Expressão gênica de miRNA na toxoplasmose cerebral / Gene expression of miRNA in cerebral toxoplasmosis

RESUMO

A toxoplasmose constitui um sério problema de saúde pública, principalmente em pacientes imunocomprometidos, como os portadores do vírus da imunodeficiência humana (HIV). Apesar do acesso universal e gratuito à terapia antirretroviral (TARV) e a diminuição dos casos, a toxoplasmose cerebral ainda é responsável por alta morbidade e mortalidade, além de representar um determinante de mau prognóstico nesses pacientes. Os miRNAs são moléculas que exercem um importante papel na regulação da expressão gênica em células eucariontes. Sendo assim, há muito potencial para serem utilizados para o diagnóstico, prognóstico e intervenções terapêuticas. Diante disso, este estudo avaliou os níveis de expressão dos miRNAs miR-146a, miR-21, miR-155, miR-125b e miR-29c em plasma de pacientes com toxoplasmose cerebral e aids (TC/aids). Foram analisadas 79 amostras de plasma divididas em três grupos grupo I- 32 amostras de plasma de pacientes TC/aids; grupo II- 27 amostras de plasma de indivíduos assintomáticos e soropositivos para toxoplasmose (TA) e grupo III- 20 amostras de indivíduos soronegativos para toxoplasmose (CN). Após a extração de RNA total contendo miRNA foi realizada a síntese do DNA complementar e em seguida o perfil de expressão de cada miRNA foi determinado por PCR quantitativo em tempo real. Os resultados foram expressos em quantificação relativa e mostraram que o miR-146a e o miR-21 foram significativamente mais expressos nos pacientes com toxoplasmose cerebral e aids quando comparados com os indivíduos assintomáticos e soropositivos para toxoplasmose.

ABSTRACT

Toxoplasmosis is an important public health problem, especially in immunocompromised patients, such as those with human immunodeficiency virus (HIV). Despite free universal access to antiretroviral therapy (HAART), cerebral toxoplasmosis is still responsible for high morbidity, mortality and a determinant of worst prognosis. MicroRNAs are molecules that play an important role in gene expression in eukaryotic cells. Therefore, these molecules have the potential to be used for diagnosis, prognosis and therapeutic. This study evaluated the miRNA expression levels of miR-146a, miR-21, miR-155, miR125b and miR-29c in plasma of patients with cerebral toxoplasmosis/aids (TC/AIDS). A total of 79 plasma samples were divided into three groups. Group I 32 plasma samples from TC/aids patients. Group II 27 plasma samples from individuals with asymptomatic toxoplasmosis, seropositives for toxopalsmosis (TA). Group III 20 plasma samples from seronegative individuals for toxoplasmosis (CN). After extraction of total RNA, containing miRNA, a complementary DNA synthesis was performed and, then, the expression profile of each target miRNA, which was determined by quantitative real-time PCR (qPCR). Results expressed as relative quantification (RQ) showed that miR-146a and miR-21 were significantly up-expressed in TC/AIDS patients, when compared with TA individuals. Analyzes of miR-155, miR-125b and miR-29c showed that no statistically significant differences were shown between TC/AIDS and TA groups. These results suggest the host miRNAs modulation by T. gondii