Hyperbaric oxygen therapy in wound healing in mice / [Oxigenoterapia hiperbárica na cicatrização de feridas em camundongos]

We investigated the local and systemic effects of hyperbaric oxygen therapy in BALB/C mice, exposed to two different exposure times, under 2.4 atmosphere (ATM). Fifteen animals were divided into three groups (GI, GII and Control) and underwent a surgical excision of a skin fragment of approximately one square centimeter of the dorsal region. The wounds were treated and monitored for 21 days. In the control group, the wound was cleaned once a day with sterile 0.9% NaCl solution. GI and GII mice were submitted to daily hyperbaric oxygen therapy of 30 or 60minutes sessions, respectively. The wounds were photographed every three days and their surfaces were analyzed by an image analyzer. At 21 days, all animals were euthanatized for histopathological analysis of the skin, lungs and liver in order to identify eventual alterations in wound healing or in the analyzed organs. Animals belonging to GI showed a faster skin wound healing in comparison to the other groups. Animals from GII, however, showed a delayed wound healing process and exhibited lung and microcirculatory alterations. These findings allow us to conclude that the exposure time to the oxygen in hyperbaric environment is crucial and can help or disturb skin wound healing or even be deleterious to other organs.(AU)

Investigaram-se os efeitos locais e sistêmicos da oxigenoterapia hiperbárica em camundongos BALB / C, submetidos a dois tempos de exposição diferentes, sob atmosfera 2,4 (ATM). Quinze animais foram divididos em três grupos (GI, GII e controle) e submetidos à excisão cirúrgica de fragmento de pele de aproximadamente um centímetro quadrado da região dorsal. As feridas foram tratadas e acompanhadas por 21 dias. No grupo controle, a ferida foi limpa uma vez ao dia, com solução estéril de NaCl 0,9%. Camundongos GI e GII foram submetidos à oxigenoterapia hiperbárica diária de 30 ou 60 minutos de sessões, respectivamente. As feridas foram fotografadas a cada três dias, e suas superfícies analisadas por um analisador de imagens. Aos 21 dias, todos os animais foram submetidos à eutanásia para análise histopatológica da pele, do pulmão e do fígado, em busca de eventuais alterações na cicatrização da ferida ou nos órgãos analisados. Animais pertencentes ao GI apresentaram cicatrização mais rápida de feridas cutâneas em comparação aos outros grupos. Já os animais do GII apresentaram retardo na cicatrização da ferida e alterações pulmonares e microcirculatórias. Esses achados permitem concluir que o tempo de exposição ao oxigênio em ambiente hiperbárico é fundamental e pode auxiliar ou atrapalhar a cicatrização de feridas cutâneas ou mesmo ser deletério para outros órgãos.(AU)

Células-tronco mesenquimais de origem adiposa na fase de proliferação do processo de cicatrização de queimaduras frias / Adipose-derived stem cells in the proliferation phase of the healing process in cold burns

A criocirurgia tem sido utilizada no tratamento de diferentes enfermidades de sistemas e órgãos. Contudo, são relatados efeitos adversos, como cicatrização lenta, cicatrizes extensas, disfunção estética e funcional. As lesões que ocorrem naturalmente pela exposição ao frio extremo, comumente, resultam em gangrena. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a influência das células-tronco mesenquimais de origem adiposa (ADSCs) na fase de proliferação da cicatrização de feridas cutâneas. Por meio da aplicação do nitrogênio líquido pela técnica do spray aberto, realizou-se a indução de uma ferida, de aproximadamente 15mm de diâmetro, na região dorsal de cada rato. A ferida recebeu o tratamento de acordo com o grupo ao qual pertencia: 1) aplicação das ADSCs no 15º dia (grupo tratado); 2) aplicação da solução cloreto de sódio 0,9% no 15º dia (grupo sham); 3) nenhuma intervenção até o momento da eutanásia (grupo controle). O grupo tratado com as ADSCs apresentou as maiores taxas de contração média das feridas e obteve diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo sham quanto à neovascularização. A terapia com as ADSCs proporcionou uma relevante evolução clínica das feridas, podendo ser constatada ao final do período de avaliação por cicatrizes mais estreitas e compridas.(AU)

Cryosurgery has been used to treat different diseases of systems and organs, although adverse effects have been reported such as delayed wound healing, large scars, esthetical deformation and functional impairment. Injuries caused naturally by the exposure to extreme cold weather conditions mostly result in gangrene. This study aims to evaluate the influence of adipose-derived stem cells (ADSCs) in the proliferation phase on cutaneous wound healing. Through the application of liquid nitrogen by the spraying technique, a 15 millimeter diameter lesion was produced in the dorsal region of each rat. The wound received treatment according to the group it belonged: 1) ADSCs application on the 15th day (treated group); 2) application of 0.9% sodium chloride solution on the 15th day (sham group); 3) no intervention until euthanasia (control group). The group treated with ADSCs showed the highest wound average contraction rate; this group got a significant statistical difference in relation to the sham group when it refers to neovascularization. The ADSCs therapy provides an important clinical evolution of wounds. This was verified at the end of the evaluation period through narrower and longer scars.(AU)

Isolamento e diferenciação das células-tronco da polpa dentária canina em células progenitoras neurais / Isolation and differentiation of canine dental pulp stem cells in neural progenitor cells

O objetivo deste estudo foi verificar a capacidade de diferenciação das células-tronco da polpa dentária canina em células progenitoras neurais bem como quantificar obtenção e viabilidade celular, durante três passagens em cultura. As células foram extraídas da polpa dentária de dois cadáveres caninos, com aproximadamente dez meses de idade, que foram a óbito em decorrência de traumatismo automotivo. Após três subculturas, realizou-se avaliação da viabilidade celular por quantificação em câmara de Neubauer. A partir disso, induziu-se diferenciação neural em meio de cultura neurobasal (Gibco™), com células aderidas ao plástico ou suspensas em placas tratadas com agarose. Após sete e 14 dias em cultivo indutor, observou-se morfologia e perfil imunofenotípico utilizando citometria de fluxo e imunocitoquímica fluorescente. Aos 14 dias as células apresentaram alto grau de expressão para marcadores anti-nestina e anti-glial fibrillary acidic protein (anti-GFAP). Anteriormente, obteve-se ao 25º dia, média de 18x106 células viáveis indiferenciadas oriundas do tecido pulpar. Sugere-se que as células-tronco indiferenciadas da polpa dentária canina apresentem índices satisfatórios de diferenciação em células progenitoras neurais, aderidas ou suspensas em cultura. A polpa dentária dos dentes decíduos caninos, fornece células indiferenciadas viáveis em quantidade adequada.(AU)

The objective of this study was to verify the differentiation capacity of canine tooth pulp stem cells in neural progenitor cells as well as to quantify the attainment and viability during three culture passages. The cells were extracted from the dental pulp of two canine cadavers, with approximately ten months of age, which died due to automotive trauma. After three subcultures, cell viability evaluation was performed by Neubauer chamber quantification. Neural differentiation was induced in neurobasal culture medium (Gibco ™), with cells adhered to the plastic or suspended in agarose-treated plates. After seven and 14 days in inducer culture, morphology and immunophenotypic profile were observed using flow cytometry and fluorescent immunocytochemistry. At 14 days the cells had a high degree of expression for anti-nestin and anti-glial fibrillary acidic (anti-GFAP) markers. Previously, an average of 18x106 undifferentiated viable cells from the pulp tissue were obtained on the 25th day. It is suggested that the undifferentiated canine pulp stem cells present satisfactory differentiation indices in neural progenitor cells, adhered or suspended in culture. The dental pulp of deciduous canine teeth provides viable undifferentiated cells in adequate quantity.(AU)

Gemistocytic astrocytoma in the spinal cord in a dog: a case report / Astrocitoma gemistocítico medular em cão: relato de caso

This paper reports a case of a rare variant of the cervical spinal cord astrocytoma diagnosed in a dog with progressive neurological signs, initially asymmetrical, not ambulatory tetraparesis, segmental reflexes and normal muscle tone in all four limbs and absence of pain upon palpation of the cervical spine. Myelography revealed attenuation of the ventral and dorsal contrast line in the third region of the fifth cervical vertebra. At necropsy intramedullary cylindrical mass that stretched from the third to the sixth cervical vertebra, which replaced all the gray matter of the spinal cord was observed. In the histological study, there was the replacement of the substance by neoplastic cells mantle arranged loosely. The cells were large and slightly rounded. The eosinophilic cytoplasm was well defined, sometimes forming processes interconnecting cells. The nucleus was eccentric, round, oval or kidney-shaped, and the nucleolus was evident. Thus, the microscopic changes observed in the cervical spinal cord were consistent with gemistocytic astrocytoma.(AU)

Relata-se um caso de uma variante rara de astrocitoma na medula cervical, diagnosticado em cadela com sinais neurológicos progressivos, inicialmente assimétricos, de tetraparesia não ambulatória, com reflexos segmentares e tônus muscular normais nos quatro membros e ausência de dor à palpação da coluna cervical. A mielografia revelou atenuação da linha de contraste ventral e dorsal na região da terceira à quinta vértebra cervical. À necropsia, foi observada massa cilíndrica intramedular que se estendia da terceira à sexta vértebra cervical, a qual substituía toda a substância cinzenta da medula espinhal. No estudo histológico, observou-se substituição da substância por manto de células neoplásicas arranjadas frouxamente. As células eram grandes e levemente arredondadas. O citoplasma eosinofílico, bem delineado, por vezes formava processos interligando as células. O núcleo era excêntrico, redondo, oval ou reniforme, e o nucléolo evidente. Logo, as alterações microscópicas observadas na medula espinhal cervical foram compatíveis com astrocitoma gemistocítico.(AU)

Ovariossalpingo-histerectomia em cadelas: comparação da dor e análises cardiorrespiratória, pressórica e hemogasométrica nas abordagens convencional, por NOTES híbrida e NOTES total / Ovariosalpingohisterectomy in bitches: comparison of pain, cardiopulmonary, pressure and arterial blood gas analysis of the conventional approaches, by NOTES hybrid and NOTES pure

A cirurgia endoscópica por orifícios naturais (NOTES) é um novo conceito de abordagem videocirúrgica, que surge como alternativa à cirurgia convencional, eliminando incisões abdominais e as possíveis complicações relacionadas a ela. A proposta deste artigo foi comparar técnicas de ovariossalpingo-histerectomia (OSH) em cadelas, buscando determinar o procedimento que oferece menores alterações hemodinâmicas e menos estímulos dolorosos trans e pós-operatório. Para tanto, foram utilizadas 21 cadelas alocadas em três grupos. No primeiro, os pacientes foram submetidos à OSH por celiotomia (GC), no segundo por meio da técnica de NOTES híbrida (GNH) e no terceiro (GNT), utilizando-se a técnica de NOTES total. O tempo cirúrgico do GNH foi significativamente maior que nos demais grupos. Em ambos os grupos de cirurgia NOTES, verificou-se diminuição das pressões arteriais médias e diastólicas no transoperatório. Apenas o grupo GNH desenvolveu acidose severa no transoperatório. Levando-se em consideração as avaliações da dor, apenas o grupo convencional necessitou de analgesia resgate transcirúrgica. No pós-operatório, observou-se que os cães do GC apresentaram índices mais elevados na escala visual analógica e na escala de Melbourne que os animais dos demais grupos, sendo necessária analgesia resgate em 100% deles. Em contraste, no GNT nenhum dos cães requereram complementação analgésica pós-operatória. Conclui-se que a técnica de OSH por NOTES total apresenta parâmetros cardiorrespiratórios e hemogasométricos semelhantes à técnica convencional e mais estáveis que a técnica de NOTES híbrida, bem como resulta em menor dor trans e pós-operatória que a técnica convencional...

The aim of the present study was to perform bacteriological and molecular methods for identification of Mycobacterium bovis in lesions derived from bovine carcasses detected during routine post-mortem examination in officially inspected slaughterhouses. We checked the slaughter and inspection of 825,394 bovines, health upon ante-mortem examination, by the official service in 10 slaughterhouses of Bahia state from April, 2009 to April 2012. Lesions suggestive of tuberculosis were collected from 180 bovines and further evaluated by bacteriology and multiplex PCR. The majority of lesions were located in the respiratory tract lymph nodes and 71% were from male bovines up to 32 months old. 13.9% of samples presented small, granular and creamy-yellowish colonies after being cultured in Stonebrink-Leslie with an average growth time of 34 days. All smears from the isolated samples were Acid Fast Bacilli (AFB) and among them 56% were identified by mPCR as M. bovis. Thus, the association between post-mortem examination, culture and multiplex PCR allowed the bacillus identification in a reduced time and in regions of low prevalence, pointing out its importance for bovine tuberculosis detection and as a supportive tool for the tuberculosis control and eradication program...

Fração total de células mononucleares intra-articular em cães submetidos à reconstrução do ligamento cruzado / Total fraction of mononuclear intra-articular cells in dogs undergoing cruciate ligament reconstruction

Avaliou-sea ação da fração total de células mononucleares autógenas da medula óssea (FCMO) por aplicação intra-articular, após a correção cirúrgica do ligamento cruzado rompido. Foram utilizados 20 cães, os quais sofreram desmotomia do ligamento cruzado cranial e caudal unilaterais, 21 dias antes do reparo cirúrgico. Dez animais receberam as células autógenas no momento da correção. As avaliações se deram por estudo radiográfico, exames clínicos e biópsias aos 50 e 90 dias pós-operatórios. O grupo que recebeu a FCMO apresentou crescimento ósseo intra-articular ao estudo radiográfico, contudo os 20 animais apresentaram célulasCD34 positivas em suas amostras biopsiadas, indicando haver presença de células-tronco em ambos os grupos. Conclui-se que,para o modelo experimental proposto, não se recomenda o uso da fração total de células mononucleares e que trabalhos experimentais com o uso de células-tronco nas articulações devem evitar modelos cujo foco de lesão mantenha contato direto com a medula óssea.

This study was performed to evaluate the action of the fraction of total mononuclear cells from the bone marrow (FCMO) applied intra-articularly after the surgical repair of an experimentally ruptured cruciate ligament. Twenty dogs which suffered one-sided cruciate desmotomy of the cranial and caudal cruciate ligament 21 days before the correction were used. Ten animals received the FCMO at the time of correction. The assessments were done through X-ray and clinical examinations, and biopsies at 50 and 90 days postoperatively. It was concluded that there was no clinical difference between the two groups until 90 days of evaluation. The group that received FCMO grew intra-articular bone shown on the X-ray study. All twenty animals, however, presented cells marked with CD34 antibodies on their biopsy samples, indicating the presence of stem cells in both groups. It is concluded thatfor theexperimental model, it is not recommended to use the mononuclear cell fraction,andin experimental studies with the use of stem cells in the joints models whose focus of injury keep direct contact with the bone marrow should be avoided.