Pam16 and Pam18 were repurposed during Trypanosoma brucei evolution to regulate the replication of mitochondrial DNA.

Protein import and genome replication are essential processes for mitochondrial biogenesis and propagation. The J-domain proteins Pam16 and Pam18 regulate the presequence translocase of the mitochondrial inner membrane. In the protozoan Trypanosoma brucei, their counterparts are TbPam16 and TbPam18, which are essential for the procyclic form (PCF) of the parasite, though not involved in mitochondrial protein import. Here, we show that during evolution, the 2 proteins have been repurposed to regulate the replication of maxicircles within the intricate kDNA network, the most complex mitochondrial genome known. TbPam18 and TbPam16 have inactive J-domains suggesting a function independent of heat shock proteins. However, their single transmembrane domain is essential for function. Pulldown of TbPam16 identifies a putative client protein, termed MaRF11, the depletion of which causes the selective loss of maxicircles, akin to the effects observed for TbPam18 and TbPam16. Moreover, depletion of the mitochondrial proteasome results in increased levels of MaRF11. Thus, we have discovered a protein complex comprising TbPam18, TbPam16, and MaRF11, that controls maxicircle replication. We propose a working model in which the matrix protein MaRF11 functions downstream of the 2 integral inner membrane proteins TbPam18 and TbPam16. Moreover, we suggest that the levels of MaRF11 are controlled by the mitochondrial proteasome.

Intermembrane space-localized TbTim15 is an essential subunit of the single mitochondrial inner membrane protein translocase of trypanosomes.

All mitochondria import >95% of their proteins from the cytosol. This process is mediated by protein translocases in the mitochondrial membranes, whose subunits are generally highly conserved. Most eukaryotes have two inner membrane protein translocases (TIMs) that are specialized to import either presequence-containing or mitochondrial carrier proteins. In contrast, the parasitic protozoan Trypanosoma brucei has a single TIM complex consisting of one conserved and five unique subunits. Here, we identify candidates for new subunits of the TIM or the presequence translocase-associated motor (PAM) using a protein-protein interaction network of previously characterized TIM and PAM subunits. This analysis reveals that the trypanosomal TIM complex contains an additional trypanosomatid-specific subunit, designated TbTim15. TbTim15 is associated with the TIM complex, lacks transmembrane domains, and localizes to the intermembrane space. TbTim15 is essential for procyclic and bloodstream forms of trypanosomes. It contains two twin CX9C motifs and mediates import of both presequence-containing and mitochondrial carrier proteins. While the precise function of TbTim15 in mitochondrial protein import is unknown, our results are consistent with the notion that it may function as an import receptor for the non-canonical trypanosomal TIM complex.

RhoA-mediated G12-G13 signaling maintains muscle stem cell quiescence and prevents stem cell loss.

Multiple processes control quiescence of muscle stem cells (MuSCs), which is instrumental to guarantee long-term replenishment of the stem cell pool. Here, we describe that the G-proteins G12-G13 integrate signals from different G-protein-coupled receptors (GPCRs) to control MuSC quiescence via activation of RhoA. Comprehensive screening of GPCR ligands identified two MuSC-niche-derived factors, endothelin-3 (ET-3) and neurotensin (NT), which activate G12-G13 signaling in MuSCs. Stimulation with ET-3 or NT prevented MuSC activation, whereas pharmacological inhibition of ET-3 or NT attenuated MuSC quiescence. Inactivation of Gna12-Gna13 or Rhoa but not of Gnaq-Gna11 completely abrogated MuSC quiescence, which depleted the MuSC pool and was associated with accelerated sarcopenia during aging. Expression of constitutively active RhoA prevented exit from quiescence in Gna12-Gna13 mutant MuSCs, inhibiting cell cycle entry and differentiation via Rock and formins without affecting Rac1-dependent MuSC projections, a hallmark of quiescent MuSCs. The study uncovers a critical role of G12-G13 and RhoA signaling for active regulation of MuSC quiescence.

Preanesthetic assessment data do not influence the time for tracheal intubation with Airtraq(tm) video laryngoscope in obese patients / Dados da avaliação pré-anestésica não influenciam o tempo de intubação com o videolaringoscópio Airtraq(r) em pacientes obesos / Datos de evaluación preanestésica no influyen en el tiempo de intubación traqueal con el videolaringoscopio Airtraq(r) en pacientes obesos

Purpose: this study investigated the influence of anatomical predictors on difficult laryngoscopy and orotracheal intubation in obese patients by comparing Macintosh and Airtraq(tm) laryngoscopes. Methods: from 132 bariatric surgery patients (body mass index = 35 kg m-1), cervical perimeter, sternomental distance, interincisor distance, and Mallampati score were recorded. The patients were randomized into two groups according to whether a Macintosh (n = 64) or an Airtraq(tm) (n = 68) laryngoscope was used for tracheal intubation. Time required for intubation was the first outcome. Cormack-Lehane score, number of intubation attempts, the Macintosh blade used, any need for external tracheal compression or the use of gum elastic bougie were recorded. Intubation failure and strategies adopted were also registered. Results: intubation failed in two patients in the Macintosh laryngoscope group, and these patients were included as worst cases scenario. The intubation times were 36.9 + 22.8 s and 13.7 + 3.1 s for the Macintosh and Airtraq(tm) laryngoscope groups (p < 0.01), respectively. Cormack-Lehane scores were also lower for the Airtraq(tm) group. One patient in the Macintosh group with intubation failure was quickly intubated with the Airtraq(tm). Cervical circumference (p < 0.01) and interincisor distance (p < 0.05) influenced the time required for intubation in the Macintosh group but not in the Airtraq(tm) group. Conclusion: in obese patients despite increased neck circumference and limited mouth opening, the Airtraq(tm) laryngoscope affords faster tracheal intubation than the Macintosh laryngoscope, and it may serve as an alternative when conventional laryngoscopy fails. .

Objetivo: esse estudo investigou a influência de preditores anatômicos para laringoscopia e intubação orotraqueal difícil em pacientes obesos mediante a comparação dos laringoscópios Macintosh e Airtraq(r). Métodos: em 132 pacientes de cirurgia bariátrica foram registrados: perímetro cervical, distância esternomentoniana, distância inter-incisivos e escore de Mallampati. Os pacientes foram randomizados em dois grupos, de acordo com o laringoscópio usado para a intubação traqueal: Macintosh (n = 64) ou Airtraq(r) (n = 68). O tempo até a intubação foi o primeiro desfecho. Também foram registrados: escore de Cormack-Lehane, número de tentativas de intubação, lamina Macintosh usada, necessidade de compressão traqueal externa, ou uso de um bougie elástico de borracha. Também foram anotados o insucesso na intubação e as estratégias adotadas. Resultados: houve insucesso na intubação em dois pacientes no grupo com laringoscópio de Macintosh; esses pacientes foram incluídos como o pior cenário de caso. Os tempos para intubação foram 36,9 ± 22,8 seg e 13,7 ± 3,1 seg para os grupos Macintosh e Airtraq(r) (p < 0,01), respectivamente. Os escores de Cormack-Lehane também foram mais baixos para o grupo Airtraq(r). Um paciente no grupo Macintosh com insucesso na intubação foi rapidamente intubado com o laringoscópio Airtraq(r). A circunferência cervical (p < 0,01) e a distância inter-incisivos (p < 0,05) influenciaram o tempo até a intubação no grupo Macintosh, mas não no grupo Airtraq(r). Conclusão: em pacientes obesos, apesar da maior circunferência cervical e da limitada abertura da boca, o laringoscópio Airtraq(r) possibilita uma intubação traqueal mais rápida ...

Objetivo: el objetivo de este estudio fue evaluar la influencia de los predictores anatómicos en la laringoscopia e intubación orotraqueal difíciles en pacientes obesos comparando el laringoscopio Macintosh y el videolaringoscopio Airtraq(r). Métodos: en 132 pacientes sometidos a cirugía bariátrica (índice de masa corporal = 35 kg/m2), se registraron los valores de perímetro cervical, distancia mentoesternal, distancia interincisivos y puntuación de Mallampati. Los pacientes fueron aleatorizados en 2 grupos de acuerdo con el uso de los laringoscopios Macintosh (n = 64) o Airtraq(r) (n = 68) para intubación traqueal. El resultado primario fue el tiempo necesario para la intubación. Se registraron la puntuación de Cormack-Lehane, el número de intentos de intubación, el uso de lámina Macintosh y cualquier necesidad de compresión traqueal externa o la utilización de introductor del tubo traqueal. Las estrategias de intubación adoptadas y los fallos de las intubaciones también fueron recogidos en el informe. Resultados: en el grupo Macintosh, 2 pacientes presentaron fallo en la intubación y fueron incluidos como los peores casos de intubación. Los tiempos de intubación fueron 36,9 ± 22,8 s y 13,7 ± 3,1 s para los grupos Macintosh y Airtraq(r) (p < 0,01), respectivamente. Las puntuaciones de Cormack-Lehane también fueron menores para el grupo Airtraq(r). Un paciente del grupo Macintosh con fallo de intubación fue rápidamente intubado con el Airtraq(r). La circunferencia cervical (p < 0,01) y la distancia interincisivos (p < 0,05) influyeron en el tiempo necesario para la intubación en el grupo Macintosh, pero no en el grupo Airtraq(r). Conclusión: en los pacientes obesos, a pesar del aumento de la circunferencia del cuello y de la abertura limitada de la boca, el laringoscopio ...

Efeitos da pressão positiva no final da expiração orientada pela análise da complacência estática do sistema respiratório sobre a pressão intra-abdominal / Effect of the positive end expiration pressure guided by the analysis of the static compliance of the respiratory system on the intra-abdominal pressure

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: A pressão intra-abdo­minal (PIA) costuma se elevar em pacientes graves e deve ser monitorada considerando o risco de síndrome compar­timental. A ventilação mecânica pode intensificar o aumen­to da PIA por transmissão da pressão intratorácica pelo diafragma. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de valores mais elevados de pressão positiva no final da expi­ração (PEEP) sobre a PIA em pacientes com diagnóstico de hipertensão intra-abdominal. MÉTODO: Quinze pacientes com indicação para elevação dos níveis de PEEP e que apresentavam hipertensão intra­-abdominal; a mensuração da PIA foi realizada por medida de pressão intravesical em cinco momentos distintos: pré e pós-bloqueio neuromuscular, pós-otimização da PEEP, após 6 horas e 12 horas da otimização. RESULTADOS: Foram avaliados 15 pacientes, sendo 33,3% (5) do sexo feminino e 66,7% (10) sexo masculino; com idade entre 20 e 89 anos. Sete pacientes (46,7%) em pós­-operatório de cirurgia gastroenterológica, cinco (33,3%) vítimas de politraumatismo e três (20%) em pós-operató­rio de cirurgia de aorta. Considerando a classificação de Burch, 10 pacientes, apresentava hipertensão abdominal grau 1(10,4-15 mmHg); quatro com grau II (16-25 mmHg) e um com grau III (27,5 mmHg). A variação entre a PIA inicial e as quatro medidas seqüenciais após otimização da PEEP variaram entre 2 e 10 mmHg; esta comparação não se apresentou estatisticamente significativa, utilizando-se o teste Analise de Variância de Friedman com p igual 0,196, logo maior que 0,005. CONCLUSÃO: O incremento da PEEP não alterou de for­ma significativa os níveis de pressão intra-abdominal nas primeiras 12 horas pós sua otimização.

Análise comparativa da aptidäo cardiorrespiratória de triatletas, avaliados em ciclossimulador e bicicleta ergométrica / Comparation of Cardiopulmonary exercise testing of tri-athletes on cyclosimulador and bicycle ergometer

[1]Carvalho Jr., E.,Santos, A.L.G., Schneider A.P., Beretta, L., Tebexreni, A.S., Cesar, M.C., Barros, T.L.Análise comparativa da aptidäo cardiorrespiratória de triatletas avaliados em ciclossimulador e bicicleta ergométrica. Rev. Bras. Ciên. e Mov. 8 (3):21-24,2000. bjetivo: comparar a aptidäo cardiorrespiratória de triatletas, avaliados por testes em bicicleta ergométrica e ciclossimulador (ergômetro mais específico).Métodos: 9 triatletas treinados, 6 do sexo masculino e 3 do sexo feminino, foram submetidos a testes ergoespirométricos em 2 diferentes cicloergômetros, um ciclossimulador e uma bicicleta ergométrica, sendo determinados o consumo máximo de oxigênio (VO2 max), o limiar anaeróbico ventilatório (LA), a freqüência cardíaca máxima (FCmax) e a freqüência cardíaca do limiar anaeróbio (FC LA). Resultados: näo foram encontradas diferenças significantes entre os testes para nenhuma das variáveis determinadas. Os valores dos testes em ciclossimulador e bicicleta ergométrica foram, respectivamente-. VO2 max 62,88 ñ 5,13 vs 62,13 ñ 6,00 ml/kg/min,LA 37,84 ñ 3,75 vs 38,96 ñ 4,92 ml/kg/min, FC max 182,00 ñ 8,72 vs 180,89 ñ 11,16 bpm e FC LA 148,22 ñ6,22 vs 147,89 ñ 8,54 bpm. Conclusäo: os resultados sugerem que a bicicleta ergométrica pode ser utilizada para avaliaçäo física cardiorrespiratória de triatletas com a mesma precisäo do ciclossimulador.