Actividad antifúngica in vitro del ajoeno en cinco aislamientos clínicos de Histoplasma capsulatum var. capsulatum / In vitro antifungal activity of ajoene on five clinical isolates of Histoplasma capsulatum var. capsulatum

RESUMEN

Antecedentes. Con el advenimiento del sida, la histoplasmosis ha aumentado considerablemente y su tratamiento continúa siendo relativamente eficaz, si bien provoca efectos adversos. Objetivo. Evaluar el efecto inhibitorio del ajoeno sobre Histoplasma capsulatum, en fase micelial, utilizando como medios de cultivo caldo glucosado de Sabouraud y RPMI-1640. Métodos. Las curvas de crecimiento y el efecto inhibitorio del ajoeno (1,25-20mg/ml) se realizaron a temperatura ambiente, en agitación y se registraron turbidimétricamente (540nm) cada 48h, durante 14 días. Se construyeron gráficas para estimar el tiempo de generación (Tg), concentración mínima inhibitoria (CMI) y concentración inhibitoria 50% (CI50). La concentración fungicida mínima (CFM) se determinó por el método de cultivo en placas. Se usaron las pruebas de Mann-Whitney y T-test para evaluar la significación estadística entre los medios de cultivo y los parámetros Tg, CIM, CI50, CFM y efecto fungistático (EF) con un nivel de significación de 0,05. Resultados. Para los dos medios de cultivo, en todos los aislamientos se obtuvieron curvas de crecimiento con Tg de 43 a 67h, EF a concentraciones de 1,25 y 2,5mg/ml y CFM de 5 y 10mg/ml. Los valores de la CIM, en CSD fueron de 2,5 y 5 y en RPMI, de 1,25 a 5mg/ml. La CI50 en CSD fue de 1,9 a 2,6 y en RPMI, de 3,8 a 4,3mg/ml de ajoeno. No hubo diferencias significativas entre los medios de cultivo para los parámetros estudiados (p>0,05). Conclusiones. Los hallazgos del presente trabajo corroboran que el ajoeno inhibe el desarrollo de H. capsulatum en fase micelial(AU)

ABSTRACT

Background. The number of histoplasmosis cases have considerably increased since the advent of AIDS, and the therapy for this mycosis is not always effective, as well as having adverse effects. Aims. To evaluate the inhibitory effect of ajoene on five clinical isolates of Histoplasma capsulatum, on the mycelial form, using Sabouraud dextrose broth (SDB) and RPMI-1640 culture media. Methods. Growth curves and inhibitory activity of the drug (at concentrations of 1.25 mg/ml to 20mg/ml) were performed at room temperature, under mechanical agitation, and the turbidimetric readings (540nm) were recorded every 48h for 14 days, in both culture media. Generation times (GT) were calculated and graphs were constructed to estimate Minimal Inhibitory Concentrations (MIC) and Inhibitory Concentration 50% (IC50). The fungicidal minimal concentrations (FMC) were determined by plate cultures. The U-Mann-Whitney and t-test with a significance level of 0.05 were used to evaluate the statistical significance between culture media and GT, MIC, IC50 MFC and fungistatic effect (FE). Results. In both media and for all isolates, growth curves showed a GT of 43 to 67hrs, an FE at 1.25-2.5mg/ml, and a MFC at 5-10mg/ml of ajoene. Values of MIC were 2.5-5 in SDB and in RPMI medium these values were 1.25-5mg/ml of ajoene. For IC50, in SDB, the values were 1.9-2.6 mg/ml and in RPMI medium, they were of 3.8-4.3mg/ml of ajoene. There were no significance differences between culture media for GT, FE, MIC, IC50 and MFC (p>0.05). Conclusions. These findings corroborate that ajoene inhibits the growth of the mycelial form of H. capsulatum(AU)