Standardisation of Glutaraldehyde-modified Tyrosine-adsorbed Tree Pollen Vaccines Containing the Th1-inducing Adjuvant, Monophosphoryl Lipid A (MPL)

ABSTRACT

Background: a new range of allergy vaccines has been developed by the introduction of a relatively new Th1-inducing adjuvant known as 3-deacylated monophosphoryl lipid A (MPL®). MPL® adjuvant is of natural origin, derived from the lipopolysaccharide of Salmonella minnesota R595. This adjuvant is incorporated in a glutaraldehyde-modified pollen extract adsorbed to L-tyrosine (Pollinex® Quattro). A major potential benefit provided by MPL® adjuvant is the promotion of a Th1 response which enhances the efficacy of allergy vaccination and can consequently allow a reduction in the number of injections required for treatment. The standardisation of Pollinex® Quattro tree pollen allergy vaccine is described and we include details of some innovative analytical procedures. Methods and results: an essential feature of the analytical strategy is the assay of the MPL® adjuvant using a recently developed HPLC technique. The adjuvant has a complex chemical structure and the analysis is illustrated in detail. We give a full picture of the vaccine standardisation by describing biochemical and immunological characterisation of the allergen extract, together with some brief manufacturing details. Conclusions: a high overall level of standardisation is illustrated by a number of different tests applied to all stages of vaccine manufacture. Tree pollen allergen potency is measured following the pollen extraction, chemical modification and formulation as a tyrosine adsorbate. Good batch-to-batch reproducibility is shown. The HPLC assay for MPL® adjuvant showed high quality resolution which did not vary when measuring raw material or when incorporated in the vaccine and the technically complex assay is shown to be reliable (AU)

RESUMEN

Antecedentes: un nuevo tipo de Inmunoterapia específica (I.T.s.) ha sido desarrollado por la introducción de un nuevo adyuvante, MPL (3-deacylated monophosphoryl lipid A), inductor Th1.MPL es un adyuvante de origen natural, derivado del lipopolisacárido de la Salmonela minnesota R595.Este adyuvante se incorpora a un extracto de pólenes modificados con glutaraldehído y adsorbidos con tirosina (Pollinex Quattro).El principal beneficio potencial proporcionado por el adyuvante MPL consiste en la inducción de la respuesta Th1 que incrementa la eficacia de la I.T.s y, consecuentemente, permite una reducción en el número de inyecciones requerido para el tratamiento. Se describe la estandarización de Pollinex Quattro con pólenes de árboles y se incluyen detalles de algunos procedimientos analíticos innovativos. Métodos y resultados: una característica esencial de la estrategia analítica consiste en la valoración del MPL utilizando una técnica HPLC recientemente desarrollada. El adyuvante tiene una estructura química compleja cuyo análisis se describe en detalle. Se proporciona una completa descripción de la estandarización de la vacuna basada en la caracterización bioquímica e inmunológica del extracto alergénico, junto a unos detalles técnicos de elaboración. Conclusiones: la alta calidad de la metodología de estandarización se ve reflejada por los diferentes tests aplicados a todas las fases del proceso de elaboración de la vacuna. La potencia alergénica de los pólenes de árboles se determina en cada una de las fases: extracción del polen, modificación química y formulación con tirosina como adsorbente. Se demuestra la buena reproductibilidad lote a lote. El ensayo HPLC para MPL presentó una resolución de alta calidad que no variaba cuando se determinaba como materia prima o una vez incorporado a la vacuna; mostrándose la compleja valoración técnica fiable (AU)