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Optogenetic control with a photocleavable protein, PhoCl.

Zhang, Wei; Lohman, Alexander W; Zhuravlova, Yevgeniya; Lu, Xiaocen; Wiens, Matthew D; Hoi, Hiofan; Yaganoglu, Sine; Mohr, Manuel A; Kitova, Elena N; Klassen, John S; Pantazis, Periklis; Thompson, Roger J; Campbell, Robert E.

Nat Methods ; 14(4): 391-394, 2017 Apr.

Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-28288123

RESUMEN

To expand the range of experiments that are accessible with optogenetics, we developed a photocleavable protein (PhoCl) that spontaneously dissociates into two fragments after violet-light-induced cleavage of a specific bond in the protein backbone. We demonstrated that PhoCl can be used to engineer light-activatable Cre recombinase, Gal4 transcription factor, and a viral protease that in turn was used to activate opening of the large-pore ion channel Pannexin-1.

Asunto(s)

Optogenética/métodos , Ingeniería de Proteínas/métodos , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Conexinas/genética , Conexinas/metabolismo , Evolución Molecular Dirigida , Proteínas Fluorescentes Verdes/genética , Proteínas Fluorescentes Verdes/metabolismo , Células HEK293 , Proteínas HSP90 de Choque Térmico/genética , Proteínas HSP90 de Choque Térmico/metabolismo , Humanos , Proteínas Luminiscentes/genética , Proteínas Luminiscentes/metabolismo , Proteínas del Tejido Nervioso/genética , Proteínas del Tejido Nervioso/metabolismo , Señales de Localización Nuclear/genética , Técnicas de Placa-Clamp , Fotoquímica/métodos , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas no Estructurales Virales/genética , Proteínas no Estructurales Virales/metabolismo , Proteína Fluorescente Roja

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