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ACS Sens ; 3(12): 2526-2531, 2018 12 28.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-30468073

RESUMO

We develop a novel amplified split aptamer sensor for highly sensitive detection and imaging of small molecules in living cells by using cationic block copolymer nanoparticles (BCNs) with entrapped fluorescent conjugated polymer as a delivery agent. The design of a split aptamer as the initiator of hybridization chain reaction (HCR) affords the possibility of enhancing the signal-to-background ratio and thus allows high-contrast imaging for small molecules with relatively weak interactions with their aptamers. The novel design of using fluorescent cationic BCNs as the nanocarrier enables efficient and self-tracking transfection of DNA probes. Results reveal that BCNs exhibit high fluorescence brightness allowing direct tracking of the delivery location. The developed amplified split aptamer sensor is shown to have high sensitivity and selectivity for in vitro quantitative detection of adenosine triphosphate (ATP) with a detection limit of 30 nM. Live cell studies show that the sensor provides a "signal on" approach for specific, high-contrast imaging of ATP. The DNA sensor based HCR system may provide a new generally applicable platform for detection and imaging of low-abundance biomarkers.


Assuntos
Aptâmeros de Nucleotídeos/química , Técnicas Biossensoriais/métodos , Nanopartículas/química , Polietilenoglicóis/química , Polivinil/química , Trifosfato de Adenosina/análise , Aptâmeros de Nucleotídeos/genética , Biomarcadores/análise , DNA/química , DNA/genética , Sondas de DNA/química , Sondas de DNA/genética , Fluorenos/química , Fluorenos/toxicidade , Corantes Fluorescentes/química , Corantes Fluorescentes/toxicidade , Células HeLa , Humanos , Sequências Repetidas Invertidas , Limite de Detecção , Microscopia de Fluorescência/métodos , Nanopartículas/toxicidade , Hibridização de Ácido Nucleico , Polietilenoglicóis/toxicidade , Polivinil/toxicidade
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