Development and validation of a chemiluminescent western blot assay for glanders (Burkholderia mallei) serodetection.

Glanders, caused by Burkholderia mallei, is a zoonotic disease of equids. Serologic testing for glanders is required by disease-free countries before international movement of equids. The World Organisation for Animal Health Terrestrial Manual recommends the complement fixation test (CFT) for clearance of individual animals for movement, but the CFT is prone to false-positive results. A colorimetric western blot (WB) assay was developed and validated to resolve false-positive CFT results; however, that assay is relatively time-consuming, and the interpretation is subjective. We present here a procedurally similar chemiluminescent WB assay that performs comparably to the validated colorimetric WB assay and offers noticeable benefits of decreased time-to-result and greater ease of interpretation.

Desenvolvimento e avaliação de um teste ELISA indireto para o diagnóstico sorológico do mormo em equídeos / Standardization and evaluation of an indirect ELISA for the serological diagnosis of glanders in horses

O mormo é uma enfermidade infecto-contagiosa de caráter agudo ou crônico que acomete principalmente os equídeos, causando enormes prejuízos na cadeia produtiva do cavalo. Para controlar a enfermidade o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) instituiu medidas sanitárias obrigatórias em todo território nacional que incluem o diagnóstico oficial pela fixação do complemento (FC), maleinização e sacrifício dos animais positivos. Os kits atuais utilizados no diagnóstico da doença são importados, dificultando e encarecendo sua aplicação na rotina. Objetivou-se com este estudo padronizar um teste de ELISA indireto utilizando o extrato protéico de Burkholderia mallei isolada a partir de equídeo portador no estado de Pernambuco. As amostras foram cultivadas em ágar sangue 10%, incubada por 48h a 37°C; posteriormente caracterizou-se fenotípica e genotipicamente uma das colônias isoladas, e em seguida a cultivou em BHI para enriquecimento; logo após, esta foi repicada para o meio Dor-set Henley o qual foi incubado a 37ºC sob 60rpm por oito semanas. Para padronização do teste utilizou-se o Conjugado Proteína G Peroxidase Sigma na diluição de 1:90.000, com soros diluídos em 1:100 e o antígeno em 1:400. Utilizou-se 60 soros como controle negativo testados frente à FC para determinação do ponto de corte o qual ficou em 0,042nm. Feitas as padronizações, foram testadas 300 amostras, onde 99% (297) foram concordantes com os resultados obtidos na FC. Ao final, o ensaio apresentou 100% de sensibilidade e 98,2% de especificidade com valores preditivo positivo e negativo de 97,7% e 100%, respectivamente. O teste de concordância kappa foi 0,98 e a repetibilidade intra e interplaca ficaram em 8,8 e 10,3%, respectivamente. Diante dos resultados obtidos durante os ensaios, conclui-se que o teste de ELISA indireto pode ser utilizado como uma ferramenta de diagnóstico eficiente. Entretanto, mais ensaios devem ser realizados visando consolidar a confiabilidade do referido teste.

Glanders is an infectious-contagious disease of acute or chronic character which principally affects horses, causing enormous losses in the productive chain of this animal. To control the disease, the Ministry of Agriculture, Husbandry and Supply instituted mandatory sanitation measures in the entire national territory which include an official diagnosis through the complement fixation (CF) test, maleinization and sacrifice of the animals that are positive. Nowadays the kits used for the diagnosis of the disease are imported, making their routine application difficult and more expensive. The objective of this study was to standardize an indirect ELISA test, using the proteic extract of Burkholderia mallei isolated from a carrier horse in the state of Pernambuco. The samples were cultivated in 10% blood agar and incubated for 48h at 37°C; later, one of the isolated colonies was characterized phenotypically and genotypically and immediately cultivated in brain heart infusion (BHI) for enrichment; then it was peaked (repicada) for the Dor-set Henley medium which was incubated at 37ºC under 60rpm for eight weeks. To standardize the test the Protein G Peroxidase Sigma Conjugate was used in the dilution of 1:90.000, with serums diluted in 1:100 and the antigen in 1:400. Sixty serums were used as negative controls, tested before the CF to determine the cutting point which was 0.042nm. After establishing the standardization, 300 samples were tested, of which 99% (297) were in agreement with the results obtained in the CF. At the end, of assay presented 100% sensibility and 98.2% specificity, with predictive (preditivo) positive and negative values of 97.7% and 100% respectively. The Kappa concordance test was 0.98 and the intra and interplac repeatability were 8.8% and 10.3% respectively. From the results obtained, it is possible to affirm that the indirect ELISA test can be used as an efficient diagnosis tool. However, more essays must be carried out to consolidate the reliability of this test.

A comparison of two agar gel immunodiffusion methods and a complement fixation test for serologic diagnosis of Brucella ovis infection in experimentally infected rams / Comparação entre dois métodos de imunodifusão em gel de Agar e um método de fixação de complemento para o diagnóstico sorológico da infecção por Brucella ovis em carneiros experimentalmente infectados

A infecção por Brucella ovis é considerada uma das principais causas de epididimite e infertilidade em carneiros, resultando em falhas reprodutivas e perdas econômicas significativas em rebanhos ovinos ao redor do mundo. O estudo teve o objetivo de avaliar três testes sorológicos disponíveis para o diagnóstico da brucelose ovina por B. ovis, utilizando 181 soros ovinos. Amostras de soro provenientes de carneiros experimentalmente infectados foram coletadas ao longo de 192 dias pós-infecção (n=117) e durante o período pré-infecção (n=9). Adicionalmente, amostras de soro foram obtidas de ovinos provenientes de um rebanho livre para B. ovis (n=55). As técnicas de imunodifusão em gel de agar (IDGA), utilizando dois antígenos disponíveis comercialmente, e de fixação de complemento foram comparadas (FC). Foram obtidos resultados de sensibilidade especificidade semelhantes para ambos os métodos de IDGA e ainda, a técnica de IDGA foi mais eficiente do que a da FC para o diagnóstico sorológico da infecção por B. ovis.

Epidemiological aspects of an infection by Brucella abortus in risk occupational groups in the microregion of Araguaína, Tocantins

The aim of this paper was to study some epidemiological aspects of the infection by Brucella abortus in risk occupational groups in the microregion of Araguaína, Tocantins. For antibody research, 645 serum samples were analyzed by the complement fixation test (CF). A 4.0 percent frequency was found (26/645) in patients' serum and among those 4.1 percent (23/551) were slaughterhouses employees and 8.1 percent (3/37) rural workers. Of the total positive samples, three (2.0 percent) were women and 23 (4.7 percent) men; ten (2.9 percent) were between the ages of 18 and 30, six (3.4 percent) between 31 and 40, and nine (8.0 percent) were above 41 years of age. Risk factors for brucellosis in the study groups were age, background (OR = 2.45; CI 95 percent = 0.98 to 6.10) and previous work conducted with production animals (OR 2.36; CI 95 percent = 0.95 to 6.02). It was concluded that the infection by Brucella abortus is found in some risk occupational groups in the microregion of Araguaína, Tocantins, and control and prophylactic measures must be implemented emphasizing risk factors identified in the study.

Estabilidade do antígeno de célula total de Brucella abortus para uso no diagnóstico sorológico da brucelose bovina pela reação de fixação de complemento / Stability of Brucella abortus whole cell antigen for use in the serological diagnosis of bovine brucellosis by the complement fixation test

A reação de fixação de complemento é um dos testes usados no diagnóstico confirmatório da brucelose bovina, e para sua realização emprega-se o mesmo antígeno usado na prova de soroaglutinação lenta, porém não foi possível encontrar na literatura estudos sobre a estabilidade desse antígeno para uso na prova de fixação de complemento, de modo a estabelecer um prazo de validade para o mesmo. Por isso, esta investigação teve por objetivo avaliar a estabilidade do antígeno de célula total de Brucella conservado sob refrigeração, para uso na reação de fixação de complemento. Analisaram-se 14 partidas de antígeno, preparado com Brucella abortus amostra 1119/3 e padronizado para uso na prova de soroaglutinação lenta, com tempo de fabricação variando de 9 meses a 23 anos e 11 meses. Testaram-se 167 soros bovinos com títulos variáveis de anticorpos contra Brucella, adotando-se a técnica com incubação a 37ºC nas duas fases da reação e 5 unidades hemolíticas 50 por cento de complemento. Considerou-se como positivo o soro com pelo menos 25 por cento de fixação de complemento na diluição 1:4. Compararam-se os resultados obtidos com as 13 partidas de antígeno com aqueles obtidos com a partida com 9 meses de fabricação, usando o teste de chi2 de McNemar e o coeficiente kappa. A grande maioria dos soros apresentou resultados muito próximos quando testados com as diversas partidas de antígeno, e não se observou relação entre tempo de fabricação do antígeno e diferenças nos resultados obtidos.

The complement fixation test is used worldwide in the confirmatory diagnosis of bovine brucellosis. For this technique the antigen is the same as the one used in the tube agglutination test. However, literature is poor in information about the stability of the whole cell Brucella antigen for use in the complement fixation test to establish a time of validity of the antigen. Hence the aim of this investigation was to evaluate the stability of this antigen under refrigeration for use in the complement fixation test. Fourteen batches of antigen prepared with Brucella abortus strain 1119/3, produced from 9 months to 23 years and 11 months before, were analysed. One hundred and sixty-seven cattle sera with varying titres of antibodies to Brucella were tested through the warm complement fixation microtechnique with five 50 percent haemolytic units of complement. Sera with at least 25 percent of complement fixation in dilution 1:4 were considered positive. The results with 13 of the antigen batches were compared with the results obtained with the batch produced 9 months before by the McNemar chi2 test and kappa statistic. The oldest antigen batch gave a higher proportion of sera titres which were exactly the same observed with the 9-month-batch (90.4 percent), and the antigen produced 4 years and 3 months before the test gave de lowest proportion of sera with the same titre of the 9-month-antigen (73.7 percent). The comparison of the results after being classified as positive and negative showed that the highest proportion of agreed results was observed with the antigen produced 21 years and 4 months before (98.8 percent, kappa 0.98). The antigen with the lowest proportion of agreed results was the one produced 3 years and 2 months before (91.6 percent, kappa 0.84). The results of the study show that most sera gave very similar results with all antigen batches evaluated, and that there was no relationship between the period of antigen production...

Sensibilidade toxicológica e especificidade do teste de microfixação de complemento na detecção de toxinas botulínicas C e D em meio de cultura e fígado de camundongos / Toxicological sensitivity and specificity of the micro-complement fixation test for the detection of botulinum toxins C and D in culture medium and liver of mice

No presente estudo pretendeu-se verificar a sensibilidade toxicológica e especificidade do Teste de Microfixação de Complemento (MCF) na detecção de toxinas botulínicas C e D no sobrenadante de cultivos bacterianos e em fígados de camundongos inoculados com doses letais e subletais. As toxinas foram produzidas em meio de cultura Hemoline, tituladas através da determinação da DL50 pelo Bioensaio em Camundongo e diluídas nas concentrações de 10, 1, 0,1, 0,01 e 0,001 DL50. Desta forma, foram utilizadas em dois modelos experimentais, onde foi determinada a sensibilidade toxicológica do MCF no sobrenadante do meio de cultura com as diluições descritas acima e ainda em extratos hepáticos de camundongos com peso corporal de 20g, inoculados com as mesmas diluições. A tentativa de evidenciação das toxinas botulínicas nos extratos hepáticos de camundongos foi realizada através da sua extração após a morte pela administração das doses letais e ainda pelo sacrifício dos animais inoculados com doses subletais, em intervalos de 5 dias. Os resultados evidenciaram uma sensibilidade toxicológica para o MCF de 100% para os dois tipos de toxinas ao nível de 0,01 DL50, quando testados os sobrenadantes de meio de cultura, portanto 100 vezes superior ao Bioensaio em Camundongo. A sensibilidade toxicológica do MCF, quando examinados extratos hepáticos de camundongos inoculados com 1 e 10 DL50 de toxinas botulínicas C e D, foi inferior, com valores de 100, 80, 89 e 72%, respectivamente. Pelo teste foi possível detectar toxinas botulínicas tipos C e D nos extratos hepáticos de camundongos inoculados com doses subletais até 15 dias após a sua inoculação. A especificidade do MCF foi de 88 e 92%, quando testados extratos hepáticos de camundongos sadios, e confrontados com as antitoxinas C e D; e 100% no sobrenadante do meio de cultura. Os resultados apontam para uma possível utilização do teste como importante instrumento de pesquisa e ainda na eventual substituição dos testes in vivo pelas suas implicações éticas e limitações práticas

Avaliação de uma nova microtécnica de fixação de complemento (Garcia & Sotelo, 1991) para o diagnóstico da doença de Chagas crônica com diferentes preparaçoes antigênicas / The evaluation of a new complement fixation microtechnic (Garcia & Sotelo, 1991) for the diagnosis of chronic Chagas disease with different antigenic preparations

No presente trabalho, avalia-se a nova fixação de complemento, comparativamente à imunofluorescência indireta, para o diagnóstico da doença de Chagas crônica, utilizando um extrato aquoso de formas epimastigotas do Trypanosoma cruzi e três extratos etanólicos: um de epimastigotas, um de tripomastigotas e outro de amastigotas obtidas de cultura. Empregaram-se 236 amostras testadas por imunofluorescência indireta: 109 positivas (20 com diagnóstico parasitológico) e 127 amostras negativas (96 de doadores de sangue e 31 de portadores de outras patologias). Os resultados mostraram que é possível obter reação positiva em amostras diluídas até 1:16. Os melhores limiares de reatividade encontrados foram a diluição 1:4 para o extrato etanólico de amastigotas e 1:2 para os demais antígenos. Os índices de correlação entre a nova fixação de complemento e imunofluorescência indireta indicaram o extrato etanólico de epimastigotas como o antígeno mais adequado para fins de diagnóstico entre as preparações testadas, tendo apresentado índice de co-positividade com a imunofluorescência indireta de 0,92207 e índice de co-negatividade de 0,90000. Conclui-se que a nova fixação de complemento mostrou-se ser uma microtécnica semi-quantitativa rápida, sensível, barata e de fácil execução, aplicável ao diagnóstico da doença de Chagas crônica.

From this present data it has been evaluated a new complement fixation test, comparatively to indirect immunofluorescence to diagnose chronic Chagas' disease, utilizing one watery extract of epimastigotes of Trypanosoma cruzi and three other ethanolic extracts: one from epimastigotes, one from tripomastigotes and a third one of amastigotes obtained from cultures. Utilizing 236 serum samples indirect immunofluorescence test was performed: 109 positives (20 of them with positive parasitologic diagnostic) and 127 negatives (96 of healthy blood donors and 31 with other diseases). The results have showed that is possible a positive reaction in diluted samples up to 1:16. The best limits of reactivity found were the dilutions 1:4 for the ethanolic extract of amastigotes and 1:2 for the others antigens. The correlation index among the new complement fixation test and indirect immunofluorescence test showed that the ethanolic extract from epimastigotes was the best antigen to be utilized to diagnosis purposes. Its co-positivity index with indirect immunofluorescence was 0.92207 and the co-negative index was 0.90000. Concluding, the new complement fixation test showed itself as a fast, sensible, easily applicable semiquantitative microtechnique to the diagnosis of chronic Chagas' disease.

Antigenic relatedness of selected flaviviruses: study with homologous and heterologous immune mouse ascitic fluids

A relacao antigenica de 9 Flavivirus, febre amarela (YF), Wesselsbron (WSL), Uganda S (UGS), Potiskum (POT), West Nile (WN), Banzi (BAN), Zika (ZK), Dengue tipo 1 (DEN-1) e Dengue tipo 2 (DEN-2), foi avaliada por reacao de inibicao da hemaglutinacao cruzada (cross-HI) e reacao de fixacao do complemento cruzada (Cross-CF) entre cada um dos virus e seu fluido ascitico homologo em camundongos. Medias de titulos foram calculadas usando os titulos heterologos e homologos. Reacoes cruzadas CF revelaram maiores variacoes antigenicas entre virus do que reacoes cruzadas HI. Nao houve variacao antigenica significativa entre virus WSL, POT e YF usando cada um dos metodos. Todavia, diferencas definidas da antigenicidade foram observadas entre eles e os virus UGS, BAN e ZK. Nao existiram diferencas significativas entre UGS, BANe ZK ou entre DEN-1 e DEN-2. A relacao sorologica entre Flavivirus e importante para se estabelecer o diagnostico e a epidemiologia destas infeccoes na Africa

Molluscum contagiosum: serology and electron microscopy findings in twenty one patients

Vinte e um casos de molusco contagioso foram escolhidos para serem analisados por testes sorológicos e de microscopia eletrônica. O vírus do molusco foi detectado nas crostas e observados também nos vacúolos formados dentro dos queratinócitos. Os pacientes desenvolveram anticorpos fixadores do complemento para o vírus

Aplicacion de la técnica inmunoenzimática (ELISA) para el diagnostico de los virus de la fiebre aftosa y estomatitis vesicular en comparación con la prueba de fijación del complemento / Application of enzyme-linked immunosorbent assay for the diagnosis of foot-and-mouth disease virus and vesicular stomatitis in comparasion with the complement fixation

Se ha comparado la técnica inmunoenzimática (ELISA) "sandwich" indirecta con la prueba de fijación del complemento 50% (FC50) para detectar los serotipos O, A y C del virus de la fiebre aftosa (VFA) y New Jersey (NJ) e Indiana (ND) del virus de la estomatitis vesicular (VEV). Para las cepas O, A e IND se usaron antisueros polivalentes como detectores y para las cepas NJ fueron utilizados antisueros monovalentes. La prueba de ELISA mostró ser un procedimiento más satisfactorio para identificar VFA y VEV en muestras de epitelios de animales afectados por enfermedad vesicular

Isolation and characterization on partially purified leptospiral antigens

Extrato metilico de Leptospira interrogans sorovar canicola foi purificado por precipitacao com acetona ou acetona e cloroformio. A antigenicidade nao foi alterada por aquecimento ou tratamento com pepsina e pronase, entretanto foi perdida quando o antigeno foi tratado com acido periodico. Analise quimica revelou a presenca de 40 por cento de carboidrato (22 por cento de metilpentose, 28 por cento de hexose), 4 por cento de proteina, 20 por cento de lipide e 2,7 por cento de fosfato. Reacao de fixacao de complemento realizada com soros de pacientes com leptospirose apresentou concordancia com a reacao de aglutinacao microscopica.

The sensitivity, specificity and efficiency values of some serological tests used in the diagnosis of paracoccidioidomycosis

O presente trabalho avalia a sensibilidade, especificidade e eficiencia da imunodifusao dupla (ID), contraimunoeletroforese (CIE), reacao de fixacao de complemento (FC) e imunofluorescencia indireta (IFI) no diagnostico da paracoccidioidomicose. Os pacientes portadores da micose, virgens de tratamento, tiveram o diagnostico confirmado por exame micologico e/ou histopatologico. Utilizou-se como antigenos o filtrado de cultura da fase leveduriforme do Paracoccidioides brasiliensis para os testes de ID, CIE, FC e suspensao de celulas leveduriformes de "pool" de cepas do mesmo fungo para o teste de IFI. O estudo foi realizado em 4 grupos de individuos: 46 com paracoccidioidomicose ativa (sem tratamento), 22 com outras micoses profundas, 30 com outras doencas infecciosas (tuberculose e leishmaniose tegumentar) e 47 controles normais. Os valores de sensibilidade, especificidade e eficiencia foram obtidos de acordo com a metodologia utilizada por GALEN & GAMBINO (1975). Os resultados revelaram que os testes de precipitacao em gel de agar e agarose, representados pela ID e CIE foram os melhores, apresentando maior sensibilidade (91,3 por cento e 95,6 por cento, respectivamente), maxima especificidade (100 por cento) e os maiores valores de eficiencia quando comparados a FC e IFI...

Xenodiagnóstico, hemocultura e teste de lise mediada pelo complemento, como critérios de seleçäo de pacientes chagásicos crônicos para quimioterapia / Xenodiagnosis, hemoculture and the complement mediated lysis test, as criteria in selecting chronic chagasic patients for chemotherapy

O tratamento etiológico da doença de Chagas é iniciado geralmente apenas quando se dispöe de um diagnóstico parasitológico positivo. Na tentativa de aumentar o número de candidatos assim selecionados para o tratamento específico, estudamos 36 pacientes chagásicos crônicos associando o xenodiagnóstico, a hemocultura e o teste de lise mediada pelo complemento, em duas séries sucessivas, intercaladas de um mínimo de 60 dias. A sensibilidade do xenodiagnóstico e da hemocultura foi respectivamente de 30,5% e de 8,3% na primeira série e de 36,1% e de 19,4% nas duas séries. Foram positivos, em pelo menos uma das duas provas, 17(47,2%) dos pacientes. Destes, entretanto, somente 9(53,0%) mostraram teste de lise constantemente positivo enquanto que em 5 (29,4%) o teste foi negativo e 3 (17,6%) apresentaram resultados ora positivos, ora negativos. Nos pacientes com provas parasitológicas negativas, o teste de lise foi positivo em 4 (15,8%), negativo em 9(47,7%) e discordante em 6(31,5%). Assim, o teste de lise mediada pelo complemento näo se constitue em bom método de triagem de candiadatos ao tratamento. Apesar da baixa sensibilidade, as provas parasitológicas ainda constituem o instrumento mais seguro para o clínico

Evoluçäo tardia do transplante cardíaco na doença de Chagas / Long-term evolution of heart transplantation in Chagas disease

Nas formas cardíacas da doença de Chagas que evoluem com insuficiência cardíaca refratária ao tratamento clínico, o transplante é a única alternativa, ao lado da cardiomioplastia. Os autores apresentam a evoluçao tardia de seis pacientes com miocardiopatia chagásica terminal submetidos a transplante cardíaco ortotópico. O período médio de observaçao foi de 25,2 meses. O diagnóstico de reativaçao da doença de Chagas apoiou-se na observaçao clínica, na investigaçao laboratorial do parasita, nas biopsias endomiocárdicas e dos nódulos de subcutâneo. A análise dos resultados demonstra que: 1) os testes laboratoriais mostraram-se ineficazes no diagnóstico da reativaçao da doença, sendo que as biopsias mostraram maior índice de positividade; 2) a pulsoterapia com corticóide predispoe à reativaçao; 3) a doença linfoproliferativa apresenta alta incidência na doença de Chagas, sendo a principal complicaçao tardia. Possivelmente, o benzonidazol apresente seu efeito oncogênico potencializado. Tendo em vista o caráter endêmico da doença e a falta de alternativa terapêutica, tornou-se obrigatória a analise do esquema imunossupressor, do tratamento da reativaçao e a maior experiência clínica, para posiçoes mais definidas.

Infeccao humana adquirida em laboratorio causada pelo virus SPH 114202 (Arenavirus: familia Arenaviridae): aspectos clinicos e laboratoriais / Laboratory acquired infection by the virus SP H 114202 (Arenavirus : Arenaviridae) : clinical and laboratory findings

Sao descritos os achados clinico-laboratoriais da infeccao acidental pelo virus SP H 114202 (Arenavirus, familia Arenaviridae), um virus novo causador de febre hemorragica humana. O paciente, tecnico de laboratorio, apresentou quadro febril por 13 dias. A doenca cursou com febre elevada (39ºC) diaria, cefaleia, calefrios e mialgias por 8 dias. A partir do 3§ dia surgiram nauseas, vomitos alimentares e anorexia e no 10§ dia, epigastralgia, diarreia e gengivorragia....

Laboratory diagnosis of Chagas' heart disease

The laboratory diagnosis of Chagas' disease is a complex one. Factors relating to the host immune response and the antigenic variability of T. cruzi must be considered in the final interpretation of test results. Parasitologic methods for detecting T. cruzi, immunologic methods for detecting T. cruzi antigens in different biological fluids and serologic tests for detection and quantification of different classes of immunogiobulins are well standardized and used in the diagnosis of the acute or chronic phase of the disease. Xenodiagnosis is the most common parasitologic test employed, although it detects only 50 percent of infections in the chronic phase. Indirect immunofluorescence for detecting IgG and IgM antibodies, hemagglutination and enzyme immunoassay are the serologic tests most frequently employed for diagnosis, to screen blood donors and for seroepidemiologic studies. An important caveat to be remembered is that serologic tests provide only a probable diagnosis, which depends on the prevalence of Chagas disease, as well as on the sensitivity and specificity of the test employed. The use of well defined specific antigens, obtained through recombinant methods or chromatography, opens an important field for the development of very specific tests, without significant loss of sensitivity.

Níveis de anticorpos para arbovírus em indivíduos da regiäo de Ribeiräo Preto, SP (Brasil) / Arbovirus antibodies levels in subjects of the region of Ribeiräo Preto, SP (Brazil)

Com o objetivo de conhecer os níveis de anticorpos para arbovírus, foram estudados 302 indivíduos da regiäo de Ribeiräo Preto (Brasil), moradores em 3 tipos de locais com distintas formas de organizaçäo do espaço: próximos à área de paisagem natural; com paisagem modificada para a agropecuária; comunidades urbanas. Foram efetuados testes sorológicos de inibiçäo da hemaglutinaçäo, neutralizaçäo e fixaçäo do complemento para 21 arbovírus. Os resultados mostraram que 19,9% dos indivíduos investigados apresentaram anticorpos, sugerindo infecçöes pregressas por vários arbovírus. A maior percentagem de habitantes que se infectaram por estes agentes foi observada em locais próximos à área de paisagem natural, 38,5%. O vesiculovírus Piry foi o agente para o qual se encontrou o maior número de soros reagentes, 12,5%. A maior ocorrência de portadores de anticorpos para o vírus Piry foi observada nos indivíduos: do sexo masculino; com idade superior a 40 anos; guardas-florestais, lavradores e profissionais com atividades ligadas ao rio

Arbovírus Ilheus em aves silvestres (Sporophila caerulescens e Molothrus bonariensis) / Ilheus arbovirus in wild birds (Sporophila caerulescens and Molothrus bonariensis)

Objetivo: Relatar o isolamento do vírus Ilheus no Estado de São Paulo e avaliar o seu impacto para a saúde pública. Métodos: O isolamento de vírus foi realizado em camundongos albinos Swiss, a partir de sangue de aves silvestres, capturadas com redes de espera tipo mist net, armadas no nível do solo, no Parque Ecológico do Tietê, São Paulo. A identificação das cepas isoladas foi feita pelos testes de inibição da hemaglutinação, fixação de complemento e neutralização em camundongos. Amostras de plasma de aves e de mamíferos silvestres foram submetidas à pesquisa sorológica para detecção de anticorpos inibidores de hemaglutinação. Resultados: Foram isoladas duas cepas do vírus Ilheus em sangue de aves das espécies Sporophila caerulescens e Molothrus bonariensis e detectados anticorpos em aves das espécies Columbina talpacoti, Geopelia cuneata, Molothrus bonariensis e Sicalis flaveola, em sagüis das espécies Callithrix jacchus e Callithrix penicillata e no quati Nasua nasua. Conclusões: O isolamento do vírus Ilheus e a detecção de anticorpos específicos em aves residentes, migratórias e de cativeiro, em sagüis e quatis, comprovam a presença desse agente no Parque Ecológico do Tietê. O comportamento migratório de aves silvestres pode determinar a introdução do vírus em outras regiões. Considerando-se a patogenicidade para o homem e a confirmação da circulação desse agente viral em área urbana, freqüentada para atividade de lazer e de educação, o risco de ocorrência de infecção na população humana não pode ser descartado

Utilidad diagnóstica de ELISA IgG, IgM, IgA y ELISA avidez de IgG en toxoplasmosis reciente y crónica / Diagnostic utility of ELISA IgG, IgM, IgA and ELISA IgG avidity in recent and chronic toxoplasmosis

Toxoplasmosis, a world wide zoonotic infection, is generally asymptomatic and benign in immunocompetent individuals, but it can be serious in immunodeficiencies particulary in patients with acquired immunodeficiency syndrome and in children infected in utero. So, it is important to dispose methods which permit discriminate between recent and chronic infections. In order to contribute to improve the diagnosis of toxoplasmosis ELISA IgG, IgG, IgM, IgA and ELISA IgG, avidity were performed in 15 and 24 sera from patients suspectec of having acute and chronic infection respectively, according dye test (DT) titres. ELISA IgG was positive in both groups, ELISA IgM was positive in 78,6 and 58,3 percent respectively, while ELISA IgA was positive in 85,7 and 33,3 percent of recent and chronic group respectively. In those sera with low IgG avidity (18,8 percent) we found specific IgM in 71,5 and 4,2 percent and IgA in 78,6 and 0,0 percent of recent and chronic groups respectively. Parallelly, 208 sera samples were clasified according to the results of DT, indirect hemagglutination and complement fixation tests in the following groups: acute (97), intermediate (36), chronic (35) and negative (40). The results were: acute (96,9-64,9-55,6 and 65,9 percent); intermediate (97,2-63,8-44,4 and 47,2 percent); chronic (45,7-42,8-5,7 and 34,3 percent) for IgG, IgM, IgA and low IgG avidity respectively. The use of both acute markers, IgA and low IgG avidity in the diagnosis of toxoplasmosis is discussed

Heart aneurysm in Chagas' disease

Trata-se de estudo prospectivo referente a lesao apical da cardiopatia chagasica em 41 coracoes humanos. A relatada falta de correlacao entre frequencia da lesao e peso do coracao, descartou o fator patogenico vascular. Neste trabalho avalia-se a insuficiencia coronaria relativa incluindo outras variaveis alem do peso do coracao. A perfusao do leito capilar com gel de cores diferentes para cada coronaria (verde e amarelo) permitiu delimitar seus territorios antes de separar os atrios e a gordura sub-epicardica. As paredes livres dos ventriculos direito (RV) e esquerdo (LV) definiram o indice RV/LV. O peso do miocardio ventricular corado em verde (arteria coronaria direita-RC) e o peso ventricular total (VW) definiram o indice RC/VW. O peso do coracao e esses dois indices, graduados e somados, compuseram um "score" de valor inversamente proporcional a condicao de irrigacao do miocardio...