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1.
Arq. bras. med. vet. zootec. (Online) ; 69(6): 1443-1450, nov.-dez. 2017. tab
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-909839

RESUMO

The purpose of the present work was to evaluate the accuracy of quantitative polymerase chain reaction (qPCR) performed on samples of fresh frozen tissue (FT) and formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) healthy skin. This is a validation study conducted with samples from 46 dogs from an endemic area in Brazil. After sample collection, DNA extractions were conducted using commercial kits and qPCR was oriented to kinetoplast DNA (kDNA) targets of the Leishmania infantum species. The results obtained for the FFPE samples showed 63.6% sensitivity and 77.1% specificity, whereas those obtained for the FT samples showed 100% and 48.6%, respectively. Poor agreement was observed for the results of the qPCR technique with FT and FFPE samples. Our results suggest freezing as the most suitable conservation method for the formation of sample databases considering DNA recovery.(AU)


O objetivo deste trabalho foi avaliar a acurácia da PCR quantitativa (qPCR) realizada em amostras de pele íntegra congelada (FT) e parafinada (FFPE). Trata-se de um estudo de validação, com amostras provenientes de 46 cães de uma área endêmica no Brasil. Após as coletas de amostras, as extrações de DNA foram realizadas utilizando-se kits comerciais, e a qPCR foi orientada para alvos do kDNA da espécie Leishmania infantum. Os resultados obtidos para as amostras FFPE foram 63,6% de sensibilidade e 77,1% de especificidade; para as amostras FT, 100% e 48,6%, respectivamente. A concordância dos resultados da técnica de qPCR com amostras FT e FFPE foi pobre. Os resultados sugerem que o congelamento é o método mais adequado de conservação para banco de amostras para recuperação de DNA.(AU)


Assuntos
Animais , Cães , Confiabilidade dos Dados , Leishmania infantum/isolamento & purificação , Leishmaniose Visceral/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Pele/microbiologia , Parafina
2.
Appl. cancer res ; 37: 1-8, 2017. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, Inca | ID: biblio-915391

RESUMO

Background: Gastric carcinoma (GC) is the third leading cause of death among malignant tumors worldwide, causing approximately 900,000 deaths/year. Changes in oncogenes that encode tyrosine kinase receptors play an important role in the pathogenesis of GC. MET gene is a proto-oncogene that encodes a tyrosine kinase receptor c-MET and it is required for embryonic development and tissue repair. The hepatocyte growth factor (HGF) is the only known ligand for c-Met receptor. The MET oncogene activation suppresses apoptosis and promotes the survival, proliferation, migration, differentiation and angiogenesis of cells. Among the angiogenic factors, VEGF is the main regulator. Its biological function includes the promotion of endothelial cells mitosis to stimulate cells proliferation. These biomarkers expression in GC is relatively recent and population-based studies are required to define the expression pattern. The aim of this study was to determine qPCR technical standardization to evaluate quantitatively, in paraffin tissue samples, the presence of gene 23 expression of the MET, HGF and VEGF in diffuse and intestinal GC types. Methods: Twenty GC patients were studied, 10 patients were intestinal-type GC (average age 72.1 years) and 10 diffuse-type (average age 50.1 years). In all patients, tissue samples were analyzed from the tumor and distant areas of the tumor tissue. The relative expressions of the tumor markers c-Met, HGF and VEGF were performed by qPCR technique by comparing tumor and non-tumoral samples and they were normalized with the GAPDH constitutive gene. Statistical analysis was performed through T-test. Results: For c-Met, 18/20 (90%) patients expressed the marker and 9/20 (45%) overexpressed this gene, in which three were intestinal-type GC and six were diffuse-type GC. For HGF, only 7/20 (35%) patients expressed this gene and it was overexpressed in 4/20 (20%), in which two were intestinal-type GC and two were diffuse-type GC. For VEGF, 20/20 (100%) patients expressed this marker and in 12/20 (60%) were observed overexpression, in which eight patients had diffuse-type GC and four had intestinal-type GC. Conclusions: qPCR technique was standardized and suitable for expression analysis of the three biomarkers using paraffin embedded tissue samples. Further studies should be carried out to characterize the expression pattern of these biomarkers in GC in the Brazilian population (AU)


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Parafina , Estômago , Neoplasias Gástricas/genética , Proto-Oncogenes , Biomarcadores Tumorais , Controle da População , Proteínas Proto-Oncogênicas c-met , Fator A de Crescimento do Endotélio Vascular , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
3.
Rev. Soc. Bras. Med. Trop ; 48(5): 555-559, Sept.-Oct. 2015. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-763336

RESUMO

ABSTRACTINTRODUCTION: In the Americas, mucosal leishmaniasis is primarily associated with infection by Leishmania (Viannia) braziliensis. However, Leishmania (Viannia) guyanensis is another important cause of this disease in the Brazilian Amazon. In this study, we aimed at detecting Leishmaniadeoxyribonucleic acid (DNA) within paraffin-embedded fragments of mucosal tissues, and characterizing the infecting parasite species.METHODS: We evaluated samples collected from 114 patients treated at a reference center in the Brazilian Amazon by polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism (RFLP) analyses.RESULTS: Direct examination of biopsy imprints detected parasites in 10 of the 114 samples, while evaluation of hematoxylin and eosin-stained slides detected amastigotes in an additional 17 samples. Meanwhile, 31/114 samples (27.2%) were positive for Leishmania spp. kinetoplast deoxyribonucleic acid (kDNA) by PCR analysis. Of these, 17 (54.8%) yielded amplification of the mini-exon PCR target, thereby allowing for PCR-RFLP-based identification. Six of the samples were identified as L. (V.) braziliensis, while the remaining 11 were identified as L. (V.) guyanensis.CONCLUSIONS: The results of this study demonstrate the feasibility of applying molecular techniques for the diagnosis of human parasites within paraffin-embedded tissues. Moreover, our findings confirm that L. (V.) guyanensisis a relevant causative agent of mucosal leishmaniasis in the Brazilian Amazon.


Assuntos
Feminino , Humanos , Masculino , Leishmania braziliensis/genética , Leishmania guyanensis/genética , Leishmaniose Mucocutânea/parasitologia , Membrana Mucosa/parasitologia , DNA de Protozoário/análise , Leishmania braziliensis/isolamento & purificação , Leishmania guyanensis/isolamento & purificação , Parafina , Reação em Cadeia da Polimerase , Polimorfismo de Fragmento de Restrição , Proteínas de Protozoários/genética
4.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 67(4): 1193-1196, July-Aug. 2015. tab
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1095960

RESUMO

A placa aural é uma dermatopatia associada à quatro Equus caballus papillomavirus (EcPVs). Até o momento, o DNA de EcPVs não foi identificado em amostras de placa aural fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE). O objetivo deste estudo foi otimizar um método para a detecção dos quatro tipos de EcPVs em 21 amostras FFPE usando a PCR. O DNA dos EcPVs foram detectados em 11 amostras (52.4%). O DNA do EcPV4 foi detectado em 38.1% (8/21) e do EcPV3 em 4.8% (1/21) das amostras. Coinfecção foi identificada em duas amostras (9.5%); EcPV4 e 5 foram detectados simultaneamente em uma amostra, enquanto o DNA dos EcPV4 e 6 foi detectado em outra. A especificidade do DNA dos papilomavírus equinos foi avaliada por sequenciamento gênico direto, que confirmou a especificidade dos produtos. A metodologia de PCR proposta possibilita o diagnóstico dos EcPV3, 4, 5 e 6 em amostras FFPE de placa aural equina.(AU)


Assuntos
Animais , Métodos Analíticos de Preparação de Amostras/veterinária , Testes de DNA para Papilomavírus Humano/veterinária , Cavalos/virologia , Parafina , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária
5.
Rev. bras. queimaduras ; 14(2): 103-108, abr.-Jun. 2015. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-777683

RESUMO

Introdução: A literatura não tem evidenciado um consenso sobre o tratamento da área doadora de enxerto de pele. Curiosamente, apesar da malha de fibra de celulose e Jenolet (parafina) serem utilizados há muitos anos em áreas doadoras de enxerto, em busca no PubMed, nenhum estudo foi encontrado comparando estes dois tipos de curativos. Objetivo: Comparar a cicatrização das áreas doadoras de enxertos de pele com uso de Jelonet e malha de fibra de celulose salinizada. Método: Estudo prospectivo e randomizado envolvendo 37 pacientes admitidos na Unidade de Queimados do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo- HCFMRP-USP; 20 e 17 pacientes usaram curativos com malha de fibra de celulose e Jenolet, respectivamente. As áreas doadoras foram avaliadas comparativamente para sangramento, secreção serosa, infecção, vermelhidão, descolamento do curativo, intensidade da dor (escala visual analógica) e reepitelização. Resultados: Os grupos não diferiram significativamente em termos de sangramento, secreção serosa, infecção, descolamento local, ou vermelhidão. No entanto, a reepitelização ocorreu mais cedo no grupo com curativo parafinado em comparação com o grupo com a malha de fibra de celulose, com diferença estatística para a coxa (10,7±2,3 dias para o grupo com malha de fibra de celulose e 8,3±1,63 dias para o grupo com curativo parafinado, p=0,01). Além disso, a dor tendeu a ser menos intensa no grupo com curativo parafinado. Conclusão: A gaze impregnada com parafina (Jelonet) promove reepitelização mais rápida no local doador de enxerto de pele parcial, com potencial para reduzir a dor e o tempo de internação hospitalar em comparação com a malha de fibra de celulose salinizada. Esses dados são importantes principalmente para países em desenvolvimento.


Introduction: The literature has revealed a lack of agreement on the local handling of donor skin graft site. Interestingly, despite the use of cellulose fiber mesh and Jenolet (paraffin) longstanding at donor site graft, searching in PubMed, no studies comparing these two common and cheap type of dressings. Objective: To compare the healing of donor sites for skin grafts with use of Jelonet and cellulose fiber salinated mesh. Methods: A prospective randomized study involved 37 patients admitted to the Burns Unit of the University Hospital of the Ribeirão Preto Medical School–University of São Paulo, Brazil (HCFMRP–USP); 20 and 17 patients used cellulose fiber mesh and paraffin gauze dressing, respectively. The donor sites were comparatively evaluated for bleeding, serous secretion, infection, redness, detachment of dressing, pain intensity (visual analogue scale), and re-epithelization. Results: The groups did not differ significantly in terms of bleeding, serous secretion, infection, local detachment, or redness. However, tissue re-epithelization occurred earlier in the paraffin gauze dressing group as compared with the cellulose fiber mesh group, with statistical difference for the thigh (10.7±2.3 days for the cellulose fiber mesh group, and 8.3±1.63 days for the paraffin gauze dressing group, p= 0.01). Also, pain tended to be less intense in the paraffin gauze group. Paraffin gauze dressing required shorter re-epithelization time and presented a trend to reduce the pain at donor site. Conclusion: Jelonet® promotes faster re-epithelialization in the donor site of skin graft, with the potential to reduce pain and hospital stay when compared with cellulose fiber salinated mesh. These data are important especially for developing countries.


Introducción: En la literatura no hay ningún consenso sobre el tratamiento de las zonas donantes de injertos de piel. Curiosamente, a pesar de la malla de fibra de celulosa y Jenolet (parafina) que se utiliza desde hace muchos años en los sitios donantes de injertos, en PubMed, no se han encontrado estudios que compararon estos dos tipos de vendajes. Objetivo: Comparar la curación de las zonas donantes de injertos de piel con el uso de Jelonet y fibra de celulosa salinizada. Método: Estudio prospectivo y aleatorio con 37 pacientes ingresados en la Unidad de Quemados del Hospital de la Facultad de Medicina de Ribeirão Preto - Universidad de São Paulo HCFMRP- USP; 20 y 17 pacientes llevaban vendajes con malla de fibra de celulosa y Jenolet respectivamente. Los sitios donantes fueron evaluados en comparación con sangrado, secreción serosa, infección, enrojecimiento, desprendimiento del sitio, la intensidad del dolor (escala analógica visual) y reepitelización. Resultados: Los grupos no difirieron significativamente en términos de sangrado, secreción serosa, infección, desprendimiento de sitio, o enrojecimiento. Sin embargo, reepitelización ocurrió antes en el grupo con el aderezo de parafina en comparación con el grupo con una malla de fibras de celulosa, con diferencia estadística con el muslo (10,7±2,3 días en el grupo de malla de fibra de celulosa y 8,3±1,63 días para el grupo con el vendaje de parafina, p= 0,01). Además, el dolor tendía a ser menos pronunciada en el grupo con aderezo de parafina. Conclusión: Gasa impregnada de parafina (Jelonet) promueve la rápida reepitelización en la zona donante del injerto de piel, con el potencial para reducir el dolor y la estancia hospitalaria en comparación con la malla de fibra de celulosa salinizada. Estos datos son importantes especialmente para los países en desarrollo.


Assuntos
Humanos , Bandagens , Celulose , Parafina , Queimaduras/terapia , Transplante de Pele/métodos , Estudos Prospectivos , Unidades de Queimados/normas
6.
Rev. bras. anal. clin ; 46(1-4): 37-43, 2014. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-775382

RESUMO

A obtenção de um material genético íntegro e com concentrações satisfatórias para a amplificação de de uma determinada sequência são os principais desafios para o processamento de amostras de tecido preservados em parafina. O presente estudo teve como objetivo comparar três diferentes protocolos de extração de DNA que têm em comum entre si o princípio de extração por silica-gel. Vinte e sete amostras de tecidos tireoidianos preservados em parafina foram processadas por meio de cortes em triplicata de 20um. O método A utilizou tr~es horas na etapa de digestão do tecido, os métodos B e C utilizaram 16 horas para a digestão, sendo que o último utilizou diferentes solventes para reidratar o tecido e solução de fenol-clorofórmio-álcool isoamílico para purificação. Todos os métodos utilizaram em comum o conjunto de reagentes QIAamp DNA mini kit. Na comparação entre as concentrações obtidas de DNA, o método B spresentou maior média (3,7 ng/iL) já o método A obteve valor médio que 1,2 ng/uL e o método C, de 0,7 ng/uL. Todos os protocolos obtiveram valores da relação 260/280 e 260/230 fora dos valores de refer~encia esperado, evidenciando uma perda na qualidade do DNA extraído. O resultado da integridade do DNA, por meio de eletroforese em gel agarose também demonstrou o alto grau de degradação de todos os métodos analisados. Entretanto, foi possível realizar a genotipagem do polimorfismo 174G>C do gene da interleucina 6 em 100% das amostras testadas para o método C, e 66% par a o método A e B. O método C foi o mais reprodutivo para genotipagem , apesar do maior custo e tempo de processamento, sendo este método mais indicado para a implementação na rotina laboratorial de biologia molecular para amostras preservadas em parafina.


Assuntos
DNA , Biologia Molecular , Parafina , Reação em Cadeia da Polimerase , Preservação de Amostras de Água/métodos , Preservação de Tecido/métodos , Eletroforese em Gel de Ágar , Polimorfismo de Nucleotídeo Único/genética
7.
Rev. colomb. biotecnol ; 15(1): 172-179, ene.-jun. 2013. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-696127

RESUMO

Los tejidos fijados en formol e incluidos en parafina son una fuente de material para hallazgos moleculares en el ámbito clínico y científico, demostrándose que el ADN extraído de éstos, es adecuado para amplificación a través de la reacción en cadena de la polimerasa (RCP). En este estudio, se ensayaron tres métodos de extracción de ADN en tejidos incluidos en parafina, con el objetivo de comparar la eficiencia de estos para obtener ADN adecuado, además se analizó su utilidad en amplificación por RCP. Se emplearon tres muestras, correspondientes a una biopsia de pulmón, legrado endometrial y ganglio linfático, todas fijadas en formaldehido al 10% e incluidas en parafina. Utilizándose tres métodos diferentes de extracción de ADN (extracción por salting out, método modificado de Sambrook y kit comercial) El ADN obtenido se cuantificó por espectrofotometría, además se realizó electroforesis en gel de agarosa al 1%, para comprobar si el ADN era de buena calidad y se realizó RCP para el exón 3 del gen caveolina 1. Todos los métodos dieron como resultado una buen producto de ADN genómico, observándose mayor cantidad y pureza en los métodos de salting out y kit comercial, asimismo se obtuvo amplificación del producto esperado por estos dos métodos, no hubo buenos resultados con el ADN extraído por el método modificado "Preparation of Genomic DNA from Mouse Tails y Other Small samples, según Sambrook". El ADN obtenido a partir de tejidos FFIP puede ser amplificado por varios métodos, entre estos, la extracción por salting out es útil y con poca toxicidad, permite obtener ADN de buena calidad para amplificación por RCP.


Formalin-fixed and paraffin-embedded tissues are a source of important molecular findings in clinical and scientific, demonstrating that the DNA extracted from these is suitable for amplification by polymerase chain reaction (PCR). In this study, we tested three methods of DNA extraction, in order to compare the efficiency of these DNA for RCP amplification. Three samples were used, corresponding to a lung biopsy, endometrial curettage and lymph node, all fixed in 10% formaldehyde and embedded in paraffin. Three different methods were used for DNA extraction (extraction by salting out, modified Sambrook method and commercial kit) The DNA obtained was analyzed by spectrophotometry, and gel electrophoresis was performed in 1% agarose to check if the DNA was amplifiable. PCR was performed for exon 3 of caveolin-1 gene. All methods resulted in a good product of genomic DNA, obtaining more quality and purity in the salting out and commercial kit methods. Also, we obtained amplification of the product by these two methods, without favorable results with the DNA extracted by the modified "Preparation of Genomic DNA from Mouse Tails and Other Small samples, according to Sambrook et al." The DNA obtained from FFPE can be amplified by several methods, among them, salting out extraction is an easy, effective and low toxicity for obtaining good quality DNA for PCR amplification.


Assuntos
Desoxirribonucleases , DNA , Formaldeído , Reação em Cadeia da Polimerase , Parafina
8.
Pesqui. vet. bras ; 32(8): 772-780, ago. 2012. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-649526

RESUMO

This paper describes the use of a panel of antibodies (CD117, CD3, CD79a, CD45, cytokeratin, vimentin and E-cadherin) on formalin-fixed, paraffin-embedded sections of canine cutaneous round cell tumours. Neoplastic tumours were diagnosed by histology and histochemical stains and included 107 mast cell tumours, 31 cutaneous histiocytomas, two localized histiocytic sarcomas, 21 cutaneous lymphomas, three plasma cell tumours, one transmissible venereal tumour and seven unclassified round cell tumours. The histologic diagnosis was modified in 39.5% of the total 172 neoplasms. The staining for CD45 and Ecadherin were variable, and therefore, the final diagnoses of cutaneous histiocytoma and localized histiocytic sarcoma were made based on histology in association with negative results for CD3, CD79a, CD117 and cytokeratin. The cellular origin of unclassified round cell tumours was defined in all cases. Cutaneous B-cell lymphoma and plasma cell tumours were CD79a-positive and could be distinguished from each other by the morphological characteristics. Mast cell tumours and T cell lymphoma were CD117 and CD3 positive, respectively. The positive staining for vimentin and the negative staining for CD3, CD79a, CD117 and cytokeratin favoured the diagnosis of transmissible venereal tumours. Thus, the final diagnosis of cutaneous round cell tumours should be based on the interpretation of immunohistochemical results together with the cellular morphology observed by histology. Therefore, more studies to optimize the specific markers in formalin-fixed, paraffinembedded tissues (especially for histiocytes) are required for definitive diagnosis of round cell tumours in dogs.


Este trabalho descreve o uso de um painel de anticorpos (CD117, CD3, CD79a, CD45, citoqueratina, vimentina e e-caderina em tecidos formalizados e parafinizados para o diagnóstico de neoplasias de células redondas em cães. Os tumores foram diagnosticados usando-se a histopatologia e a marcação imuno-histoquímica. Foram incluídos 107 mastocitomas, 31 histiocitomas cutâneos, 2 sarcomas histiocíticos localizados, 21 linfomas cutâneos, 3 plasmocitomas, 1 tumor venéreo transmissível e 7 tumores de células redondas não classificados. O diagnóstico histológico foi modificado em 39,5% do total de 172 neoplasias. A marcação do anticorpo CD45 e E-caderina foi variável e, nesse sentido, o diagnóstico final de histiocitoma cutâneo e sarcoma histiocítico localizado foi baseado na histologia em associação com os resultados negativos para CD3, CD79a, CD117 e citoqueratina. A origem celular dos tumores de células redondas não classificados foi definida em todos os casos. Linfoma cutâneo de célula B e plasmocitoma foram positivos para CD79a e foram distinguidos entre si pelas características morfológicas. Marcação positiva para vimentina e negativa para CD3, CD79a, CD117 e citoqueratina favoreceram o diagnóstico dos tumores venereos transmissíveis. Assim, o diagnóstico final dos tumores de células redondas foram baseados na interpretação dos resultados da imuno-histoquímica em conjunto com a avaliação das características morfológicas observadas na histologia. Finalmente, mais estudos em relação à padronização de marcadores específicos para tecidos parafinizados (especialmente para histiócitos) são necessários para o diagnóstico definitivo das neoplasias de células redondas em cães.


Assuntos
Animais , Cães , Cães , Histiocitoma Fibroso Benigno/veterinária , Neoplasias Cutâneas/veterinária , Sarcoma Histiocítico/veterinária , Tumores Venéreos Veterinários/diagnóstico , Fixação de Tecidos/veterinária , Parafina , Plasmocitoma/veterinária
9.
J. bras. patol. med. lab ; 47(6): 649-654, dez. 2011. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-610899

RESUMO

INTRODUÇÃO: Tecidos fixados em formalina e emblocados em parafina (FFEP) são importantes fontes de amostras para estudos retrospectivos. Apesar de sua capacidade de preservação de proteínas e morfologia celular, a formalina interfere negativamente em testes de biologia molecular por fragmentar e modificar quimicamente os ácidos nucleicos, particularmente o ácido ribonucleico (RNA). OBJETIVO: Comparar a eficiência de três diferentes protocolos de extração de RNA para análise de expressão gênica de tecidos FFEP. MATERIAL E MÉTODOS: Amostras de linfonodo humano FEEP foram submetidas à extração de RNA utilizando-se os kits Ambion e Arcturus Bioscience e o método clássico de Trizol. Após a extração, o RNA foi quantificado e testado quanto à sua capacidade de amplificação pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) utilizando primers do gene endógeno gliceraldeído-3 fosfato desidrogenase (GAPDH). DISCUSSÃO/CONCLUSÃO: Todos os protocolos testados produziram quantidades adequadas e suficientes de RNA total, entretanto, somente os protocolos com uso dos kits Ambion e Arcturus produziram RNA capaz de ser amplificado pela PCR.


INTRODUCTION: Formalin fixed paraffin embedded (FFPE) tissues are an important sample source for retrospective studies. Despite its ability to preserve proteins and cell morphology, formalin hinders Molecular Biology tests once it fragments and chemically modifies nucleic acids, particularly RNA. OBJECTIVE: To compare the efficiency of three different RNA extraction protocols for gene expression analysis of FFEP tissues. MATERIAL AND METHODS: RNA was extracted from FFPE samples of human lymph by means of Ambion and Arcturus Bioscience kits and the classical Trizol method. After extraction, RNA was quantified and tested for amplification through real time polymerase chain reaction (RT-PCR) using glyceraldehydes-3 phosphate dehydrogenase (GAPDH) endogenous gene primers. DISCUSSION/CONCLUSION: All the protocols produced sufficient and adequate amounts of total RNA. However, only protocols using Arcturus and Ambion kits generated suitable RNA for PCR amplification.


Assuntos
Humanos , Expressão Gênica/genética , Parafina , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , RNA , Protocolos
10.
Pesqui. vet. bras ; 30(9): 793-797, set. 2010. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-562965

RESUMO

The morphology of the accessory genital glands of the male agouti was studied in twenty-three animals that were raised in captivity. Twenty animals had their genital glands dissected in situ for macroscopic description. The samples of each gland were recovered, embedded in paraffin, sliced and stained by Hematoxylin-Eosin technique. It was founded four pairs of glands: the vesicular glands, the coagulating glands, the prostate and the bulbourethral glands. Histological characteristics of the vesicular, coagulating and prostate glands showed similar morphology, within the pseudostratified columnar epithelium. The tubulo-alveolar type of the bulbourethral glands showed a lack of connective tissue among the tubules, a small amount of red stained presented it the cytoplasm, and the presence of vacuoles in the tissue. This study concluded that the agouti showed to have similar morphological aspect described in the others species of rodents.


A morfologia das glândulas genitais acessórias de cutias foram estudados em 23 animais criados em cativeiros. Vinte animais tiveram suas glândulas genitais dissecadas in situ para as descrições macroscópicas. Para o estudo microscópico foram utilizados três animais. Os fragmentos de cada glândula foram embebidos em parafina, seccionados e corados em hematoxilina e eosina. Foram encontrados quatro pares de glândulas: vesiculares, coaguladoras, próstata e bulbouretrais. As características histológicas da glândula vesicular, coaguladora e próstata mostraram morfologia similar, com epitélio colunar pseudoestratificado. O tipo tuboalveolar da glândula bulbouretral mostrou uma deficiência de tecido conjuntivo, citoplasma pouco corado e presença de vacúolos. Este estudo concluiu que a cutia apresenta as mesmas características morfológicas das glândulas genitais acessórias encontradas em roedores.


Assuntos
Animais , Genitália/anatomia & histologia , Genitália/cirurgia , Genitália/fisiologia , Corantes/análise , Parafina , Roedores
11.
Rev. chil. enferm. respir ; 26(2): 72-80, jun. 2010. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-577322

RESUMO

The aim of this study is to report the association between indoor pollution (IP), chronic respiratory symptoms (CRS) and chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Data provided from PLATINO study considering a sample of 1.208 subjects 40 and over years old population in Santiago, Chile. Analyses regarding indoor air pollution variables, smoking, environmental tobacco smoke (ETS) and lifetime exposure to occupational dust and CRS and COPD as main outcomes was performed. Crude and adjusted prevalence odds ratios (POR) were calculated using logistic regression, adjusting for potential confounders. Variables explaining higher COPD risk were age > 60 years (POR 3.94, CI95 percent 2.87-5.41, p < 0.01) and males (POR 2.08, CI95 percent 1.53-2.83, p < 0.01). Exposure to coal IP was associated with CRS (POR 1.41, CI95 percent 1.05-1.89; p = 0.024), as well as exposure to firewood IP (POR 1.42, CI95 percent 1.04-1.93; p = 0.029) and ETS (POR 2.15, CI95 percent 1.24-3.73, p = 0.006). Exposure to coal, firewood and ETS are independent risk factors for CRS. Association between exposure to IP and COPD was not observed.


El objetivo de la comunicación fue evaluar la asociación entre contaminación intradomiciliaria (CID) y la presencia de síntomas respiratorios crónicos (SRC) y Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC). Se analizó información del estudio de prevalencia Platino en base a una muestra de población general de 1.208 sujetos de 40 y más años de Santiago, Chile. Se analizó la CID derivada del uso de combustibles sólidos, exposición a humo ambiental (EHAT) y el reporte de exposición previa a polvo de origen ocupacional calculando Odds Ratio de Prevalencia (ORP) crudos y ajustados por potenciales variables confundentes. Las variables que determinan mayor riesgo de EPOC fueron edad mayor 60 años (ORP 3,9; IC95 por ciento 2,9-5,4; p < 0,01) y sexo masculino (OR 2,08; IC95 por ciento 1,5-2,8; p < 0,01). La CID derivada de carbón se asoció con síntomas respiratorios crónicos (ORP 1,4; IC95 por ciento 1,05-1,89; p = 0,024), al igual que el antecedente de exposición a humo de leña (ORP 1,4, IC95 por ciento 1,04-1,9; p = 0,029) y EHAT (ORP 2,1, IC95 por ciento 1,2-3,7; p = 0,006). La exposición a carbón, leña y EHAT constituyen factores de riesgo independientes para presentar SRC. No se encontró asociación entre CID y EPOC.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Poluição do Ar em Ambientes Fechados/efeitos adversos , Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica/epidemiologia , Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica/etiologia , Exposição por Inalação/efeitos adversos , Fatores Etários , Biomassa , Carvão Mineral/efeitos adversos , Chile/epidemiologia , Poluição por Fumaça de Tabaco/efeitos adversos , Poluentes Ocupacionais do Ar/efeitos adversos , Dispneia/epidemiologia , Dispneia/etiologia , Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica/fisiopatologia , Gases/efeitos adversos , Modelos Logísticos , Prevalência , Parafina/efeitos adversos , Espirometria , Tosse/epidemiologia , Tosse/etiologia , Área Urbana
12.
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-652035

RESUMO

Introducción: La cirugía micrográfica de Mohs (CMM) es la técnica para la resección secuencial del cáncer de piel que permite el mejor control histológico y la conservación de tejido sano, dejando defectos quirúrgicos menores, reconstrucciones menos complejas y un buen resultado funcional y estético. La adaptación de la técnica clásica de Mohs en congelación a la variedad en parafina se ajusta al uso de los recursos, humanos, técnicos y físicos en los servicios de dermatología y patología del Hospital Militar Central, dispuestos para el manejo quirúrgico de los pacientes con tumores de piel de alto riesgo, disminuyendo costos, optimizando recursos y logrando resultados excelentes y reproducibles. Objetivos: Demostrar la efectividad de la CMM variedad en parafina en el tratamiento de los tumores malignos de piel de alto riesgo en el servicio de Dermatología del Hospital Militar Central. Materiales y Métodos: Estudio descriptivo, de serie de casos, donde se incluyeron los pacientes manejados con CMM variedad en parafina en el HOSMIC desde julio de 2005 hasta julio de 2008. Resultados: Se incluyó un total de 114 tumores, en 104 pacientes (primarios: 107, recurrentes: 7), con una evolución promedio de 20.5 meses. Se intervinieron 102 (89.4%) carcinomas basocelulares (CBC), 7 (6%) carcinomas escamocelulares (CEC), 1 (0,9%) léntigo maligno, 1 (0,9%) melanoma léntigo maligno, y 3 (2.6%) correspondientes a otro tipo de tumores. Se requirió un promedio de 1.3 estados de Mohs, erradicando el tumor en un solo tiempo en el 72% de los casos. El ahorro de tejido en CBC fue de 35,1% y 18,6% en CEC, al compararlo con los márgenes convencionales. La corrección quirúrgica fue realizada por el cirujano de Mohs en 78 casos (68.42%). Se comparó el informe final de patología con el de la biopsia inicial hallando una concordancia del 70%, en los restantes, 15%, correspondían a un patrón más agresivo que el inicial, generándose un riesgo adicional para estos pacientes en cirugía convencional. Se ha podido realizar seguimiento al 94%, (98), de los pacientes, sin presencia de recidivas en tres años del programa. Conclusiones: En el Hospital Militar Central los pacientes con cáncer de piel de alto riesgo se benefician de la técnica CMM variedad en parafina, la cual se ajusta a los recursos disponibles y brinda una alta tasa de curación con la posibilidad de ahorro de tejido sano, dejando defectos menores y permitiendo correcciones quirúrgicas por parte del servicio. Esta técnica puede ser reproducible con los recursos convencionales de histología en parafina bajo un entrenamiento previo en otras instituciones.


Assuntos
Cirurgia de Mohs , Neoplasias Cutâneas/terapia , Neoplasias Cutâneas/cirurgia , Parafina , Colômbia
13.
Rev. cuba. med. trop ; 60(3)sept.-dic. 2008. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-515737

RESUMO

Introducción: Pneumocystis jiroveci es uno de los más frecuentes patógenos oportunistas que afectan a los pacientes con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida. Objetivo: detectar P. jiroveci en tejidos embebidos en parafina mediante la reacción en cadena de la polimerasa. Métodos: se emplearon 6 bloques de parafina procedentes de 3 fallecidos por sida y neumonía por P. jiroveci. Se realizaron coloraciones de rutina y especiales de anatomía patológica, así como la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico del microorganismo. Resultados: con la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa se identificó este agente infeccioso en los bloques de parafina estudiados. Se logró detectar P. jiroveci hasta una dilución de 1:100 del material genético extraído de cada bloque. Conclusiones: contar con métodos moleculares que permitan identificar P. jiroveci en tejido parafinado abre el camino para la determinación de los genotipos involucrados en la pandemia sida cubana y permitirá determinar si la cepa infectante, en los casos que resulten fatales, presenta resistencia a los fármacos empleados.


Background: Pneumocystis jiroveci is one of the most frequent opportunistic pathogens affecting the patients with the acquired immunodeficiency syndrome. Objective: to detect P. jiroveci in paraffin-embedded tissues by means of the polymerase chain reaction. Methods: six paraffin blocks from 3 dead persons who died from AIDS and P. jiroveci pneumonia. Routine and special staining of the pathological anatomy together with the PCR for diagnosis were performed. Results: the PCR identified this infective agent in the studied paraffin blocks. It was possible to detect P. jiroveci up to 1:100 dilution of the genetic material extracted from each block. Conclusions: the availability of molecular methods to identify P. jiroveci in paraffined tissue opens up the road to determination of genotypes involved in the Cuban AIDS pandemics and will allow ascertaining whether the infective strain, in fatal cases, is resistant to the drugs that are being used.


Assuntos
Morte , HIV , Parafina , Pneumocystis carinii/citologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos
14.
Rev. colomb. cancerol ; 12(3): 143-150, set. 2008. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-504056

RESUMO

Introducción: El lentigo malaigno (LM) es un subtipo de melanoma in situ que por lo menos en un 5 porciento de los casos puede convertirse en elntigo maligno melanoma (LMM). La gran extensión subclínica de LM exige métodos terapéuticos con control de márgenes histológicos, como la cirugía de Mohs o sus variaciones en parafina. En el Instituto Nacional de Cancerología (INC) se implementó una modificación al Mohs en parafina para el tratamiento de LM y duarnte seis años se evaluaron las características clínicas e histlógicas de los pacientes con LM y LMM tratados con cirugía micrográfica de Mohs con variación en parafina (CMMP). Métodos: Revisión de las historias clínicas y los registros de CMMP de los 19 pacientes con LM y LMM operados con CMMP entre 2000 y 2006. Registro de datos demográficos, quirúrgicos y patológicos y seguimeinto para determinar recaídas locales, regionales o a distancia. Resultados: se encontraron 8 tumores invasivos (42.1 porciento) con un Breslow promedio de 0,68 (00,3-1,3MM).El promedio de estados de CMMP para remover las lesiones fue 1,26(1-3); el defecto quirúrgico promedio fue de 41,94 mmm (23-55mm).Quince pacientes (78,9por ciento) requirieron 10mm o menos de margen de seguridad lateral para resección del tumor; 3 pacientes (15,78 por ciento) entre 10 y 20 mm, y 1 paciente, más de 20 mm(5,26 por ciento). El tiempo promedio de seguimiento fue de 21,84 meses (0-78 meses); no se observaron recurrencias, regionales o a distancia. Conclusiones: La CMMP es una modalidad prometedora para el tratamiento de LM y el LMM.


Assuntos
Cirurgia de Mohs , Sarda Melanótica de Hutchinson , Melanoma , Parafina
15.
Gac. méd. Caracas ; 116(2): 93-103, jun. 2008. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-630527

RESUMO

Los meningiomas son neoplasias primarias frecuentes del sitema nervioso central, usualmente benignas y susceptibles de curación mediante cirugía. Se presentan los hallazgos clínicos y morfológicos en una casuística de 580 meningiomas diagnosticados durante el período 1980 a 2003. Estos tumores representaron el 16 por ciento de las neoplasias del sistema nervioso central y la gran mayoría fueron únicos (85 por ciento de los casos), con localización intracraneana preferente y manifestaciones clínicas relacionadas con el tamaño y localización del tumor. Afectaron con mayor frecuencia a mujeres (relación 2.4:1) y a pacientes con edades comprendidas entre los 30 a 59 años (67 por ciento de los casos). Según la clasificación histológicas de la Organización Mundial de la Salud, 80 por ciento de los meningiomas correspondieron al grado histológico I (beningnos), 17 por ciento al grado II (atípicos) y apenas 3 por ciento al grado (malignos). El subtipo histológico más frecuente fue la variante transicional. Resulta importante para el patólogo reconocer y clasificar adecuadamente a los meningiomas, puesto que de ello depende el tratamiento y pronóstico de este tipo frecuente de neoplasia


Meningiomas are frequent primary neoplasms of the central nervous system, usually benign and susceptible to healing through surgery. The clinical and morphological discoveries are presented in a study of 580 meningiomas diagnosed during the period 1980-2003. These tumors represented a 16% of the neoplasms of the central nervous system and most of them were unique (85% of the cases), with preferential intracranial localization and clinical manifestations related to the size and localization of the tumor. Women were affected more frequently (the rate female/male of 2.4:1) and patients with ages among 30 and 59 years (67% of the cases). According to the histologic classification of the World Health Organization, 80% of the meningiomas corresponded to histological grade I (benign), 17% to grade II (atypical) andonly 3% to grade III (malignant). The most frequent histological subtype was the transitional variant. It is important for the pathologist to recognize and classify adequately the meningiomas, since upon this depends the treatment and prognosis of this frequent kind of neoplasm


Assuntos
Humanos , Masculino , Adulto , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Amarelo de Eosina-(YS)/análise , Hematoxilina/análise , Neoplasias Meníngeas/cirurgia , Neoplasias Meníngeas/patologia , Neoplasias do Sistema Nervoso Central/cirurgia , Neoplasias do Sistema Nervoso Central/patologia , Parafina/análise , Recidiva/prevenção & controle , Biópsia/métodos , Meningioma/classificação
16.
Rev. Univ. Ind. Santander, Salud ; 36(2): 73-79, abr.-ago. 2004.
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-548908

RESUMO

Los tejidos fijados en formalina y embebidos en parafina son un material de incalculable valor para estudios retrospectivos que requieran aplicar el análisis molecular a muestras clínicas de archivo. Sin embargo, la extracción del DNA a partir de este material consume mucho tiempo y los reactivos usados pueden contribuir a su fragmentación y contaminación, dificultando de esta forma su uso para pruebas moleculares. En este trabajo se analizaron cuatro métodos de desparafinación y su efecto sobre la cantidad y calidad del DNA. Todos los métodos mostraron una alta fragmentación del DNA, con amplificación de fragmentos de tamaños menores a 200 pb. El método de microondas fue el único que permitió amplificación de fragmentos de mayor tamaño, además de presentar la ventaja de su simplicidad, poco tiempo de ejecución y bajo costo. El tiempo de almacenamiento influyó, obteniéndose amplificación hasta 6 años y no en muestras almacenadas 10 años.


Formaline-fixed and paraffin wax embedded tissues are an invaluable source for retrospectives molecular analysis with clinical correlation. However, DNA extraction from this type of material demands a prolonged time and the DNA is often highly fragmented and contaminated by protein agents, making it inadequate for molecular purposes. Four methods to deparaffinization are tested and compared the quality and quantity to DNA obtained. All techniques lead to DNA degradation but only short sequences can be amplified, less than 200 bases in all methods. The most efficient method uses a microwave to melt the wax. This method was quick, straighforward, cheaper and effective to amplify fragments the 450 pb. The time of storage influenced, with amplification to specimens to 6 years and not in samples stored 10 years


Assuntos
Parafina , Inclusão em Parafina , Reação em Cadeia da Polimerase , Histologia , Micro-Ondas
17.
Braz. j. microbiol ; 34(4)Oct.-Dec. 2003. ilus, tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-364047

RESUMO

Os experimentos com Bacillus subtilis para avaliacão da tensão superficial foram realizados com meio de cultivo contendo como nutrientes básicos 0,4 por cento de ions nitrato e 4 por cento de glicose, na presenca de petróleo. A producão de surfactina foi observada pela reducão da tensão superficial do meio de cultura fermentado. Surfactina foi isolada a partir do meio de cultura fermentado por B. subtilis, por precipitacão ácida seguida de extracão com clorofórmio-metanol. A avaliacão da composicão dos alcanos lineares (parafinas) foi realizada por cromatografia gasosa. Observamos uma significativa reducão da tensão superficial do meio de cultura indicando que a producão de biosurfactante não foi inibida pela presenca de parafina, e que as parafinas leves podem ter sido consumidas.


Assuntos
Bacillus subtilis , Técnicas In Vitro , Parafina , Petróleo/análise , Tensoativos , Biodegradação Ambiental , Cromatografia Gasosa
18.
RPG rev. pos-grad ; 9(2): 137-141, abr.-jun. 2002. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-336389

RESUMO

A análise do DNA extraído de espécimes de arquivo utilizando-se a reaçäo em cadeia da polimerase (PCR) representa a base de uma variedade de pesquisas e protocolos de diagnóstico. A escolha de um método de extraçäo ótimo é crítica para o sucesso do procedimento. Nós avaliamos quatro métodos de extraçäo rápida de DNA para verificar qual o protocolo mais apropriado para amostras processadas rotineiramente e embebidas em parafina: digestäo enzimática e fervura, ambos com e sem desparafinizaçäo prévia em xilol. O DNA extraído das amostras foi quantificado em espectrofotômetro. O DNA foi amplificado pela técnica da PCR utilizando-se "primers" para éxon 7 da citoqueratina humana tipo 14 e o éxon 8 do gene p53 humano. DNA foi obtido através de todos os métodos de extraçäo utilizados. Apenas o DNA extraído com digestäo enzimática, com e sem desparafinizaçäo prévia, foi amplificado com sucesso pela PCR. Essas duas técnicas produzem métodos rápidos e reproduzíveis de obtençäo de DNA de tecidos arquivados em blocos de parafina, para ajudar no diagnóstico histopatológico e para realizar estudos retrospectivos


Assuntos
DNA , Reação em Cadeia da Polimerase , Parafina
19.
RBM rev. bras. med ; 58(9): 672-676, set. 2001.
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-324130

RESUMO

O autor avaliou, segundo a técnica de randomizaçäo da modalidade duplo-cega, o Psyllium Husk associado com a parafina microencapsulada (medicamento I), comparativamente com um produto convencional à base de Psyllium isoladamente (medicamento II), em pacientes portadores de constipaçäo intestinal essencial. As duas fases de três semanas foram separadas por uma janela terapêutica de três dias. Os resultados demonstraram um aumento estatisticamente significativo no número de evacuaçöes por semana com o medicamento I. A tolerabilidade foi excelente em todos os indivíduos, com aceitaçäo satisfatória pelos pacientes. O autor conclui que o medicamento I em estudo foi eficaz, sem ocorrência de efeitos colaterais, no tratamento da constipaçäo intestinal essencial.(au)


Assuntos
Humanos , Constipação Intestinal , Parafina , Psyllium
20.
Rev. costarric. cienc. méd ; 22(1/2): 51-56, ene.-jun. 2001. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-581098

RESUMO

Se describe un método simple rápido para el re-procesamiento de tejidos incluidos en parafina usados en microscopia electrónica de transmisión (MET) y de rastreo (MER). Los tejidos incluidos en parafina se seccionaron, desparafinaron en tolueno y se expusieron a vapores de osmio mediante irradiación con microorndas en horno de microondas doméstico. Los tejidos fueron embebidos en resina epóxica, polimerizados y seccionados. El método de procesamiento requirió un tiempo relativamente corto (aproximadamente 30 minutos para MET y 15 para MER) y rinde una calidad razonable de la ultraestructura para propósitos diagnósticos.


A simple and rapid method is described for re-processing of light microscopy paraffin sections to observe they under transmission electron microscopy (TEM) and scanning electron microscopy (SEM). The paraffin-embedded tissue is sectioned and deparaffinized in toluene; then exposed to osmium vapor under microwave irradiation using a domestic microwave oven. The tissues were embedded in epoxy resin, polymerized and ultrathin sectioned. The method requires a relatively short time (about 30 minutes for TEM and 15 for SEM), and produces a reasonable quality of the ultrastructure for diagnostic purposes.


Assuntos
Diagnóstico , Microscopia Eletrônica , Microscopia Eletrônica de Varredura , Parafina , Extratos de Tecidos , Costa Rica
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