP/LLLT presented a greater level of maturation of periodontal mineralized tissues when compared to control in fenestration defects in rats.

Reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico tratados com aspirado de medula óssea associado ou não a terapia com laser em baixa intensidade: estudo imunoistoquímico em calvárias de ratos / Bone healing in critical-size defects treated with bone marrow aspirate combined or not with low-level laser therapy: an immunohistochemical study in rat calvaria

Este estudo imunoistoquímico avaliou a influência do aspirado de medula óssea (AMO) associado ou não à terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) no processo de reparo de defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 64 ratos foram aleatoriamente distribuídos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. No Grupo AMO, o defeito preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu irradiação com laser (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo ou AMO, respectivamente, e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 15 e 30 dias pós-operatórios. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para detecção do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), proteína óssea morfogenética-2 (BMP-2), osteopontina (OPN) e osteocalcina (OCN). Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação para VEGF. As células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas foram quantificadas. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Aos 15 dias pós-operatórios, o Grupo LLLT apresentou números de células OPN-positivas e OCN-positivas significativamente maiores que o Grupo C; o Grupo AMO apresentou números de células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas e OPN-positivas significativamente maiores do que os grupos C e LLLT, além de número de células OCN-positivas significativamente maior que o controle; o Grupo AMO/LLLT apresentou imunomarcação para VEGF e números de células Runx2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas significativamente maiores que o Grupo C. Aos 30 dias pós-operatórios, o Grupo LLLT apresentou imunomarcação para VEGF e números de células OPN-positivas e OCN-positivas significativamente...

This immunohistochemical study evaluated the influence of bone marrow aspirate (BMA) combined or not with low-level laser therapy (LLLT) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSDs) in rat calvaria. 64 rats were randomly divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In Group BMA, the defect was filled with BMA. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot or BMA respectively, and irradiated again. Animals were euthanized at either 15 or 30 days postoperative. Vascular endothelial growth factor (VEGF), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), runt-related transcription factor-2 (Runx2), bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), osteocalcin (OCN) and osteopontin (OPN) immunohistochemical staining were performed. A semi-quantitative method was used to evaluate VEGF immunolabeling. PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells were quantified. Data were statistically analyzed. At 15 days postoperative, Group LLLT presented a significantly higher number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a significantly higher number of PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive and OPN-positive cells than groups C and LLLT, and a significantly higher number of OCN-positive cells than control; Group BMA/LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of Runx2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells than Group C. At 30 days postoperative, Group LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a higher number of Runx2-positive, BMP-2-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA/LLLT presented a significantly higher number of PCNA-positive, BMP-2-positive...

Caracterización farmacobotánica y evaluación genotóxica del extracto acuoso de dos especies de Baccharis (asteraceae) / Pharmacobotanical characterization and genotoxic evaluation of the aqueous extract of two Baccharis species (asteraceae)

La presente investigación se planteó con el objetivo de caracterizar la farmacobotánica y evaluar de manera preliminar la genotoxicidad de Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" y Baccharis buxifolia "Tayanka". Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" fue recolectada en los valles de Limatambo y Baccharis buxifolia "Tayanka" en Kachona del distrito de Santiago. Para la caracterización farmacobotánica, se estudió la morfología externa y morfometría, descripción de la anatomía interna, la densidad e índice estomático y la histolocalización mediante pruebas histoquímicas de algunos metabolitos, de las partes aéreas vegetativas de Baccharis genistelloides y Baccharis buxifolia. Con dichos datos se realizó la comparación fenética con relación a otras especies del genero Baccharis y se evaluó de manera preliminar la genotoxicidad de los extractos acuosos al 1% de Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu"y Baccharis buxifolia "Tayanka". Para el estudio de la morfología externa y la morfometría se describe los parámetros (tamaño, número, disposición de hojas, flores, inflorescencias, etc) para lo cual se usa un instrumento de medida (vernier) y un esteroscopio. Para la anatomía interna se realizó cortes anatómicos mediante el uso de un micrótomo manual para luego ser fijados, coloreados y montados al microscopio, la densidad e índice estomático se obtienen de la relación porcentual directamente proporcional de la cantidad total de células y el número total de estomas en la cara abaxial y adaxial, Todos estos datos fueron procesados mediante el análisis fenética, utilizando el paquete estadístico Past 3 complementando la caracterización farmacobotánica con la histoquímica para tres reacciones de coloración utilizando dragendorff, SUDAN III y lugol. La evaluación genotóxica se realizo usando Allium cepa como bioensayo, sometiendo los meristemos apicales al extracto acuoso 1% (como forma de uso tradicional) de Baccharis genístelloides "Quimsa Qüchu" y Baccharís buxífolía "Tayanka", evaluando el índice mitótico y aberración cromosómicas que generan. Los resultados encontrados en la caracterización farmacobotánica indican como característica principal la disposición de las inflorescencias en capitulo en ambas especies, en Baccharis genistelloides la característica principal es la presencia de tres cladodios a lo largo de la planta, así como la presencia de flores femeninas exclusivamente, en cambio Baccharis buxifolia presenta ramas alternas con hojas lanceoladas y flores dioicas. El resultado del análisis fenético muestra una relación estrecha entre Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" y Baccharis Crispa mientras que Baccharis buxifalia "Tayanka" no está emparentado con las especies en comparación. La reacción histoquímica ratifica antecedentes teóricas de la presencia de alcaloides, almidón y lipidos para ambas especies. La evaluación preliminar de genotoxicidad muestra una reducción del índice mitótico normal de 13.03 % hasta 6.1% para Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" y 7.4% para Baccharis buxifolia "Tayanka", considerándose como no genotóxico . Este tipo de estudios mejorara la correcta identificación y distinción de especies próximas y morfológicamente similares. Además que brindara luces sobre la ausencia de genotoxicidad.

Avaliação da influência do plasma rico em plaquetas, da terapia com laser em baixa intensidade ou da associação de ambos na cicatrização de defeitos de fenestração periodontal em ratos: estudo histoquímico e imunoistoquímico / Influence of platelet-rich plasma, low-level laser therapy or their combination on the healing of periodontal fenestration defects in rats: a histochemical and immunohistochemical study

Este estudo avaliou, histoquimicamente e imunoistoquimicamente, a influência do plasma rico em plaquetas (PRP), da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) ou da associação de ambos na cicatrização de defeitos de fenestração periodontal (DFP) em ratos. DFP foram criados cirurgicamente na mandíbula de 80 ratos. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos: 1) C (controle) e 2) PRP - defeitos preenchidos com coágulo sanguíneo ou PRP, respectivamente; 3) LLLT e 4) PRP/LLLT - defeitos receberam aplicação da LLLT, foram preenchidos com coágulo sanguíneo ou PRP, respectivamente e irradiados novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 10 ou 30 dias pós-operatórios. As fibras colágenas imaturas e maduras foram avaliadas por análise histoquímica e suas porcentagens calculadas. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), osteocalcina (OCN), osteopontina (OPN) e fosfatase alcalina (ALP). Células Runx2-positivas foram quantificadas. Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação de OCN, OPN e ALP. Os dados foram analisados estatisticamente. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas nas porcentagens de fibras colágenas imaturas e maduras dos grupos experimentais quando comparadas ao grupo controle. Aos 10 dias, os grupos PRP e PRP/LLLT apresentaram número de células Runx2-positivas significativamente maior que o controle; o grupo PRP/LLLT apresentou padrões de imunomarcação de OCN e OPN significativamente maiores que o controle e não houve diferenças estatisticamente significativas no padrão de imunomarcação de ALP. Aos 30 dias, diferenças estatisticamente significativas não foram observadas nos padrões de imunomarcação de OCN, OPN e ALP entre os grupos experimentais. Conclui-se que a associação PRP/LLLT apresentou maior nível de maturação dos tecidos periodontais mineralizados quando comparada ao controle em defeitos de fenestração em ratos

This study histochemically and imunoistochemically evaluated the influence of platelet-rich plasma (PRP), low-level laser therapy (LLLT), or their combination on the healing of periodontal fenestration defects (PFD) in rats. PFD were surgically created in the mandible of 80 rats. The animals were randomly divided into 4 groups: 1) C (Control) and 2) PRP - defects were filled with blood clot or PRP, respectively; 3) LLLT and 4) PRP/LLLT - defects received laser irradiation, were filled with blood clot or PRP, respectively, and then irradiated again. Animals were euthanized at either 10 or 30 days post-operative. Immature and mature collagen fibers were histochemically evaluated and their percentages were calculated. Runtrelated transcription factor 2 (Runx2), osteocalcin (OCN), osteopontin (OPN) and alkaline phosphatase (ALP) immunohistochemical staining were performed. Runx2-positive cells were quantified. A semi-quantitative method was used to evaluate OCN, OPN, and ALP immunolabeling pattern. Data were statistically analyzed. Statistically significant differences were not observed in the percentages of immature and mature collagen fibers when each experimental group was compared to control. At 10 days, PRP and PRP/LLLT groups presented a significantly higher number of Runx2-positive cells than control; PRP/LLLT presented significantly higher OCN and OPN immunolabeling than control; and statistically significant differences were not observed in the ALP immunolabeling. At 30 days, statistically significant differences were not observed in the OCN, OPN and ALP immunolabeling among the experimental groups. It was concluded that PRP/LLLT presented a greater level of maturation of periodontal mineralized tissues when compared to control in fenestration defects in rats

Características farmacognósticas de Campsiandra angustifolia (huacapuruna) de uso terapéutico tradicional en la ciudad de Iquitos 2013 / Pharmacognostic characteristics of Campsiandra angustifolia (huacapuruna) of traditional therapeutic use in the city of Iquitos 2013

Se realizó un estudio farmacognóstico de las raíz, corteza y hojas de Campsiandra angustifolia (huacapurana), el estudio de tipo experimental permitió determinar inicialmente las características morfológicas para reconocimiento de la especie, luego se identificó cualitativamente los metabolitos secundarios encontrándose la presencia de triterpenos (raíz)/ esteroides (raíz, corteza), aminoácidos (raíz ), flavonoides (raíz, corteza y hoja ) saponinas (raíz, corteza y hoja ), taninos (corteza )/fenoles(raíz, hoja) El análisis microquímico de la nervadura central de la hoja dio positivo a grasas/ aceites y ligninas. El análisis de los parámetros físico-químicos de la droga cruda según las Normas Ramales Para Drogas Crudas del MINSAP; permitió determinar en raíz, corteza y hoja de la huacapurana valores de humedad 11.47% (raíz),12.54% ( corteza), 10,51% (hojas); de cenizas totales 1.63% (raíz), 4.75% (corteza), 3.04% (hojas); de cenizas solubles en agua 1.83% (raíz), 1.64% (corteza), 2.01%( hojas) y de las insolubles en acido 1.68% (raíz), 4.68% (corteza), 2.52% (hojas); todos los valores de los parámetros de calidad se encontraron dentro de los rangos permisibles. Se concluyó que los resultados obtenidos nos permiten proponer los parámetros de calidad de la planta en estudio.

Histological and histochemical studies of the aorta and pulmonary trunk in STZ-induced diabetic wistar rats treated with momordica charantia / Estudio histológico e histoquímico de la aorta y el tronco pulmonar en ratas wistar diabéticas inducidas por STZ y tratadas con momordica charantia

Diabetes mellitus (DM) is a serious metabolic disorder with micro and macro-vascular complications that result in a significant morbidity and mortality. The present study investigated the effects of Momordica charantia (M. charantia) on histological changes of the aorta and pulmonary trunk in streptozotocin-induced diabetic Wistar rats. Forty healthy adult Wistar rats of both sexes were randomly assigned into five groups A, B, C, D and E of eight rats each. Group A were the control (normal rats); B were the experimentally-induced diabetic rats; C were diabetic rats treated with methanolic extracts of M. charantia for two weeks (withdrawal group); D were diabetic rats treated with methanolic extracts of M. charantia for four weeks. E was diabetic rats treated glimepiride for four weeks. Tissues were harvested, processed routinely in paraffin wax and stained with routine and special stains. Histological results revealed morphological alterations in the aorta and pulmonary trunk of diabetic rats. Histochemical analysis also revealed abnormal deposition of glycogen in these vessels of diabetic rats. M. charantia and glimperide attenuated the morphological alterations and reduced the glycogen deposits. In conclusion M. charantia has a promising ameliorative effect on the morphology of the aorta and pulmonaty trunk in STZ-induced diabetic wistar rats and by extension, may be relevant in the management of cardiovascular alteration associated with DM.

La diabetes mellitus (DM) es una enfermedad metabólica grave con complicaciones micro y macro vasculares que resultan en una significativa morbilidad y mortalidad. El presente estudio investigó los efectos de Momordica charantia (M. charantia) sobre los cambios histológicos de la aorta y el tronco pulmonar en ratas Wistar con diabetes inducida por estreptozotocina. Cuarenta ratas Wistar adultas sanas de ambos sexos fueron asignadas al azar en cinco grupos A, B, C, D y E, 8 ratas cada grupo. El grupo A fue control (ratas normales); el grupo B fue de ratas diabéticas inducidas experimentalmente; el grupo C fue de ratas diabéticas tratadas con extractos metanólicos de M. charantia por dos semanas (grupo de retirada); grupo D fue de ratas diabéticas tratadas con extractos metanólicos de M. charantia durante cuatro semanas, y el grupo E fue de ratas diabéticas tratadas con glimepirida durante cuatro semanas. Los tejidos obtenidos se incluyeron en parafina y se tiñeron con técnica de rutina y tinciones especiales. Los resultados histológicos revelaron alteraciones morfológicas en la aorta y el tronco pulmonar de las ratas diabéticas. El análisis histoquímico reveló también la deposición anormal de glucógeno en estos vasos de ratas diabéticas. Tanto M. charantia y glimperida atenuaron las alteraciones morfológicas y redujeron los depósitos de glucógeno. En conclusión, la M. charantia tiene un efecto de mejora prometedor sobre los cambios en la morfología de la aorta y el tronco pulmonar en ratas Wistar diabéticas inducidas por STZ y, por extensión, pueden ser relevantes en el manejo de alteraciones cardiovasculares asociadas con la DM.

Actividad antioxidante, análisis fitoquímico y micrografía analítica de hojas de Castela tweedii (Simaroubaceae) / Antioxidant activity, phytochemical analisys and micrographic characterization of Castela tweedii (Simaroubaceae) leaves

Castela tweedii is a small tree belonging to Simaroubaceae family. Infusions of its leaves are used in folk medicine to treat gastrointestinal disorders and diarrhea. In this work, we evaluated the antioxidant activity of ethanol and dicloromethane leaves extracts against DPPH radical (2,2-difenilpicrilhidrazil) in order to justify, at least in part, its popular use. Ethanol extract showed scavenging activity, with an IC50=0.1288 mg/mL. Responsible compounds for these activity were tannins, flavonoids and phenylcarboxilic acids, among them we identified rutine and chlorogenic acid. Microscopic and histochemical analysis of leaves was carry out to developed useful characterizations that will allow a future identification and authentication of raw material: such as, the presence of mucilaginous hypodermis, leaf of dorsiventral structure, 1 to 2 rows of empalisade parenchyma with tannin deposits, anomocytic stomata in low epidermis and simple, unicellular trichomes in both epidermis.

Castela tweedii es un árbol de bajo porte perteneciente a la Familia Simaroubaceae, las infusiones de sus hojas son utilizadas en la medicina popular Argentina para el tratamiento de desordenes gastrointestinales y diarreas. Con el objetivo de fundamentar el uso popular de esta especie se evaluó la actividad antioxidante de los extractos etanólicos y diclorometánicos de forma cuantitativa y cualitativa frente al radical 2,2-difenilpicrilhidrazilo (DPPH); el extracto etanólico demostró actividad obteniéndose una CI50= 0,1288 mg/mL. El análisis fitoquímico mostró que los compuestos responsables de esta actividad fueron taninos, flavonoides y ácidos fenilcarboxílicos, entre ellos se identificó rutina y ácido clorogénico. Además se realizó el estudio morfoanatómico e histoquímico de las hojas que aportó datos de valor diagnostico para el control de calidad de la droga vegetal: presencia de una hipodermis mucilaginosa, estructura dorsiventral con una a dos hileras de parénquima en empalizada conteniendo taninos, estomas anomocíticos solo en la epidermis abaxial y tricomas simples unicelulares en ambas epidermis.

Anatomia dos órgãos vegetativos de Hymenaea martiana Hayne (Caesalpinioideae-Fabaceae): espécie de uso medicinal em Caetité-BA / Anatomy of vegetative organs of Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae-Caesalpinioideae): a species of medicinal use in Caetité-Bahia State, Brazil

Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae-Caesalpinioideae) apresenta grande valor na medicina popular em Caetité. A casca, entrecasca do caule e a resina, são utilizadas no tratamento de diversos males. Neste estudo são apresentadas a caracterização anatômica e histoquímica dos órgãos vegetativos. Amostras foram coletadas e processadas segundo técnicas usuais em anatomia vegetal e histoquímica. Todos os órgãos apresentam, em visão transversal, epiderme unisseriada e cavidades secretoras. Cutícula espessa ocorre em todos os órgãos aéreos. A raiz é tetrarca. Colênquima lacunar foi encontrado no caule. Bainha de fibras esclerenquimáticas envolve os feixes vasculares dos órgãos aéreos. Células pétreas ocorrem no pecíolo. Tricomas tectores ocorrem em ambas as faces da folha. A folha é hipoestomática com estômatos paracíticos e o mesofilo é dorsiventral. Cristais de oxalato de cálcio ocorrem no caule, pecíolo e lâmina foliar. Compostos fenólicos ocorrem na raiz, pecíolo e nervura central da folha. Grãos de amido ocorrem na raiz, caule e pecíolo. Lipídios ocorrem em todos os órgãos. Acredita-se que compostos fenólicos e cavidades secretoras de resina podem justificar a utilidade medicinal da espécie pela população de Caetité.

Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae-Caesalpinioideae) shows a great value in folk medicine in Caetité. Its bark, stem-bark and resin are used to treat various ailments. In this study, the anatomical and histochemical characterization of vegetative organs is reported. Samples were collected and processed according to usual techniques of plant anatomy and histochemistry. All organs have, by cross-sectional view, uniseriate epidermis and secretory cavities. Thick cuticle occurs in all aerial organs. The root is tetrarch. Lacunar collenchyma was found in the stem. Sclerenchymatic sheath of fibers surrounds the vascular bundles of the aerial organs. Stone cells occur in the petiole. Trichomes occur on both sides of the leaves. The leaf is hypostomatic with paracytic stomata and the mesophyll is dorsiventral. Calcium oxalate crystals occur in the stem, petiole and leaf blade. Phenolic compounds occur in the root, petiole and midrib of the leaf. Starch grains occur in the root, stem and petiole. Lipids occur in all organs. It is believed that phenolic compounds and resin secretory cavities may justify the use of medicinal species by the population of Caetité.

Avaliação imuno-histoquímica da remodelação óssea alveolar em ratos diabéticos durante a movimentação ortodôntica associada à laserterapia / Immunohistochemical evaluation of alveolar bone remodeling in diabetic rats during orthodontic movement associated with laser therapy

O Diabetes mellitus é um distúrbio metabólico crônico e sua prevalênciavem aumentando de forma exponencial, particularmente nos países em desenvolvimento. Concomitantemente tem aumentado a acessibilidade ao tratamento ortodôntico, incluindo pacientes diabéticos, tornando o processo de remodelação óssea frente aos estímulos ortodônticos motivode grande preocupação. A procura por meios que possam melhorar esse processo é uma realidade atual, a aplicação do laser de baixa potênciadurante a movimentação ortodôntica pode ser de grande valia, principalmente com o descontrole glicêmico. Desta forma o objetivo deste trabalho foi analisar por meio de reações imuno-histoquímicas, o processo de remodelação óssea alveolar, decorrente do movimento ortodôntico em ratos diabéticos e a influência da aplicação do laser de baixa potência As GaAl durante o período experimental de 7, 14 e 21 dias. Foram utilizados 60 ratos machos Wistar, divididos em 4 grupos por período: Grupo Controle (C), Grupo Laser (L), Grupo Diabetes (D) e Grupo Diabetes-Laser (D-L). Para a indução do diabetes foi utilizada uma dose única de aloxano (40mg/kg), a glicemia foi mensurada e sendo os ratos considerados diabéticos foram submetidos a uma força ortodôntica de20cN, assim como todos os animais dos grupos (C) e (L). Os grupos (L) e(D-L) foram tratados com laser de baixa potência AsGaAl em dias intercalados até a eutanásia. Foram realizadas análises histomorfológicas, reação imuno-histoquímica e histomorfometria para os anticorpos RANK-L e OPG do primeiro molar inferior direito, submetido à movimentação ortodôntica. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente mediante os testes de variância (ANOVA) e TUKEY (P<0,05). Diante dos resultados obtidos, pode-se concluir que houve efetividade da radiação laser As GaAl durante a movimentação ortodôntica, visto que, a fisiopatologia do diabetes não interferiu na integridade dos tecidos periodontais e no processo de remodelação óssea alveolar

Diabetes mellitus is a chronic metabolic disorder and its prevalence hasbeen increasing exponentially, particularly in developing countries. At the same time the accessibility to orthodontic treatment has increased,including diabetic patients, making the point of process of bone remodeling in the face of orthodontic stimuli of great concern. The search for ways they can improve this process is a current reality, the application of low power laser during orthodontic movement can be of great value, especially with the loss of glycemic control. Thus, the objective of this study was to analyze by immunohistochemical reactions, the process of alveolar bone remodeling, due to orthodontic movement in diabetic rats and the influence of application of low power laser Ga AlAs during the experimental period of 7, 14 and 21 days. Sixty male Wistar rats we redivided into four groups: Control (C), Laser Group (L), Diabetes Group (D)and Diabetes Group-Laser (DL). For the induction of diabetes a single dose of alloxan (40mg/kg) was used, considered diabetic by blood glucose measure nurts and the molar was subjected to a force orthodontic 20cN aswell as all the animals of group (C) and (L .) Groups (L) and (DL) were treated with low power GaAlAs laser every other day until euthanasia. Analyzes were performed by histomorphology, immunohistochemistry and histomorphometry for antibodies RANK-L and OPG in the mesial anddistal and mesial interradicular septum of the interdental septum of the alveolar bone of the lower right first molar, subjected to orthodontic movement. The data were statistically analyzed by means of tests ofvariance (ANOVA) and Tukey is tests (P<0.05). Based on these results, itcan be concluded that there was effectiveness of GaAlAs laser radiation during orthodontic movement, since the pathophysiology of diabetes didnot affect the integrity of the periodontal tissues and alveolar bone remodeling process