Aplicação da técnica de REP – PCR no rastreamento de Staphylococcus aureus em sala de ordenha, para o monitoramento da qualidade do leite / Using the REP-PCR technic in the tracking of Staphylococcus aureus in milking room, for milk quality production

RESUMO

A identificação e classificação bacteriana são de suma importância no ambiente, na indústria, na medicina veterinária, na microbiologia e na ecologia microbiana. Um número de diferentes métodos genotípicos e fenotípicos estão sendo empregados para identificação e classificação microbiana. A técnica de REP-PCR é baseada no uso de primers sintetizados a partir de sequências repetidas de DNA, chamadas depalindrômicas extragênicas repetidas (REP), e têm sido descrita como um método o qual gera impressões digitais (fingerprints) de DNA que podem diferenciar bactérias entre gêneros e espécies. Neste estudo, o método de fingerprint foi usado para Staphylococcus aureus com o objetivo de avaliar a higiene de ordenha em duas fazendas leiteiras.Foram obtidos vários fingerprints de todos os isolados coletados das diferentes fontes estudadas (mãos de ordenhadores, tetos das vacas,leite e ordenhadeira), e foram obtidos comportamentos muito similares das bandas indicando que os isolados podem ser relatados como clones epidemiológicos. Em nosso estudo, a técnica mostrou ser eficiente para a análise da similaridade entre indivíduos da mesma espécie, no caso, o Staphylococcus aureus, mostrando ser uma ferramenta útil para investigação de falhas no manejo e, em um controle mais eficiente para evitar e/ou diminuir a disseminação de microrganismos causadores de sérias enfermidades em humanos e em animais, que podem ser transmitidas através de produtos como o leite e seus derivados.

ABSTRACT

The identification and classification of bacteria are of crucial importance in environmental, industrial, veterinary, microbiology and microbial ecology. A number of different phenotypic and genotypic methods are presently being employed for microbial identification and classification. Repetitive-element PCR (Rep-PCR) with primers basedon repetitive extragenic palindromic (REP) repeated DNA sequencesis a recently described method which generates DNA fingerprints that descriminate between bacterial species and strains. In this study, this method was used for genomic fingerprinting of Staphylococcus aureus in control of hygiene in milk line production on two farms. Complex fingerprinting patterns were obtained for all isolates from different sources (milking handlers, cows teats, milk and milk machine) were very similar, and the data indicated that the isolated were closely related.In our study, this technic shows to be usefull for investigation in fails on milk line production and for more efficient control for patogenic microrganisms that cause serious illness in humans and animals.