Newborn Screening for 5q Spinal Muscular Atrophy: Comparisons between Real-Time PCR Methodologies and Cost Estimations for Future Implementation Programs.

Since the approval of modifying therapies for Spinal Muscular Atrophy (SMA), several protocols aiming to screen SMN1 homozygous deletion in a neonatal context have been published. However, no work has compared different methodologies along with detailed implementation costs for centers where the neonatal screening of SMA has not yet been implemented. Therefore, our work compared different qualitative real-time PCR approaches for SMA screening and the estimated costs of test implementation. Using Brazilian blood samples, the presence and absence (P/A) and melt curve protocols were analyzed. MLPA was used as a confirmatory test. The costs were calculated for the simplex and multiplex tests plus equipment. The test workflow was based on the present experience and literature report. The accuracy of the P/A protocol was 1 (95% CI 0.8677-1) using dried blood spots (DBS). The melt curve protocol also achieved 100% concordance. The consumable costs ranged from USD 1.68 to 4.42 and from USD 2.04 to 12.76 per reaction, for the simplex and multiplex tests, respectively. The equipment acquisition costs ranged from USD 44,817.07 to 467,253.10, with several factors influencing this value presented. Our work presents a framework for decision-making, with a project demonstration of the different assays that will be useful in dealing with the issues of cost and availability of reagents. Moreover, we present a literature review and discussion of important concerns regarding treatment policies. We take the first step towards a future SMA NBS pilot program where it is not yet a reality.

Neuroprogenitor Cells From Patients With TBCK Encephalopathy Suggest Deregulation of Early Secretory Vesicle Transport.

Biallelic pathogenic variants in TBCK cause encephaloneuropathy, infantile hypotonia with psychomotor retardation, and characteristic facies 3 (IHPRF3). The molecular mechanisms underlying its neuronal phenotype are largely unexplored. In this study, we reported two sisters, who harbored biallelic variants in TBCK and met diagnostic criteria for IHPRF3. We provided evidence that TBCK may play an important role in the early secretory pathway in neuroprogenitor cells (iNPC) differentiated from induced pluripotent stem cells (iPSC). Lack of functional TBCK protein in iNPC is associated with impaired endoplasmic reticulum-to-Golgi vesicle transport and autophagosome biogenesis, as well as altered cell cycle progression and severe impairment in the capacity of migration. Alteration in these processes, which are crucial for neurogenesis, neuronal migration, and cytoarchitecture organization, may represent an important causative mechanism of both neurodevelopmental and neurodegenerative phenotypes observed in IHPRF3. Whether reduced mechanistic target of rapamycin (mTOR) signaling is secondary to impaired TBCK function over other secretory transport regulators still needs further investigation.

Publisher Correction: Discordant congenital Zika syndrome twins show differential in vitro viral susceptibility of neural progenitor cells.

The original PDF version of this Article contained errors in the spelling of Luiz Carlos Caires-Júnior, Uirá Souto Melo, Bruno Henrique Silva Araujo, Alessandra Soares-Schanoski, Murilo Sena Amaral, Kayque Alves Telles-Silva, Vanessa van der Linden, Helio van der Linden, João Ricardo Mendes de Oliveira, Nivia Maria Rodrigues Arrais, Joanna Goes Castro Meira, Ana Jovina Barreto Bispo, Esper Abrão Cavalheiro, and Robert Andreata-Santos, which were incorrectly given as Luiz Carlos de Caires Jr., UiráSouto Melo, Bruno Silva Henrique Araujo, Alessandra Soares Schanoski, MuriloSena Amaral, Kayque Telles Alves Silva, Vanessa Van der Linden, Helio Van der Linden, João Mendes Ricardo de Oliveira, Nivia Rodrigues Maria Arrais, Joanna Castro Goes Meira, Ana JovinaBarreto Bispo, EsperAbrão Cavalheiro, and Robert Andreata Santos. Furthermore, in both the PDF and HTML versions of the Article, the top panel of Fig. 3e was incorrectly labeled '10608-1' and should have been '10608-4', and financial support from CAPES and DECIT-MS was inadvertently omitted from the Acknowledgements section. These errors have now been corrected in both the PDF and HTML versions of the Article.

Discordant congenital Zika syndrome twins show differential in vitro viral susceptibility of neural progenitor cells.

Congenital Zika syndrome (CZS) causes early brain development impairment by affecting neural progenitor cells (NPCs). Here, we analyze NPCs from three pairs of dizygotic twins discordant for CZS. We compare by RNA-Seq the NPCs derived from CZS-affected and CZS-unaffected twins. Prior to Zika virus (ZIKV) infection the NPCs from CZS babies show a significantly different gene expression signature of mTOR and Wnt pathway regulators, key to a neurodevelopmental program. Following ZIKV in vitro infection, cells from affected individuals have significantly higher ZIKV replication and reduced cell growth. Whole-exome analysis in 18 affected CZS babies as compared to 5 unaffected twins and 609 controls excludes a monogenic model to explain resistance or increased susceptibility to CZS development. Overall, our results indicate that CZS is not a stochastic event and depends on NPC intrinsic susceptibility, possibly related to oligogenic and/or epigenetic mechanisms.

Discordant congenital Zika syndrome twins show differential in vitro viral susceptibility of neural progenitor cells

Congenital Zika syndrome (CZS) causes early brain development impairment by affecting neural progenitor cells (NPCs). Here, we analyze NPCs from three pairs of dizygotic twins discordant for CZS. We compare by RNA-Seq the NPCs derived from CZS-affected and CZS-unaffected twins. Prior to Zika virus (ZIKV) infection the NPCs from CZS babies show a significantly different gene expression signature of mTOR and Wnt pathway regulators, key to a neurodevelopmental program. Following ZIKV in vitro infection, cells from affected individuals have significantly higher ZIKV replication and reduced cell growth. Whole-exome analysis in 18 affected CZS babies as compared to 5 unaffected twins and 609 controls excludes a monogenic model to explain resistance or increased susceptibility to CZS development. Overall, our results indicate that CZS is not a stochastic event and depends on NPC intrinsic susceptibility, possibly related to oligogenic and/or epigenetic mechanisms.

Tratamento da insuficiência ventilatória nas distrofias musculares: uma revisão / Treatment of respiratory failure in muscular dystrophies: a review

As doenças neuromusculares (DNM) não são raras, ocorrendo com uma freqüência de 1: 1000 pessoas. Entre as distrofias musculares a proporção é de 1: 2000 pessoas, sendo que a sua forma mais grave, a Distrofia Muscular de Duchenne, esta proporção é de 1: 3500 meninos. A grande maioria dos portadores de DNM evolui, em algum momento de suas vidas, para um quadro de restrição ventilatória decorrente da fraqueza dos músculos respiratórios. É importante compreender a diferença entre a insuficiência respiratória daqueles que possuem musculatura respiratória normal, atingidos por processos pulmonares, da insuficiência ventilatória dos doentes com DNM para determinar as terapias distintas nas duas patologias. O tratamento de pessoas com hipóxia devido à doença pulmonar é a administração de oxigênio, já que nestes casos a hipóxia resulta da falência da oxigenação. Quando falamos de pacientes cujas alterações musculares levam a alterações na mecânica respiratória, dizemos que eles têm primariamente falência da ventilação. Nestes casos deve-se lembrar que o importante é VENTILAR e não oxigenar o paciente. A hipoxemia é secundária à hipercapnia, deste modo, a suplementação de oxigênio e a conseqüente normalização dos níveis de O2 fazem com que os quimiorreceptores periféricos da aorta e carótida não sejam estimulados e, portanto, não enviem informações ao controle central, que tentaria aumentar a freqüência respiratória. A hipercapnia torna-se, então, mais grave. O paciente torna-se comatoso (narcose pelo CO2) e, sequencialmente, evoluindo para parada respiratória. O objetivo deste estudo é revisar a literatura, abordando os seguintes aspectos: 1) a ventilação não invasiva como uma forma de tratamento dos distúrbios ventilatórios nas distrofias musculares 2) o impacto na qualidade de vida dos pacientes e 3) reforçar aos pediatras a diferença no tratamento da insuficiência respiratória e ventilatória para evitar a iatrogenia (AU)

Tratamento da insuficiência ventilatória nas distrofias musculares: uma revisão

As doenças neuromusculares (DNM) não são raras, ocorrendo com uma freqüência de 1: 1000 pessoas. Entre as distrofias musculares a proporção é de 1: 2000 pessoas, sendo que a sua forma mais grave, a Distrofia Muscular de Duchenne, esta proporção é de 1: 3500 meninos. A grande maioria dos portadores de DNM evolui, em algum momento de suas vidas, para um quadro de restrição ventilatória decorrente da fraqueza dos músculos respiratórios. É importante compreender a diferença entre a insuficiência respiratória daqueles que possuem musculatura respiratória normal, atingidos por processos pulmonares, da insuficiência ventilatória dos doentes com DNM para determinar as terapias distintas nas duas patologias. O tratamento de pessoas com hipóxia devido à doença pulmonar é a administração de oxigênio, já que nestes casos a hipóxia resulta da falência da oxigenação. Quando falamos de pacientes cujas alterações musculares levam a alterações na mecânica respiratória, dizemos que eles têm primariamente falência da ventilação. Nestes casos deve-se lembrar que o importante é VENTILAR e não oxigenar o paciente. A hipoxemia é secundária à hipercapnia, deste modo, a suplementação de oxigênio e a conseqüente normalização dos níveis de O2 fazem com que os quimiorreceptores periféricos da aorta e carótida não sejam estimulados e, portanto, não enviem informações ao controle central, que tentaria aumentar a freqüência respiratória. A hipercapnia torna-se, então, mais grave. O paciente torna-se comatoso (narcose pelo CO2) e, sequencialmente, evoluindo para parada respiratória. O objetivo deste estudo é revisar a literatura, abordando os seguintes aspectos: 1) a ventilação não invasiva como uma forma de tratamento dos distúrbios ventilatórios nas distrofias musculares 2) o impacto na qualidade de vida dos pacientes e 3) reforçar aos pediatras a diferença no tratamento da insuficiência respiratória e ventilatória para evitar a iatrogenia