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1.
Rev. esp. enferm. dig ; 110(10): 634-640, oct. 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-177819

RESUMO

Background: non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is the most common cause of chronic liver disease in developed countries. Lifestyle changes are the pillar of the treatment, although a pharmacological approach is sometimes required in the case of a failure to respond/adhere to the diet. Objective: the aim of this study was to evaluate the effect of silymarin and the influence of the patatin-like phospholipase domain-containing protein 3 (PNPLA3) variant on the response to treatment in patients with NAFLD in a pilot study. Methods: a total of 54 patients with a NAFLD proven biopsy were enrolled in an open prospective study and were treated with Eurosil 85(R) (silymarin + vitamin E) for six months. Biochemical parameters and cardiovascular risk factors (diabetes mellitus, dyslipidemia, hypertriglyceridemia, arterial hypertension and HOMA-IR > 2.5) were recorded before and after six months of treatment. Non-invasive indexes (fatty liver index, lipid accumulation product and NAFLD-fibrosis score) were also calculated. The rs738409 PNPLA3 gene polymorphism status was also determined. Results: significant statistical changes from baseline values after six months of treatment were observed in transaminases levels but not in non-invasive index markers. Twenty patients (37.1%) were G allele carriers and had a higher percentage of lobular inflammation and ballooning on the basal liver biopsy. Patients with the G allele had a smaller decrease in transaminases levels after treatment with silymarin + vitamin E than non-G-allele carriers. Conclusions: treatment with silymarin + vitamin E produced a decrease in transaminases after six months of treatment without an accompanying weight loss. PNPLA3 G-allele carriers responded poorly to the treatment


No disponible


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Fígado Gorduroso/tratamento farmacológico , Silimarina/administração & dosagem , Vitamina E/administração & dosagem , Fosfolipases , Polimorfismo Genético/genética , Fígado Gorduroso/fisiopatologia , Biópsia , Testes de Função Hepática/estatística & dados numéricos , Resultado do Tratamento
3.
Rev. iberoam. micol ; 35(1): 17-21, ene.-mar. 2018. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-170917

RESUMO

Background. Candida tropicalis is an increasingly important human pathogen which usually affects neutropenic oncology patients with common hematogenous seeding to peripheral organs and high mortality rates. Candida pathogenicity is facilitated by several virulence attributes, including secretion of hydrolytic enzymes; however, little is known regarding the C. tropicalis ability to secrete them and their role in the disease. Aims. To confirm by molecular means the identification of 187 clinical isolates (127 from blood, 52 from urine, and 8 from diverse clinical origins) phenotypically identified as C. tropicalis, and to investigate their in vitro aspartyl proteinase, phospholipase, esterase, hemolysin, DNase and coagulase activities. Methods. The molecular confirmation was performed by ITS sequencing, and the enzymatic determinations were conducted using plate assays with specific substrates, with the exception of coagulase, which was determined by the classical tube test. Results. The majority of the strains exhibited a very strong or strong activity of aspartyl proteinase, phospholipase and esterase. A 4.7% of the bloodstream isolates were hemolysin producers, and all were negative for the coagulase and DNase assays. Conclusions. Very strong activities of aspartyl proteinase, phospholipase and esterase profiles were detected, and a statistical association between phospholipase production and blood and urine isolates was found (AU)


Antecedentes. Candida tropicalis es un patógeno del ser humano cada vez más importante que afecta especialmente a pacientes oncológicos neutropénicos, en los cuales es frecuente la diseminación hematógena del microorganismo a órganos periféricos, lo que conlleva elevadas tasas de mortalidad. La patogenicidad de Candida es facilitada por diversos factores de virulencia, incluyendo la secreción de enzimas hidrolíticas; sin embargo, poco se sabe respecto a la habilidad de C. tropicalis para su secreción, así como el papel que desempeña en la enfermedad. Objetivos. Confirmar por un método molecular la identidad de 187 aislamientos clínicos (127 de sangre, 52 de orina y 8 de orígenes diversos) fenotípicamente identificados como C. tropicalis y estudiar la actividad in vitro de las enzimas proteinasa aspártica, fosfolipasa, esterasa, hemolisina, DNasa y coagulasa. Métodos. La confirmación molecular se llevó a cabo mediante secuenciación del ITS y las determinaciones enzimáticas se llevaron a cabo mediante ensayos en placa con sustratos específicos, a excepción de la coagulasa, que se determinó mediante la clásica prueba en tubo. Resultados. La mayoría de los aislamientos analizados mostraron un perfil de actividad muy fuerte o fuerte de proteinasa aspártica, fosfolipasa y esterasa. El 4,7% de las cepas sanguíneas fue productora de hemolisinas y todas fueron negativas para coagulasa y DNasa. Conclusiones. Se detectaron perfiles con una actividad proteinasa aspártica, fosfolipasa y esterasa muy fuerte entre los aislamientos clínicos analizados, así como también se encontró asociación estadística entre la producción de fosfolipasa y aquellos aislamientos obtenidos de sangre y orina (AU)


Assuntos
Humanos , Candida tropicalis/isolamento & purificação , Candidíase/microbiologia , Ácido Aspártico Proteases/análise , Fosfolipases/análise , Esterases/análise , Proteínas Hemolisinas/análise , Desoxirribonucleases/análise , Coagulase/análise , Biomarcadores/análise , Técnicas In Vitro/métodos
4.
Rev. iberoam. micol ; 34(2): 77-82, abr.-jun. 2017. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-162493

RESUMO

Background. Cryptococcus neoformans is an encapsulated yeast causing mainly opportunistic infections. The virulence factors involved in cryptococcosis pathogenesis include the presence and the size of the polysaccharide capsule, the production of melanin by phenoloxidase, the growth at 37°C and the enzyme secretion like proteinase, phospholipase and urease. Many other enzymes are secreted by C. neoformans but their role in the fungus virulence is not yet known. Aims. In order to investigate this topic, we compared the phospholipase production between strains from patients and from bird droppings, and we examined its relationship to phenoloxidase production. We further characterized the strains by determining the activity of 19 different extracellular enzymes. Methods. Two hundred and five Italian C. neoformans clinical isolates and 32 environmental isolates were tested. Phenoloxidase production was determined by the development of brown colonies on Staib's agar. Extracellular phospholipase activity was performed using the semiquantitative egg-yolk plate method. API ZYM commercial kit was used to observe the production and the activity of 19 different extracellular enzymes. Results. Statistical analysis of the results showed a significantly higher phospholipase activity in the clinical isolates than in the environmental isolates. No significant difference about the phenoloxidase production between both groups was found. Regarding the 19 extracellular enzymes tested using the API ZYM commercial kit, acid phosphatase showed the highest enzymatic activity in both groups. Concerning the enzyme α-glucosidase, the clinical isolates presented a significantly higher positivity percentage than the environmental isolates. A hundred percent positivity in the enzyme leucine arylamidase production was observed in both groups, but the clinical isolates metabolized a significantly greater amount of substrate. Conclusions. The higher phospholipase production in the clinical isolates group confirms the possible role of this enzyme in the cryptococcosis pathogenesis. The extracellular activities of the enzymes acid phosphatase, α-glucosidase and leucine arylamidase, tested by means of the API ZYM commercial kit, appear to be very interesting. Many studies indicate that these enzymes are involved in the virulence of bacteria and parasites; our results suggest their possible role as virulence factors in Cryptococcus infections too (AU)


Antecedentes. Cryptococcus neoformans es una levadura encapsulada que produce infecciones oportunistas. Los factores de virulencia involucrados en la patogénesis de la criptococosis incluyen la existencia y el tamaño de la cápsula polisacarídica, la producción de melanina por medio de la enzima fenoloxidasa, el crecimiento a 37°C y la secreción de ciertas enzimas como proteinasa, fosfolipasa y ureasa. Existen otras enzimas que son secretadas por C. neoformans, pero su papel en la virulencia de este hongo aún no es conocido. Objetivos. Se investigó la producción de fosfolipasa tanto en aislamientos de C. neoformans obtenidos de pacientes como de aislamientos recuperados de deposiciones de aves, y se comparó el grado de producción con el de la síntesis de la enzima fenoloxidasa. Además, distingue las cepas mediante la definición de la actividad de 19 enzimas extracelulares diferentes. Métodos. Se estudiaron 205 aislamientos clínicos de C. neoformans y 32 ambientales. La producción de fenoloxidasa se determinó por el crecimiento de colonias de color marrón en medio de Staib. Para determinar la actividad fosfolipasa extracelular se utilizó el método semicuantitativo en placa con yema de huevo. Con el método comercial API ZYM se determinó la producción de otras 19 enzimas extracelulares. Resultados. El análisis estadístico de los resultados mostró una producción de fosfolipasa significativamente mayor entre los aislamientos clínicos en comparación con los ambientales. No se encontraron diferencias significativas entre ambos grupos en la producción de fenoloxidasa. En lo referente a las 19 enzimas extracelulares valoradas mediante el sistema API ZYM, la fosfatasa ácida mostró la mayor actividad en ambos grupos. Respecto a la enzima α-glucosidasa, nuevamente los aislamientos clínicos presentaron una actividad significativamente mayor. Todos los aislamientos de ambos grupos presentaron actividad leucina-arilamidasa, si bien los aislamientos clínicos procesaron mayor cantidad de sustrato de manera significativa. Conclusiones. La mayor producción de enzima fosfolipasa entre los aislamientos clínicos evidencia que esta enzima puede estar implicada en la patogénesis de la criptococosis. También es interesante la actividad extracelular de las enzimas fosfatasa ácida, α-glucosidasa y leucina-arilamidasa, valorada por medio del sistema comercial API ZYM. Diversos estudios apuntan a que estas enzimas están implicadas en la virulencia de bacterias y parásitos; nuestros resultados muestran también su posible implicación como factores de virulencia en las infecciones por Cryptococcus (AU)


Assuntos
Humanos , Criptococose/enzimologia , Cryptococcus neoformans/enzimologia , Cryptococcus neoformans/patogenicidade , Fosfolipases/análise , Polissacarídeos Fúngicos/isolamento & purificação , Melaninas/análise , Monofenol Mono-Oxigenase/análise
5.
Rev. iberoam. micol ; 32(2): 79-82, abr.-jun. 2015. tab, graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-137305

RESUMO

Background: Candida species, in conditions of microbiota imbalance or decreased immune defenses, may be one of the main human fungal pathogens. Virulence factors constitute the mechanisms used by the fungus to avoid host defenses. Aims: This study aimed to investigate the in vitro production of virulence factors, such as hemolytic activity, and deoxyribonuclease (DNase), proteinase, and phospholipase activities in Candida spp. Methods: Fifty clinical isolates were analyzed for virulence factors: Candida albicans (15), Candida tropicalis (15), Candida parapsilosis (10), Candida glabrata (5), and Candida krusei (5). Hemolytic activity was determined in Sabouraud dextrose agar plates containing 3% glucose and 7% sheep red cells. Culture media containing, respectively, agar-base DNA, egg yolk, and bovine albumin were used to determine DNase, phospholipase and proteinase activities, respectively. Results: Forty-eight (96%) of 50 isolates showed hemolytic activity, with 10 (20%) positive for DNase, 19 (38%) for proteinase, and 16 (32%) for phospholipase. Statistically significant differences were observed between species for phospholipase (p < 0.0001) and proteinase (p < 0.05) production. Conclusions: It is concluded that all species had hemolytic activity. DNase activity was detected in all species except in C. glabrata; proteinase activity was detected in C. albicans, C. tropicalis, and C. parapsilosis; and phospholipase activity was observed in C. albicans and C. tropicalis (AU)


Antecedentes: Las levaduras del género Candida, en condiciones de desequilibrio de la microbiota o de disminución de las defensas inmunológicas, pueden ser uno de los principales patógenos fúngicos del hombre. Los factores de virulencia constituyen los mecanismos utilizados por el hongo para evadir las defensas del huésped. Objetivos: Este estudio tiene como objetivo investigar la producción in vitro de algunos factores de virulencia, como la actividad hemolítica, y las actividades desoxirribonucleasa (DNasa), proteinasa y fosfolipasa en Candidaspp. Métodos: Se analizaron 50 aislamientos clínicos: Candida albicans (15), Candida tropicalis (15), Candida parapsilosis (10), Candida glabrata (5), y Candida krusei (5). La actividad hemolítica fue determinada en placas de agar glucosado de Sabouraud, con glucosa al 3% y un 7% de hematíes de oveja. Los medios de cultivo de agar-ADN, yema de huevo y albúmina bovina fueron utilizados para determinar las actividades DNasa, fosfolipasa y proteinasa, respectivamente. Resultados: De los 50 aislamientos, 48 (96%) presentaron actividad hemolítica, 10 (20%) fueron positivos para DNasa, 19 (38%) para proteinasa y 16 (32%) para fosfolipasa. Se observaron diferencias estadísticamente significativas entre las especies para las actividades fosfolipasa (p < 0,0001) y proteasa (p < 0,05). Conclusiones: Se concluye que todas las especies estudiadas poseen actividad hemolítica. La actividad DNasa fue detectada en todas las especies, excepto en Candida glabrata; la actividad proteinasa fue detectada en C. albicans, C. tropicalis y C. parapsilosis, y la actividad fosfolipasa se observó en C. albicans y C. tropicalis (AU)


Assuntos
Candida/enzimologia , Desoxirribonucleases/análise , Ácido Aspártico Proteases/análise , Fosfolipases/análise , Candida/patogenicidade , DNA Fúngico , DNA Ligases/análise
6.
Rev. iberoam. micol ; 32(2): 122-125, abr.-jun. 2015. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-137315

RESUMO

Background: cases of superficial and invasive mycoses caused by emerging species of Candida have been increasingly reported over the last thirty years. The production of hydrolytic enzymes plays a central role in the fungal infective process. In Candida infections the secretion of both proteases and phospholipases are well-known virulence attributes. Aims: to determine the protease and phospholipase production from 58 human clinical isolates of Candida obtained from individuals with cutaneous candidiasis seen in the Human and Veterinary Diagnostic Mycology Sector from Universidade Federal Fluminense (UFF), Brazil, from November 2008 to August 2009. Methods: fungal identification was performed using biochemical tests. Proteolytic activity was detected on agar plates containing bovine serum albumin, and phospholipase production was determined on egg-yolk plates. Results: the Candida species isolated were Candida parapsilosis (27.59%), Candida famata (18.96%), Candida albicans (15.52%), Candida haemulonii (12.06%), Candida ciferri (8.62%), Candida guilliermondii (6.90%), Candida tropicalis (5.17%) and Candida lipolytica (5.17%). All isolates of C. albicans produced both protease and phospholipase. As regards the isolates of non-C. albicans Candida species, 53.06% and 4.08% were able to produce protease and phospholipase, respectively. For example, the majority of isolates of C. parapsilosis (15/16) produced protease, while 40% of C. ciferri isolates (2/5) were phospholipase producers. This study shows, for the first time, that C. ciferri and C. haemulonii strains were able to produce protease. Conclusions: collectively, our results showed that different species of Candida isolated from cutaneous lesions were able to produce proteases and/or phospholipases, which are multifunctional molecules directly involved in the infectious process of these fungi


Antecedentes: Los casos de micosis superficiales e invasoras relacionados con las especies emergentes de Candida se han reportado progresivamente durante las últimas tres décadas. La producción de enzimas hidrolíticas juega un papel central en varios contextos de la patogenicidad fúngica. Con respecto a la infección por Candida, la secreción de proteasas y fosfolipasas son atributos de virulencia bien conocidos. Objetivos: Determinar y comparar la producción de proteasa y fosfolipasa de 58 aislamientos clínicos humanos de diferentes especies de Candida obtenidos de pacientes con candidiasis cutánea, atendidos en el Sector de Diagnóstico Micológico Humano y Veterinario de la Universidad Federal Fluminense (UFF), durante el período de noviembre de 2008 a agosto de 2009. Métodos: La identificación de las especies de Candida se realizó mediante pruebas bioquímicas, la actividad proteolítica se detectó en placas de agar que contenían albúmina de suero bovino y la actividad fosfolipasa se determinó utilizando el método de la placa de yema de huevo semi-cuantitativa. Resultados: Las especies aisladas fueron Candida parapsilosis (27,59%), Candida famata (18,96%), Candida albicans (15.52%), Candida haemulonii(12,06%), Candida ciferri(8,62%), Candida guilliermondii(6,90%), Candida tropicalis (5,17%) y Candida lipolytica (5,17%). Todos los aislamientos de C. albicans produjeron tanto proteasa como fosfolipasa. El 53,06% de los aislamientos de Candida no-C. albicans fueron capaces de producir proteasa y el 4,08% fosfolipasa. La mayoría de los aislamientos de C. parapsilosis (15/16) produjo proteasa, mientras que el 40% de los aislamientos de C. ciferri (2/5) fueron productores de fosfolipasa. Se describe por primera vez en la literatura científica la producción de proteasas por cepas de C. haemulonii y C. ciferri. Conclusiones: Nuestros resultados muestran el potencial que tienen los aislamientos de Candida provenientes de lesiones cutáneas para producir proteasas y fosfolipasas (AU)


Assuntos
Humanos , Candidíase Cutânea/microbiologia , Candida/patogenicidade , Fosfolipases/análise , Peptídeo Hidrolases/análise , Candida/enzimologia , Fatores de Virulência
7.
Rev. iberoam. micol ; 28(4): 179-182, oct.-dic. 2011.
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-91060

RESUMO

Antecedentes. El género Malassezia incluye numerosas levaduras lipofílicas que pertenecen a la microbiota cutánea del hombre y de otros mamíferos. Algunas especies se han asociado con diversas dermatosis. Apenas se conocen los factores que permiten la transformación de las levaduras del género Malassezia de un microorganismo comensal a uno patógeno, pero la producción de diversas enzimas, como lipasas, fosfolipasas y lipooxigenasa, podría contribuir a la actividad patogénica de estas levaduras. Objetivos. En la presente investigación hemos determinado y comparado la actividad de la fosfolipasa extracelular a partir de 60 aislamientos de Malassezia en seres humanos para relacionar esta característica con las especies del género y con el origen (dermatosis o no) de las cepas examinadas. Métodos. La producción de fosfolipasa se determinó utilizando el método semicuantitativo de la placa de yema de huevo. Resultados y conclusiones. Malassezia obtusa, Malassezia slooffiae, Malassezia globosa y Malassezia restricta crecieron mal en el medio de cultivo seleccionado, por lo que no fue posible determinar la actividad fosfolipasa. Malassezia pachydermatis mostró la mayor actividad enzimática. Produjeron fosfolipasa 29 cepas de Malassezia sympodialis; los aislamientos de pacientes con pitiriasis versicolor se caracterizaron por una actividad fosfolipasa significativamente mayor que los aislamientos de individuos sanos. Esta observación sugiere que la actividad fosfolipasa de Malassezia podría desempeñar un papel en el inicio de las lesiones cutáneas, en particular en el caso de la mencionada micosis(AU)


Background. The Malassezia genus includes mainly lipophilic yeasts belonging to the cutaneous microbiota of man and other mammals. Some Malassezia species have been associated with various dermatological diseases. The factors permitting the transformation of yeasts of the Malassezia genus from a commensal organism to a pathogenic agent are still little known but the production of various enzymes such as lipase, phospholipase and lipoxygenase could contribute to the pathogenic activity of these yeasts. Aims. Here we have determined and compared the extracellular phospholipase activity of sixty human isolates of Malassezia so as to relate this feature to the species of Malassezia and to the origin (from dermatological diseases or not) of the strains examined. Methods. Phospholipase production was determined using the semi-quantitative egg-yolk plate method. Results and conclusions. Malassezia obtusa, Malassezia slooffiae, Malassezia globosa, Malassezia restricta had difficulty developing in the chosen culture medium so that it was not possible to measure phospholipasic activity. Malassezia pachydermatis showed the highest phospholipase activity. Twenty-nine Malassezia sympodialis strains produced phospholipase; the isolates from patients with pityriasis versicolor had significantly higher phospholipasic activity than those isolated from healthy individuals. This observation suggests that the phospholipasic activity of Malassezia may play a role in the onset of skin lesions, especially in the case of pityriasis versicolor(AU)


Assuntos
Fosfolipases/isolamento & purificação , Malassezia/isolamento & purificação , Dermatopatias/complicações , Dermatopatias/diagnóstico , Gema de Ovo , Gema de Ovo/microbiologia , Malassezia/patogenicidade , Malassezia , Gema de Ovo/metabolismo
8.
Rev. iberoam. micol ; 26(3): 202-205, sept. 2009. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-75542

RESUMO

Se aislaron 110 cepas que pertenecían a siete especies de Candida procedentes de pacientes diabéticos con distintas formas de candidiasis, encontrándose 53 aislamientos de Candida albicans (47%), 36 de Candida tropicalis (33%), 9 de Candida glabrata (8%), 4 de Candida parapsilosis (4%), 2 de Candida guilliermondii (2%), 5 de Candida krusei (5%) y 1 de Candida kefyr (1%). En las 53 cepas de C. albicans aisladas se estudió la expresión de factores de virulencia tales como la hidrofobicidad de la superficie celular (CSH), adherencia a células epiteliales bucales humanas (BEC) y actividad enzimática. La actividad proteolítica se detectó en el 100% de las cepas de C. albicans, mientras que la producción de fosfolipasa se detectó en 52 cepas (98%). Se estudió la variación fenotípica y su influencia en factores de patogenicidad en dos cepas de C. albicans, procedentes de boca y vagina respectivamente, y en la cepa patrón C. albicans NCPF 3153A. Se les indujo la variación fenotípica mediante exposición a luz UV y se valoró el grado de expresión de los factores de virulencia por las diversas formas morfológicas obtenidas. Se obtuvieron tres variaciones morfológicas de C. albicans: forma de estrella (S), rugosa (W) y anular (R), a partir de la variedad lisa original (O). La actividad proteinasa fue mayor en el tipo W, seguida por el tipo R, y por el tipo O; el tipo S fue el de menor actividad proteolítica. La actividad fosfolipasa fue mayor en el tipo O, seguida por el tipo R; los tipos W y S presentaron una actividad fosfolipasa menor. La expresión de la CSH y de la adherencia fue superior en el tipo O, seguida por el tipo R y el tipo W, y finalmente el tipo S. Las variaciones fenotípicas de C. albicans presentan una expresión diferenciada de factores de virulencia y ello puede proveer a un tipo morfológico particular de ciertas ventajas, facilitando el inicio de una candidiasis(AU)


A total of 110 strains belonging to seven species of Candida were isolated from various forms of candidiasis in diabetic patients. They were Candida albicans 53 (47%), Candida tropicalis 36 (33%), Candida glabrata 9 (8%), Candida parapsilosis 4 (4%), Candida guilliermondii 2 (2%), Candida krusei 5 (5%) and Candida kefyr 1 (1%). All 53 strains of C. albicans isolated were observed to express virulence factors such as cell surface hydrophobicity (CSH), adherence to human buccal epithelial cell (BEC) and proteinase activity (100%), while phospholipase activity was observed in 52 (98%). Phenotypic switching and its influence on the pathogenicity of C. albicans were studied. Two C. albicans strains isolated from oral and vaginal thrush, respectively, in diabetic individuals, and the control strain C. albicans NCPF 3153A were induced to undergo phenotypic switching by exposure to UV light and the degree of expression of virulence factors by the different morphological forms was determined. Three different morphological forms of C. albicans were obtained, namely Star (S), Wrinkled (W) and Ring (R) types from the original Smooth (O) variety. It was found that proteinase activity was greatest with the W type followed by the R type then the O type. The S type produced the least proteinase. The phospholipase activity was greatest with O type followed by R type. The W and S types produced the least phospholipase. Expression of CSH and adherence was greatest in the O type followed by the R and then the W type and finally the S type. Differential expression of virulence factors occurs with different phenotypic forms of C. albicans and this may provide a particular morphological type with a distinct advantage over other types in causing candidiasis(AU9


Assuntos
Candida albicans/patogenicidade , Candida albicans/isolamento & purificação , Candidíase/microbiologia , Fenótipo , Interações Hidrofóbicas e Hidrofílicas , Peptídeo Hidrolases/análise , Fosfolipases/análise
9.
Rev. iberoam. micol ; 25(1): 12-16, 2008. tab, ilus
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-75011

RESUMO

poco frecuente, en nuestro servicio asistencial encontramos una prevalenciamayor de la habitual. Por ello nos propusimos estudiar la actividad deproteinasas y fosfolipasas, factores de virulencia de Candida albicans, paradeterminar su participación en dicha asociación. De los 70 aislamientos delgénero Candida recuperados de secreciones vaginales, 65 correspondieron aC. albicans, de los cuales 26 se aislaron de secreciones vaginales conpH > 4,5, y 39 de muestras con pH <= 4,5. Para evaluar la actividad fosfolipasase usaron los medios agar malta y agar glucosado de Sabouraudsuplementados con yema de huevo. La actividad proteolítica se detectó por elmétodo en placa utilizando un medio base con albúmina sérica bovina comoúnica fuente de nitrógeno. La actividad fosfolipasa no mostró diferenciassignificativas entre las cepas procedentes de los dos grupos estudiados(p = 0,2003). La actividad proteolítica se detectó en el 61,5% de losaislamientos recuperados a pH <= 4,5 mientras que a pH > 4,5 dicho valor fue96,2%, siendo significativamente mayor en el segundo grupo (p = 0,0001).De los resultados obtenidos deducimos que la coexistencia de candidiasisvulvovaginal con vaginosis bacteriana podría deberse a la actividad proteolíticade cepas de C. albicans y no a la actividad fosfolipasa de las mismas(AU)


Even though vulvovaginal candidiasis and bacterial vaginosis are seldomsimultaneously found, we have detected this association at an above averagefrequency. Thus, we set out to study the activity of proteinases andphospholipases, virulence factors of Candida albicans, to assess their role inthe above mentioned association. Of a total of 70 Candida isolates wereretrieved from samples of vaginal secretions analyzed at our DiagnosticService, 65 were identified as C. albicans (a group of n = 26 obtained fromclinical samples of pH > 4.5 and a group of n = 39 from clinical samples ofpH <= 4.5). The evaluation of phospholipases activity was performed on maltagar and Sabouraud dextrose agar with the addition of egg yolk as substrate.The proteolytic activity was detected on plates of agar base medium with theaddition of bovine albumin serum as substrate as sole nitrogen source.Phospholipases activity was essentially the same in both groups of samples(p = 0.2003). Proteolytic activity was detected in 61.5% of the isolates fromthe group with pH < 4.5 and in 96.2% in the group with pH > 4.5; being theformer much higher than the latter (p = 0.0001). Based on these results wepostulate that the simultaneous occurrence of bacterial vaginosis andvulvovaginal candidiasis could be related to the proteolytic activity butunrelated to phospholipases activity


Assuntos
Humanos , Feminino , Candida albicans/isolamento & purificação , Peptídeo Hidrolases , Fosfolipases , Candidíase Vulvovaginal/microbiologia , Descarga Vaginal/microbiologia , Candida albicans/enzimologia , Fatores de Virulência , Concentração de Íons de Hidrogênio
10.
Rev. iberoam. micol ; 25(4): 208-210, 2008. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-75057

RESUMO

El número de fungemias nosocomiales debidas a especies de Candida haaumentado en las últimas décadas. Para producir una infección, los patógenosoportunistas tienen que evadir el sistema inmunológico, sobrevivir y dividirse enlos tejidos del huésped y diseminarse a otros órganos. La secreción deproteinasa y fosfolipasa ha sido descrita como factor potencial de virulencia dealgunas especies de Candida responsables de candidemias en pacientes concatéteres ingresados en las unidades de cuidados intensivos. En este trabajo seha tratado de demostrar que la secreción de los enzimas proteinasa yfosfolipasa son factores de virulencia de especies de Candida aisladas dehemocultivos de pacientes admitidos en las unidades de cuidados intensivos,unidades de diálisis y unidades de oncología. Ciento catorce aislamientos deCandida fueron obtenidos de muestras de sangre; se identificaron las siguientesespecies: Candida albicans (37), Candida glabrata (7), Candida guilliermondii (5),Candida kefyr (3), Candida krusei (45), Candida parapsilosis (5) y Candidatropicales (12). La detección de proteinasa fue realizada utilizando el método deStaib, y la de fosfolipasa utilizando el método de Samaranayake et al.Se determinó la zona de precipitación (valor de Pz). El porcentaje deaislamientos que produjo cantidades perceptibles de proteinasa fue 74,56%;los aislamientos productores de fosfolipasa fueron el 44,73%. En el presenteestudio se pudo observar que la producción de proteinasa y fosfolipasa puedeser un factor importante de virulencia en las fungemias causadas por Candidaindependientemente de la especie que haya sido aislada(AU)


The number of nosocomial blood stream infections due to Candida species hasincreased over the past few decades. In order to establish an infection,opportunistic pathogens have to evade the immune system, survive, divide inthe host environment, and spread to other tissues. Proteinase andphospholipase secretion has been implicated as potential virulence factors forsome Candida species responsible for catheter related candidemia in intensivecare unit (ICU) patients with indwelling devices. We therefore have aimed atdemonstrating the secretion of proteinase and phospholipase enzymes asvirulent factors by Candida species isolated from blood samples collected fromICUs, dialysis units and oncology units. One hundred and fourteen isolates ofCandida species were obtained from the blood samples and the isolates include37 Candida albicans, 7 Candida glabrata, 5 Candida guilliermondii, 3 Candidakefyr, 45 Candida krusei, 5 Candida parapsilosis, and 12 Candida tropicalis.Proteinase assay was performed by using the Staib method. Phospholipaseassay was performed by using the method of Samaranayake et al. Precipitationzone (Pz value) was determined. The percentage of isolates which produceddetectable amounts of proteinase is 74.56% and 44.73% of isolates produceddetectable amounts of phospholipase. We believe that production of bothphospholipase and proteinase enzimes could be an important virulence factorfor several Candida species(AU)


Assuntos
Humanos , Peptídeo Hidrolases/análise , Fosfolipases/análise , Candida/patogenicidade , Candidíase/enzimologia , Fatores de Virulência , Candida/isolamento & purificação
11.
Rev. diagn. biol ; 54(4): 301-303, oct.-dic. 2005. tab
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-044007

RESUMO

Rhodotorula ha sido implicada como agente etiológico dediversas infecciones, sobre todo en pacientes inmunocomprometidos,ya que esta levadura solamente llega a ser patógenaen determinadas circunstancias. En este estudio se determinanlos factores de patogenicidad implicados en las infecciones poresta levadura. Ensayamos un total de 50 muestras clínicas deRhodotorula, investigando las enzimas hidrolíticas esterasa,fosfatasa ácida, proteinasa y fosfolipasa. Todas las cepas mostraronpositividad para fosfatasa ácida; sin embargo la actividadpara las otras enzimas fue negativa. La ausencia de actividadde las enzimas proteinasa y fosfolipasa confirma la escasapatogenicidad del género Rhodotorula


Rhodotorula has been implicated as the ethiologic agent ofhuman infections mainly in immunocompromised patients,because this yeast only became pathogen in special circumstances.This study has been carried to determinate the virulencefactors implicated in the infections by this yeast. A total of50 strains of Rhodotorula isolated from clinical samples werestudied. Hidrolytic enzymes esterase, acid phosphatase, proteinaseand phospholipase were performed. All strains showedpositivity to acid phosphatase. However the activity to otherenzymes was negative. The absence of enzymatic activity toproteinase and phospholipase confirm the limited pathogenicityof the Rhodotorula genus


Assuntos
Rhodotorula/patogenicidade , Micoses/enzimologia , Peptídeo Hidrolases , Fosfolipases , Fosfatase Ácida
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