Neonatal screening of ABO/RhD blood group and direct antiglobulin Coombs test. Experience of a single institution.

BACKGROUND: Evaluating the ABO/RhD blood group and the direct antiglobulin Coombs test (DAT) at birth is recommended good practice, but there is variability in its universal implementation. This study aims to show the comparative results in various variables of clinical impact during the hospital stay of neonates with positive DAT compared with those with negative DAT, based on the systematic detection of the ABO/RhD group and DAT at birth. METHODS: Newborns between 2017 and 2020 in a high-risk pregnancy care hospital were included. The ABO/RhD and DAT group was determined in umbilical cord samples or the first 24 hours of life. Demographic, maternal, and neonatal variables were recorded. The association between the variables was estimated using the odds ratio (OR). RESULTS: 8721 pairs were included. The DAT was positive in 239 newborns (2.7%), with the variables associated with positive PDC being maternal age > 40 years (OR: 1.5; 95% CI: 1.0 to 2.3), birth by cesarean section (1.4; 1.1-2.0), mother group O (6.4; 3.8-11.8), prematurity (3.6; 2.6-5.0), birth weight < 2500 g (2.1; 1.6-2.8), newborn group A (15.7; 10.7-23.1) and group B (17.6; 11.4-27.2), hemoglobin at birth < 13.5 g/dl (4.5; 2.8-7.1) and reticulocytosis > 9% (1.9; 1.2 to 3.1). DISCUSSION: The frequency of neonatal positive PDC was 2.7%, with a significant association with maternal/neonatal incompatibility to the ABO and RhD group, with a substantial impact on various neonatal variables. These results support the policy of universal implementation at the birth of the ABO/RhD and DAT determination.

INTRODUCCIÓN: La determinación del grupo sanguíneo ABO/RhD y la prueba directa de Coombs (PDC) al nacimiento son una práctica recomendada, pero existe variabilidad en su implementación universal. Se presentan los resultados de la determinación al nacimiento del grupo ABO/RhD y la PDC en una cohorte institucional. MÉTODOS: Se incluyeron los recién nacidos entre 2017 y 2020 en un hospital de atención a embarazos de alto riesgo. Se determinó el grupo ABO/RhD y se realizó la PDC en muestras de cordón umbilical o en las primeras 24 horas de vida. Se registraron las variables demográficas, maternas y neonatales. Se estimó la asociación entre las variables mediante la razón de probabilidad (OR). RESULTADOS: Se incluyeron 8721 binomios. La PDC fue positiva en 239 recién nacidos (2.7%), siendo las variables asociadas a la PDC positiva la edad materna > 40 años (OR: 1.5;IC95%: 1.0-2.3), el nacimiento por vía cesárea (1.4; 1.1-2.0), la madre del grupo O (6.4; 3.8-11.8), la prematuridad (3.6; 2.6-5.0); el peso al nacer < 2500 g (2.1; 1.6-2.8); el neonato del grupo A (15.7; 10.7-23.1) o del grupo B (17.6; 11.4-27.2), la hemoglobina al nacer < 13.5 g/dl (4.5; 2.8-7.1) y la reticulocitosis > 9% (1.9; 1.2 a 3.1). DISCUSIÓN: La frecuencia de PDC positiva neonatal es del 2.7%, con asociación significativa la incompatibilidad materna/neonatal al grupo ABO y RhD, con impacto significativo en diversas variables neonatales. Estos resultados apoyan la política de implementación universal al nacimiento de la determinación de ABO/RhD y PDC.

Tamizaje al nacimiento del grupo sanguíneo ABO/RhD y la prueba directa de la antiglobulina de Coombs. Experiencia de una sola institución / Neonatal screening of ABO/RhD blood group and direct antiglobulin Coombs test. Experience of a single institution

Resumen Introducción: La determinación del grupo sanguíneo ABO/RhD y la prueba directa de Coombs (PDC) al nacimiento son una práctica recomendada, pero existe variabilidad en su implementación universal. Se presentan los resultados de la determinación al nacimiento del grupo ABO/RhD y la PDC en una cohorte institucional. Métodos: Se incluyeron los recién nacidos entre 2017 y 2020 en un hospital de atención a embarazos de alto riesgo. Se determinó el grupo ABO/RhD y se realizó la PDC en muestras de cordón umbilical o en las primeras 24 horas de vida. Se registraron las variables demográficas, maternas y neonatales. Se estimó la asociación entre las variables mediante la razón de probabilidad (OR). Resultados: Se incluyeron 8721 binomios. La PDC fue positiva en 239 recién nacidos (2.7%), siendo las variables asociadas a la PDC positiva la edad materna > 40 años (OR: 1.5;IC95%: 1.0-2.3), el nacimiento por vía cesárea (1.4; 1.1-2.0), la madre del grupo O (6.4; 3.8-11.8), la prematuridad (3.6; 2.6-5.0); el peso al nacer < 2500 g (2.1; 1.6-2.8); el neonato del grupo A (15.7; 10.7-23.1) o del grupo B (17.6; 11.4-27.2), la hemoglobina al nacer < 13.5 g/dl (4.5; 2.8-7.1) y la reticulocitosis > 9% (1.9; 1.2 a 3.1). Discusión: La frecuencia de PDC positiva neonatal es del 2.7%, con asociación significativa la incompatibilidad materna/neonatal al grupo ABO y RhD, con impacto significativo en diversas variables neonatales. Estos resultados apoyan la política de implementación universal al nacimiento de la determinación de ABO/RhD y PDC.

Abstract Background: Evaluating the ABO/RhD blood group and the direct antiglobulin Coombs test (DAT) at birth is recommended good practice, but there is variability in its universal implementation. This study aims to show the comparative results in various variables of clinical impact during the hospital stay of neonates with positive DAT compared with those with negative DAT, based on the systematic detection of the ABO/RhD group and DAT at birth. Methods: Newborns between 2017 and 2020 in a high-risk pregnancy care hospital were included. The ABO/RhD and DAT group was determined in umbilical cord samples or the first 24 hours of life. Demographic, maternal, and neonatal variables were recorded. The association between the variables was estimated using the odds ratio (OR). Results: 8721 pairs were included. The DAT was positive in 239 newborns (2.7%), with the variables associated with positive PDC being maternal age > 40 years (OR: 1.5; 95% CI: 1.0 to 2.3), birth by cesarean section (1.4; 1.1-2.0), mother group O (6.4; 3.8-11.8), prematurity (3.6; 2.6-5.0), birth weight < 2500 g (2.1; 1.6-2.8), newborn group A (15.7; 10.7-23.1) and group B (17.6; 11.4-27.2), hemoglobin at birth < 13.5 g/dl (4.5; 2.8-7.1) and reticulocytosis > 9% (1.9; 1.2 to 3.1). Discussion: The frequency of neonatal positive PDC was 2.7%, with a significant association with maternal/neonatal incompatibility to the ABO and RhD group, with a substantial impact on various neonatal variables. These results support the policy of universal implementation at the birth of the ABO/RhD and DAT determination.

[Molecular identification of Hemoglobin D Punjab in cases detected in two families]. / Identificación molecular de la hemoglobina D Punjab en dos familias.

BACKGROUND: Hemoglobin D Punjab is the world most common variant hemoglobin D; in Mexico there are reports of isolated cases. Our goal is to present the clinical and molecular study in two families with HbD Punjab. The objective was to submit molecular diagnosis of two families with Hb D Punjab and clinical features. CLINICAL CASE: Family 1: neonate with maternal history of HbS carrier. Father and sister with natural variants for the evaluated mutations, mother, brother and index case were heterozygous for HbD Punjab. Family 2: neonate with positive neonatal screening for detection of abnormal hemoglobins. Mother and index case were heterozygous for HbD Punjab, homozygous for HFE H63D, and Gilbert's syndrome UGT1A1*28 heterozygous. Father heterozygous for HFE H63D and sister homozygous for such mutation. The study of two families for HbD Punjab, HbS, ß-thalassemia, HFE and Gilbert syndrome was performed by real time PCR. CONCLUSION: The molecular identification of HbD Punjab is an accessible methodological proposal that can adequately distinguish carriers subjects; through this method two additional cases, one initially identified as HbS.

Introducción: la hemoglobina D Punjab (HbD Punjab) es la variante mundial más frecuente de hemoglobina D. En México se tienen reportes de casos aislados. El objetivo es presentar el diagnóstico molecular de dos familias con HbD Punjab y sus características clínicas. Casos clínicos: familia 1: neonato cuya madre era portadora de HbS. El padre y la hermana tenían variante natural para las mutaciones evaluadas, madre, hermano y caso índice heterocigotos para HbD Punjab. Familia 2: neonato con tamiz neonatal positivo para la detección de hemoglobinas anormales. Madre y caso índice fueron heterocigotos para HbD Punjab, homocigotos para HFE H63, y heterocigotos para síndrome de Gilbert UGT1A1*28. Padre, heterocigoto para HFE H63D, y hermana homocigoto para dicha mutación. El estudio de las dos familias para HbD Punjab, HbS, beta-talasemia, HFE y síndrome de Gilbert se hizo mediante PCR en tiempo real. Conclusión: la identificación molecular de la HbD Punjab es una propuesta metodológica accesible y permite diferenciar adecuadamente a los portadores. A través de esta metodología se identificaron dos casos adicionales en nuestro país, uno de ellos identificado inicialmente como HbS.

[Molecular identification of glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) detected in neonatal screening]. / Identificación molecular de la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD) detectada en el tamiz neonatal.

AIMS: To present the strategy of identifying the molecular variants of G6PD detected in neonatal screening (NS). MATERIAL AND METHODS: We present a series of incident cases of newborns positive for G6PD deficiency detected in NS. From nuclear DNA with the methodology of real-time PCR we sought molecular G6PD variants: G202A, A376G, T968C and C563T. RESULTS: Of a total of 21,619 neonates, 41 cases were reactive in NS for G6PD (189.6/100,000 RN screened rate), 34 cases confirmed the molecular variant of G6PD (157.3/100,000 RN screened rate). The most frequent allele combination G202A/A376G (G6PD ratio and median activity, 0.460 and 1.72 ± 0.35 U/g Hb, respectively), followed by G202A (0.170 and 1.74 ± 0.27 U/g Hb) and A376G/T968C (ratio 0.150 and 1.10 ± 0.44 U/g Hb). The T968C allelic variant showed lower enzyme activity than the rest (1.1 ± 0.4; p = 0.02). Two women were detected with G6PD deficiency with G202A/A376G and G202A variant. CONCLUSIONS: African alleles were prevalently detected in neonatal screening. This strategy allows the identification of molecular variants involved in 80% of cases.

Variaciones en el recuento diferencial leucocitario desde el nacimiento hasta los primeros dos meses de edad en nacidos a término con bajo riesgo perinatal / Variations in the differential leukocyte count from birth through the first two months of age in term infants with low perinatal risk

Introducción: La presencia de neutropenia o neutrofilia se observa en la evaluación del neonato con sospecha de sepsis; sin embargo, en ausencia de infección sistémica, su incidencia no ha sido estimada en nuestra población. Material y métodos: En una cohorte de recién nacidos a término de bajo riesgo perinatal, seguidos desde el nacimiento hasta los dos meses de edad; se evaluaron la cuenta de leucocitos, neutrófilos (NT), linfocitos totales (LT) y la frecuencia de neutropenia a estas edades. Resultados: Se incluyeron 110 recién nacidos de bajo riesgo perinatal, evaluados al nacer, al mes y a los dos meses de edad. Los leucocitos totales promedio fueron de 18,950/µL (IC 95% 10,255 a 29,170), 11,250/µL (6,030-17,045) y 9,750/µL (6,055-17,900); los linfocitos totales de 7,442/µL (4,736-11,326), 8,198/µL (2,625-12,559) y 7,478/µL (4,276-12,782); los neutrófilos totales de 7,818/µL (2,853-13,809), 2,112 (927-7,021) y 1,944 (737-3,618), respectivamente. La incidencia de neutropenia significativa (< 750/L) fue del 0.9 al nacimiento, 2.7 al mes y 5.5% a los dos meses de edad. La neutrofilia (> 9,500/L) se presentó en el 35.5% de los neonatos al nacimiento, pero en ningún caso hacia el resto de las edades de estudio. Conclusiones: La presencia de neutropenia o neutrofilia es un cambio fisiológico en el neonato o lactante menor de bajo riesgo. Este hecho debe ser considerando en su interpretación particular en la evaluación de la sepsis a estas edades.

Introduction: The presence of neutropenia or neutrophilia is observed in the evaluation of the neonate with suspected sepsis; however, its incidence has not been estimated in our population in the absence of systemic infection. Material and methods: A cohort of newborns at term, with low perinatal risk, were followed from birth to two months of age, leukocyte count, neutrophils (NT), and total lymphocyte (TL) were evaluated; the frequency of neutropenia at these ages was determined. Results: We included 110 infants; the mean values of the total leukocyte count were 18,950/µL (CI 95% 10,255-29,170); 11,250/µL (6,030-17,045) and 9,750/µL (6,055-17,900); total lymphocytes, 7,442/µL (4,736 to 11,326), 8,198/µL (2,625-12,559) and 7,478/µL (4,276-12,782); total neutrophil count, 7,818/µL (2,853 to 13,809), 2,112 (927-7,021) and 1,944 (737-3,618) at birth, one and two months, respectively. Significant neutropenia (< 750/L) was 0.9 at birth, 2.7 at one month and 5.5% at two months of age. Neutrophilia (> 9,500/L) was present in 35.5% of infants at birth, but in none in the first and second months of age. Conclusions: The presence of neutropenia or neutrophilia is a physiological change in low-risk infants. This fact must be considered when evaluating sepsis at this age.

Evaluación del estado en la reserva neonatal de hierro y las mutaciones del gen HFE / Assessment of neonatal iron store and HFE gene mutations

Introducción: Se presenta la evaluación de la asociación entre la reserva de hierro (Fe) y los polimorfismos del gen de la hemocromatosis (HFE) en neonatos de alto riesgo perinatal. Métodos: Se incluyó una serie de neonatos de alto riesgo perinatal en los que se evaluó la reserva de Fe con la medición de la ferritina sérica (FS). Se dividieron en tres grupos: sobrecarga de Fe (SoFe), con FS >1,000 µg/l; reserva normal de Fe, con FS de 154-1,000 µg/l; y reserva baja de Fe, con FS <154 µg/l. Mediante PCR en tiempo real se buscaron las mutaciones C282Y, H63D y S65C del gen HFE. Resultados: Se estudiaron 97 neonatos. De ellos, 24 casos presentaron SoFe (proporción 0.247) y FS de 1,789 µg/l (IC 95% 1,376-2,201); 36 casos, reserva normal de FS (0.371), FS de 461 µg/l (389-533); y 37 casos, reserva baja de FS (0.381) y FS 82 µg/l (69-96). No hubo casos detectados para las mutaciones C282Y o S65C. Se identificó la variante H63D HFE en 18 neonatos (frecuencia génica de 0.185): la condición de heterocigoto (H63D/WT) en doce casos (frecuencia génica 0.124) y de homocigoto (H63D/H63D) en seis casos (frecuencia génica 0.062). La frecuencia alélica de H63D fue de 0.092. Los variante H63D HFE no mostró asociación con los neonatos de reserva normal de Fe contra reserva baja (OR 1.2; IC 95% 0.3-4.3) ni los de reserva normal contra neonatos con SoFe (OR 2.5; 0.7-9.2). Conclusiones: Cerca del 25% de neonatos de alto riesgo tendrá sobrecarga de Fe. Aún con el posible sesgo de selección, las variantes del gen HFE no influyen sobre el estado de la reserva de Fe.

Background: The association between iron stores (Fe) and HFE gene polymorphisms on high-risk neonates is shown. Methods: We included newborns with high perinatal risk. Newborns were divided into three groups for measurements of serum ferritin (SF): iron overload (IO) with SF 1000 µg/L, normal iron stores (NIS) with SF 154-1000 µg/L and low iron stores (LIS) with SF <154 µg/L. We used real-time PCR for identification of polymorphisms C282Y, H63DE, and S65C of the HFE gene. Results: We studied 97 newborns with IO in 24 cases (ratio 0.247) and SF 1789 µg/L (95% CI 1376-2201), NIS in 36 cases (0.371), and SF of 461 µg/L (389-533) and LIS in 37 cases (0.381) and SF 82 µg/L (69-96). There were no cases detected for C282Y or S65C mutations. We identified 18 neonates with H63D HFE variant (gene frequency 0.185) with heterozygous condition (H63D/ WT) in 12 cases (gene frequency 0.124) and homozygote (H63D/H63D) in six cases (gene frequency 0.062). H63D allele frequency was 0.092. The HFE H63D variant showed no association for comparing infants with NIS vs. LIS (OR 1.2, 95% CI 0.3-4.3) and NIS vs. IO newborn infant (OR 2.5, 0.7-9.2). Conclusions: In high-risk neonates ∼25% show IO even with the possible selection bias. HFE gene variants do not influence on the neonatal iron stores.

[Endometriosis and deficient intake of antioxidants molecules related to peripheral and peritoneal oxidative stress]. / Endometriosis y consumo deficiente de moléculas antioxidantes relacionado con estrés oxidante periférico y peritoneal.

OBJECTIVE: To evaluate the antioxidant intake and the lipoperoxidation status in plasma and peritoneal fluid of women with endometriosis. PATIENTS AND METHODS: The study was carried out in 48 women with endometriosis obtained at the Sterility Clinic from the National Institute of Perinatology. The antioxidant intake was evaluated applying the Questionnaire Assessment of Antioxidants and Retinol Intakes in Mexican women validated by the National Institute of Public Health. The lipoperoxidation status was determined in plasma and peritoneal fluid with the malondyaldehyde method. Results were analyzed by ANOVA of Kruskal-Wallis. RESULTS: The antioxidant intake (vitamin C, vitamin E, selenium and zinc) of women with endometriosis showed a significative statistical difference when data was compared with the control group, including total group and those stratified in pathology stages. The lipoperoxidation status in plasma and peritoneal fluid of women with endometriosis, analyzed in group, did not show statistical difference versus healthy women. When data was stratified according to the pathology severity, the percentage of lipoperoxidation status increased in plasma in the severe grade of endometriosis and in peritoneal fluid in the moderate and severe grades. CONCLUSIONS: The antioxidant intake in women with endometriosis showed an inverse correlation with the pathology intensity. As endometriosis severity intensifies, a less intake of antioxidants is present. There is a positive association between the pathology development and the lipoperoxidation status.