Correction: Safety and immunogenicity of the Na-GST-1 hookworm vaccine in Brazilian and American adults.

[This corrects the article DOI: 10.1371/journal.pntd.0005574.].

First record of Dichelyne (Dichelyne) bonacii (Nematoda, Cucullanidae) parasitizing the intestine of two species of lutjanid fish (Perciformes, Lutjanidae) on the northeast Brazilian coast.

Lutjanids are marine fish and commonly inhabit coral reefs, which have migratory habits and feed in a general way, due to these characteristics, are susceptible to infections by parasites, such as cuculanid nematodes. This work aimed to report for the first time, the occurrence of Dichelyne (Dichelyne) bonacii in Brazil, in two new hosts, Lutjanus analis and Rhomboplites aurorubens, acquired from local artisanal fishermen at the Aracaju city public fishing terminal (10 ° 54'17 "S37 ° 2'56" W), northeast coast of Brazil. Adult nematodes were collected from the intestinal tract of the hosts, clarified in Aman's Lactophenol and were briefly described here. Three adult males and five gravid females were found, indicating that the two species of fish acted as definitive hosts. Currently, this species of parasite has been reported only from fish collected in the coast of Mexico, which makes this work the first record of this parasite in Brazilian coastal waters. The results show that probably the range of hosts and the distribution of D. (Dichelyne) bonacii is not as restricted as data pointed in the literature, being a little wider, extending also to waters that bathe the Brazilian coast.

Distinct genetic profiles of Leishmania (Viannia) braziliensis associate with clinical variations in cutaneous-leishmaniasis patients from an endemic area in Brazil.

American tegumentary leishmaniasis (ATL) samples obtained from the lesions of patients with typical (n = 25, 29%), atypical (n = 60, 69%) or both (n = 2%) clinical manifestations were analysed by multilocus enzyme electrophoresis, hsp70 restriction-fragment length polymorphism (PCR-RFLP), hsp70 sequencing and phylogenetics methods. The hsp70 PCR-RFLP analysis revealed two different profiles whose the most samples differed from those expected for Leishmania braziliensis and the other Leishmania species tested: of 39 samples evaluated, two (5%) had a restriction profile corresponding to L. braziliensis, and 37 (95%) had a restriction profile corresponding to a variant pattern. A 1300-bp hsp70 gene fragment was sequenced to aid in parasite identification and a phylogenetic analysis was performed including 26 consensus sequences from the ATL patient's samples and comparing to other Leishmania and trypanosomatids species. The dendrogram allowed to observe a potential population structure of L. braziliensis complex in the studied region, emphasizing that the majority of clinical samples presented a variant genetic profile. Of interest, the L. braziliensis diversity was associated with different clinical manifestations whose parasites with hsp70 variant profile were associated with atypical lesions. The results may be helpful to improve the diagnosis, treatment and control measures of the ATL in endemic areas.

Safety and immunogenicity of the Na-GST-1 hookworm vaccine in Brazilian and American adults.

Necator americanus Glutathione-S-Transferase-1 (Na-GST-1) plays a role in the digestion of host hemoglobin by adult N. americanus hookworms. Vaccination of laboratory animals with recombinant Na-GST-1 is associated with significant protection from challenge infection. Recombinant Na-GST-1 was expressed in Pichia pastoris and adsorbed to aluminum hydroxide adjuvant (Alhydrogel) according to current Good Manufacturing Practice. Two Phase 1 trials were conducted in 142 healthy adult volunteers in the United States and Brazil, first in hookworm-naïve individuals and then in residents of a N. americanus endemic area in Brazil. Volunteers received one of three doses of recombinant Na-GST-1 (10, 30, or 100 µg) adjuvanted with Alhydrogel, adjuvanted with Alhydrogel and co-administered with an aqueous formulation of Glucopyranosyl Lipid A (GLA-AF), or the hepatitis B vaccine. Vaccinations were administered via intramuscular injection on days 0, 56, and 112. Na-GST-1/Alhydrogel was well tolerated in both hookworm-naïve and hookworm-exposed adults, with the most common adverse events being mild to moderate injection site pain and tenderness, and mild headache and nausea; no vaccine-related severe or serious adverse events were observed. Antigen-specific IgG antibodies were induced in a dose-dependent fashion, with increasing levels observed after each vaccination in both trials. The addition of GLA-AF to Na-GST-1/Alhydrogel did not result in significant increases in specific IgG responses. In both the US and Brazil studies, the predominant IgG subclass induced against Na-GST-1 was IgG1, with lesser amounts of IgG3. Vaccination of both hookworm-naïve and hookworm-exposed adults with recombinant Na-GST-1 was safe, well tolerated, and resulted in significant antigen-specific IgG responses. Based on these results, this vaccine will be advanced into clinical trials in children and eventual efficacy studies. TRIAL REGISTRATION: ClinicalTrials.gov (NCT01261130 for the Brazil trial and NCT01385189 for the US trial).

RYP1 gene as a target for molecular diagnosis of histoplasmosis.

This study analyzed the RYP1 gene as a target for the molecular diagnosis of histoplasmosis. This assay detected fungal DNA in 13/13 blood samples from HIV/AIDS-patients with histoplasmosis. Therefore, the detection of RYP1 gene in whole blood sample is a quick and sensitive test to diagnose histoplasmosis.

Gene expression profile of cytokines and chemokines in skin lesions from Brazilian Indians with localized cutaneous leishmaniasis.

Cutaneous leishmaniasis (CL) is a chronic inflammatory disease caused by dermotropic Leishmania species belonging to the Viannia subgenera, with Leishmania (V.) braziliensis considered the main agent in Brazil. After infection, a local inflammatory process is initiated, inducing the expression of several cytokine/chemokine genes. We evaluated the immunity to CL of patients living in the indigenous community Xakriabá, Minas Gerais state, Brazil, by performing detailed analyses of the mRNA expression of different cytokines and chemokines in CL lesions, considering the time evolution (recent or late). We also studied the profile of the inflammatory infiltrate by histopathological analysis. The histopathological features of recent CL lesions showed an intense inflammatory reaction, characterized by the presence of both mononuclear and polymorphonuclear cells, whereas late CL lesions exhibited a predominance of mononuclear leukocytes. The gene expression of cytokines/chemokines in skin biopsies from the CL group showed higher transcript levels of modulatory (IL10 and TGFB1), anti-inflammatory (IL4), and pro-inflammatory (TNF, IFNG, IL12B, CCL2, CCL3, CCL5, CXCL10) biomarkers in recent lesions than in late lesions. Our findings suggest that differential gene expression of cytokines and chemokines found in skin lesions from CL patients is associated with time evolution of lesions.

Generalized urticaria induced by the Na-ASP-2 hookworm vaccine: implications for the development of vaccines against helminths.

BACKGROUND: Necator americanus Ancylostoma-secreted protein 2 (Na-ASP-2) is secreted by infective hookworm larvae on entry into human hosts. Vaccination of laboratory animals with recombinant Na-ASP-2 provides significant protection against challenge infections. In endemic areas antibodies to Na-ASP-2 are associated with reduced risk of heavy N americanus infections. OBJECTIVE: To assess the safety and immunogenicity of recombinant Na-ASP-2 adjuvanted with Alhydrogel in healthy Brazilian adults previously infected with N americanus. METHODS: Participants were randomized to receive Na-ASP-2 or hepatitis B vaccine. Major IgG and IgE epitopes of the Na-ASP-2 molecule were mapped by using sera from these same subjects. Seroepidemiologic studies in adults and children residing in hookworm-endemic areas were conducted to assess the prevalence of IgE responses to Na-ASP-2. RESULTS: Vaccination with a single dose of Na-ASP-2 resulted in generalized urticarial reactions in several volunteers. These reactions were associated with pre-existing Na-ASP-2-specific IgE likely induced by previous hookworm infection. Surveys revealed that a significant proportion of the population in hookworm-endemic areas had increased levels of IgE to Na-ASP-2. Epitope mapping demonstrated sites on the Na-ASP-2 molecule that are uniquely or jointly recognized by IgG and IgE antibodies. CONCLUSION: Infection with N americanus induces increased levels of total and specific IgE to Na-ASP-2 that result in generalized urticaria on vaccination with recombinant Na-ASP-2. These data advance knowledge of vaccine development for helminths given their propensity to induce strong T(H)2 responses. Study data highlight the important differences between the immune responses to natural helminth infection and to vaccination with a recombinant helminth antigen.

Acompanhamento Clínico e Terapêutico de Pacientes com Leishmaniose Tegumentar Americana na Terra Indígena Xakriabá, São João das Missões, Minas Gerais/Brasil, 2008 – 2010 / Clinical Monitoring and Patient Therapy with American cutaneous leishmaniasis in the Indian Land Xakriabá, St. John of the Missions, Minas Gerais / Brazil, 2008 - 2010

A comunidade indígena Xakriabá, localizada no município de São João das Missões, norte de Minas Gerais/Brasil, tem registrado casos de leishmaniose tegumentar americana (LTA) desde 2001. O presente estudo teve como objetivo descrever os casos identificados desde Junho de 2008 a setembro de 2010 , bem como acompanhar a evolução a evolução clínica dos casos até 12 meses após o fim do tratamento. Os casos suspeitos foram identificados em um levantamento da população e pelos agentes de saúde indígenas. Após a assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, os pacientes foram entrevistados e avaliados clinicamente , e as informações foram registradas em questionários estruturados e pré- codificados. O diagnóstico foi confirmado por testes intradérmicos de reação(IDR) , exames parasitológicos ( exame direto , fragmento de biópsia ou aspirado cultura e técnicas moleculares ( PCR- RFLP) . Os diagnósticos confirmados foram aqueles que testou positivo para pelo menos um dos testes. Hematológica , testes bioquímicos e eletrocardiograma (ECG) foram realizados antes , durante e no final do tratamento com antimônio pentavalente meglumina . doses de 15 mg / kg / dia durante 20 dias (leishmaniose cutânea ) e 20 mg / kg / dia durante 30 dias (leishmaniose mucosa ) foram utilizados . Entre os 94 pacientes com lesões cutâneas avaliadas, 89 foram confirmados como LTA e 60 tratados e monitorados. os casos vieram de cinco áreas existentes , com maior ocorrência nas áreas conhecidas como" Brejo Mata Fome " (47,5% casos) e " Itapicuru " ( 43,8% dos casos). a distribuição dos casos foi semelhante entre os homens (51,7% ) e mulheres ( 48,3%) . idade dos pacientes variou de 1 a 72 anos, com a mediana de 18 anos...

os casos ocorreram predominantemente entre os trabalhadores rurais que ganham menos de um salário mínimo. maioria dos pacientes apresentava lesões atípicas (70,1%) e uma única lesão (60,7%) . o tempo entre o início da lesão e o diagnóstico variou de menos de um mês até 72 meses . Não houve contra-indicações para o uso de antimônio pentavalente . Sessenta pacientes foram tratados e, após o 20 º dia, 24 (40,0%)apresentavam lesões que foram completamente epitelizadas enquanto outros apresentaram os parcialmente cicatrizadas . Esses dois grupos foram comparados por características demográficas, co - infecções , número, tamanho , aparência e localização das lesões , tempo de início dos sintomas, infecções bacterianas, uso de medicamentos caseiros ou comerciais, tamanho de endurecimento, a descontinuidade do tratamento , resultados de testes de diagnóstico e genótipos de Leishmania braziliensis . Após 20 dias de tratamento , epitelização completa esteve associada a lesões parcialmente epitelizadas no primeiro exame clínico (OR = 6,5 ,IC 95 % = 2,0-21,7 ) e infecção bacteriana (OR = 0,1, IC 95 % = 0,0-0,7 ) . Uma avaliação realizada 90 dias após o final do tratamento indicou que 44 pacientes(73,3%) apresentaram lesões completamente epitelizadas. Quando estes pacientes foram comparados aos com lesões não- cicatrizadas houve uma associação entre afalha do tratamento e LTA anterior no passado (OR = 8,2, IC 95% = 1,5-46,3 ), usode medicação caseira (OR = 7,10 , IC 95 % = 1,6-71,9 ) e tempo de início dos sintomas superior a 8 meses ( OR = 6,3 , IC95% = 1,1-36,7 ) . Seis ( 10%) recidivas foram observados casos. Entre os 60 pacientes tratados, 35 não havia completado um ano de monitoramento, no momento da análise de dados. Esperamos que comeste estudo possa ampliar o conhecimento a respeito de LTA e contribuir para a melhoria do diagnóstico e tratamento da a doença na comunidade indígena Xakriabá...

Acompanhamento Clínico e Terapêutico de Pacientes com Leishmaniose Tegumentar Americana na Terra Indígena Xakriabá, São João das Missões, Minas Gerais/Brasil, 2008 – 2010

A comunidade indígena Xakriabá, localizada no município de São João das Missões, norte de Minas Gerais/Brasil, tem registrado casos de leishmaniose tegumentar americana (LTA) desde 2001. O presente estudo teve como objetivo descrever os casos identificados desde Junho de 2008 a setembro de 2010 , bem como acompanhar a evolução a evolução clínica dos casos até 12 meses após o fim do tratamento. Os casos suspeitos foram identificados em um levantamento da população e pelos agentes de saúde indígenas. Após a assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, os pacientes foram entrevistados e avaliados clinicamente , e as informações foram registradas em questionários estruturados e pré- codificados. O diagnóstico foi confirmado por testes intradérmicos de reação(IDR) , exames parasitológicos ( exame direto , fragmento de biópsia ou aspirado cultura e técnicas moleculares ( PCR- RFLP) . Os diagnósticos confirmados foram aqueles que testou positivo para pelo menos um dos testes. Hematológica , testes bioquímicos e eletrocardiograma (ECG) foram realizados antes , durante e no final do tratamento com antimônio pentavalente meglumina . doses de 15 mg / kg / dia durante 20 dias (leishmaniose cutânea ) e 20 mg / kg / dia durante 30 dias (leishmaniose mucosa ) foram utilizados . Entre os 94 pacientes com lesões cutâneas avaliadas, 89 foram confirmados como LTA e 60 tratados e monitorados. os casos vieram de cinco áreas existentes , com maior ocorrência nas áreas conhecidas como" Brejo Mata Fome " (47,5% casos) e " Itapicuru " ( 43,8% dos casos). a distribuição dos casos foi semelhante entre os homens (51,7% ) e mulheres ( 48,3%) . idade dos pacientes variou de 1 a 72 anos, com a mediana de 18 anos.

os casos ocorreram predominantemente entre os trabalhadores rurais que ganham menos de um salário mínimo. maioria dos pacientes apresentava lesões atípicas (70,1%) e uma única lesão (60,7%) . o tempo entre o início da lesão e o diagnóstico variou de menos de um mês até 72 meses . Não houve contra-indicações para o uso de antimônio pentavalente . Sessenta pacientes foram tratados e, após o 20 º dia, 24 (40,0%)apresentavam lesões que foram completamente epitelizadas enquanto outros apresentaram os parcialmente cicatrizadas . Esses dois grupos foram comparados por características demográficas, co - infecções , número, tamanho , aparência e localização das lesões , tempo de início dos sintomas, infecções bacterianas, uso de medicamentos caseiros ou comerciais, tamanho de endurecimento, a descontinuidade do tratamento , resultados de testes de diagnóstico e genótipos de Leishmania braziliensis . Após 20 dias de tratamento , epitelização completa esteve associada a lesões parcialmente epitelizadas no primeiro exame clínico (OR = 6,5 ,IC 95 % = 2,0-21,7 ) e infecção bacteriana (OR = 0,1, IC 95 % = 0,0-0,7 ) . Uma avaliação realizada 90 dias após o final do tratamento indicou que 44 pacientes(73,3%) apresentaram lesões completamente epitelizadas. Quando estes pacientes foram comparados aos com lesões não- cicatrizadas houve uma associação entre afalha do tratamento e LTA anterior no passado (OR = 8,2, IC 95% = 1,5-46,3 ), usode medicação caseira (OR = 7,10 , IC 95 % = 1,6-71,9 ) e tempo de início dos sintomas superior a 8 meses ( OR = 6,3 , IC95% = 1,1-36,7 ) . Seis ( 10%) recidivas foram observados casos. Entre os 60 pacientes tratados, 35 não havia completado um ano de monitoramento, no momento da análise de dados. Esperamos que comeste estudo possa ampliar o conhecimento a respeito de LTA e contribuir para a melhoria do diagnóstico e tratamento da a doença na comunidade indígena Xakriabá.