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2.
Actual. osteol ; 15(1): 34-43, ene. abr. 2019. ilus.
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: biblio-1049002

RESUMO

La brucelosis es una de las enfermedades zoonóticas más importantes a nivel mundial capaz de producir enfermedad crónica en los seres humanos. La localización osteoarticular es la presentación más común de la enfermedad activa en el hombre. Sin embargo, algunos de los mecanismos moleculares implicados en la enfermedad osteoarticular han comenzado a dilucidarse recientemente. Brucella abortus induce daño óseo a través de diversos mecanismos en los cuales están implicados TNF-α y RANKL. En estos procesos participan células inflamatorias que incluyen monocitos/macrófagos, neutrófilos, linfocitos T del tipo Th17 y linfocitos B. Además, B. abortus puede afectar directamente las células osteoarticulares. La bacteria inhibe la deposición de la matriz ósea por los osteoblastos y modifica el fenotipo de estas células para producir metaloproteinasas de matriz (MMPs) y la secreción de citoquinas que contribuyen a la degradación del hueso. Por otro lado, la infección por B. abortus induce un aumento en la osteoclastogénesis, lo que aumenta la resorción de la matriz ósea orgánica y mineral y contribuye al daño óseo. Dado que la patología inducida por Brucella afecta el tejido articular, se estudió el efecto de la infección sobre los sinoviocitos. Estos estudios revelaron que, además de inducir la activación de estas células para secretar quemoquinas, citoquinas proinflamatorias y MMPs, la infección inhibe la muerte por apoptosis de los sinoviocitos. Brucella es una bacteria intracelular que se replica en el retículo endoplásmico de los macrófagos. El análisis de los sinoviocitos infectados con B. abortus indicó que las bacterias también se multiplican en el retículo endoplasmático, lo que sugiere que la bacteria podría usar este tipo celular para la multiplicación intracelular durante la localización osteoarticular de la enfermedad. Los hallazgos presentados en esta revisión intentan responder a preguntas sobre los mediadores inflamatorios implicados en el daño osteoarticular causado por Brucella. (AU)


Brucellosis is one of the most important zoonotic diseases that can produce chronic disease in humans worldwide. Osteoarticular involvement is the most common presentation of human active disease. The molecular mechanisms implicated in bone damage have started to be elucidated. B. abortus induces bone damage through diverse mechanisms in which TNF-α and RANKL are implicated. These processes are driven by inflammatory cells, including monocytes/macrophages, neutrophils, Th17 lymphocytes and B cells. Also, Brucella abortus (B. abortus) can directly affect osteoarticular cells. The bacterium inhibits bone matrix deposition by osteoblast and modifies the phenotype of these cells to produce matrix methalloproteinases (MMPs) and cytokine secretion that contribute to bone matrix degradation. B. abortus also affects osteoclast increasing mineral and organic bone matrix resorption and contributing to bone damage. Since the pathology induced by Brucella species involves joint tissue, experiments conducted in sinoviocytes revealed that besides inducing the activation of these cells to secrete chemokines, proinflammatory cytokines and MMPS, the infection also inhibits sinoviocyte apoptosis. Brucella is an intracellular bacterium that replicate in the endoplasmic reticulum of macrophages. The analysis of B. abortus infected sinoviocytes indicated that bacteria also replicate in their reticulum suggesting that the bacterium could use this cell type for intracellular replication during the osteoarticular localization of the disease. The findings presented in this review try to answer key questions about the inflammatory mediators involved in osteoarticular damage caused by Brucella. (AU)


Assuntos
Humanos , Animais , Osteoartrite/patologia , Brucella abortus/patogenicidade , Brucelose/patologia , Osteoartrite/imunologia , Osteoblastos/patologia , Osteócitos/microbiologia , Osteogênese/imunologia , Brucella abortus/imunologia , Brucelose/etiologia , Brucelose/imunologia , Linfócitos B/patologia , Citocinas/efeitos adversos , Fator de Necrose Tumoral alfa/efeitos adversos , Metaloproteinases da Matriz/síntese química , Ligante RANK/efeitos adversos , Células Th17/patologia , Sinoviócitos/imunologia , Macrófagos/patologia , Neutrófilos/patologia
3.
Belo Horizonte; s.n; 2019. 130 p. ilus, tab.
Tese em Inglês, Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-1016561

RESUMO

Os objetivos deste trabalho foram 1) avaliar o impacto da terapia anticoagulante oral no sangramento associado à exodontias durante os períodos intraoperatório e pósoperatório; 2) investigar os efeitos do etexilato de dabigatrana, um inibidor direto da trombina, sobre as células ósseas. Para atender o objetivo 1, foram recrutados indivíduos em uso de anticoagulantes orais do tipo antagonista de vitamina K (AVK) e alvo-específico (DOAC, do inglês direct oral anticoagulant) e indivíduos sem terapia anticoagulante com indicação de exodontia. As exodontias foram realizadas sem a suspensão da terapia anticoagulante e parâmetros associados a desfechos hemorrágicos foram avaliados. A avaliação quantitativa do sangramento intraoperatório foi realizada por meio da mensuração do volume e análise dos fluidos aspirados durante o procedimento e normalizada por um escore. Obtivemos como resultados que as complicações hemorrágicas pós-operatórias bem como o escore de sangramento intraoperatório foi similar entre os grupos, sendo que nenhum evento hemorrágico foi observado no grupo DOAC. A história prévia de complicações hemorrágicas em procedimentos odontológicos (p=0,001) e uso de medidas hemostáticas locais (p=0,017) foram estatisticamente maiores no grupo AVK. Para atender o objetivo 2, experimentos foram conduzidos a partir de modelo in vitro, no qual o efeito da terapia anticoagulante foi avaliado diretamente sobre as células ósseas e em modelo animal ex-vivo. Neste modelo ex-vivo, células de animais previamente tratados com etexilato de dabigatrana foram diferenciadas em osteoclastos. Culturas primárias de células-tronco de camundongos e ratos foram diferenciadas em osteoclastos e osteoblastos e tratadas com o fármaco disponível comercialmente, etexilato de dabigatrana (Pradaxa® 1-6 µg/mL) bem como seu princípio ativo, dabigatrana (0,1, 0,3, 3 e 6 µg/mL). Células não expostas aos medicamentos foram utilizadas como controle. A diferenciação de osteoclastos foi inibida pelo tratamento em ambos os modelos, in vitro e ex-vivo. Paralelamente, observou-se a redução da expressão gênica e proteica do marcador Catepsina K e da atividade reabsortiva destas células. Nas culturas de osteoblastos, o tratamento inibiu a expressão gênica dos marcadores fosfatase alcalina (ALP) e osteocalcina, reduziu a atividade in situ de ALP e a deposição de matriz extracelular, indicando um efeito negativo na diferenciação dos osteoblastos. Concluiu-se que o uso de anticoagulantes orais não aumentou a ocorrência de desfechos hemorrágicos na população estudada, o que reforça a manutenção da terapia para a realização de exodontias. O tratamento sobre culturas celulares utilizando etexilato de dabigatrana impactou negativamente a diferenciação e atividade de osteoclastos e osteoblastos.(AU)


The objectives of this study were 1) to evaluate the impact of oral anticoagulant therapy on the pattern of intraoperative and postoperative bleeding in dental surgery; 2) to investigate the effects of dabigatran etexilate, a direct thrombin inhibitor, on bone cells. To fulfill objective 1, individuals undergoing oral anticoagulant therapy with vitamin K antagonists (VKA) or direct oral anticoagulants (DOAC) and individuals without anticoagulant therapy, who had indication of dental extraction were included. Dental surgery procedures were performed without interruption of anticoagulant therapy and parameters associated with hemorrhagic outcomes were evaluated. Intraoperative bleeding was evaluated by means of the measurement of the total amount of blood collected during the procedure corrected by absorbance reading and normalized by score. The results showed that the occurrence of bleeding events and the intraoperative blood loss were similar among groups and hemorrhagic episodes were not observed amongst the individuals taking DOACs. The previous history of complications in dental procedures (p=0.001) and the use of additional hemostatic measures (p=0.017) were significantly higher in the VKA group. To fulfill objective 2, experiments were conducted by means of an in vitro model in which the direct effect of anticoagulant therapy on bone cells was evaluated. An ex-vivo animal model in which cells of animals previously treated with dabigatran etexilate were differentiated was also carried out into osteoclasts. Primary cultures of mice and rats cells were differentiated into osteoclasts and osteoblasts and treated with dabigatran etexilate solution (Pradaxa® 1-6 µg/mL) and its active principle dabigatran (0.1, 0.3, 3 and 6 µg/mL). Untreated cells were used as controls and the effects of the treatment on cell viability and differentiation were evaluated. Both dabigatran etexilate and its active principle, dabigatran inhibited osteoclast differentiation and activity in vitro and in the ex-vivo model, as demonstrated by the reduction of resorption pits and cathepsin K gene and protein expression. In osteoblast cultures, dabigatran etexilate reduced the in situ alkaline phosphatase (ALP) activity, matrix mineralization and gene expression of ALP and osteocalcin. These findings indicated osteoblast inhibition. In conclusion, oral anticoagulant therapy did not result in increased bleeding outcomes in this sample, which strengthen the advocacy of the maintenance of the therapy during dental surgery. Dabigatran etexilate treatment impaired the activity and differentiation of osteoclasts and osteoblasts.(AU)


Assuntos
Humanos , Osteoblastos , Cirurgia Bucal , Extração Dentária , Varfarina , Hemorragia Pós-Operatória , Dabigatrana , Anticoagulantes/uso terapêutico , Estudos de Coortes
4.
Acta cir. bras ; 34(4): e201900408, 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1001086

RESUMO

Abstract Purpose: To evaluate histologically and immunohistochemically the bone regeneration after application of simvastatin on tibial bone defects in rats. Methods: Sixty Wistar albino rats were divided into 3 groups as control (6 mm tibial bone defect), defect + graft (allograft treatment), and defect + graft + simvastatin (10 mg/kg/day) for 28 days. Results: Histopathological examination revealed inflammation in control group (defect group), congestion in blood vessels, and an increase in osteoclast cells. In defect + graft group, osteoclastic activity was observed and osteocyte cells were continued to develop. In defect + graft + simvastatin group, osteocytes and matrix formation were increased in the new bone trabeculae. Osteopontin and osteonectin expression were positive in the osteclast cells in the control group. Osteoblasts and some osteocytes showed a positive reaction of osteopontin and osteopontin. In defect + graft + simvastatin group, osteonectin and osteopontin expression were positive in osteoblast and osteocyte cells, and a positive expression in osteon formation was also seen in new bone trabeculae. Conclusion: The simvastatin application was thought to increase bone turnover by increasing the osteoinductive effect with graft and significantly affect the formation of new bone.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Tíbia/efeitos dos fármacos , Regeneração Óssea/efeitos dos fármacos , Sinvastatina/farmacologia , Osteoblastos , Osteoclastos , Tíbia/cirurgia , Tíbia/patologia , Remodelação Óssea/efeitos dos fármacos , Ratos Wistar , Modelos Animais de Doenças , Autoenxertos
5.
Acta cir. bras ; 34(2): e201900210, 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-989058

RESUMO

Abstract Purpose: To analyze aspects of the biomodulating effect of light in biological tissues, bone cells from surgical explants of the femur of rats were irradiated with low intensity laser. Methods: Bone cells were cultured and irradiated with LASER light (GaAlAs). Growth, cell viability, mineralized matrix formation, total protein dosage, immunostimulatory properties, cytochemical analysis, gene expression of bone proteins were examined using live cell imaging and cell counting by colorimetric assay. The gene expression of: alkaline phosphatase (ALP), type 1 collagen, osteocalcin and osteopontin through the real-time polymerase chain reaction. Results: At 8 days, the viability of the irradiated culture was 82.3% and 72.4% in non-irradiated cells. At 18 days, the cellular viability (with laser) was 77.42% and 47.62% without laser. At 8 days, the total protein concentration was 21.622 mg / mol in the irradiated group and 16, 604 mg / mol in the non-irradiated group and at 18 days the concentration was 37.25 mg / mol in the irradiated group and 24, 95 mg / mol in the non-irradiated group. Conclusion: The laser interfered in the histochemical reaction, cell viability, matrix mineralization, and maintained the cellular expression of proteins


Assuntos
Animais , Ratos , Osteoblastos/efeitos da radiação , Diferenciação Celular/efeitos da radiação , Sobrevivência Celular/efeitos da radiação , Terapia com Luz de Baixa Intensidade/métodos , Fatores de Tempo , Células Cultivadas , Ratos Wistar , Relação Dose-Resposta à Radiação
6.
Acta cir. bras ; 34(7): e201900704, 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1038112

RESUMO

Abstract Purpose: The effects of resveratrol administration on calvarial bone defects with alloplastic graft material was investigated for osteoinductive reaction and bone development in rats. Methods: Healthy male rats were randomly divided into 3 groups consisting of 10 rats. Groups were as follows: control (defect) group, defect + graft group, and defect + graft + resveratrol group. A calvarial bone defect was created in all groups, alloplastic bone grafts were applied to the defect in the 2nd and 3rd group, resveratrol (5 mg/kg/day) was added to the drinking water of the animals following graft application for 28 days in the 3rd group. Results: Increase in osteoclasts and necrotic changes were observed histopathologically in the control group. In the 2nd group, reduction of inflammation, congestion of blood vessels, increased osteblastic activity, osteoinductive effect, progression of osteocyte development and increased collagen fibers in connective tissue were observed. In the 3rd group, osteoblasts seemed to secrete bone matrix and accelerate osteoinductive effect with increased osteopregenitor activity and positive osteopontin and osteonectin expressions. Conclusion: Resveratrol treatment was thought to be an alternative and supportive drug for implant application by inducing new bone formation in the calvaral defect region as a result of short-term treatment.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Crânio/cirurgia , Regeneração Óssea/efeitos dos fármacos , Transplante Ósseo/métodos , Substitutos Ósseos/administração & dosagem , Resveratrol/administração & dosagem , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteogênese/efeitos dos fármacos , Crânio/efeitos dos fármacos , Esquema de Medicação , Osteonectina/administração & dosagem , Osseointegração/efeitos dos fármacos , Substitutos Ósseos/uso terapêutico , Modelos Animais de Doenças , Osteopontina/administração & dosagem
7.
Int. j. morphol ; 36(2): 391-394, jun. 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-954126

RESUMO

Resveratrol in cell culture media increases osteoblastic markers. Also results from previous studies provide evidence for resveratrol positive effects on bone healing and bone production. In this preclinical study we investigated bone healing in rats by resveratrol systemic application. 30 Wistar male rats were divided into two groups (study group and control group). At first, maxillary second molars of rats were extracted. The rats were kept in laboratory for next 28 days. Study group received resveratrol 20 mg/kg by abdominal injection every day. The control group received placebo in the same manner that study group. Rats were sacrificed after 28 days and bone samples were collected from center of maxillary second molar socket. Samples were evaluated histologically for new bone formation, inflammation, necrosis, fibrosis and foreign body reaction. The mean difference of new bone formation in control group (28.30 %) and study group (45 %) were statistically significant (P=0.014). There were no significant differences in inflammation, fibrosis, necrosis and foreign body reaction (P>0.05). Resveratrol has positive effects on bone healing but more evidence needed from more clinical and animal studies.


El resveratrol en los medios de cultivo celular aumenta los marcadores osteoblásticos. Los resultados de estudios anteriores proporcionan evidencia de efectos positivos del resveratrol sobre la curación ósea y la producción ósea. En este estudio preclínico, investigamos la curación ósea en ratas mediante la aplicación sistémica de resveratrol. Se dividieron 30 ratas macho Wistar en dos grupos (estudio y control). Inicialmente se extrajeron los segundos molares maxilares de las ratas y los animales se mantuvieron en el laboratorio durante los siguientes 28 días. El grupo de estudio recibió todos los días resveratrol 20 mg/kg por inyección abdominal . El grupo control recibió placebo de la misma manera que el grupo estudio. Las ratas fueron sacrificadas después de 28 días y se recogieron muestras de hueso del centro del segundo molar maxilar. Las muestras se evaluaron histológicamente para la formación de hueso nuevo, inflamación, necrosis, fibrosis y reacción de cuerpo extraño. La media de formación de hueso nuevo en el grupo control (28,30 %) y en el grupo estudio (45 %) fueron estadísticamente significativas (P=0,014). No hubo diferencias significativas en la inflamación, fibrosis, necrosis y reacción al cuerpo extraño (P>0,05). El resveratrol tiene efectos positivos sobre la curación de los huesos, pero aún es necesario realizar más pruebas de estudios clínicos, como también en animales.


Assuntos
Animais , Ratos , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteoclastos/efeitos dos fármacos , Estilbenos/farmacologia , Desenvolvimento Ósseo/efeitos dos fármacos , Osteogênese/efeitos dos fármacos , Ratos Wistar , Suplementos Nutricionais
8.
Bauru; s.n; 2018. 98 p. ilus, graf, tab.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-885097

RESUMO

O osteossarcoma (OS) é o tumor maligno primário mais comum do tecido ósseo, caracterizado pela formação de osteócitos anormais. Apesar do avanço nas terapias convencionais (quimioterapia e retirada do tumor), essas não conseguem eliminar totalmente as células tumorais e impedir a progressão da doença. Recentemente, agentes derivados de fontes naturais ganharam considerável atenção por causa de sua segurança, eficácia e disponibilidade imediata. Nesse sentido, a apocinina, inibidor do complexo NADPH-oxidase, vem sendo estudada como agente antitumoral em alguns tipos de câncer como: pâncreas, próstata, pulmão e mama. Apocinina é um pró-fármaco e sua ação parece estar relacionada à sua conversão produzindo a diapocinina, a qual se mostrou mais efetiva do que a apocinina. Portanto, o objetivo desse estudo é avaliar, in vitro, o potencial antitumoral da apocinina e diapocinina em células de osteossarcoma humano. Para isso, foram utilizados osteoblastos humanos normais (HOb) e osteossarcoma humano imortalizadas (SaOS-2) tratados ou não com apocinina e diapocinina em diversas concentrações. Foram realizados os ensaios de viabilidade celular, alterações morfológicas, apoptose celular, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), formação de colônias, migração, invasão e expressão do fator indutor de hipóxia-1alfa (HIF-1). Também foram conduzidos ensaios para verificar a atividade de metaloproteinase de matriz (MMP) 2 e 9. Os resultados em SaOS-2 mostraram que o tratamento com apocinina nas concentrações de 1,5 e 3 mM; e diapocinina nas concentrações de 0,75 e 1,5 mM reduziram a viabilidade; aumentaram o número de células em apoptose e diminuíram a produção de EROs; sem causar danos às células HOb. Além disso, essas mesmas concentrações inibiram a migração e invasão celular; diminuíram a expressão de HIF-1; e reduziram a atividade de MMP-2 em SaOS-2. Considerando os resultados obtidos, concluímos que a apocinina e diapocinina podem atuar como possíveis moduladores de células tumorais, sendo que a diapocinina mostrou ser mais efetiva nos parâmetros testados.(AU)


Osteosarcoma (OS) is the most common primary malignant tumor of bone tissue, characterized by the formation of abnormal osteocytes. Despite advances in conventional therapies (chemotherapy and surgery) they cannot completely eliminate tumor cells and prevent the progression of the disease. Recently, agents derived from natural sources have achieved considerable attention because of their safety, efficacy and immediate availability of therapies. In this way, apocynin, an inhibitor of the NADPH-oxidase complex, has been studied as an antitumor agent in some types of cancer, such as pancreas, prostate, lung and breast. Apocynin is a prodrug and its action indicate to be related to its conversion to diapocynin, which has been shown to be more efficient than apocynin itself. Thus, the aim of this study is to evaluate, in vitro, the antitumor potential of apocynin and diapocynin in human osteosarcoma cells. For this, normal human osteoblasts (HOb) and immortalized human osteosarcoma cells (SaOS-2) were treated or no-treated with apocynin and diapocynin in various concentrations. Cell viability assay, morphological alterations, cellular apoptosis, reactive oxygen species (ROS) production, colony formation, migration, invasion and expression of hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-1) were performed. We also performed assays to verify the activity of matrix metalloproteinase (MMP) 2 and 9. The results in SaOS-2 showed that treatment with apocynin at concentrations of 1,5 e 3 mM; and diapocynin at concentrations of 0,75 e 1,5 mM reduced cell viability; increased the number of cells in apoptosis and decreased the production of ROS; without damaging HOb cells. Moreover, these same concentrations inhibited cell migration and invasion; decreased HIF-1 expression; and reduced MMP 2 activity in SaOS-2. Considering the results, we suggest that apocynin and diapocynin may act as possible modulators of tumor cells, and diapocynin has been shown to be more effective.(AU)


Assuntos
Humanos , Acetofenonas/farmacologia , Antineoplásicos/farmacologia , Compostos de Bifenilo/farmacologia , Osteossarcoma/tratamento farmacológico , Apoptose/efeitos dos fármacos , Movimento Celular/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Metaloproteinase 2 da Matriz/efeitos dos fármacos , Metaloproteinase 9 da Matriz/efeitos dos fármacos , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Espécies Reativas de Oxigênio/análise , Reprodutibilidade dos Testes , Células Tumorais Cultivadas
9.
Braz. J. Pharm. Sci. (Online) ; 54(3): e17567, 2018. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-974397

RESUMO

In this study, the effects of geraniin on osteoprotegerin/receptor activator of nuclear factor-κB ligand(OPG/RANKL) in regulating the proliferation of osteoblasts and suppression of osteoclast-like cells (OLC) in OLC-osteoblast co-cultured system in vitro were investigated. Osteoblasts were cultured and identified with alkaline phosphatase (ALP), gomori stain, and mineralized nodule stain. OLCs were isolated from long bones of Sprague-Dawley (SD) rats and identified with tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP) stain. Methyl thiazolyl tetrazolium assay was used to examine the proliferation of osteoblasts, and immunocytochemistry and in situ hybridization to analyze the expression OPG/RANKL in osteoblasts co-cultured with osteoclasts under the action of geraniin, respectively. Geraniin could regulate the proliferation of osteoblasts MC3T3-E1, decrease the number of OLC in OLC-osteoblast co-cultured system, and inhibit the bone resorption areas and resorption pits of OLC in vitro experiments. Geraniin could promote the mRNA and protein expression levels of OPG and suppress those of RANKL in osteoblasts. These results indicate that geraniin has a promoting effect on the proliferation of osteoblasts and an inhibitory effect on the osteoclastic bone-resorption through regulating OPG/RANKL signaling pathway in OLC-OB co-cultured system.


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Ratos , Ligante RANK/classificação , Osteoprotegerina/efeitos adversos , Osteoblastos , Phyllanthus/classificação , Componentes Aéreos da Planta
10.
Arq. bras. med. vet. zootec. (Online) ; 69(6): 1573-1580, nov.-dez. 2017. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-910772

RESUMO

The objective was to evaluate the in vitro effect of prolactin in osteogenic potential of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (ADSCs) in female rats. ADSCs were cultured in osteogenic medium with and without the addition of prolactin and distributed into three groups: 1) ADSCs (control), 2) ADSCs with addition of 100ng/mL of prolactin and 3) ADSCs with addition of 300ng/mL of prolactin. At 21 days of differentiation, the tests of MTT conversion into formazan crystals, percentage of mineralized nodules and cells per field and quantification of genic transcript for alkaline phosphatase, osteopontin, osteocalcin, bone sialoprotein, BMP-2 and collagen I by real-time RT-PCR were made. The addition of prolactin reduced the conversion of MTT in group 3 and increased the percentage of cells per field in the groups 2 and 3, however without significantly increasing the percentage of mineralized nodules and the expression of alkaline phosphatase, osteopontin, osteocalcin, bone sialoprotein, BMP-2 and collagen I. In conclusion, the addition of prolactin in concentrations of 100ng/mL and 300ng/mL does not change the osteogenic differentiation to the ADSCs of female rats despite increase in the cellularity of the culture.(AU)


O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito in vitro da prolactina sobre o potencial osteogênico de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo (CTM-TA) em ratas. CTM-TA foram cultivadas em meio osteogênico com e sem adição de prolactina e distribuídas em três grupos: 1) CTM-TA (controle), 2) CM-TA com adição de 100ng/mL de prolactina e 3) CTM-TA com adição de 300ng/mL de prolactina. Aos 21 dias de diferenciação, foram realizados os testes de conversão do MTT em cristais de formazan, porcentagem de nódulos mineralizados e células por campo e quantificação dos transcritos gênicos para fosfatase alcalina, osteopontina, osteocalcina, sialoproteína óssea, BMP-2 e colágeno I. A adição de prolactina reduziu a conversão do MTT no grupo 3 e aumentou a porcentagem de células por campo nos grupos 2 e 3, sem alterar significativamente a porcentagem de nódulos mineralizados e a expressão de fosfatase alcalina, osteopontina, osteocalcina, sialoproteína óssea, BMP-2 e colágeno I. Conclui-se que a adição de prolactina nas concentrações de 100ng/mL e 300ng/mL não altera a diferenciação osteogênica das CTM-TA de ratas, apesar do aumento de celularidade da cultura.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Ratos , Tecido Adiposo , Osteogênese , Prolactina/análise , Células-Tronco , Osteoblastos
11.
Rev. clín. periodoncia implantol. rehabil. oral (Impr.) ; 10(2): 111-114, ago. 2017. tab, ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: biblio-900289

RESUMO

RESUMEN: Objetivo: Evaluar la influencia de la variación en la presión de oxígeno ambiental sobre la regeneración ósea guiada en cobayos. Material y método: Treinta y dos cobayos machos de 750±50g de peso fueron asignados en 2 grupos de 16 integrantes cada uno (grupo A: trabajado a 150msnm en la ciudad de Lima y a presión de oxígeno de 157mmHg; grupo B: trabajado a 3.230msnm en la ciudad de Jauja y a presión de oxígeno de 107mmHg). En ambos grupos se indujeron defectos óseos mandibulares de 5×6mm a través de un acceso quirúrgico extraoral; a 8 cobayos de cada grupo se les recubrió el defecto con una membrana de colágeno reabsorbible de origen porcino, mas al resto de animales no. Se evaluó el conteo celular de osteoblastos y osteocitos a los 15 y 30 días postoperatoriamente. Resultados: A los 15 y a los 30 días, en los grupos trabajados en altura y en los que se aplicó la membrana, la cantidad de osteoblastos fue 71±12,1 cél/camp y 83±7,2 cél/camp respectivamente, y la de osteocitos fue 34,5±6,6 cél/camp y 25±7,6 respectivamente; siendo estos grupos, en todas las comparaciones, los que tuvieron mayor cantidad de células óseas, aunque sin ser diferencias estadísticamente significativas (p>0,05). Conclusión: Se encontró tendencia a formar mayor cantidad de células óseas en las muestras tratadas con regeneración ósea y expuestas a la altitud comparados con el nivel del mar.


ABSTRACT: Objective: To evaluate the influence of the variation in ambient oxygen pressure on guided bone regeneration in guinea pigs. Material and method: A total of 32 male guinea pigs weighing 750±50g were assigned into two groups of 16 (group A: studied at 150 metres above sea level in the city of Lima and oxygen pressure of 157mmHg; group B: was at 3230 meters above sea level in the city of Jauja and an oxygen pressure of 107mmHg). Bone defects of 5×6mm were induced in the jaw in both groups through extra-oral surgical access. The defect in 8 guinea pigs of each group were covered with a porcine resorbable collagen membrane, but not in the other animals. The osteoblast and osteocyte cell counts were evaluated at 15 and 30 days post-operatively. Results: At 15 and 30 days, in the groups studied at height and with the membrane applied, the osteoblast count was 71±12.1 cells/field, and 83±7.2 cells/field, respectively, and an osteocyte count of 34.5±6.6 cells/field, and 25±7.6 cells/field, respectively. These groups had a higher number of bone cells in all the comparisons, but there were no statistically significant differences (P>.05). Conclusion: There was a tendency to form a greater amount of bone cells was found in the samples treated with bone regeneration and exposed to altitude compared to those at sea level.


Assuntos
Animais , Masculino , Cobaias , Oxigênio , Regeneração Óssea/fisiologia , Hipóxia Celular , Fator 1 Induzível por Hipóxia/fisiologia , Altitude , Osteoblastos , Pressão Atmosférica , Fatores de Tempo , Regeneração Tecidual Guiada
12.
Braz. dent. j ; 28(3): 307-316, May-June 2017. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-888646

RESUMO

Abstract This study aimed to investigate the influence of a three-dimensional cell culture model and bioactive glass (BG) particles on the expression of osteoblastic phenotypes in rat calvaria osteogenic cells culture. Cells were seeded on two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) collagen with BG particles for up to 14 days. Cell viability and alkaline phosphatase (ALP) activity was performed. Cell morphology and immunolabeling of noncollagenous bone matrix proteins were assessed by epifluorescence and confocal microscopy. The expressions of osteogenic markers were analyzed using RT-PCR. Mineralized bone-like nodule formation was visualized by microscopy and calcium content was assessed quantitatively by alizarin red assay. Experimental cultures produced a growing cell viability rate up to 14 days. Although ALP activity at 7 days was higher on BG cultures, cells on 3D and 3D+BG had an activity decrease of ALP at 14 days. Three-dimensional conditions favored the immunolabeling for OPN and BSP and the expression of ALP and COL I mRNAs. BG particles influenced positively the OC and OPN mRNAs expression and calcified nodule formation in vitro. The results indicated that the 3D cultures and BG particles contribute to the expression of osteoblastic phenotype and to differentiated and mineralized matrix formation.


Resumo O objetivo deste estudo foi investigar a influência do modelo de cultura celular tridimensional e das partículas de vidro bioativo (BG) sobre a expressão fenotípica de culturas de células osteogênicas da calvária de ratos. As células foram mantidas em culturas sobre superfícies colágenas bi-dimensionais (2D) e em géis de colágeno tridimensional (3D) com e sem partículas de BG até 14 dias. Foram avaliadas: viabilidade celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP), morfologia celular e imunomarcação de proteínas da matriz não-colágena do osso através de epifluorescência e microscopia confocal. As expressões de marcadores osteogênicos foram analisadas utilizando RT-PCR. A formação de nódulos mineralizados foi visualizada através de microscopia e o conteúdo de cálcio foi avaliado quantitativamente pelo Alizarina Red. As culturas experimentais produziram uma taxa crescente de viabilidade até 14 dias. Embora a atividade ALP em 7 dias tenha sido maior em culturas com BG, as células em 3D e 3D+BG apresentaram uma diminuição da atividade ALP aos 14 dias. As condições tridimensionais favoreceram a imunomarcação para OPN e BSP e a expressão de mRNAs para ALP e COL I. As partículas de BG influenciaram positivamente a expressão do mRNAs para OPN e OC e a formação de nódulos calcificados in vitro. Os resultados indicaram que as culturas em 3D e partículas BG contribuíram para a expressão do fenótipo osteoblástico e para a diferenciação e formação de matriz mineralizada.


Assuntos
Animais , Materiais Biocompatíveis , Vidro , Osteoblastos/citologia , Osteogênese , Crânio/citologia , Fosfatase Alcalina/genética , Fosfatase Alcalina/metabolismo , Biomarcadores/metabolismo , Cálcio/metabolismo , Técnicas de Cultura de Células , Sobrevivência Celular , Colágeno Tipo I/genética , Colágeno Tipo I/metabolismo , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo , Perfilação da Expressão Gênica , Sialoproteína de Ligação à Integrina/metabolismo , Microscopia Confocal , Microscopia de Fluorescência , Osteoblastos/enzimologia , Osteoblastos/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Ratos Wistar , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , RNA Mensageiro/genética , Crânio/enzimologia , Crânio/metabolismo , Tecidos Suporte
13.
J. appl. oral sci ; 25(1): 42-52, Jan.-Feb. 2017. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-841161

RESUMO

Abstract Sodium alendronate is a bisphosphonate drug that exerts antiresorptive action and is used to treat osteoporosis. Objective The aim of this study was to evaluate the bone repair process at the bone/implant interface of osteoporotic rats treated with sodium alendronate through the analysis of microtomography, real time polymerase chain reactions and immunohistochemistry (RUNX2 protein, bone sialoprotein (BSP), alkaline phosphatase, osteopontin and osteocalcin). Material and Methods A total of 42 rats were used and divided in to the following experimental groups: CTL: control group (rats submitted to fictitious surgery and fed with a balanced diet), OST: osteoporosis group (rats submitted to a bilateral ovariectomy and fed with a low calcium diet) and ALE: alendronate group (rats submitted to a bilateral ovariectomy, fed with a low calcium diet and treated with sodium alendronate). A surface treated implant was installed in both tibial metaphyses of each rat. Euthanasia of the animals was conducted at 14 (immunhostochemistry) and 42 days (immunohistochemistry, micro CT and PCR). Data were subjected to statistical analysis with a 5% significance level. Results Bone volume (BV) and total pore volume were higher for ALE group (P<0.05). Molecular data for RUNX2 and BSP proteins were significantly expressed in the ALE group (P<0.05), in comparison with the other groups. ALP expression was higher in the CTL group (P<0.05). The immunostaining for RUNX2 and osteopontin was positive in the osteoblastic lineage cells of neoformed bone for the CTL and ALE groups in both periods (14 and 42 days). Alkaline phosphatase presented a lower staining area in the OST group compared to the CTL in both periods and the ALE at 42 days. Conclusion There was a decrease of osteocalcin precipitation at 42 days for the ALE and OST groups. Therefore, treatment with short-term sodium alendronate improved bone repair around the implants installed in the tibia of osteoporotic rats.


Assuntos
Animais , Feminino , Osteoporose/tratamento farmacológico , Implantes Dentários , Osseointegração/efeitos dos fármacos , Alendronato/farmacologia , Conservadores da Densidade Óssea/farmacologia , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteoporose/fisiopatologia , Tíbia/cirurgia , Fatores de Tempo , Imuno-Histoquímica , Ovariectomia , Densidade Óssea/efeitos dos fármacos , Osteocalcina/análise , Osteocalcina/efeitos dos fármacos , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Reprodutibilidade dos Testes , Ratos Wistar , Implantes Experimentais , Implantação Dentária Endo-Óssea , Fosfatase Alcalina/análise , Fosfatase Alcalina/efeitos dos fármacos , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/análise , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/efeitos dos fármacos , Osteopontina/análise , Osteopontina/efeitos dos fármacos , Microtomografia por Raio-X , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
14.
Bauru; s.n; 2017. 125 p. graf, ilus, tab.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-885135

RESUMO

Os leucotrienos (LTs) são mediadores inflamatórios derivados da via 5- lipoxigenase (5-LO), com contribuição relevante na reabsorção óssea. Neste estudo investigamos o papel dos LTs na diferenciação osteogênica e o seu impacto na osteoclatogênese. Assim, foi avaliado o perfil ósseo dos camundongos 129/Sv (WT) e 5-LO Knockout (5-LO KO) por meio de microtomografia computadorizada, evidenciando maior densidade óssea vertebral e trabéculas mais espessas em machos 5-LO KO. Após isso, osteoblastos primários (OBL) foram isolados e cultivados para determinar a atividade de fosfatase alcalina (ALP) e o potencial de mineralização. Resultados mostraram que OBL KO possui maior atividade de ALP e mineralização, em todos os períodos quando comparados com WT. Em adição, o tratamento com os LTs B4 e D4 inibiu a deposição de cálcio. Os inibidores da síntese de LTs e os antagonistas do BLT1/2 foram efetivos em recuperar a formação dos nódulos mineralizados. A cinética do Alox5 apresentou um aumento da expressão nos períodos de maior diferenciação celular em OBL WT. Além disso, a expressão de OCN, MMPs 2 e 9 e RANKL foram aumentadas em células 5-LO KO em quase todos os períodos avaliados. Em geral, o estímulo com LTs, seus inibidores e antagonistas diminuiu a expressão de Sp7, Col1a1, Opg e MMP-9 e aumentou RANKL em células KO. A sinalização por meio de segundos mensageiros também foi avaliada. Células 5-LO KO apresentam menor concentração de cálcio intracelular (Ca2+i) em relação ao WT. No período de 14 dias, o estímulo com LTD4 inibiu a liberação Ca2+i independente da linhagem, em relação ao controle. Os níveis de cAMP foram menores em OBL 5- LO KO, em todos os grupos tratados ou controle. LTD4 diminuiu a concentração de cAMP, mas não LTB4, em OBL 5-LO KO. O estudo também quantificou a produção de LTB4 e outros eicosanoides em osteoblastos mostrando a sua capacidade de síntese. A análise proteômica revelou 89 proteínas com expressão diminuída em OBL 5-LO KO, de um total de 154, sendo a maioria relacionada ao citoesqueleto e ao metabolismo energético. Também foram identificadas 59 proteínas exclusivas em OBL 5-LO KO e 06 unicamente expressas em células WT, revelando as diferenças intrínsecas de cada animal. O perfil osteoclastogênico de camundongos WT vs. 5-LO KO mostrou diferenças significativas na análise fenotípica, TRAP e na expressão gênica de células derivadas da linhagem monocítica-macrofágica. Após o estímulo com M-CSF e RANKL, as células WT apresentaram osteoclastos gigantes multinucleados, porém, células 5-LO KO apresentaram uma população de células com formas e tamanhos variáveis, e menor grau de maturação. Em adição, os LTsexógenos não modularam a atividade da TRAP. O meio condicionado proveniente dos OBL WT e KO, retardaram o processo de formação dos osteoclastos. A análise da expressão gênica em osteoclastos mostrou diminuição da expressão de Alox5, Il- 1b, Il-6 e TNFa em células 5-LO KO. BLT1/2, CysLt1 e os marcadores da diferenciação Acp5, Ctsk e Nfact1 não apresentaram diferenças entre os animais. Em adição, o LTB4 diminuiu a expressão do Alox5 e a Il-1b foi aumentada em osteoclastos WT. Assim, os resultados demonstram que os LTs são capazes de modular o metabolismo ósseo, e a ausência do gene da 5-LO está relacionada ao maior perfil osteogênico.(AU)


Leukotrienes (LTs) are inflammatory mediators derived from the 5-lipoxygenase (5-LO) pathway, with a relevant contribution in bone resorption. In this study we investigated the role of LTs in osteogenic differentiation and its impact on osteoclastogenesis.Thus, the bone profile of the 129/Sv (WT) and 5-LO Knockout mice (5-LO KO) was evaluated by computerized microtomography, showing higher vertebral bone density and thicker trabeculae in 5-LO KO males. After that, primary osteoblasts (OBL) were isolated and cultured to determine alkaline phosphatase activity (ALP) and mineralization potential. Results showed that OBL KO has higher ALP activity and mineralization, in all periods when compared with WT. In addition, the treatment with LTB4 and LTD4 inhibited calcium deposition. Inhibitors of LT synthesis and BLT1/2 antagonists were effective to recover the mineralized nodules formation. The kinetics of Alox5 showed an increase in expression during cellular differentiation period in WT OBL. In addition, expression of OCN, MMPs 2 and 9 and RANKL were increased in 5- LO KO cells in almost all evaluated periods. In general, the stimulation with LTs, their inhibitors and antagonists decreased the expression of Sp7, Col1a1, Opg and MMP- 9. But it increased the RANKL expression in KO cells. The second messengers signaling was also evaluated. 5-LO KO cells showed lower concentration levels of intracellular calcium (Ca2+ i) when compared to WT cells. In the 14-day period, the LTD4 treatment inhibited the Ca2+i independent of the murine lineage, relative to the control. cAMP levels were lower in OBL 5-LO KO, in all treated or control groups. LTD4 decreased the concentration of cAMP, but not LTB4, in KO cells. The study also quantified the production of LTB4 and other eicosanoids in osteoblasts showing their ability to synthesize those metabolites. The proteomic analysis revealed 89 downregulated proteins in OBL KO, out of a total of 154, most of them related to cytoskeleton and energy metabolism. Also 59 identified proteins were unique in OBL 5-LO KO and 06 exclusively expressed in WT cells, revealing the intrinsic differences of each strain. The osteoclastogenic profile of WT vs. 5-LO KO showed significant differences in phenotypic analysis, TRAP and in the gene expression of cells derived from the monocyte-macrophage-lineage. After M-CSF and RANKL stimulation, WT cells showed multinucleated giant osteoclasts. However, 5-LO KO cells presented a population of cells with variable shapes and sizes, and a lower maturation stage. In addition, exogenous LTs did not modulate TRAP activity. The conditioned medium from OBL WT and 5-LO KO delayed the formation process of osteoclasts. Gene expression analysis in osteoclasts showed decreased expression of Alox 5, Il-1b, Il-6 and TNFα in 5-LO KO cells. BLT1/2, CysLt1 and the osteoclast differentiation markers Acp5, Ctsk and Nfact1 showed no differences between the strains. In addition, LTB4 decreased the expression of Alox5, and IL-1b was increased in WT osteoclasts. Thus, the results demonstrate that the LTs are able to modulate the bone metabolism, and the absence of the 5-LO gene is related to the greater osteogenic profile.(AU)


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Camundongos , Leucotrienos/farmacologia , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteogênese/efeitos dos fármacos , Osteogênese/fisiologia , Proteínas Ativadoras de 5-Lipoxigenase/análise , Densidade Óssea , Expressão Gênica , Osteoblastos/fisiologia , Proteômica , Ligante RANK/análise , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Reprodutibilidade dos Testes , Fatores de Tempo , Microtomografia por Raio-X
15.
Rev. Salusvita (Online) ; 36(4): 1169-1182, 2017.
Artigo em Português | LILACS | ID: biblio-1022172

RESUMO

Introdução: uma variedade de estudos vem demonstrando que o laser de baixa potência estimula a osteogênese. Os mecanismos propostos para o efeito bioestimulador do laser envolvem aumento da síntese de ATP e formação de espécies reativas de oxigênio (EROs) pelas mitocôndrias. Estas EROs, incluindo peróxido de hidrogênio, atuam na sinalização celular e influenciam a regulação da expressão gênica, conduzindo a respostas celulares horas ou até mesmo dias após a irradiação. As Peroxirredoxinas (Prxs) constituem uma família de enzimas abundantes capazes de decompor peróxido de hidrogênio. Objetivo: foi realizada uma revisão de literatura acerca dos efeitos bioestimulantes do laser de baixa potência sobre o extresse oxidativo durante o processo de cicatrização. Material e Métodos: foi realizada uma busca nas bases de dados Pubmed e Scielo nos últimos anos, seguindo critérios de inclusão e exclusão pré-determinados, utilizando os termos peroxirredoxina, laser de baixa potência e osteoblastos. Resultados: foram identificados cinquenta artigos com texto completo que se enquadravam nos critérios de inclusão e exclusão. Quanto aos tipos de Peroxirredoxinas, se destacaram as Prxs I e IV. Conclusão: diante das informações colhidas na literatura, concluímos que o mecanismos de ação do laser, induz a formação de EROs, e ainda ressaltamos a importância do estabelecimento de parâmetros seguros na aplicação do laser para que os efeitos desejados, de bioestimulação, sejam alcançados e que sejam evitados os efeitos tóxicos.


Introduction: a variety of studies has shown that low-power laser stimulates osteogenesis. The mechanisms proposed for the biostimulating effect of the laser involve increased ATP synthesis and formation of reactive oxygen species (ROS) by mitochondria. These EROs, including hydrogen peroxide, act on cell signaling and influence the regulation of gene expression, leading to cellular responses at hours or even days after irradiation. Peroxiredoxins (Prxs) constitute a family of abundant enzymes capable of breaking down hydrogen peroxide. Objective: a literature review was carried out on the biostimulating effects of low power laser on oxidative stress during the cicatrization process. Material and Methods: a search of the PubMed and Scielo databases was carried out in recent years, following inclusion and exclusion criteria, using as descriptors peroxirredoxin, low power laser and osteoblasts. Results: fifty full-text articles were identified that fit the inclusion and exclusion criteria. As for the types of Peroxirredoxins, Prxs I and IV were highlighted. Conclusion: In light of the information gathered in the literature, we conclude that the mechanisms of action of the laser induce the formation of EROs, and we also stress the importance of establishing safe parameters in the laser application so that the desired effects of biostimulation are achieved and that toxic effects are avoided.


Assuntos
Peroxirredoxinas , Osteoblastos , Terapia com Luz de Baixa Intensidade
16.
Braz. oral res. (Online) ; 31: e7, 2017. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-839537

RESUMO

Abstract The aim of this study was to evaluate the efficacy of low-level 940 nm laser therapy with energy intensities of 5, 10 and 20 J/cm2 on bone healing in an animal model. A total of 48 female adult Wistar rats underwent surgery to create bone defects in the right tibias. Low-level laser therapy (LLLT) was applied immediately after surgery and on post-operative days 2, 4, 6, 8, 10 and 12 in three study groups with energy intensities of 5 J/cm2, 10 J/cm2 and 20 J/cm2 using a 940 nm Gallium-Aluminium-Arsenide (Ga-Al-As) laser, while one control group underwent only the tibia defect surgery. All animals were sacrificed 4 or 8 weeks post-surgery. Fibroblasts, osteoblasts, osteocytes, osteoclasts and newly formed vessels were evaluated by a histological examination. No significant change was observed in the number of osteocytes, osteoblasts, osteoclasts and newly formed vessels at either time period across all laser groups. Although LLLT with the 10 J/cm2 energy density increased fibroblast activity at the 4th week in comparison with the 5 and 20 J/cm2 groups, no significant change was observed between the laser groups and the control group. These results indicate that low-level 940 nm laser with different energy intensities may not have marked effects on the bone healing process in both phases of bone formation.


Assuntos
Animais , Feminino , Cicatrização/efeitos da radiação , Regeneração Óssea/efeitos da radiação , Terapia com Luz de Baixa Intensidade/métodos , Lasers Semicondutores/uso terapêutico , Osteoblastos/efeitos da radiação , Osteoclastos/efeitos da radiação , Osteogênese/efeitos da radiação , Valores de Referência , Tíbia/efeitos da radiação , Tíbia/patologia , Fatores de Tempo , Reprodutibilidade dos Testes , Resultado do Tratamento , Ratos Wistar , Relação Dose-Resposta à Radiação , Fibroblastos/efeitos da radiação
17.
Univ. odontol ; 36(76): 1-9, 2017. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS, COLNAL | ID: biblio-996110

RESUMO

Antecedentes: Los factores de crecimiento utilizados en salud se pueden obtener de una fuente autóloga de primera generación llamada plasma rico en plaquetas (PRP). La diversidad de protocolos para prepararlos genera resultados variables en cuanto al tiempo entre la activación del PRP y sus efectos sobre la proliferación y viabilidad celular. Objetivo: Evaluar proliferación y viabilidad celular de fibroblastos de ligamento periodontal y osteoblastos tratados con PRP en diferentes concentraciones y tiempos de aplicación. Métodos: Se cultivaron líneas celulares de fibroblastos y osteoblastos y se preparó el PRP de sangre venosa de un adulto sano mediante centrifugación, seguido de activación con CaCl2 al 10 %. El efecto sobre la proliferación de las líneas celulares tras la aplicación de PRP y plasma pobre en plaquetas al 1 %, al 3 % y al 5 % se evaluó a las 0, 12, 24, 48 y 72 horas después de su activación mediante MTS. El grupo control consistió en cultivos sin tratamiento. Los datos se analizaron mediante las pruebas de Chi cuadrado, Fischer y McNemar. Resultados: Se observó un aumento de la viabilidad en células tratadas con PRP 24 horas después de su activación en una concentración del 5%. El ensayo de viabilidad celular mostró diferencias estadísticamente significativas entre el grupo experimental y el grupo control (p = 0,05). Conclusión: Los cultivos de fibroblastos y osteoblastos mostraron una tendencia a mayor viabilidad 24 horas después de a la activación con PRP al 5 %.


Background : Growth factors used in health treatments can be obtained from a first-generation source called platelet-rich plasma. The variety of protocols to prepare PRP produces variable results regarding PRP activation time and its effects on cell proliferation and viability. Purpose: To evaluate proliferation and cell viability of periodontal ligament fibroblasts and osteoblasts stimulated with PRP in several concentrations and times after PRP activation. Methods: An in vitro study was carried out using periodontal ligament fibroblast and osteoblast cell cultures. PRP from venous blood of a healthy adult was prepared through centrifugation and activated with 10% CaCl2. The effect on cell proliferation after application of 1%, 3%, and 5% PRP and platelet-poor plasma was evaluated at 0, 12, 24, 48, and 72 hours after activation through MTS. The control group consisted of culture that did not receive any treatment. Data were analyzed using Chi square, Fisher, and McNemar tests. Results: The cell viability assay showed statistically significant differences between the experimental and the control groups. Cell viability increased in cells treated with 5% PRP 24 hours after activation (p = 0.05). Conclusions: Fibroblast and osteoblast cell lines tended to be more viable 24 hours after activation with 5% PRP.


Assuntos
Humanos , Ligamento Periodontal , Proliferação de Células , Osteoblastos , Técnicas In Vitro , Plasma Rico em Plaquetas
18.
Acta bioquím. clín. latinoam ; 50(3): 423-427, set. 2016.
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: biblio-837619

RESUMO

Por muchos años los osteocitos han sido las células óseas "olvidadas" y consideradas espectadores inactivos enterrados en la matriz ósea. Hoy en día se sabe que los osteocitos detectan y responden a estímulos mecánicos y hormonales para coordinar tanto la resorción como la formación ósea. Actualmente se considera que los osteocitos proveen la mayoría de las moléculas que regulan la actividad de los osteoclastos y de los osteoblastos, como RANKL y esclerostina, ya que manipulaciones genéticas y famacológicas de cualquiera de estas dos moléculas afectan marcadamente la homeostasis ósea. Este artículo resume hallazgos recientes que delinean los mecanismos por los cuales los osteocitos regulan el número y actividad de los osteoblastos afectando de esta manera la formación ósea.


For many years, osteocytes have been the forgotten bone cells and considered as inactive spectators buried in the bone matrix. We now know that osteocytes detect and respond to mechanical and hormonal stimuli to coordinate bone resorption and bone formation. Osteocytes are currently considered a major source of molecules that regulate the activity of osteoclasts and osteoblasts, such as RANKL and sclerostin; and genetic and pharmacological manipulations of either molecule markedly affect bone homeostasis. This article summarizes recent findings demonstrating the mechanisms by which osteocytes regulate the number and activity of osteoblasts and thus affect bone formation.


Durante muitos anos, os osteócitos têm sido células ósseas "esquecidas" e consideradas como espectadores inativos enterrados na matriz óssea. Hoje sabemos que os osteócitos são capazes de detectar e responder a estímulos mecânicos e hormonais para coordenar tanto a reabsorção quanto a formação óssea. Os osteócitos são considerados atualmente como aquelesque fornecema maioria das moléculas que regulam a atividade dos osteoclastos e dos osteoblastos, tais como RANKL e a esclerostina,visto que manipulações genéticas e farmacológicas de qualquer uma destas moléculas afetam consideravelmente a homeostase óssea. Este artigo resume as recentes descobertas que demarcam os mecanismos pelos quais os osteócitos regulam o número e atividade dos osteoblastos, afetando assim a formação óssea.


Assuntos
Camundongos , Remodelação Óssea , Osteoblastos , Osteócitos
19.
Braz. dent. j ; 27(4): 419-423, July-Aug. 2016. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-794613

RESUMO

Abstract The aim of the present study was to verify the long-term cytotoxic effects of the MTA Fillapex and to compare them with AH Plus. Dissolution rate and pH were also evaluated. Human osteoblast cells were incubated with elutes of fresh specimens from AH Plus and MTA Fillapex, and with elutes of the same specimens for 4 successive weeks. Elute's pH was evaluated at each time point. A multiparametric cell viability assay was performed. For dissolution rate, ISO methodology was used. The results were analyzed by one-way analysis of variance, complemented with the Tukey post-test (p<0.05). No significant difference was found among the materials when fresh mixed (p>0.05). After 1 week, AH Plus became non-cytotoxic on all three evaluated parameters. Conversely, MTA Fillapex remained severely and mildly cytotoxic over the entire experimental period (p<0.05). The dissolution rate of AH Plus was significantly lower than MTA Fillapex at all time points (p>0.05). The pH of AH Plus was significantly lower than MTA Fillapex at the second and third week (p<0.05). In the other tested time points no statistical difference was observed. In conclusion, MTA Fillapex remained cytotoxic after 4 weeks and its cytotoxicity may be related to the high dissolution rate of this material.


Resumo O objetivo do presente estudo foi verificar os efeitos citotóxicos de longo prazo da MTA Fillapex e comparar com os do AH Plus. Solubilidade e pH também foram avaliados. Osteoblastos humanos foram incubados com elutos de amostras frescas de AH Plus e MTA Fillapex, e com elutos dos mesmos espécimes pelas 4 semanas seguintes. O pH foi avaliado a cada semana. Um ensaio multiparamétrico de viabilidade celular foi realizado. Para solubilidade foi utilizada metodologia ISO. Os resultados foram analisados por ANOVA, complementada com o pós-teste de Tukey (p<0,05). Nenhuma diferença significativa foi encontrada entre os materiais frescos quando avaliados em relação a citotoxicidade (p>0,05). Depois de uma semana, o AH Plus tornou-se não-citotóxico em todos os três parâmetros avaliados. Por outro lado, MTA Fillapex permaneceu citotóxico durante todo o período experimental (p<0,05). A solubilidade do AH Plus foi significativamente menor do MTA Fillapex para todos os períodos avaliados (p>0,05). O pH da AH Plus foi significativamente menor do que o MTA Fillapex na segunda e na terceira semana (p<0,05). Nos outros períodos testados não houve diferença estatística. Em conclusão, o MTA Fillapex permaneceu citotóxico após 4 semanas e a sua citotoxicidade pode estar relacionada à elevada solubilidade deste material.


Assuntos
Humanos , Concentração de Íons de Hidrogênio , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Materiais Restauradores do Canal Radicular , Células Cultivadas , Solubilidade
20.
J. appl. oral sci ; 24(4): 376-382, July-Aug. 2016. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-792596

RESUMO

ABSTRACT Aging negatively affects bone/titanium implant interactions. Our hypothesis is that the unbalance between osteogenesis and adipogenesis induced by aging may be involved in this phenomenon. Objective We investigated the osteoblast and adipocyte differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) from young and aged rats cultured on Ti. Material and Methods Bone marrow MSCs derived from 1-month and 21-month rats were cultured on Ti discs under osteogenic conditions for periods of up to 21 days and osteoblast and adipocyte markers were evaluated. Results Cell proliferation, alkaline phosphatase (ALP) activity, extracellular matrix mineralization and gene expression of RUNX2, osterix, ALP, bone sialoprotein, osteopontin, and osteocalcin were reduced in cultures of 21-month rats compared with 1-month rats grown on Ti. Gene expression of PPAR-γ , adipocyte protein 2, and resistin and lipid accumulation were increased in cultures of 21-month rats compared with 1-month rats grown on the same conditions. Conclusions These results indicate that the lower osteogenic potential of MSCs derived from aged rats compared with young rats goes along with the higher adipogenic potential in cultures grown on Ti surface. This unbalance between osteoblast and adipocyte differentiation should be considered in dental implant therapy to the elderly population.


Assuntos
Animais , Feminino , Ratos , Osteoblastos/fisiologia , Titânio/química , Envelhecimento/fisiologia , Implantes Dentários , Adipogenia/fisiologia , Células-Tronco Mesenquimais/fisiologia , Osteogênese/fisiologia , Propriedades de Superfície , Expressão Gênica , Células Cultivadas , Fatores Etários , Proliferação de Células/fisiologia , Fosfatase Alcalina/análise , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Lipídeos/análise
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