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1.
Genome Biol ; 14(11): R124, 2013 Nov 07.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-24200198

RESUMEN

ChIP-seq is an established manually-performed method for identifying DNA-protein interactions genome-wide. Here, we describe a protocol for automated high-throughput (AHT) ChIP-seq. To demonstrate the quality of data obtained using AHT-ChIP-seq, we applied it to five proteins in mouse livers using a single 96-well plate, demonstrating an extremely high degree of qualitative and quantitative reproducibility among biological and technical replicates. We estimated the optimum and minimum recommended cell numbers required to perform AHT-ChIP-seq by running an additional plate using HepG2 and MCF7 cells. With this protocol, commercially available robotics can perform four hundred experiments in five days.


Asunto(s)
Inmunoprecipitación de Cromatina/métodos , Secuenciación de Nucleótidos de Alto Rendimiento/métodos , Robótica/métodos , Animales , Inmunoprecipitación de Cromatina/instrumentación , Células Hep G2 , Secuenciación de Nucleótidos de Alto Rendimiento/instrumentación , Humanos , Hígado/metabolismo , Células MCF-7 , Masculino , Ratones , Ratones Endogámicos C57BL , Reproducibilidad de los Resultados , Robótica/instrumentación , Análisis de Secuencia de ADN
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