Diferenciación de especies de Rhodococcus mediante una prueba de PCR-RFLP basada en los genes codificantes para la subunidad 16S ribosomal / Differentiation of Rhodococcus's species by means of a test of PCR-RFLP based on the genes codificantes for the subunit 16S ribosomal

RESUMEN

Dada la dificultad en diferenciar las especies de Rhodococcus por pruebas bioquímicas, se desarrolló unaprueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), seguida de un ensayo de Polimorfismo de Longitud de Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP) para la diferenciación de las mismas. R. equi, R. rhodnii y otrasbacterias fueron cultivadas en agar sangre y BHI a 37 y 26 °C. El ADN bacteriano fue extraído y amplificadocon los iniciadores descritos por Hypsa y Dale. Los productos de amplificación fueron sometidos a digestióncon diversas enzimas de restricción y los patrones de restricción obtenidos fueron confirmados mediante análisis in silico. Se obtuvo el fragmento de amplificación esperado de 1300 pb en todas las bacterias analizadas. Se pudo diferenciar R. equi de R. rhodnii con las endonucleasas PstI y HindIII y con respecto a otrasbacterias con PstI, HindIII, SstI, BamHI y EcoRI. Los patrones de restricción obtenidos fueron confirmadosmediante análisis in silico. La prueba PCR-RFLP constituye una alternativa para la diferenciación entreespecies de Rhodococcus tales como R. equi y R. rhodnii.