New mixed lymphocyte microculture test harvested by a simple device developed for this purpose.

The methodology of the conventional mixed lymphocyte culture test has been simplified and miniaturized by developing a micromethod employing Terasaki trays with a final culture volume of 20 mul containing between 10,000 and 20,000 responding and stimulating cells each/culture. This represents one-tenth the cell concentration of the conventional mixed lymphocyte culture. For this new test, a special microharvester has been designed and developed. The test allows accurate and reproducible results giving a high level of discrimination between the different levels of response.

Microculture method for mixed lymphocyte cultures in the horse.

A miniaturized method for the mixed lymphocyte culture test in the horse is described. The test is performed in either round- or flat-bottom microtitration tissue culture plates. Concentrations of responsing and stimulating cells are varied, depening on the experiment. Significant discrimination between isogeneic and allogenic mixtures is possible after 120 hours' culture when cells are labeled ([3H]thymidine) for the last 16 to 18 hours of the test.

[Computer-assisted histocompatibility assessment in mixed lymphocyte culture (MLC)]. / Computergestützte Verträglichkeitsbeurteilung in der gemischten Lymphozytenkultur (MLC).

Analysis of the results of mixed lymphocyte culture (MLC) for compatibility testing preceding transplantation of bone marrow and other organs has so far required a vast input, both in terms of laboratory staff and work hours. We have developed a computer programme which performs this work rapidly. Graphics of the reaction patterns can be obtained, moreover, and these can prove a helpful tool in interpretation of the results.

Interferón gamma y factor necrosante de tumores/linfotoxina en el cultivo de linfocitos de candidatos y donadores de trasplante renal

Basados en el papel central que ejercen el interferón gamma (INF-gamma) y el factor necrazante de tumores (FNT) en los procesos de acitivación e inflamación y en los efectos antivirales de éstos, nos propusimos determinar sus niveles en cultivos mixtos de linfocitos (CML) de parejas de candidatos receptores/donadores de trasplante renal. Mediante radioinminoanálisis y ensayo biológico correlacionamos estos niveles con la presencia de episodios de rechazo e infección por Citomegalovirus (CMV) en el período postrasplante

Efecto de la gamaglobulina humana intravenosa sobre el cultivo mixto de linfocitos

Se estudio el efecto de la gamaglobulina humana intravenosa (GGHIV)(Sandoblogulin) sobre la reacción alogénica in vitro mediante el cultivo mixto de linfocitos (CML) en individuos normales. LA GGHIV en concentraciones superiores a 0.5 mg/ml inhibió en 61 por ciento y 99 por ciento la respuesta proliferativa. Se descartó que la inhibición fuese debida a factores citotóxicos presentes en la GGHIV comercial y/o deficit nutricional en los medios de cultivo. La incubación de los CML con 4 mg/ml de GGHIV durante 4 h/37 grados Centigrados produjo un 74 por ciento de inhibición. Se observó un efecto más acentuado al preincubar las células estimuladoras. La adición de GGHIV al CML, ocasionó una inhibición dependiente del tiempo de adición, mayor entre las 0 horas (h)(90 por ciento) y las 48 h (40 por ciento). El fenómeno inhibitorio no fue específico sobre la reacción alogénica puesto que también se encontró sobre la respuesta proliferativa a concavalina A (Con A) (63 por ciento), fitohematoglutinina A (PHA) (62 por ciento) y derivado protéico purificado (PPD) (84 por ciento). La inhibición sobre el CML, se revirtió parcialmente con la adición de 100 U de IL-2rH en las primeras 24h. La GGHIV redujo en un 79 por ciento la expresión del receptor de IL-2 al quinto día del CML. Los resultados de cuantificación de IL-1B en los sobrenadantes de CML con y sin GGHIV no arrojaron datos concluyentes. Se discuten los posibles mecanismos de acción y futuras utilidades de la GGHIV como inmunomoduladora en los transplantes de tejidos.