Comparison of different laboratory tests in the evaluation of hemorrhagic risk of patients using rivaroxaban in the critical care setting: diagnostic accuracy study.

BACKGROUND: Rivaroxaban is a direct oral anticoagulant designed to dispense with the necessity of laboratory monitoring. However, monitoring rivaroxaban levels is necessary in certain clinical conditions, especially in the critical care setting. METHODS: This is a diagnostic accuracy study evaluating sensitivity and specificity of prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT), and Dilute Russell viper venom time (dRVVT), to evaluate the hemorrhagic risk in patients taking rivaroxaban. The study used a convenience sample of 40 clinically stable patients using rivaroxaban to treat deep vein thrombosis or atrial fibrillation admitted in a private hospital in Brazil, compared to a group of 60 healthy controls. The samples from patients were collected two hours after the use of the medication (peak) and two hours before the next dose (trough). RESULTS: The correlation with the plasmatic concentration measured by anti-FXa assay was higher for PT and dRVVTS. The PT and aPTT tests presented higher specificity, while dRVVT was 100% sensible. CONCLUSIONS: There was a strong correlation between the tests and the plasma concentration of the drug. Additionally, our results demonstrated the potential use of dRVVT as a screening test in the emergency room and the need of a second test to improve specificity.

Determination of rivaroxaban in patient's plasma samples by anti-Xa chromogenic test associated to High Performance Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry (HPLC-MS/MS).

Rivaroxaban is an oral direct factor Xa inhibitor, therapeutically indicated in the treatment of thromboembolic diseases. As other new oral anticoagulants, routine monitoring of rivaroxaban is not necessary, but important in some clinical circumstances. In our study a high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) method was validated to measure rivaroxaban plasmatic concentration. Our method used a simple sample preparation, protein precipitation, and a fast chromatographic run. It was developed a precise and accurate method, with a linear range from 2 to 500 ng/mL, and a lower limit of quantification of 4 pg on column. The new method was compared to a reference method (anti-factor Xa activity) and both presented a good correlation (r = 0.98, p < 0.001). In addition, we validated hemolytic, icteric or lipemic plasma samples for rivaroxaban measurement by HPLC-MS/MS without interferences. The chromogenic and HPLC-MS/MS methods were highly correlated and should be used as clinical tools for drug monitoring. The method was applied successfully in a group of 49 real-life patients, which allowed an accurate determination of rivaroxaban in peak and trough levels.

Correlação entre citometria de fluxo e anatomia patológica: experiência de dez anos na investigação de doenças linfoproliferativas / Correlation between flow cytometry and histologic findings: ten year experience in the investigation of lymphoproliferative diseases

Objetivo: Evidenciar as vantagens da correlação entre imunofenotipagem por citometria de fluxo e exame anatomopatológico/imunoistoquímico de adenomegalias e/ou nódulos no diagnóstico de doenças linfoproliferativas. Métodos: Estudo retrospectivo no qual foram avaliadas 157 amostras de biópsias ou punções aspirativas de gânglios ou nódulos de 142 pacientes, durante o período de 1999 a 2009. As amostras tinham sido encaminhadas simultaneamente para os Serviços de Citometria de Fluxo e Anatomia Patológica do Hospital Israelita Albert Einstein, em São Paulo. Para a análise na anatomia patológica, as amostras foram preparadas em lâminas e coradas com hematoxilina-eosina, Giemsa, ou marcadas com anticorpos monoclonais para detecção de antígenos específicos. Para a análise por imunofenotipagem por citometria de fluxo, as amostras foram hemolisadas e marcadas com diferentes painéis de anticorpos monoclonais para detecção dos diferentes antígenos. Resultados: Foram concordantes os diagnósticos entre a anatomopatológico e imunofenotipagem por citometria de fluxo em 115 (81%) pacientes, o que correspondeu a 127 amostras distribuídas da seguinte forma, conforme o diagnóstico anatomopatológico: 63 pacientes com linfoma não Hodgkin de células B; 26 pacientes com hiperplasia linfoide reacional; 5 pacientes com linfoma não Hodgkin de células T; 4 pacientes com proliferação linfoide atípica; 5 pacientes com processo inflamatório crônico granulomatoso; 5 pacientes com diagnósticos não hematológicos; 2 pacientes com sarcoma granulocítico; 2 pacientes com timoma; 1 paciente com leucemia bifenotípica; 1 paciente com plasmocitoma Kappa; e 1 paciente com linfoma de Hodgkin. A correlação entre os resultados das duas técnicas permitiu a classificação dos subtipos de linfomas da seguinte forma: 19 pacientes com linfoma folicular; 15 pacientes com linfoma difuso de grandes células B; 7 pacientes com linfoma linfocítico de pequenas células B/leucemia linfocítica crônica; 3 pacientes com linfoma de células do manto; 1 paciente com linfoma de Burkitt; 1 paciente com linfoma do tipo MALT (tecido linfoide associado à mucosa); 1 paciente com doença linfoproliferativa pós-transplante; 2 pacientes com linfoma não Hodgkin de células B de alto grau; 1 paciente com linfoma não Hodgkin de células B de baixo grau; 1 paciente linfoma de Hodgkin; e 12 pacientes com linfoma não Hodgkin de células B, sem outra especificação. Conclusão: A imunofenotipagem por citometria de fluxo complementa os achados do estudo anatomopatológico/imunoistoquímico, permitindo um diagnóstico hematopatológico rápido e preciso das doenças linfoproliferativas.

Correlation between flow cytometry and histologic findings: ten year experience in the investigation of lymphoproliferative diseases.

OBJECTIVE: To demonstrate the advantages of correlating flow cytometry immunophenotyping with the pathology/ immunohistochemistry of lymph nodes or nodules in the diagnosis of lymphoproliferative diseases. METHODS: A retrospective study was carried out of 157 biopsy or fine-needle aspiration lymph nodes/ nodule specimens taken from 142 patients, from 1999 and 2009. The specimens were simultaneously studied with fow cytometry and pathology at Hospital Israelita Albert Einstein. The specimens were prepared in hematoxylin/eosin, Giemsa, or monoclonal antibody stained slides for detecting specific antibodies for the purposes of pathology/immunohistochemical analysis. The samples were hemolyzed and marked with different monoclonal antibody panels for different antigens in fow cytometry immunophenotyping. RESULTS: The diagnostic results of pathology/immunohistochemical studies and flow cytometry immunophenotyping agreed in 115 patients (81%), corresponding to 127 specimens, as follows according to the pathologic diagnosis: 63 patients with non-Hodgkin's B-cell lymphoma; 26 patients with reactive lymphoid hyperplasia; 5 patients with non-Hodgkin's T-cell lymphoma; 4 patients with atypical lymphoid proliferation; 5 patients with a chronic granulomatous inflammatory process; 5 patients with a non-hematologic diagnosis; 2 patients with granulocytic sarcoma; 2 patients with thymoma; 1 patient with byphenotypic leukemia; 1 patient with kappa plasmocytoma; 1 patient with Hodgkin's lymphoma. Subtypes of lymphomas could be classified by associating the two techniques: 19 patients with follicular lymphoma; 15 patients with diffuse large B-cell lymphoma; 7 patients with small lymphocytic B-cell lymphoma/chronic lymphocytic leukemia; 3 patients with mantle cell lymphoma; 1 patient with Burkitt's lymphoma; 1 patient with MALT type lymphoma; 1 patient with post-transplant lymphoproliferative disease; 2 patients with high grade non-Hodgkin's B-cell lymphoma; 1 patient with low grade non-Hodgkin's B-cell lymphoma not otherwise specified; 1 patient with Hodgkin's lymphoma; and 12 patients with B-cell non-Hodgkin's lymphoma not otherwise specified. CONCLUSION: Flow cytometry adds to the results of morphologic and immunohistochemical studies, facilitating a rapid and accurate diagnosis of lymphoproliferative diseases.

Poluição atmosférica e seu impacto no sistema cardiovascular / Air pollution and its impact on the cardiovascular system

A despeito dos grandes avanços médicos, a doença cardiovascular continua sendo uma das mais importantes causas de mortalidade em todo o mundo, e em especial, no industrializado. Seu desenvolvimento é o resultado de inúmeras interações complexas entre fatores genéticos, como por exemplo, os relacionados à idade, sexo, história familiar, peso, e status pós-menopausa nas mulheres; e fatores de influência ambiental, como, o tabagismo, a ingestão alcoólica, hábitos dietéticos e de atividade física, entre outros. Há pouco mais de uma década, inúmeros estudos epidemiológicos têm demonstrado existir uma consistente associação entre a poluição do ar atmosférico e o aumento do risco para eventos cardiovasculares, não somente morte por causa cardiovascular, mas também a ocorrência de infarto agudo do miocárdio e de arritmias. Estudos experimentais em diferentes espécies animais; os observacionais em humanos; os modelos in vitro, celulares e acelulares, tentam esclarecer os prováveis mecanismos biológicos que conferem plausibilidade a essas associações, mas o fazem sem muita clareza, uma vez que a severidade e a progressão da doença cardiovascular são afetadas de forma muito maior que sua indução. Entretanto, alguns efeitos decorrentes da exposição aos diferentes poluentes atmosféricos têm sido evidenciados, e os mais significativos envolvem resposta inflamatória pulmonar e sistêmica, alteração da coagulabilidade sanguínea, promoção e potencialização do processo aterosclerótico, e disfunção autonômica cardíaca.

Exposição aguda ao material particulado total em suspensão proveniente de diferentes fontes e suas repercussões nas respostas inflamatórias, sistêmica e local, em ratos / Acute exposure to total suspended particles from different sources and their impacts on both, systemic and local inflammatory responses, in rats

A poluição do ar está associada ao aumento da morbimortalidade pulmonar e cardiovascular. O objetivo desse estudo foi o de avaliar e comparar a resposta inflamatória à exposição a três diferentes tipos de particulado total em suspensão (fonte automativa, industrial e da queimada da cana de açúcar), às baixas concentrações e de forma aguda; comparando-as ao grupo controle (black carbon). Os resultados mostraram uma maior inflamação pulmonar induzida pela fonte automotiva, uma maior oxidação cardíaca induzida pela biomassa de queima de cana de açúcar, e uma mais intensa alteração na contagem de células sanguíneas nas partículas industriais. Concluímos que o aerossol ambiente pode induzir inflamação subclínica a baixas concentrações, e que a composição do particulado afetou a magnitude e o tipo de resposta.

Air pollution is associated with increased pulmonary and cardiovascular morbidity and mortality. The objective of this study is to assess and to compare inflammatory responses of acute exposures to total suspended particles generated from three different sources (automotive, burning cane sugar and industrial) at lower concentrations, comparing to the control group (carbon black). The results showed a great pulmonary inflammation induced by automotive source, a strong cardiac oxidation induced by sugar cane burning source, and an intense alteration in the blood cells count induced by the industrial source. We concluded that the environmental aerosol can induce sub clinic inflammation at lower concentrations and that the composition of total suspended particles affects magnitude and kind of responses.