Cystatin C: immunoregulation role in macrophages infected with Porphyromonas gingivalis.

Background: Periodontitis is a chronic infectious disease, characterized by an exacerbated inflammatory response and a progressive loss of the supporting tissues of the teeth. Porphyromonas gingivalis is a key etiologic agent in periodontitis. Cystatin C is an antimicrobial salivary peptide that inhibits the growth of P. gingivalis. This study aimed to evaluate the antimicrobial activity of this peptide and its effect on cytokine production, nitric oxide (NO) release, reactive oxygen species (ROS) production, and programmed cell death in human macrophages infected with P. gingivalis. Methods: Monocyte-derived macrophages generated from peripheral blood were infected with P. gingivalis (MOI 1:10) and stimulated with cystatin C (2.75 µg/ml) for 24 h. The intracellular localization of P. gingivalis and cystatin C was determined by immunofluorescence and transmission electron microscopy (TEM). The intracellular antimicrobial activity of cystatin C in macrophages was assessed by counting Colony Forming Units (CFU). ELISA assay was performed to assess inflammatory (TNFα, IL-1ß) and anti-inflammatory (IL-10) cytokines. The production of nitrites and ROS was analyzed by Griess reaction and incubation with 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA), respectively. Programmed cell death was assessed with the TUNEL assay, Annexin-V, and caspase activity was also determined. Results: Our results showed that cystatin C inhibits the extracellular growth of P. gingivalis. In addition, this peptide is internalized in the infected macrophage, decreases the intracellular bacterial load, and reduces the production of inflammatory cytokines and NO. Interestingly, peptide treatment increased ROS production and substantially decreased bacterial-induced macrophage apoptosis. Conclusions: Cystatin C has antimicrobial and immuno-regulatory activity in macrophages infected with P. gingivalis. These findings highlight the importance of understanding the properties of cystatin C for its possible therapeutic use against oral infections such as periodontitis.

Resistance against two lytic phage variants attenuates virulence and antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa.

Background: Bacteriophage therapy is becoming part of mainstream Western medicine since antibiotics of clinical use tend to fail. It involves applying lytic bacteriophages that self-replicate and induce cell lysis, thus killing their hosts. Nevertheless, bacterial killing promotes the selection of resistant clones which sometimes may exhibit a decrease in bacterial virulence or antibiotic resistance. Methods: In this work, we studied the Pseudomonas aeruginosa lytic phage φDCL-PA6 and its variant φDCL-PA6α. Additionally, we characterized and evaluated the production of virulence factors and the virulence in a Galleria mellonella model of resistant mutants against each phage for PA14 and two clinical strains. Results: Phage φDCL-PA6α differs from the original by only two amino acids: one in the baseplate wedge subunit and another in the tail fiber protein. According to genomic data and cross-resistance experiments, these changes may promote the change of the phage receptor from the O-antigen to the core lipopolysaccharide. Interestingly, the host range of the two phages differs as determined against the Pseudomonas aeruginosa reference strains PA14 and PAO1 and against nine multidrug-resistant isolates from ventilator associated pneumonia. Conclusions: We show as well that phage resistance impacts virulence factor production. Specifically, phage resistance led to decreased biofilm formation, swarming, and type III secretion; therefore, the virulence towards Galleria mellonella was dramatically attenuated. Furthermore, antibiotic resistance decreased for one clinical strain. Our study highlights important potential advantages of phage therapy's evolutionary impact that may be exploited to generate robust therapy schemes.

Apoptosis en protozoarios y en la célula huésped inducida por protozoarios / Apoptosis in protozoa and in host cell induced by protozoa

La apoptosis es una forma de muerte celular programada que ha sido descrita como un mecanismo esencial en la organogénesis normal y en el desarrollo tisular, así como en funciones celulares propias de sistemas de renovación celular en organismos adultos. La apoptosis preserva la homeostasis, manteniendo un estricto balance entre la proliferación y la muerte celular. Se considera un fenómeno biológico generalizado, encontrado tanto en organismos multicelulares como en unicelulares; los mecanismos de inducción de la apoptosis, los patrones morfológicos y los sistemas reguladores son básicamente los mismos en estos organismos. Los protozoarios, además de sufrirla, son capaces de inducir o prevenir la apoptosis en las células de sus huéspedes, dependiendo de lo que más les convenga. Es interesante que los mecanismos de regulación y la maquinaria de muerte celular se hayan conservado evolutivamente. Ésta es una revisión del fenómeno de apoptosis en protozoarios y de apoptosis inducida en células del huésped que aloja a estos parásitos.

Búsqueda de Trichinella spiralis en carne de cerdo que se expende en carnicerías del Distrito Federal / Trichinella spiralis search in pork meat sold by butchers in Mexico City

Se realizó un estudio transversal de frecuencia con el objetivo de buscar larvas enquistadas viables de Trichinella spiralis en carne de cerdo que se comercializa en mercados públicos, carnicerías y tianguis (mercados ambulantes) de la ciudad de México. Se examinaron 500 muestras de carne de cerdo de l00 g cada una, 165 se obtuvieron en carnicerías establecidas, 208 en mercados públicos y 127 en tianguis ubicados en las 16 delegaciones políticas que conforman la ciudad de México. De cada muestra de carne se tomaron cinco fragmentos a diferentes niveles, todas las muestras fueron de 1 g cada una para su examen mediante triquinoscopía utilizando microscopios Carl Zeiss con objetivos seco-débil y seco-fuerte. Los 2 500 cortes de carne de cerdo examinados resultaron negativos a la presencia de larvas de Trichinella spiralis. Este resultado sugiere que es mínimo el riesgo de adquisición de triquinelosis para el consumidor de carne de cerdo que se expende en la ciudad de México.

Serología para detección de helmitos extraintestinales en niños con alteración neurológica / Serology for detection of extraintestinal helminthes in children with neurological disorders

Se estudiaron los sueros de 207 niños, con edades desde 20 meses hasta 17 años 11 meses, con diagnóstico clínico de parálisis cerebral infantil (PCI), de un centro de rehabilitación neurológica en la Ciudad de México, D.F. Objetivo. Detectar reactividad serológica contra antígenos de helmintos con localización extraintestinal, en niños con alteraciones neurológicas. Los antígenos utilizados se obtuvieron de: el metacéstodo de Taenia solium (cisticercos); Fasciola hepatica, Toxocara canis, Ascaris lumbricoides lumbricoides y Trichinella spiralis. Como prueba inmunológica se utilizó la hemaglutinación indirecta; se consideró como título de reactividad positivo la dilución 1:32 o mayor. Diecisiete (8.2 por ciento) de los sueros resultaron con títulos positivos a los siguientes antígenos: 4 (1.9 por ciento) al metacéstodo de T. solium, 1 (0.5 por ciento) a F. hepatica, 4 (1.9 por ciento) a T. canis, 4 (1.9 por ciento) a A. I. lumbricoides y 4 (1.9 por ciento) a T. spiralis. Con base en los resultados obtenidos se hacen recomendaciones al personal médico, paramédico y familiar de extremar las precauciones en la atención y cuidado de los niños con deficiencia motora

Inmunoepidemiología sobre ascariasis en escolares de la Ciudad de México / Immunoepidemiology of ascariasis on scholar children from Mexico City

El objetivo de este trabajo es determinar mediante hemaglutinación indirecta (HAI) la prevalencia de anticuerpos específicos contra un antígeno de larvas de Ascaris lumbricoides suum, presentes en el suero de niños que viven en la Ciudad de México. Se estudiaron 455 niños, con edades comprendidas entre 6 y 12 años, de una escuela de educación primaria ubicada en la colonia Santo Domingo, Delegación Coyoacán, D.F. Se formaron seis grupos de estudio, uno por cada grado escolar. Como antígeno se utilizó un extracto de larvas (L3 y L4) de Ascaris lumbricoides suum. Como prueba de inmunodiagnóstico se utilizó la técnica de hemaglutinación indirecta (HAI). Se consideraron como reacciones positivas los títulos de dilución de 1:32 o mayores, resultando así 21(4.6 por ciento). La mayor frecuencia (33.3 por ciento) se presentó en alumnos de 6o grado con siete seropositivos; le siguieron los alumnos de 1er grado con 23.8 por ciento. Respecto al género, la mayor frecuencia correspondió al femenino con 12 seropositivos (63.1 por ciento). La seropositividad reportada en este estudio (4.6 por ciento) la consideramos alta para una población infantil que habita en la delegación Coyoacán, D.F., la que por sus características de urbanización es desfavorable para la transmisión de las geohelmintiasis. Sin embargo, las deplorables condiciones socioeconómicas y de promiscuidad en las que se encuentra inmersa la población estudiada favorecen la transmisión.

Reactividad serológica a cinco antígenos de parásitos en adolescentes escolares / Serological reactivity to five parasites antigens on adolescent students

La presente investigación tuvo como objetivo detectar mediante hemaglutinación indirecta (HAI) reactividad serológica a antígenos de cinco helmintos, parásitos de localización extraintestinal: a) Metacéstodo de Taenia solium, b) Fasciola hepatica, c) Toxocara canis, d) Ascaris lumbricoides, e) Trichinella spiralis en una población estudiantil de enseñanza media superior. Se estudiaron 739 sueros de alumnos del 5§ grado de los nueve planteles de la Escuela Nacional Preparatoria de la Ciudad de México, D.F. De cada participante se obtuvieron 5 mL de sangre por punción venosa. Los sueros se procesaron mediante HAI en microplacas con los cinco diferentes antígenos. Se consideró como reacción positiva el título de dilución de 1:32 o mayor. Cuarenta de los 739 sueros analizados resultaron positivos a uno o más antígenos con una frecuencia total de 5.68 por ciento.De los cuarenta seropositivos 27 (3.65 por ciento) lo fueron a T. spiralis, 10 (1.35 por ciento) al metacéstodo de T. solium, 4 (0.54 por ciento) a F. hepatica y uno (0.13 por ciento) a T. canis. No se presentó reactividad con el antígeno de A. lumbricoides. El mayor número de sueros positivos correspondió a estudiantes del plantel 9 con 11 (26.19 por ciento). Los resultados obtenidos son marcadamente diferentes a lo que hemos observado en niños, en los que la mayor frecuencia de seropositividad se presenta contra antígenos de A. lumbricoides y T. canis, quizá debido principalmente a cambios hormonales, de alimentación y de hábitos de juego.

Inmunoepidemiología de la triquinelosis en niños de la Ciudad de México / The immunoepidemiology of trichinellosis in children in Mexico City

La triquinelosis constituye una enfermedad zoonótica cosmopolita de origen alimentario, la causa el nemátodo Trichinella spiralis. En México se ignora su frecuencia a pesar de los numerosos brotes epidémicos que se han presentado. El presente trabajo tiene como objetivo determinar, mediante hemaglutinación indirecta (HAI), la prevalencia de anticuerpos específicos contra antígenos de Trichinella spiralis, que se encontraron en el suero de una muestra de escolares que viven en la ciudad de México. Se analizaron 211 sueros de escolares de seis a doce años de edad, 111 (52.6 por ciento) varones y 110 (47.4 por ciento) niñas. Se formaron seis grupos de estudio, uno por cada grado escolar. El análisis inmunológico de los sueros se realizó con la microtécnica de hemaglutinación indirecta (HAI).Siete (3.3 por ciento) de los 211 sueros analizados resultaron positivos con títulos de dilución de 1:32; cinco sueros correspondieron a alumnos de 10 años de edad que cursaban el quinto grado escolar: cuatro varones y una niña; los otros dos sueros pertenecieron a niñas de nueve años de edad, del cuarto grado escolar. No se observó diferencia de reactividad respecto del sexo.La seropositividad obtenida en este estudio (3.3 por ciento) constituye un indicador de que la transmisión de triquinelosis está afectando a los habitantes de la población estudiada. Se analizan las posibles causas que favorecen esa transmisión.

Frecuencia de Toxocara canis en perros y áreas verdes del sur de la ciudad de México Distrito Federal / Frequency of Toxocara canis in dogs and green area in the south of Mexico City

El objetivo de este trabajo fue determinar la frecuencia de contaminación de áreas verdes por perros parasitados con Toxocara canisen seis delegaciones políticas del sur de la ciudad de México, Distrito Federal. Se colectaron 935 muestras de suelo de 200 g cada una en 187 áreas de estudio de dicha zona. Las muestras se obtuvieron en Coyoacán, Iztapalapa, Milpa Alta, Tláhuac, Tlalpan y Xochimilco. La colecta de muestras de suelos se realizó en 82 parques, 22 jardines y 83 camellones. También se estudiaron 710 muestras de materia fecal de perros, 500 de éstos tenían dueño y 210 eran animales vagabundos que habitaban en la misma zona. Las muestras de suelo se procesaron con la técnica de Ferreira, modificada con gradiente de concentración de sulfato de zinc 1:200, las heces se procesaron mediante el método de Faust, El 14.6 por ciento de las muestras de suelos estudiadas resultaron positivas con huevos de T. Canis. La frecuencia de contaminación con estos huevecillos en las muestras de suelos por delegación, Fue: Xochimilco, 16.8 por ciento; Tláhuac, 15.4 por ciento; Iztapalapa, 14.5 por ciento; Coyoacán, 10.9 por ciento; Tlalpan, 9.5 por ciento; y Milpa Alta, 8.3 por ciento. La frecuencia de T. Canis en las heces de perros con dueño fue de 21.2 por ciento y en los perros callejeros de 12.4 por ciento. Las elevadas frecuencias de contaminación de áreas verdes, así como el alto porcentaje de este parásito, hacen necesario legislar estrictas medidas de control de excretas tanto de perros con dueño como de perros vagabundos; de esta forma, los seres humanos tendrán menor riesgo de adquirir toxocariasis al frecuentar lugares de esparcimiento

Reactividad serológica a antígenos del metacéstodo de Taenia solium en una población de estudiantes del estado de Hidalgo / Serologic reactivity to Taenia solium metacestode antigens in a student population at Hidalgo

En México la cisticercosis humana continúa siendo uno de los problemas más serios de salud pública. La Organización Mundial de la Salud (OMS) considera a México como un país de alta endemicidad, con 1.9 por ciento de defunciones por cisticercosis cerebral. Debido a los diferentes órganos del hombre que llega a parasitar es difícil hacer el diangóstico, razón por la que se ha tratado de establecer por métodos de laboratorio un diagnóstico, razón por la que se ha tratado de establecer por métodos de laboratorio un diagnóstico adecuado y oportuno. A partir de los trabajos de Nieto en 1956, las pruebas de inmunodiagnóstico de la cisticercosis se han desarrollado considerablemente. El objetivo de este estudio, consistió en detectar la reactividad serológica contra cuatro antígenos del metacéstodo de T. solium en una población abierta mediante hemaglutinación indirecta. Se estudiaron 122 sueros de estudiantes de 16 a 24 años de edad en Santiago Tulantepec, estado de Hidalgo. Los metacéstodos de T. solium se aislaron de cerdos parasitados. Los antígenos utilizados fueron: somático completo (ASC), somático incompleto (ASI), fluido vesicular (AFV) y excreciones y secreciones(AES). Seis de los 122 sueros estudiados (4.9 por ciento) resultaron positivos con títulos de dilución de 1:32, cuatro sueros presentaron seropositividad a los antígenos AFV y ASC, uno resulto positivo a ASC, y otro a ASC, AFV y AES. Se copncluye que el grupo de edad estudiado presenta un alto porcenjate de individuos seropositivos comparado con estudios previos, hecho que habla de la necesidad de intensificar programas de prevención en este tipo de poblaciones