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1.
Nutr. hosp ; 32(6): 2771-2776, dic. 2015. graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-146143

RESUMO

Background: we successfully reconstituted the gene from group 1 allergens of dust mites, and obtained a body of shuffled genes. In order to verify the prediction on the chimeric gene, we tentatively cloned R8 into the vector that was prokaryoticly expressed, purified and assessed for its bio-activities. Methods: the expressed product was detected by SDSPAGE and the target protein was purified. The purified protein R8 was detected by ELISA. 75 BALB/c mice were divided into 5 groups, namely PBS, rDer f1, rDer p1, R8 and asthma group. The mice were treated with dust mite allergens at 0, 7, 14 day by intraperitoneal injection and inhaled challenge as aerosol on day 21 for 7 days. Specific allergen immunotherapy was performed using rDer f1, rDer p1 and R8 allergens respectively. The level of IFN and IL- 4 in BALF was detected by ELISA. Results: the chimeric gene R8 was expressed with a band of approximately Mr 35000. Compared with groups of rDer f 1 and rDer p 1 [(80.44±15.50) and (90.79±10.38) μg/ml respectively], IgE binding capacity of the protein R8 (37.03±12.46) μg/ml was statistically lower (P0.05). IL-4 level in R8 group was lower markedly than the others (P<0.01), but no statistical difference to that of the rDer f 1 and rDer p 1 groups (P>0.05). IL-4 level in R8 group was lower markedly than the others (P<0.05 or P<0.01). Conclusions: chimeric protein R8 derived from the group 1 allergens of dust mites has been expressed with low allergenicity and high immunogenicity (AU)


Antecedentes: se reconstituyó con éxito el gen del grupo 1 alérgenos de los ácaros del polvo, y obtuvo un conjunto de genes barajadas. Con el fin de verificar la predicción en el gen quimérico, hemos clonado tentativamente R8 en el vector que se expresó prokaryoticly, purificó y se evaluó por sus actividades-bio. Métodos: el producto expresado se detectó por SDS-PAGE y la proteína diana se purificó. La proteína purificada R8 se detectó por ELISA. Setenta y cinco ratones BALB/ c se dividieron en 5 grupos, a saber: PBS, rDer f1, rDer p1, R8 y el grupo de asma. Los ratones fueron tratados con alérgenos de ácaros del polvo a los 0, 7, 14 días mediante inyección intraperitoneal y inhaladas desafío como aerosol en día 21 durante 7 días. La inmunoterapia específica para el alérgeno se realizó utilizando rDer f1, rDer p1 y alérgenos R8, respectivamente. El nivel de IFN e IL-4 en BALF se detectó por ELISA. Resultados: el gen quimérico R8 se expresó con una banda de aproximadamente Mr 35000. En comparación con los grupos de rDer f 1 y rDer p 1 [(80,44 ± 15,50) y (90,79 ± 10,38) μg/ml, respectivamente], la capacidad de unión a IgE de la proteína R8 (37,03 ± 12,46) μg/ml fue estadísticamente inferior (P 0,05). La IL-4 en el grupo R8 fue menor significativamente que las otras (P <0,01), pero no hubo diferencia estadística a la de los grupos rDer f 1 y rDer p 1 (P> 0,05). La IL-4 en el grupo R8 fue menor significativamente que las otras (P <0,05 o P <0,01). Conclusiones: la proteína quimérica R8 derivados de los grupos 1 alérgenos de los ácaros del polvo se ha expresado con baja alergenicidad y alta inmunogenicidad (AU)


Assuntos
Humanos , Células Procarióticas , Quimera/genética , Pyroglyphidae/genética , Alérgenos/genética , Modelos Animais de Doenças
2.
Rev. bioét. derecho ; (n.extr): 193-209, 2015.
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-146203

RESUMO

En las últimas décadas estamos experimentando cambios profundos en la relación entre los seres humanos y la biotecnología y más en concreto, en el ámbito del deporte. Tres de estos avances biotecnológicos están produciendo (o producirán) un impacto en la ética del deporte: el dopaje genético, los deportistas ciborgs y los deportistas híbridos y quimeras. Son varios los desafíos que plantean estos desarrollos tecnológicos: a la salud, a la igualdad y a la comprensión de la naturaleza humana, problemas a los que el deporte tendrá que dar una respuesta y que supondrán posiblemente un cambio profundo respecto a su naturaleza actual (AU)


In the last decades we are experiencing deep changes in the relation between the human beings and the technology, specifically, in the field of the sport. Three of these biotechnological advances are producing (or will produce) an impact in sport ethics: gene doping, ciborgs and the hybrids and chimaeras. These technological developments are introducing some relevant challenges to the health, equality and understanding of the human nature. Sport authorities will be required to provide an answer, which most probably will deeply change the foundations of current sport (AU)


Assuntos
Humanos , Esportes/ética , Biotecnologia/ética , Organismos Geneticamente Modificados , Quimera/genética , Doping nos Esportes/ética , Engenharia Genética/tendências
3.
Int. microbiol ; 17(4): 213-224, dic. 2014. ilus, tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-138145

RESUMO

We evaluated the genetic stabilization of artificial intra- (Saccharomyces cerevisiae) and interspecific (S. cerevisiae × S. kudriavzevii) hybrids under wine fermentative conditions. Large-scale transitions in genome size and genome reorganizations were observed during this process. Interspecific hybrids seem to need fewer generations to reach genetic stability than intraspecific hybrids. The largest number of molecular patterns recovered among the derived clones was observed for intraspecific hybrids, particularly for those obtained by rare-mating. Molecular marker analyses revealed that unstable clones could change during the industrial process to obtain active dry yeast. When no changes in molecular markers and ploidy were observed after this process, no changes in genetic composition were confirmed by comparative genome hybridization, considering the clone as a stable hybrid. According to our results, under these conditions, fermentation steps 3 and 5 (30-50 generations) would suffice to obtain genetically stable interspecific and intraspecific hybrids, respectively (AU)


No disponible


Assuntos
Feminino , Humanos , Masculino , Quimera/metabolismo , Saccharomyces/genética , Saccharomyces/metabolismo , Vinho/microbiologia , Quimera/classificação , Quimera/genética , Fermentação , Proteínas Fúngicas/genética , Proteínas Fúngicas/metabolismo , Saccharomyces/classificação
4.
Int. microbiol ; 10(4): 261-269, dic. 2007. ilus
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-62540

RESUMO

Recombinant adenoviruses, poxviruses, and plasmid DNA vaccines encoding different hepatitis B virus (HBV)/murine cytomegalovirus (MCMV) protein chimeras were used to immunize mice. Processing of the chimeras resulted in presentation of a protective Ld/CD8+ T-cell epitope of the immediate early 1 protein pp89 (IE1 pp89) of MCMV to the immune system. Different levels of immunogenicity were observed depending on: (i) the type of viral vector used, (ii) whether the antigens were included in the cellular secretion pathway, and (iii) the location of the protective epitope within the chimeric protein. An adenovirus expressing a secretory HBV core protein with the MCMV epitope in its C-terminus induced the highest immune response. When the most immunogenic adenovirus and vaccinia virus were used in a heterologous prime-boost immunization protocol, even higher levels of epitope-specific T cells were obtained. Furthermore, responses were protective against a challenge with MCMV, inducing up to a 96% reduction of viral load in immunized animals, as determined by a sensitive real-time PCR assay. Together, these results confirmed previous observations of the efficient use of adenoviral and poxviral vectors in prime-boost protocols for immunization against diseases whose resolution depends on cellular immunity, as well as the aptness of correctly designed chimeric carrier proteins to facilitate this goal (AU)


No disponible


Assuntos
Animais , Camundongos , Citomegalovirus/patogenicidade , Infecções por Citomegalovirus/prevenção & controle , Imunização/métodos , Muromegalovirus/patogenicidade , Vacinas Sintéticas/imunologia , Adenoviridae , Poxviridae , Vírus da Hepatite B , Hepatite B , Quimera/microbiologia , Imunidade Celular , Camundongos/imunologia , Expressão Gênica/imunologia
6.
Rev. esp. cardiol. (Ed. impr.) ; 55(10): 1070-1082, oct. 2002.
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-15129

RESUMO

Durante el desarrollo cardíaco, el epicardio deriva de un primordio externo al corazón, denominado proepicardio, que está formado por un acúmulo de células mesoteliales situado en la superficie ventral y cefálica del límite hígado-seno venoso (aves) o en la cara pericárdica del septo transverso (mamíferos). El proepicardio entra en contacto con la superficie miocárdica y da lugar a un mesotelio que crece y recubre progresivamente al miocardio. El epicardio genera, por un proceso localizado de transición epitelio-mesénquima, una población de células mesenquimáticas, las células derivadas de epicardio (CDEP). Las CDEP contribuyen al desarrollo del tejido conectivo del corazón y también dan lugar a los fibroblastos y las células musculares lisas de los vasos coronarios. Existen evidencias que sugieren la diferenciación de las CDEP en células endoteliales del plexo subepicárdico primitivo. De confirmarse esto, las CDEP mostrarían propiedades similares a los precursores vasculares bipotenciales derivados de células madre recientemente descritos, cuya diferenciación en endotelio y músculo liso se regula por exposición a VEGF y PDGF-BB, respectivamente. Además de las funciones señaladas en la formación de los tejidos vascular y conectivo del corazón, las CDEP podrían desempeñar un papel modulador esencial para la formación de la capa compacta ventricular del miocardio, un papel que podría estar regulado por el factor de transcripción WT1 y la producción de ácido retinoico (AU)


Assuntos
Animais , Camundongos , Humanos , Modelos Cardiovasculares , Músculo Liso Vascular , Mesoderma , Pericárdio , Aves , Vasos Sanguíneos , Diferenciação Celular , Quimera , Vasos Coronários , Técnicas Histológicas , Epitélio , Coração , Técnicas de Cultura
7.
Actas dermo-sifiliogr. (Ed. impr.) ; 91(11): 487-497, nov. 2000. ilus, tab
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-3976

RESUMO

Durante el embarazo se produce una transferencia de células desde el feto hacia la madre y viceversa. Algunas son células progenitoras hematopoyéticas capaces de persistir viables durante décadas, dando lugar a microquimerismos. Estos microquimerismos pueden estar implicados en la etiopatogenia de ciertas enfermedades, como la esclerosis sistémica. Mediante nested PCR para amplificar secuencias de ADN del gen SRY, específico del cromosoma Y, realizamos un estudio prospectivo a fin de investigar la presencia de microquimerismos fetales en 25 muestras de sangre, piel afecta y piel sana de 10 pacientes afectas de morfea que habían tenido uno o más hijos y/o abortos de sexo masculino o desconocido. La sensibilidad de la técnica fue del 0,01-0,004%. Se detectaron secuencias SRY en tres pacientes (dos muestras de sangre periférica, una de piel afecta y una de piel sana perilesional). Los resultados fueron negativos en las 30 muestras procedentes de 16 pacientes control, 11 de ellas potencialmente expuestas a microquimerismos masculinos durante la gestación. Estos hallazgos sugieren que los microquimerismos fetales podrían estar implicados en la etiopatogenia de la morfea. Sin embargo, su detección en piel aparentemente sana parece indicar que no son suficientes para el desarrollo de la enfermedad (AU)


Assuntos
Adulto , Gravidez , Feminino , Humanos , Quimera/imunologia , Complicações na Gravidez/diagnóstico , Esclerodermia Localizada/etiologia , Estudos Prospectivos , Sensibilidade e Especificidade , Cromossomo Y/imunologia , Complicações na Gravidez/imunologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Esclerodermia Localizada/diagnóstico
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