Expression of enamel proteins in human dental pulp stem cells by the effect of extracellular matrix / Expresión de proteínas de esmalte en células madre de pulpa dental humana por el efecto de matriz extracelular

SUMMARY: Mesenchymal stem cells are present in adult tissues such as the human dental pulp. They are pluripotent and can differentiate into various specialized cell types in vitro through appropriate stimuli. Ameloblasts produce human tooth enamel only during embryonic development before tooth eruption, so endogenous regeneration is not possible. Various efforts have been aimed at generating natural or artificial substitutes for dental enamel with properties similar to the specific components of said tissue. The purpose of this study was to induce human dental pulp stem cells to produce enamel proteins using extracellular matrix derived from the rat tail tendon and pigskin. Primary cultures of human dental pulp stem cells were established and characterized by RT-PCR and immunofluorescence, using mesenchymal cell markers such as CD14, CD40, CD44, CD105, and STRO-1. The cells were then incubated with the extracellular matrix for fourteen days and labeled with specific antibodies to detect the expression of dental enamel proteins such as amelogenin, ameloblastin, enamelisin, tuftelin, and parvalbumin, characteristics of the phenotype of ameloblasts. This work demonstrated a positive effect of the extracellular matrix to induce the expression of enamel proteins in the stem cells of the human dental pulp.

RESUMEN: Las células madre mesenquimales están presentes en los tejidos adultos como la pulpa dental humana. Son pluripotentes y pueden diferenciarse en varios tipos de células especializadas in vitro a través de estímulos adecuados. Los ameloblastos producen esmalte dental humano sólo durante el desarrollo embrionario antes de la erupción dental, por lo que no es posible su regeneración endógena. Varios esfuerzos se han orientado a generar sustitutos naturales o artificiales de esmalte dental con propiedades similares a los componentes específicos de este tejido. El propósito de este estudio fue inducir células madre de pulpa dental humana para producir proteínas del esmalte dental a través del estímulo de matriz extracelular derivada del tendón de la cola de rata y piel de cerdo. Se establecieron cultivos primarios de células madre de pulpa dental humana y se caracterizaron por RT-PCR e inmunofluorescencia utilizando marcadores de células mesenquimales como CD14, CD40, CD44, CD105 y STRO-1. Posteriormente, las células se incubaron con matriz extracelular durante un período de catorce días y se marcaron con anticuerpos específicos para detectar la expresión de proteínas de esmalte dental como amelogenina, ameloblastina, enamelisina, tuftelina y parvalbúmina, las cuales son características del fenotipo de ameloblastos. Este trabajo demostró el efecto positivo que tiene el empleo de la matriz extracelular para inducir la expresión de proteínas de esmalte en las células pluripotenciales de la pulpa dental humana.

Metaloproteinases da matriz: papel no desenvolvimento das lesões periapicais e modulação após tratamento endodôntico / Matrix metalloproteinases: role in the development of apical periodontitis and modulation after endodontic treatment

Introduction: Apical periodontitis represents a local immune response directed against the progression of microorganisms from the dental pulp to the apical foramen and periapical tissues, which results in bone and dental resorption. The aim of this review is to describe the expression of this group of proteases in apical periodontitis and its modulation during the periapical healing phase following root canal treatment. Literature review: The pathogenesis of apical periodontitis involves degradation of several extracellular matrix components. Matrix metalloproteinases (MMPs) are expressed in response to specific stimuli by resident cells of connective tissue during tissue remodeling and by inflammatory cells that arrive into the surrounding tissues during inflammatory events. MMPs have been reported in apical periodontitis, either experimentally induced or obtained from humans and there is evidence that these enzymes show diff erent expression patterns in granulomas and periapical cysts. Root canal therapy is important for the reduction of periapical inflammation as well as the synthesis of MMPs, especially when using a calcium hydroxide-based dressing. Conclusion: Apical periodontitis show high expression of matrix metalloproteinases and root canal treatment results in less expression of MMPs when compared to untreated apical periodontitis.

Introdução: A lesão periapical representa a resposta imunoinflamatória devido ao aumento do número e progressão de micro-organismos advindos dos canais radiculares contaminados em direção aos tecidos apicais e periapicais, resultando em reabsorção óssea. O objetivo desta revisão será abordar a importância das metaloproteinases da matriz no desenvolvimento das lesões periapicais e sua modulação durante a fase de reparação tecidual depois de instituído o tratamento endodôntico. Revisão da literatura: A patogênese da lesão periapical envolve a degradação progressiva de diversos componentes da matriz extracelular. Dentre as proteases responsáveis pela degradação destes componentes estão as metaloproteinases da matriz (MMPs). Estas proteinases são expressas em resposta a estímulos específicos pelas células residentes do tecido conjuntivo durante o processo de remodelação tecidual e por células inflamatórias que invadem os tecidos durante eventos inflamatórios. As MMPs foram descritas em lesões periapicais experimentais e em humanos e existem evidências de que estas enzimas apresentam padrões de expressões diferentes em granulomas e cistos periapicais. A terapia endodôntica é importante para a redução da inflamação periapical assim como da síntese das MMPs, principalmente quando utilizado um curativo de demora à base de hidróxido de cálcio. Conclusão: As lesões periapicais apresentam alta expressão de metaloproteinases da matriz e o tratamento endodôntico em dentes com lesão periapical resulta em menor expressão de MMPs quando comparado às lesões periapicais não tratadas.

Metaloproteinasas de la matriz extracelular (mmps) en odontología / Metalloproteinases (MMPs) of the extracellular matrix in dentistry

La mayoría de los tejidos del organismo se encuentran en un constante proceso de renovación, modulado por una vasta cantidad de proteínas que inducen la síntesis y degradación tisular a lo largo del tiempo. Las metaloproteinasas de la matriz extracelular (MMPs) son una familia de 25 endopeptidasas zinc dependientes encargadas de escindir los componentes inmediatos de la matriz extracelular (MEC). Ciertas metaloproteinasas de la matriz extracelular, especialmente MMP-2 y MMP-9, se ven implicadas en el desarrollo del germen dental así como con la proliferación e invasión de los tumores odontogénicos, siendo un factor a considerar sobre la posible agresividad tumoral y la base para el tratamiento de los mismos. A su vez, ambas MMPs actúan en la progresión de las lesiones cariosas así como en progresión de la periodontitis apical de pacientes con necrosis pulpar. Varios patógenos periodontales, promueven la secreción tanto de MMP-2 como MMP-9 favoreciendo la destrucción de los tejidos periodontales, íntimamente relacionadas con el avance de la enfermedad. En pacientes bajo tratamiento ortodóncico se encuentran altos niveles de estas MMPs, tanto en zonas de compresión como de tensión, relacionando los movimientos dentales con la renovación de los tejidos. Esta revisión analiza su expresión y utilidad relacionándolas con diferentes disciplinas en el área de las ciencias odontológicas, enfatizando su potencial como biomarcadores.

Most body tissues are found in a constant renovation process, modulated by a large number of proteins that induce tissue synthesis and degradation over time. Matrix metalloproteinases (MMPs) are a family of 25 zinc-dependent endopeptidases in charge of the cleavage of the immediate components of the extracellular matrix. Certain MMPs, especially MMP-2 and MMP-9, are related to the development of dental germ as well as odontogenic tumor invasion and proliferation. They are a significant factor in tumor aggressiveness and possible treatments. Moreover, both MMPs participate in the progression of dental caries and apical periodontitis in patients with necrotic pulp. Several periodontal pathogens promote the secretion of both MMP-2 and MMP-9, increasing the destruction of periodontal tissues, which is closely linked to the progression of the disease. High levels of these MMPs are found in patients undergoing orthodontic treatment, not only in the compression side but also on the tension one. This establishes a connection between tooth movement and tissue renovation. This review analyzes MMPs expression and usefulness in different areas of dental science, emphasizing their potential as biomarkers.

Actividad de metaloproteinasa de matriz extracelular-9 en fluido crevicular gingival durante la respuesta reparativa en periodontitis apical asintomática / Activity of matrix metalloproteinase-9 in gingival crevicular fluid during the reparative phase in asymptomatic apical periodontitis

OBJETIVO: Los procesos destructivos del periodonto apical están en su mayoría mediados por proteasas específicas. Existe evidencia de que los niveles de metaloproteinasa de matriz extracelular-9 (MMP-9) en el fluido crevicular gingival (FCG) podrían reflejar la presencia de periodontitis apical asintomática (PAA). El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad de MMP-9 durante la respuesta reparativa periapical en controles postendodóncicos entre una semana y 6 meses y en controles sanos. MATERIALES Y MÉTODOS: En este estudio prospectivo se incluyeron 28 pacientes con periodontitis apical asintomática, y se tomaron muestras de FCG a partir de dientes con PAA en línea base y controles postendodóncicos de una semana, uno, 3 y 6 meses. Adicionalmente se incluyeron controles contralaterales sanos. Las muestras se eluyeron y analizaron mediante gelatinogramas y densitometría. RESULTADOS: En pacientes con periodontitis apical asintomática se identificaron tanto la proforma como la forma activa de la MMP-9. Estas presentaron aumentos significativos en controles postendodóncicos de 3 y 6 meses con signos de reparación periapical. CONCLUSIONES: Los niveles de MMP-9 aumentaron significativamente en dientes con diagnóstico de PAA durante la fase reparativa. Estos resultados sugieren que MMP-9 también cumpliría un papel fisiológico durante la reparación periapical, que es susceptible de ser evaluado a través del análisis del FCG.

OBJECTIVE: Apical destructive periodontal processes are largely mediated by specific proteases. Evidence supports that the levels of extracellular matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) could reflect the presence of asymptomatic apical periodontitis (AAP) in gingival crevicular fluid (GCF). The aim of this study was to evaluate the activity of MMP-9 during reparative response in periapical post endodontic controls between 1 week and 6 months later and in healthy controls. MATERIALS AND METHODS: A prospective study was performed on 28 patients with a diagnosis of AAP. GCF samples were taken from AAP teeth at baseline and post-endodontic controls at 1 week, 1, 3 and 6 months. Additional healthy contralateral controls were obtained, and samples were eluted and analyzed by densitometric scanning and gelatin zymography. RESULTS: In patients with asymptomatic apical periodontitis, both the pro form and the active form of MMP-9 were identified. These showed significant increases in post-endodontic controls at three and six months, with signs of periapical repairing. CONCLUSIONS: MMP-9 levels significantly increased in teeth diagnosed with AAP during the reparative phase. These results suggest that MMP-9 might be involved in the healing of apical tissues that might be reflected in GCF.

Estudo da gelificação do produto de digestão de ECM descelularizada para uso em engenharia de tecidos / Gelation study of extracellular matrix digestion products for tissue engineering

Os implantes utilizados para regeneração tecidual ainda falham na tentativa de mimetizar as propriedades da matriz extracelular (ECM), o que compromete a viabilidade e aplicabilidade do material. Além disso, permanece o desafio de desenvolver um método de aplicação minimamente invasivo para evitar danos teciduais adicionais (Badylak et al., 2015; Crapo et al., 2011; Xing et al., 2014). Assim, o objetivo do projeto é desenvolver um hidrogel injetável composto de ECM de pericárdio, tendão e osso bovino enzimaticamente digerida e reticulada com glutaraldeído, ésteres ativados de NHS e derivados de polietilenoglicol (PEG). O protocolo de digestão foi modificado de Willians (Williams et al., 2015), utilizando tripsina, pepsina e colagenase. A quantificação de GAGs e peptídeos mostrou que, independentemente do substrato e enzima utilizados, o processo em etapas gerou uma maior concentração de estruturas em relação ao processo contínuo. Adicionalmente, a análise de dicroísmo circular mostrou que o processo em etapas preservou mais estruturas secundárias. O perfil proteico das ECMs foi analisado como descrito em Flores (Flores et al., 2016), e foi verificado que ele é altamente diverso e tecido - específico. A ECM do pericárdio possui 94 tipos diferentes de proteínas, seguidas pela ECM do tendão (48) e pela ECM óssea (35), sendo o colágeno α1 (1) e o colágeno α2 (1) presentes em todas elas. Além disso, os produtos digeridos ECMp aumentaram a proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais da medula óssea a osteoblastos maduros. A cinética do processo de gelificação, bem como as propriedades mecânicas do gel são dependentes do tipo de agente reticulante, assim como da concentração da gelatina. Este novo material é altamente personalizável e adaptável à aplicação biológica desejada

The implants used for tissue regeneration still fail to mimic properties of extracellular matrix. It compromises the material viability and applicability. Furthermore, the challenge to manufacture a minimally invasive delivery system for it to avoid extra tissue damage still remains (Badylak et al., 2015; Crapo et al., 2011; Xing et al., 2014). Thus, the project goal is to develop an injectable hydrogel composed of pericardium, tendon and bovine bone ECM enzymatically digested and crosslinked with glutaraldehye, activated esters of NHS and polyethylene glycol (PEG) derivatives. The digestion protocol was modified from Willians (Williams et al., 2015), using trypsin, pepsin and collagenase as lytic enzymes. GAGs and peptides quantification showed that regardless of the substrate and enzyme, the stepwise process yields a higher amount of GAGs and peptides in comparison with the continuous process. In addition, circular dicroism analysis showed that the stepwise process preserves more secondary structures of proteins. ECMs protein profile was analyzed as in Flores (Flores et al., 2016) and verified that it is the highly diverse and tissue-specific. Pericardium ECM has 94 different types of proteins, followed by tendon ECM (48) and bones ECM (35), being collagen α1(1) and collagen α2(1) present in all of them. Furthermore, the ECMp digested products enhanced bone marrow mesenchymal stem cells proliferation and differentiation in mature osteoblast. The kinetics of the gelification process, as well as mechanical properties of the gel is dependent of the type of crosslinker and concentration of gelatin. This new material is highly customizable and adaptable to the biological application

Análise imunoistoquímica de metaloproteases nos cistos dentígeros, cistos radiculares e tumores odontogênicos ceratocísticos: revisão sistemática / Immunohistochemical analysis of metalloproteases in dentigerous cysts, radicular cysts and keratocystic odontogenic tumors: systematic review

Evidence suggests that metalloprotease expression may affect the biological behavior of odontogenic lesions. This study was conducted to review the literature about the role of metalloproteases in the development of odontogenic lesions. A search was carried out using one database, MEDLINE, via PubMed. Only articles written in English were included. Abstracts of all articles retrieved in the electronic search were evaluated for their relevance. Three articles met inclusion criteria. They analyzed the role of MMP-2, MMP-8 and MMP-13 in radicular cysts, dentigerous cysts and keratocystic odontogenic tumors, and of MMP-1, MMP-7 and MMP-27 in keratocystic odontogenic tumors. The immunostaining technique used for all studies was similar, differing only in type of staining used. Different immunoreactivity results were found in the studies. The pattern of metalloprotease expression in odontogenic lesions was different from the pattern found in other lesions. In the studies analyzed, there was a significant positive immunoreactivity for metalloproteases in odontogenic lesions, particularly in keratocystic odontogenic tumors, a finding that may explain KCOT aggressiveness.

Evidências sugerem que a expressão das metaloproteinases podem afetar o comportamento biológico das lesões odontogênicas. Esse estudo foi conduzido a fim de revisar a literatura sobre o papel das metaloproteinases no desenvolvimento das lesões odontogênicas. A pesquisa foi realizada utilizando a base de dados do MEDLINE, via PUBMED. Somente artigos escritos em língua inglesa foram aceitos. Os resumos de todos os artigos encontrados na busca foram avaliados de acordo com sua relevância. Três artigos preencheram os critérios de inclusão. Eles analisaram o papel da MMP-2, MMP-8 e MMP-13 nos cistos radiculares, cistos dentígeros e nos tumores odontogênicos ceratocísticos (TOC) e MMP-1, MMP-7 e MMP-27 no TOC. A técnica imunoistoquímica utilizada por todos os estudos foi similar, diferindo somente pelo tipo da coloração utilizada. Diferentes imunomarcações foram encontradas nos estudos. O padrão da expressão das metaloproteinases nas lesões odontogênicos variou entre as lesões. Nos estudos analisados, houve uma imunomarcação positiva, significante estatiticamente, das metaloproteinases nas lesões odontogênicas em especial nos TOCs, o que pode explicar a agressividade dessas lesões.

Expressão de MMPs, marcadores angiogênicos e proliferação celular em tumores odontogênicos / Expression of MMPs, angiogenic and proliferation cell markers in odontogenic tumors

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: O conhecimento do comportamento biológico de lesões de natureza odontogênica é essencial para tornar a abordagem terapêutica adequada e estabelecer um prognóstico. A produção de metaloproteinases da matriz extracelular (MMPs), a angiogênese e a proliferação celular fornecem subsídios para o crescimento tumoral. O presente artigo tem como objetivo fazer uma revisão de literatura de pesquisas em tumores odontogênicos (TOs) selecionados a partir da nova classificação da Organização Mundial da Saúde (OMS) de 2005 sobre a expressão de MMPs, marcadores angiogênicos e proliferação celular e verificar, nestes estudos, a relação desses marcadores quanto ao comportamento biológico dessas lesões. RESULTADOS: Nota-se que as MMPs -1, -2, -7, -9 e -26 encontram-se mais expressas no componente epitelial e estroma e, particularmente, a -13 em estroma. Uma maior angiogênese é observada em TOs mais agressivos. CD 105 foi mais expresso no TO ceratocístico (TOC) e CD34 em ameloblastomas sólidos (ASs). Relata-se elevada expressão do Ki-67 e p53 no TOC e no AS e baixo índice de proliferação celular no TO adenomatoide (TOA). CONCLUSÃO: Esses resultados mostram que as MMPs participam no processo de invasão e recorrência de algumas lesões odontogênicas, estando associadas ao comportamento biológico desses tumores. A angiogênese é fundamental para fornecer suporte à proliferação celular e esses dois eventos em conjunto estão correlacionados com diferentes níveis de comportamento biológico nos TOs, quando comparados com cistos de natureza odontogênica, o que pode sugerir o uso de inibidores angiogênicos como provável abordagem terapêutica nessas lesões.

INTRODUCTION AND OBJECTIVE: The study of biological behavior of odontogenic lesions is essential to the establishment of appropriate therapeutic approach and prognosis. The production of extracellular matrix metalloproteinases (MMPs), angiogenesis and cell proliferation contribute to tumor growth. This paper aims to review the literature on odontogenic tumors (OT) selected according to the new World Health Organization classification (WHO- 2005) by evaluating the expression of MMPs, angiogenic and cell proliferation. Furthermore, it aims to verify the relation between these markers and the biological behavior of these lesions. RESULTS: it was found that MMPs -1, -2, -7, -9 and -26 had a higher expression in both epithelial component and stroma, and 13 particularly in the stroma. Increased angiogenesis was observed in more aggressive OT. CD105 expression was higher in keratocystic odontogenic tumour (KOT) and CD34 in solid ameloblastomas (SA). It was observed a higher expression of Ki-67 and p53 in SA and KOT and a low cell proliferation rate in the adenomatoid odontogenic tumour (AOT). CONCLUSION: These results show that MMPs are involved in invasion and recurrence of some odontogenic lesions and are associated with the biological behavior of these tumors. Angiogenesis is critical to provide support to cell proliferation and these concomitant events are correlated with different levels of biological behavior in OT when compared to odontogenic cysts, hence the use of angiogenic inhibitors may be a potential therapeutic approach in these lesions.

Inmunodetección de metaloproteinasas de matriz extracelular (MMPs)-2, -9, -13 y -14 en lesiones apicales asociadas con periodontitis apical asintomática / Immunodetection of matrix metalloproteinases (MMPs)-2, -9, -13 and -14 in periapical lesions associated with asymptomatic apical periodontitis

La periodontitis apical asintomática (PAa) es una patología infecciosa caracterizada por destrucción ósea perirradicular asociada a un proceso inflamatorio crónico y producción de mediadores inflamatorios, entre los cuales se encuentran las metaloproteinasas de matriz extracelular (MMPs). Entre éstas, las MMPs-13, -14, -2 y -9, son producidas por el tejido óseo y degradan sinérgicamente el colágeno tipo I, principal componente de los tejidos periodontales, y gelatina, producto de la degradación y desnaturación del colágeno. El objetivo de este estudio fue determinar el patrón de expresión de las MMPs-2, -9, -13 y -14 en granulomas periapicales (GPAs), quistes radiculares inflamatorios (QRIs) y ligamento periodontal sano (LS). Materiales y Métodos: Se seleccionaron 12 pacientes con diagnóstico clínico de PAa e indicación de exodoncia a partir de los cuales se obtuvieron biopsias de lesiones periapicales (LPAs). Como controles, se seleccionaron 7 individuos con indicación de exodoncia de premolares por ortodoncia, obteniéndose biopsias de LS. Se efectuó el diagnóstico anátomo-patológico de los especímenes y se caracterizó la expresión de las MMPs en estudio mediante inmunohistoquímica. Resultados: Las MMPs en estudio sólo se detectaron en GPAs y QRIs, y se inmunolocalizaron principalmente en el infiltrado inflamatorio de éstos. Adicionalmente, la MMP-2 se identificó en fibroblastos del tejido conectivo. Conclusiones: MMPs-2, -9, -13 y -14 se expresan predominantemente en el infiltrado inflamatorio de las LPAs y no en LS, y por tanto se sugiere la participación de estos mediadores en la patogénesis de la PAa.

Asymptomatic apical periodontitis (aAP) is an infectious disease characterized by perirradicular bone destruction associated with chronic inflammation and release of inflammatory mediators, such as matrix metalloproteinases (MMPs). MMPs-13, -14 and -2, -9 are bone-expressed enzymes that can synergistically degrade collagen I, the main component of periodontal extracellular matrix, and gelatin, the product of degradation and denaturation of collagen. The aim of this study was to characterize the expression pattern of MMPs-2, -9, -13, and -14 in periapical granulomas (PGs), radicular cysts (RCs) and healthy periodontal ligament (PDL). Materials and Methods: Individuals with clinical diagnosis of aAP and indication of extraction were selected (N=12), and biopsies of periapical lesions (PLs) were obtained. For controls, 7 subjects with indication of premolar extraction for orthodontic reasons were selected, and PDL biopsies were obtained. Samples were diagnosed by anatomopathological examination and immunohistochemical staining was carried out to characterize MMPs expression. Results: MMPs-2, -9, -13 and -14 detection was limited to PLs and were localized mainly to inflammatory infiltrate on both, PGs and RCs. Additionally, MMP-2 was immunolocalized to fibroblasts from the connective tissue. Conclusions: Whereas MMPs-2, -9, -13 and -14 were not detected in healthy periodontal ligament, they were highly expressed on inflammatory infiltrate from PGs and RCs, suggesting a role of these mediators in aAP pathogenesis.

Análise da influência de proteínas da matriz extracelular e fibrinogênio na formação de biofilme por cepas de Enterococcus faecalis isoladas de infecção endodôntica primária / Analysis of influence of extracellular matrix proteins and fibrinogen in biofilm formation by Enterococcus faecalis strains isolated from primary endodontic infection

Enterococcus faecalis é um patógeno oportunista com peculiar potencial para a manutenção da infecção perirradicular endodôntica após o preparo químico-mecânico do sistema de canais radiculares. Adicionalmente, possui aptidão para desenvolver-se em biofilme e apresenta em sua parede celular adesinas compatíveis com substratos colagênicos, como a composição da matriz extracelular da dentina e dos túbulos dentinários. Esse estudo propôs-se a caracterizar geneticamente 23 amostras de E faecalis isoladas de infecções endodônticas primárias através da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR, do inglês Polymerase Chain Reaction) e investigar a influência de COL I (colágeno tipo I), FN (fibronectina) e fibrinogênio (FBG) na formação de biofilme em superfície abiótica. Assim, após a sensibilização de ¾ dos poços de placas de poliestireno estéreis com 50 µl da solução de proteína de matriz (COL I, FN e FBG) na concentração de 1mg/ml, transferiu-se 50µl de suspensão bacteriana (1,5 x 108 bact/mL) correspondente a cada amostra, de modo a preencher tanto os poços sensibilizados como os não sensibilizados. A quantificação da formação de biofilme foi realizada por meio de leitura por densidade óptica, cujos resultados revelaram que houve formação de biofilme por todas as em superfície abiótica, porém com diferentes graus de intensidade. Todas as cepas foram identificadas geneticamente como Enterococcus faecalis e a presença do gene gelE foi dominante. Contudo, nenhuma apresentou amplificação para os genes esp e agg, e, apesar de 73,9% das amostras amplificarem para o gene ace, apenas 2 cepas (P7 e P75) isoladas de infecções endodônticas primárias tiveram aumento de formação de biofilme na presença de COL I (P<0,05). Embora a presença de FBG não forneça subsídio estatisticamente significante para a formação de biofilme, COL I e FN influenciaram na redução da formação do biofilme para a maior parte das amostras. É possível que a capacidade de formação de biofilme inerente ao E. faecalis e a afinidade para FN e COL I através da expressão gênica de ace contribuam substancialmente para a manutenção desse micro-organismo no ambiente radicular mesmo após o tratamento endodôntico minucioso.

Enterococcus faecalis is an opportunistic pathogen with peculiar potential to maintain the periradicular endodontic infection even after chemical-mechanical preparation of the root canal system. In addition, it has the ability to develop into biofilms and presents in your cell wall adhesins compatible with collagenous substrates, as the composition of the extracellular matrix of the dentine and dentinal tubules. This study aims to characterize genetically 23 samples of E. faecalis isolated from primary endodontic infections by Polymerase Chain Reaction (PCR) technique and investigate the influence of collagen type I (COL I), fibronectin (FN) and fibrinogen (FBG) in biofilm formation on abiotic surface. Thus, after the sensitization of ¾ the wells of sterile microtiter plates with 50 ul of matrix protein solution (COL I and FN FBG) at a concentration of 1mg / ml, was transferred 50mL of bacterial suspension (1.5 x 108 bact / ml) corresponding to each sample in order to fill both wells sensitized and non-sensitized. Quantification of biofilm formation was performed by optical density, so the results showed that there were biofilm formation by all strains on abiotic surface, but with different degrees of intensity. All strains were genetically identified as Enterococcus faecalis and the presence of gelE gene was prevalent. However, none showed amplification for the esp and agg gene, and, while 73.9% of the samples for amplifying ace gene, only 2 strains (P7 and P75) isolated from primary endodontic infections they had increased biofilm formation in the presence of COL I (P <0.05). Although the presence of FBG no provides significant support for the biofilm formation, COL I and FN were relevant influence in the reduction of biofilm formation for most of the samples. It is possible that the biofilm-forming ability inherent in E. faecalis and affinity for FN and COL I through ace gene expression contribute substantially to maintain of this microorganism in the root environment even after thorough endodontic treatment.

Apicoformación en dientes permanentes jóvenes / Apexification in young permanent teeth

La endodoncia regenerativa desarrolla técnicas basadas en ingeniería de tejidos para reponer tejidos perdidos. Con el desarrollo del conocimiento actual de la biología molecular, la microbiología y la genética, entre otras disciplinas, estamos en condiciones de introducirnos en el conocimiento de las cascadas de señales intracelulares desencadenadas por los sistemas complejos autoorganizados en sus procesos de autoreparación. Esto nos permite definir los pasos que debemos efectuar para la regeneración ad integrum de los tejidos que conforman el sistema de inserción dental

O papel da matriz extracelular na cicatrização de feridas bucais / Extracellular matrix role on the wound healing of oral lesions

A matriz extracelular (MEC) é uma estrutura complexa que proporciona o arcabouço que sustenta as células nos tecidos de todos os mamíferos. Uma contínua reconstrução e mudança nos constituintes da MEC ocorrem normalmente durante o processo de reparo de uma ferida. Assim, pode-se afirmar que a cicatrização é uma integração dinâmica que envolve células, MEC e mediadores solúveis. Dessa maneira, a cicatrização depende não só das células e polipeptídeos disponíveis, mas do microambiente da matriz extracelular (MEC). Devido à imensa gama de fatores de origem local ou sistêmica, exógena ou endógena, certamente ocorrem modificações muito mais complexas e profundas nos componentes da MEC e suas inter-relações com as células envolvidas no processo de reparação de feridas bucais, o que influencia a qualidade e quantidade de tecido reparador em cada tipo de ferimento.

Extracellular matrix (ECM) is a complex structure which supports and maintains all the cells organized in tissues in mammalians. A continuous reconstruction and change of the ECM components normally occur during the repair of injured tissue. Thus, it can be affirmed that wound healing is a dynamic integration among cells, ECM and soluble mediators. So it depends not only on the available polypeptides and cells, but especially on the micro environment of the ECM. Because of the enormous endogenous and exogenous, local and systemic factors related, many complex and profound modifications certainly occur in the components of the ECM and also in their relation with all the cells involved in oral lesion repair. These factors influence the quality and quantity of the repairing tissue in each type of lesion.

Experiência inicial no tratamento endoscópico de fístulas gastrocutâneas pós-gastroplastia vertical redutora através da aplicação de matriz acelular fibrogênica / Endoscopic placement of a plug made of acellular biomaterial: a new technique for the repair of gastric leak after Roux-en-Y gastric bypass

RACIONAL: A gastroplastia redutora à Capella, que combina técnicas restritiva e disabsortiva, é o procedimento bariátrico mais realizado no Brasil. Uma das complicações mais temidas desta operação é a fístula gastrocutânea que ocorre na linha de grampeamento vertical da neocâmara. O tratamento inicial consiste em drenagem adequada, suporte nutricional, bloqueio da produção de ácido e antibioticoterapia. Em 20 por cento a 30 por cento dos casos, a fístula tomará curso crônico. Nestes casos, vários tratamentos endoscópicos têm sido sugeridos. OBJETIVO: Descrever a técnica e os resultados do tratamento endoscópico das fístulas gastrocutâneas decorrentes de operações bariátricas através da aplicação de matriz acelular fibrogênica. MÉTODOS: Nesta série de casos, descrevem-se 25 pacientes com esta complicação tratados de maneira pioneira através da aplicação endoscópica de matriz acelular fibrogênica. O tempo entre o diagnóstico da fístula e a primeira sessão do tratamento endoscópico variou de 4 a 25 semanas, mediana: 7 semanas). RESULTADOS: Dos 25 pacientes, 20 (80 por cento) tiveram a fístula fechada pelo método. Seis deles com uma única sessão (30,0 por cento), 11 necessitaram de duas aplicações (55,0 por cento) e 3 pacientes, de uma terceira sessão (15,0 por cento) para a obliteração do trajeto fistuloso. Não houve complicações relacionadas ao procedimento. CONCLUSÃO: O uso de matriz fibrogênica para o tratamento endoscópico da fístula gástrica após operação de Capella é método seguro e eficaz, sendo sua principal limitação o número de sessões necessárias.

BACKGROUND: Roux-en-Y gastric bypass is one of the most commonly performed bariatric surgeries in Brazil. Gastric leaks are relatively uncommon and potentially dangerous complications. The initial management of gastric leaks consists in adequate drainage, nutritional support, antibiotics and acid suppression. In almost 30 percent of the cases the fistula will become chronic. AIM: A novel peroral endoscopic treatment of gastric leaks in Roux-en-Y gastric bypassed patients is presented. METHODS: An acellular biomaterial was endocopically placed in the fistulous orifice in order to promote healing and avoid surgery in 25 patients. The time between fistula diagnosis and endoscopic treatment varied from 4 to 25 weeks (median: 7 weeks). RESULTS: Endoscopic treatment was successful in 20 (80 percent) patients. Fistula closure was obtained after one, two and three sessions in 6 (30 percent), 11 (55 percent) and 3 (15 percent) patients, respectively. No procedure related complications were observed. CONCLUSION: Endoscopic repair of gastric leak after Roux-en-Y gastric bypass by using an acellular biomaterial is safe and effective. However two or three endoscopic sessions are usually needed.

Expressão imuno-histoquímica de colágeno IV, tenascina-C e fibronectina em lesões centrais e periféricas de células gigantes / Immunohistochemical expression of collagen IV, tenascin-C and fibronectinin central and peripheral giant cell lesions

Introdução - As lesões centrais e periféricas de células gigantes constituem um grupo de entidades patológicas que apesar de apresentarem características histopatológicas semelhantes, possuem etiologia e natureza incompletamente elucidadas. Material e Métodos - Procedeu-se análise imuno-histoquímica em 8 casos de lesões periféricas de células gigantes (LPCGs) e 16 casos de lesões centrais de células gigantes (LCCGs), obtidos dos arquivos do Serviço de Anatomia Patológica do Departamento de Odontologia da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, quanto à expressão e distribuição das proteínas da matriz extracelular colágeno IV, tenascina-C e fibronectina. Resultados - A análise dos espécimes revelou expressão descontínua de colágeno IV na membrana basal subepitelial das LPCGs, comumente associadas às áreas de infiltrado inflamatório, bem como, em membrana basal perivascular de LPCGs e LCCGs, com padrão contínuo, diminuindo de intensidade da periferia para o centro das lesões. A tenascina-C exibiu imunorreatividade na matriz extracelular intersticial, nos padrões reticular e fibrilar, com distribuição predominantemente dispersa e não uniforme, nas lesões pesquisadas. A fibronectina demonstrou expressão imuno-histoquímica semelhante entre LPCGs e LCCGs, exibindo distribuição uniforme por toda a matriz extracelular intersticial, com padrão reticular e fibrilar, freqüentemente associados à presença de células gigantes multinucleadas e células mononucleadas. Conclusão - Os resultados obtidos não revelaram diferenças significativas na expressão imuno-histoquímica das proteínas, entre as lesões estudadas.

Introdution - The central and peripheral giant cells lesions represent a group of pathological entities that despite exhibiting similar histopatological features, etiology and nature are not entirely clear. Methods - It was performed an immunohistochemical analysis of 8 cases of peripheral giant cell lesion (PGCLs) and 16 cases of central giant cell lesion (CGCLs) obtained from the archives of Surgical Oral Pathology of Federal University of Rio Grande do Norte, in relation to expression and distribution of extracellular matrix proteins collagen IV, tenascin-C and fibronectin. Results - The specimens revealed discontinuous expression of collagen IV in epithelial basement membrane of PGCLs, commonly associated with areas showing inflammatory cells. Additionally, collagen IV was observed in vascular basal membrane of PGCLs and CGCLs, showing continuous pattern, fading from periphery to center areas. Tenascin-C expression was verified in extracellular matrix displaying reticular and fibrillar patterns and predominantly diffuse and heterogeneous distribution both in PGCLs and CGCLs. Immunohistochemical expression of fibronectin was observed equally in PGCLs and CGCLs, exhibiting a uniform distribution through extracellular matrix, with reticular and fibrillar patterns, mainly in the neighborhood of mononucleated and multinucleated cells. Conclusion - The results obtained demonstrated no significant differences in the pattern of expression of collagen IV, tenascin-C and fibronectin among PGCLs and CGCLs studied.

Contribuição do estudo do biofilme dentário para o tratamento das doenças periodontais / Contribution of dental biofilm study to the treatmente of periodontal diseases

Microrganismos tem uma tendência bastante forte de se associar a superfícies, sejam estas inertes ou móveis. Uma vez ligados a uma superfície, denominada substrato, é desencadeado um processo elaborado de formação de microcolônias que se estruturam em comunidades organizadas e funcionais. Cada bactéria destas comunidades vive em um cooperativismo metabólico. Este complexo é chamado de biofilme e está presente na maioria das superfícies molhadas da natureza (tecidos humanos, próteses médicas, tubulação de água), podendo causar vários problemas ao meio onde se desenvolve. A placa dentária é um biofilme denominado supragengival quando se acumula na superfície dentária coronariamente à margem gengival e subgengival quando se associa à superfície dentária e a tecidos moles apicalmente à margem gengival. Estas comunidades extremamente estruturadas onde cada elemento desempenha um papel em prol do bem comum são responsáveis por doenças nos seres humanos. Os biofilmes que colonizam as superfícies dentárias e os tecidos orais podem provocar cáries, gengivites e perodontites, que estão entre as infecções mais comuns que afligem os homens. Os microorganismos pertencentes a estas estruturas demostram certa resistência a agentes antimicrobianos e mecanismos de defesa do hospedeiro, o que torna estas infecções difíceis de serem tratadas de forma eficaz. Entender o biofilme, sua composição, estrutura, organização, atividade e como se relaciona com agentes químicos pode ser um meio para melhorar o combate das patologias originadas por ele

Caracterização imuno-histoquímica de lesão híbrida de ameloblastoma desmoplásico e convencional / Hybrid lesion of desmoplastic and conventional ameloblastoma: immunohistochemical aspects

O ameloblastoma é uma neoplasia odontogênica benigna comumente encontrada nos ossos maxilares. Histologicamente, mostra diversos padrões, incluindo a ameloblastoma plexiforme e folicular. Quando estes padrões histológicos coexistem com um ameloblastoma que exibe abundante desmoplasia, são então denominados de lesão æhíbrida" de ameloblastoma desmoplásico e convencional. No presente trabalho, nos propomos a relatar um caso de lesão híbrida de ameloblastoma desmoplásico e convencional destacando os aspectos imuno-histoquímicos relativos a expressão das proteínas da matriz extracelular (tenascina, fibronectina e colágeno I).

Ameloblastoma is a benign epithelial odontogenic tumor and is the most commonly encountered odontogenic tumor in the jaws. Histologically, ameloblastomas occur in different patterns, including plexiform pattern and follicular pattern. "Hybrid " lesion of ameloblastoma is a tumor variant in which histologically, areas of follicular or plexiform ameloblastoma coexist with characteristic areas of ameloblastoma exhibiting pronounced stromal desmoplasia (desmoplastic ameloblastoma). The purpose of this article is to present a case of "hybrid" lesion of desmoplastic ameloblastoma (AD) and conventional, and investigate extracellular matrix proteins such as tenascin, fibronectin, and type I collagen.

Engenharia de tecidos com células-tronco de dentes decíduos e scaffolds injetáveis e a formação de polpa dental funcional / Stem cells from exfoliated deciduous teeth and self-assembling nanofiber and recombinant human collagen I scaffolds allows for the engineering of a functional dental pulp

A translação da regeneração pulpar com células tronco para a clinica requerirá o uso de scaffolds injetáveis. O objetivo foi estudar o comportamento de células tronco obtidas de dentes decíduos exfoliados (SHED) injetados em canais radiculares de pré-molares humanos com ápice aberto com scaffold de colágeno recombinante humano tipo I (rhC-I) e a base de nanofibras auto-organizáveis (SA). Para determinar a viabilidade e potencial de diferenciação de SHED in vitro, raízes nao instrumentadas foram posicionadas com o ápice em meio de cultura. SHED ressuspendida em rhC e SA foram injetadas nos canais (n=24, 5X105 células/mL). Os controles foram SHED e scaffolds sozinhos. Marcadores para diferenciação odontoblastica (DSPP, DMP-1 e MEPE) foram avaliados semanalmente por RT-PCR por 28 dias. Para avaliar a diferenciação odontoblástica e formação de tecido in vivo, SHED transuzida com GFP foram injetadas em canais radiculares (n=8, 106 célulass/mL) utilizando os mesmos grupos e implantadas subcutaneamente em camundongos imunodeprimidos. O controle (C+) foi um pré-molar humano extraído. Analise estatística foi feita com ANOVA (=0.05). Os marcadores de diferenciação odontoblástica aumentaram para SA e rhC-I mas nao nos controles. Crescimento de tecido pulpar-símile ( do que 60% do comprimento da raiz) foi observado em 75% dos implantes para SA e rhC-I e 0% nos controles. Analise de imunohistoquimica para GFP confirmou a origem tecidual a partir de SHED. PCNA e ensaio de TUNEL mostraram alta ativiade proliferativa e poucas células apoptóticas. Injeções de tetraciclina evidenciaram neoformação de dentina. A densidade microvascular e nomero de odontoblastos delineando a dentinta foi similar em rhC-I, SA e C+. A associação de SHED com scaffolds injetáveis foi capaz de originar um tecido pulpar capaz de produzir dentina e constitui um passo a mais frente ao objetivo de regeneração pulpar em pacientes humanos.

The translation of dental pulp regeneration with stem cells to the clinic will require the use of injectable scaffolds. The aim was to study the behavior of stem cells from exfoliated deciduous teeth (SHED) injected in the root canal of opened-apex human premolars with either recombinant human collagen I (rhC-I) or self assembling nanofiber (SA) scaffolds. To assess in vitro SHED viability and differentiative potential, non-instrumented roots were set with the apex in culture media. SHED were mixed in rhC-I or SA and injected into canals (n=24, 5X105 cells/mL). Controls were SHED or scaffolds alone. Odontoblastic differentiation markers (DSPP, DMP-1 and MEPE) were assessed weekly by RT-PCR for 28 days. To evaluate odontoblast differentiation and tissue formation in vivo, SHED transduced with GFP were injected in canals (n=8, 106 cells/mL) using same groups and implanted subcutaneously in immunodeficient mice. Positive control (C+) was extracted premolar. Statistic was done with ANOVA (=0.05). Odontoblastic differentiation markers increased in SA and rhC-I but not in controls. Pulp-like tissue growth ( than 60% of root length) was observed in 75% of implants for SA and rhC-I and 0% in controls. GFP staining confirmed SHEDs tissue origin. PCNA staining and TUNEL assay showed high proliferative activity and few apoptotic cells. Tetracycline injections showed newly formed dentin. Microvessel density and odontoblastic-like cell number lining dentin were similar in rhC-I, SA and C+. Injectable scaffolds and SHED allowed for the engineering of a pulp-like tissue and constitute one step forward towards the goal of dental p ulp regeneration in human patients.

A interface célula-matriz extracelular-biomaterial e a biocompatibilidade de implantes de titânio / The cell-extracellular matrix-biomaterial interface and the biocompatibility of titanium implants

O conhecimento acumulado na última década sobre as interações mecanoquímicas entre implantes de titânio e tecidos animais revela o papel crucial desempenhado pela interface célula-matriz extracelular (MEC)-titânio na biocompatibilidade do último. Nesse contexto, e focalizando a interação células ósseas-MEC-titânio, esta breve revisão discute e apresenta alguns dados originais relativos ao comportamento de células formadoras de osso ou osteoblastos sobre superfícies de titânio, sob a intermediação de componentes da matriz extracelular. Como enfatizado em publicações recentes, o conhecimento subjacente a este tema é relevante para as modernas clínicas odontológica, médica e veterinária, assim como para empresas envolvidas no desenho e no desenvolvimento de implantes de titânio.

The accumulated knowledge during last decade on the mechanochemical interactions between titanium implants and animal tissues has point out the crucial role played by the cell-extracellular matrix (ECM)-titanium interface in the biocompatibility of the last. In this context, and specifi cally focusing the bone cells-ECM-titanium interaction relationships, this brief revision includes a discussion and some original data all concerning the behavior of bone-forming cells or osteoblasts onto titanium surfaces under the intervention of extracellular matrix components. As emphasized in recent publications, the knowledge underlying this subject is relevant for the modern dental, medical and veterinary clinics, as well as to companies involved in both design and development of titanium implants.

Estudo da descelularização tecidual na produção de arcabouços biológicos para enxerto / Study of the decellularized tissue scaffolds in the production of biological grafts

A regeneração de defeitos ósseos com perda de substância permanece um desafio terapêutico na área médica. É consenso ser o osso autógeno, o material mais adequado para esta finalidade, porém há limitações até para o seu uso, especialmente a quantidade insuficiente no próprio doador. Pesquisas de engenharia tecidual evidenciam que os componentes da matriz extracelular (MEC) são geralmente conservados entre as diferentes espécies sendo bem toleradas, mesmo em receptores xenógenos. Assim, diversos estudos têm sido realizados na busca por um arcabouço substituto do osso autógeno através da técnica de descelularização. Para a obtenção destes arcabouços, os tecidos devem passar por um processo de remoção celular, que cause mínimos efeitos adversos na composição, atividade biológica e integridade mecânica na matriz extracelular remanescente. Entretanto, há controvérsias acerca do melhor protocolo de descelularização, já que cada um desses tratamentos interfere de maneira diferente na composição bioquímica, ultraestrutura e comportamento mecânico da matriz extracelular, afetando o tipo de resposta imunológica ao material. Ademais o baixo arsenal de pesquisas envolvendo a descelularização de tecidos ósseos representa mais um obstáculo à chegada de um consenso protocolar. O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência dos métodos de descelularização na produção de arcabouços biológicos a partir de órgãos ósseos de camundongos, visando sua utilização para enxertia. Trata-se de um estudo laboratorial, sequenciado em duas etapas distintas. Na primeira fase foram avaliadas 12 hemi-calvárias de camundongos, divididas em três grupos (n=4) e submetidas a três diferentes protocolos de descelularização (SDS [Grupo I], Tripsina [Grupo II], Triton X-100 [Grupo III]). Buscou-se identificar aquele que promove a mais eficiente remoção celular, simultaneamente a melhor preservação estrutural da MEC óssea. Para tanto, foi realizada análise quantitativa do número de células remanescentes e análise descritiva dos arcabouços, possibilitadas por microscopia. Na segunda etapa, foi realizado um estudo in vitro para avaliar a adesão de células mesenquimais da medula óssea de camundongos, cultivadas sobre arcabouços previamente descelularizados. Através da contagem manual de células nos arcabouços, verificou-se total remoção celular no Grupo II, remoção praticamente completa no Grupo I, e permanência de células e remanescentes no Grupo III. Os achados permitiram observar diferença significativa apenas entre os Grupos II e III (p=0,042). Melhor manutenção da estrutura colágena foi obtida com o Triton X-100, ao passo que a descelularização com Tripsina foi responsável pelas maiores alterações estruturais nos arcabouços. Após o cultivo, a adesão de células mesenquimais só foi observada nas calvárias descelularizadas com Tripsina. Devido ao potencial de remoção total das células e à capacidade de permitir a adesão destas, o protocolo baseado no uso da Tripsina (Grupo II) foi considerado o mais adequado para uso em experimentos futuros, que envolvam enxertia de arcabouços ósseos descelularizados. (AU)

The regeneration of bone defects with loss of substance remains as a therapeutic challenge in the medical field. There are basically four types of grafts: autologous, allogenic, xenogenic and isogenic. It is a consensus that autologous bone is the most suitable material for this purpose, but there are limitations to its use, especially the insufficient amount in the donor. Surveys show that the components of the extracellular matrix (ECM) are generally conserved between different species and are well tolerated even in xenogenic recipient. Thus, several studies have been conducted in the search for a replacement for autogenous bone scaffold using the technique of decellularization. To obtain these scaffolds, tissue must undergo a process of cell removal that causes minimal adverse effects on the composition, biological activity and mechanical integrity of the remaining extracellular matrix. There is not, however, a conformity among researchers about the best protocol for decellularization, since each of these treatments interfere differently in biochemical composition, ultrastructure and mechanical properties of the extracellular matrix, affecting the type of immune response to the material. Further down the arsenal of research involving decellularization bone tissue represents another obstacle to the arrival of a consensus protocol. The present study aimed to evaluate the influence of decellularization methods in the production of biological scaffolds from skeletal organs of mice, for their use for grafting. This was a laboratory study, sequenced in two distinct stages. In the first phase 12 mice hemi-calvariae were evaluated, divided into three groups (n = 4) and submitted to three different decellularization protocols (SDS [group I], trypsin [Group II], Triton X-100 [Group III]). We tried to identify the one that promotes most efficient cell removal, simultaneously to the best structural preservation of the bone extracellular matrix. Therefore, we performed quantitative analysis of the number of remaining cells and descriptive analysis of the scaffolds, made possible by microscopy. In the second stage, a study was conducted to evaluate the in vitro adhesion of mice bone marrow mesenchymal cells, cultured on these scaffolds, previously decellularized. Through manual counting of cells on scaffolds there was a complete cell removal in Group II, Group I showed a practically complete cell removal, and Group III displayed cell remains. The findings allowed us to observe a significant difference only between Groups II and III (p = 0.042). Better maintenance of the collagen structure was obtained with Triton X-100, whereas the decellularization with Trypsin was responsible for the major structural changes in the scaffolds. After culture, the adhesion of mesenchymal cells was only observed in specimens deccelularized with Trypsin. Due to the potential for total removal of cells and the ability to allow adherence of these, the protocol based on the use of Trypsin (Group II) was considered the most suitable for use in future experiments involving bone grafting decellularized scaffolds. (AU)

Expressão imuno-histoquimica metaloproteinases -1, -2 e -9 em ameloblastoma sólido e tumor odontogênico adendomatóide / imuno-histoquímica expression of metaloproteinase -1, -2 and -9 in ameloblastoma solid and odontogênico tumor adenomatóide

O ameloblastoma e o tumor odontogênico adenomatóide são tumores odontogênicos derivados do epitélio odontogênico que possuem comportamentos distintos. Na tentativa de compreender a interação existente entre as células tumorais e a matriz extracelular, o presente trabalho teve como objetivo avaliar e comparar a expressão das metaloproteinases-1 (MMP-1), -2 (MMP-2) e -9 (MMP-9), através da técnica imuno-histoquímica em 20 casos de ameloblastoma e 10 de tumor odontogênico adenomatóide. A MMP-1 teve uma marcação predominante nos dois tumores, sendo observada tanto no parênquima como no estroma de todos os tumores estudados. Para a MMP-2, observou-se uma expressão variada, sendo 80% e 60% das células tumorais imunorreativas nos ameloblastomas e tumores odontogênicos adenomatóides, respectivamente. Em relação às células do mesênquima, 65% dos ameloblastomas e 80% tumores odontogênicos adenomatóides exibiram positividade. Verificou-se imunoexpressão para a MMP-9 nas células parenquimatosas e estromais em todos os casos, sendo que nos ameloblastomas, houve o predomínio de menos de 50% das células imunomarcadas; enquanto que em 60% dos tumores odontogênicos adenomatóides mais de 50% das células apresentaram positividade. Observou-se diferença estatisticamente significante na expressão da MMP-1 em relação à MMP-2 e -9 nos ameloblastomas (p<0,001). A análise estatística não pôde ser aplicada para os tumores odontogênicos adenomatóides, porém verificou-se tendência de maior expressão da MMP-1 em relação às outras MMPs avaliadas. Os resultados deste estudo sugerem que as MMPs-1, -2 e -9 estão relacionadas com crescimento e progressão dos tumores analisados e, particularmente no ameloblastoma, sua maior agressividade pode resultar, em parte, pela participação também do estroma presente de forma bem mais marcante permeando o parênquima tumoral e sendo fonte também das proteases estudadas (AU).

Ameloblastoma and adenomatoid odontogenic tumor are odontogenic tumors arising from the odontogenic epithelium with distinct clinical behavior. In attempt to comprehend the interaction between the odontogenic tumor cells and the extracellular matrix, the present work evaluated and compared the immunohistochemical expression of the matrix metalloproteinases-1 (MMP-1), -2 (MMP-2) and -9 (MMP-9) in 20 cases of ameloblastoma and 10 adenomatoid odontogenic tumor. MMP-1 exhibited exuberant expression in the parenchyma and in the stroma of both studied tumors, while the MMP-2 showed varied expression with about of 80% and 60% of the neoplastic cells exhibiting positivity in the ameloblastoma and adenomatoid odontogenic tumor, respectively. With relation to the MMP-2 expression by the mesenchymal cells, it was observed that 65% of the ameloblastoma and 80% of the adenomatoid odontogenic tumor were positive. The immunoreactivity of MMP-9 was detected in all studied cases, although its expression had occurred predominantely in less than 50% of the parenchyma cells of the ameloblastoma, while in about of 60% of the adenomatoid odontogenic tumor more than 50% of cells were positive. The mesenchymal cells were positive to MMP-9 in 65% of the ameloblastoma and in 80% of the adenomatoid odontogenic tumor, respectively. Statistically significant difference was observed to the MMP-1 expression with relation to MMP-2 and MMP-9 in the ameloblastoma (p < 0.001). It was not possible to perform statistical analysis to the cases of adenomatoid odontogenic tumor, however there was a tendency toward a differential expression of the MMP-1 with relation to other studied MMPs. These results suggest that MMP-1, - 2 and -9 are implicated in the growth and progression of both tumors analyzed as well as the more pronounced participation of the stroma in the ameloblastoma could together to be related to the higher clinical aggressiveness (AU).