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1.
Biosens Bioelectron ; 35(1): 44-49, 2012 May 15.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-22410489

RESUMO

We developed a simple and effective polydiacetylene-based, label-free multiplex DNA chip for the detection of various pathogenic microorganisms. A novel immobilization method of PDA vesicles on glass slides was exploited using α-cyclodextrin (α-CD). The surface topography of the efficiently immobilized PDA vesicles was confirmed using scanning electron microscopy (SEM) and atomic force microscopy (AFM). Then, oligonucleotides complementary to rRNAs of three pathogenic bacteria were conjugated to the PDA vesicles. Finally, crude lysate of pathogenic bacteria was applied to the PDA biochip. The pathogenic bacteria were specifically detected by DNA-RNA hybridization in an hour. The new PDA sensor was effective in detecting multiple pathogenic bacteria easily and accurately without rigorous purification, amplification, and labeling of their genetic components.


Assuntos
Análise de Sequência com Séries de Oligonucleotídeos/métodos , RNA Bacteriano/análise , Sequência de Bases , Técnicas Biossensoriais/métodos , Sondas de DNA/genética , Escherichia coli/genética , Escherichia coli/isolamento & purificação , Listeria monocytogenes/genética , Listeria monocytogenes/isolamento & purificação , Microscopia de Força Atômica , Microscopia Eletrônica de Varredura , Reação em Cadeia da Polimerase Multiplex/métodos , Hibridização de Ácido Nucleico , Polímero Poliacetilênico , Polímeros , Poli-Inos , RNA Bacteriano/genética , Salmonella enteritidis/genética , Salmonella enteritidis/isolamento & purificação
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