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1.
Vitae (Medellín) ; 23(2): 119-123, 2016. Ilustraciones
Artigo em Inglês | LILACS, COLNAL | ID: biblio-988472

RESUMO

Background: Some species of the Lauraceae family are known to produce secondary metabolites that have antiplatelet properties. Studies on the leaves of Nectandra amazonum Nees. have shown antiaggregant activity but the bark of this species has not been studied. Objectives: To assess the antiplatelet effect of the ethanolic fraction obtained from the bark of Nectandra amazonum Nees. [N.V. "laurel amarillo", Lauraceae] applying the "Born" turbidimetric method. Methods: The screening test compared the effects of a fraction of N. amazonum (0.1 mg/mL), acetylsalicylic acid (ASA, 0.5 mM, as reference standard) and dimethylsulphoxide (DMSO, 0.1%, as control) on human platelets stimulated with adenosine diphosphate (ADP, 2 µM), epinephrine (EPI, 1 uM (one micromolar)), collagen (COLL, 1 µg/mL) and arachidonic acid (AA, 0.2 mg/mL). Subsequently, the study focused on determining the antiaggregant potency of the N. amazonum fraction through concentration - response curves (from 1 µg/mL to 0.4 mg/ mL), obtaining pIC50 (-log IC50) values against the platelet agonists. Results: Control platelets attained the highest percentage values of aggregation (96% AA, 89% EPI, 85% COLL, and 77% ADP). The N. amazonum fraction significantly reduced the aggregation effects (6% AA, 45% EPI, 10% COLL, 21% ADP), with values close to those obtained with ASA (17% AA, 21% EPI, 10% COLL, 20% ADP). According to concentration - response curves, the pIC50 values of the ethanolic fraction indicated the following order of potency: AA, 4.90 > ADP, 4.51 > COLL, 4.33 > EPI, 3.85. Conclusions: These results suggest that the N. amazonum Nees. ethanolic fraction elicited antiplatelet effects mainly related to the inhibition of the arachidonic acid pathway.


Antecedentes: Algunas especies de la familia Lauraceae poseen metabolitos secundarios que ejercen efectos antiplaquetarios. Estudios de las hojas de Nectandra amazonum Nees. han mostrado esa actividad, pero no se conoce sobre las propiedades antiagregantes de su corteza. Objetivos: Evaluar el efecto antiagregante plaquetario de la fracción etanólica obtenida de la corteza de Nectandra amazonum Nees. [N.V. "laurel amarillo", Lauraceae] aplicando el método turbidimétrico de Born. Métodos: En el tamizaje antiagregante se comparó la fracción de N. amazonum (0,1 mg/mL) con ácido acetil salicílico (ASA 0,5 mM, como estándar de referencia) y dimetilsulfóxido (DMSO, 0,1%, como control) en plaquetas humanas estimuladas con adenosin difosfato (ADP, 2 µM), epinefrina (EPI, 1 uM (uno micromolar)), colágeno (COLL, 1 µg/mL) y ácido araquidónico (AA, 0,2 mg/mL). Posteriormente, el estudio se enfocó en la determinación de la potencia antiagregante de la fracción mediante curvas de concentración - respuesta (desde 1 µg/mL hasta 0,4 mg/mL) para obtener los valores respectivos de pIC50 (-log CI50). Resultados: En el grupo control se alcanzaron altos valores de agregación plaquetaria (96% AA, 89% EPI, 85% COLL, 77% ADP). La fracción de N. amazonum redujo significativamente la agregación (6% AA, 45% EPI, 10% COLL, 21% ADP), con valores próximos a los obtenidos con ASA (17% AA, 21% EPI, 10% COLL, 20% ADP). De acuerdo con las curvas de concentración ­ respuesta, los valores de pIC50 arrojaron el siguiente orden de potencia: AA, 4,90 > ADP, 4,51 > COLL, 4,33 > EPI, 3,85. Conclusiones: Estos resultados sugieren que la fracción etanólica de N. amazonum Nees ejerce efectos antiplaquetarios relacionados especialmente con la cascada metabólica del ácido araquidónico.


Assuntos
Humanos , Agregação Plaquetária , Lauraceae , Epinefrina , Difosfato de Adenosina , Colágeno , Ácido Araquidônico
2.
Acta bioquím. clín. latinoam ; 46(4): 656-659, dic. 2012. graf, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-671973

RESUMO

La agregación por transmisión de luz (ATL) es el método más usado por laboratorios clínicos y de investigación para evaluar la función plaquetaria y es considerado actualmente el estándar de oro; no obstante, la ATL aún no es un método estandarizado, pese a los esfuerzos de organismos internacionales como la International Society of Thrombosis and Hemostasis (ISTH). Organismos regulatorios recomiendan que cada laboratorio clínico determine e informe sus intervalos de referencia (IR) para cada agonista que utiliza. Se presenta los IR de este laboratorio en la determinación de agregación plaquetaria mediante ALT utilizando adenosin difosfato (ADP), colágeno y adrenalina como agonistas. Para ello se diseñó un estudio de corte transversal sobre una muestra a conveniencia de voluntarios(as) aparentemente sanos; se usó un agregómetro óptico y se emplearon los siguientes agonistas y concentraciones finales: ADP 5 µM, colágeno 2 µM y adrenalina 10 µM. Se definió IR como los percentiles 2,5 y 97,5 (P2,5 y P97,5) del Porcentaje de Agregación Plaquetaria Máxima APM%. Participaron 63 individuos, rango de edad 18 a 66 años, 79,4% sexo femenino. Los valores de APM% fueron: ADP P2,5=49% y P97,5=87%; colágeno P2,5=43% y P97,5=86%; adrenalina P2,5=42% y P97,5=85%. Atendiendo a recomendaciones internacionalmente aceptadas, se presentan los IR de APM (%) por el método ATL en este laboratorio (ASCARDIO, Barquisimeto, Venezuela), lo que permite al clínico basar sus decisiones en evidencia válida y pertinente.


Platelet aggregation tests by means of light transmission (LTA), the current gold standard, are the most commonly used methods used to evaluate platelet function at clinical and research laboratories. However, LTA has not been determinastandardized despite the work from international organizations such as the International Society of Thrombosis and Homeostasis (ISTH). Regulatory agencies recommend that each clinical laboratory establishes and informs its own Reference Internal (RI) for all agonists they use. RI are presented for our laboratory using the following agonists: diphosphate (ADP), collagen y adrenaline and the pertaining methodology. To assess our RI for platelet aggregation tests by LTA, a cross-sectional study was designed with a convenience sample of healthy volunteer men and women using an optical aggregometer with the following agonist and final concentration: adenosine diphosphate (ADP) 5 µM, collagen 2 µM and adrenaline 10 µM. The RIs were defined as Percentiles 2.5 (P2,5) and 97.5 (P97.5) of the percentage of maximal aggregation (%MA). 63 subjects participate, age range 18 to 66,79.4% were female. The IR for %MA were: ADP P2,5=49% and P97.5=87%; collagen P2,5=43% and P97.5=86%; adrenaline P2,5=42% and P97.5=85%. In agreement with international accepted recommendation guidelines, RIs for the %MA values were presented by LTA done in our clinical laboratory (ASCARDIO, Barquisimeto, Lara State, Venezuela), that allows physicians to base their clinical decision process on valid and pertinent information.


A agregometria por transmissão de luz (ATL) é o método mais utilizado pelos laboratórios clínicos e de pesquisa para avaliar a função plaquetária e é atualmente considerada o padrão-ouro; no entanto, a ATL ainda não é um método padronizado, apesar dos esforços das agências internacionais como a International Society of Thrombosis and Hemostasis (ISTH). Agências reguladoras recomendam que cada laboratório clínico determine e comunique seus intervalos de referência (IR) para cada agonista utilizado. São apresentados o IR de nosso laboratório para determinar a agregação plaquetária através de ALT usando Difosfato de Adenosina (ADP), Colágeno e Adrenalina como agonistas. Para isso foi elaborado um estudo de corte transversal em uma amostra de conveniência de voluntários(as) aparentemente saudáveis , foi usado agregômetro ótico e foram utilizados os seguintes agonistas e concentrações finais: 5µ M ADP, Colágeno 2µM e Adrenalina 10µM. Definiu-se o IR com os percentis 2,5 e 97.5 (P2,5 e P97.5) do Percentual de Agregação Plaquetária Máxima APM%. Participaram 63 indivíduos, na faixa etária 18-66 anos, 79,4% do sexo feminino. Os valores de APM% foram: ADPP2,5=49% e P97.5=87%; Colágeno P2,5=43% e P99,5=86%, Adrenalina P2,5=42% e P97.5=85%. Atendendo às recomendações aceitas internacionalmente, apresentam-se os IR de APM% pelo método ATL em nosso laboratório (ASCARDIO, Barquisimeto, Venezuela), o que permite ao médico basear as suas decisões em evidências válidas e pertinentes.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Agregação Plaquetária/fisiologia , Difosfato de Adenosina/agonistas , Agonistas Colinérgicos/sangue , Transtornos Hemorrágicos/diagnóstico , Valores de Referência
3.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 23(2): 190-196, abr.-jun. 2008. ilus, graf
Artigo em Inglês, Português | LILACS | ID: lil-492970

RESUMO

OBJETIVO: Aplicação de energia por ultra-som pode facilitar a remoção da placa ateromatosa, mas o efeito desse procedimento em vasos próximos ainda é matéria de estudos experimentais. MÉTODOS: Para determinar se a energia ultra-sônica compromete a produção de óxido nítrico, segmentos de artérias coronárias caninas foram expostos a baixos (0-10 W) e altos (25 W) níveis de energia por 15 segundos, utilizando-se protótipo de aparelho para a realização de endarterectomia. Após exposição, segmentos das artérias coronarianas foram estudados em organ chambers. Para os ensaios farmacológicos foram utilizadas as seguintes drogas:difosfato de adenosina (ADP), acetilcolina (Ach) e fluoreto de sódio (NaF) para a avaliação do relaxamento dependente do endotélio. O nitroprussiato de sódio (NPS) e o isoproterenol foram utilizados para a avaliação do relaxamento independente do endotélio. RESULTADOS: A aplicação de alta energia ultra-sônica comprometeu o relaxamento dependente do endotélio induzido por ADP (10-9 - 10-4 M), Ach (10-9 - 10-4 M) e NaF (0,5 -9,5 mM) em artérias coronarianas epicárdicas. Entretanto, baixos valores de energia ultra-sônica não alteraram o relaxamento dependente do endotélio (nem o relaxamento máximo e nem a EC50) induzido pelos mesmos agonistas. O relaxamento da musculatura lisa vascular induzido por isoproterenol (10-9 - 10-5 M) ou NPS (10-9 - 10-6 M) não foi comprometido, tanto por baixos, quanto por altos níveis de energia ultra-sônica. CONCLUSÃO: Os experimentos demonstram que altas energias ultra-sônicas alteram a função endotelial. Entretanto, o ultra-som não altera a habilidade de relaxamento da musculatura lisa vascular de artérias caninas epicárdicas.


OBJECTIVE: Application of ultrasound energy by an endarterectomy probe can facilitate the removal of atheromatous plaque, but the effect of this procedure on surrounding vessel structure and function is still a matter of experimental investigations. METHODS: To determine whether ultrasound energy impairs the production of nitric oxide or damages vascular smooth muscle function, isolated canine epicardial coronary artery segments were exposed to either high (25 W) or low (0-10 W) ultrasonic energy outputs, for 15 seconds, using an endarterectomy device prototype. After exposure, segments of epicardial coronary artery were studied in organ chambers. The following drugs were used: adenosine diphosphate (ADP), acetylcholine (Ach) and sodium fluoride (NaF) to study endothelium-dependent relaxation and sodium nitroprusside (SNP) and isoproterenol to evaluate endothelium-independent relaxation. RESULTS: Application of high ultrasonic energy power impaired endothelium-dependent relaxation to ADP (10-9 - 10-4 M), Ach (10-9 - 10-4 M) and NaF (0.5 - 9.5 mM) in epicardial coronary arteries. However, low ultrasound energy output at the tip of the probe did not alter the endothelium-dependent relaxation (either maximal relaxation or EC50) to the same agonists. Vascular smooth muscle relaxation to isoproterenol (10-9 - 10-5 M) or SNP (10-9 - 10-6 M) was unaltered following exposure to either low or high ultrasonic energy outputs. CONCLUSION: These experiments currently prove that ultrasonic energy changes endothelial function of epicardial coronary arteries at high power. However, ultrasound does not alter the ability of vascular smooth muscle of canine epicardial coronary arteries to relax.


Assuntos
Animais , Cães , Feminino , Masculino , Endotélio Vascular/lesões , Músculo Liso Vascular/lesões , Óxido Nítrico/biossíntese , Terapia por Ultrassom/efeitos adversos , Ultrassonografia de Intervenção/efeitos adversos , Análise de Variância , Acetilcolina/farmacologia , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Vasos Coronários/lesões , Vasos Coronários/metabolismo , Endarterectomia/métodos , Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular/fisiopatologia , Isoproterenol/farmacologia , Modelos Animais , Músculo Liso Vascular/efeitos dos fármacos , Músculo Liso Vascular/fisiopatologia , Nitroprussiato/farmacologia , Fluoreto de Sódio/farmacologia , Ultrassonografia de Intervenção/métodos , Vasodilatação/efeitos dos fármacos , Vasodilatação/fisiologia
4.
Rev. chil. cardiol ; 23(4): 337-342, oct.-dic. 2004. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-419192

RESUMO

Introducción: La aspirina se usa frecuentemente para la prevención y tratamiento de eventos isquémicos cardiovasculares. Estudios en población anglosajona han mostrado que entre 5-9 por ciento de los pacientes presentan resistencia total a la acción antiplaquetaria de aspirina. Objetivos: Conocer la prevalencia de resistencia a aspirina en enfermos cardiovasculares chilenos. Evaluar factores asociados a la resistencia. Pacientes y Métodos: Se estudian 68 pacientes (21 mujeres, ± 10 años) con enfermedades cardiovasculares estables usuarios de aspirina (100-325 mg/día). Se evalúan variables clínicas y de coagulación básica. Se estudió la agregación plaquetaria con agregómetro óptico en plasma rico en plaquetas con 3 agonista. Se definió Resistencia Total a la aspirina como. 1) agregación (20 por ciento con ácido araquidónico y 2) agregación > 70 por ciento con ADP y/o colágeno. Resultados: Siete pacientes (10,3 por ciento, IC 95 por ciento = 4,2-20,1 por ciento) cumplieron ambos criterios y se consideraron como resistentes totales, 34 (50 por ciento, IC 95 por ciento = 37,6-62,4 por ciento) cumplieron con sólo un criterio y se consideraron como resistentes parciales, y los 27 pacientes restantes (39,7 por ciento, IC 95 por ciento = 28,0-52,3 por ciento) no cumplieron con ninguno de los criterios y se clasificaron como respondedores a AAS. Hubo una mayor frecuencia de fumadores (55,6 vs 23,7 por ciento) en los pacientes con Resistencia Total, pero no alcanzó significación estadística (p = 0,06). Conclusiones: La mayoría de los pacientes cardiovasculares presentan algún grado de resistencia al AAS y un 10,3 por ciento presentan Resistencia Total. No encontramos diferencias significativas entre los los pacientes con y sin resistencia total a aspirina.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Aspirina/uso terapêutico , Resistência a Medicamentos , Doenças Cardiovasculares/tratamento farmacológico , Difosfato de Adenosina , Ácido Araquidônico , Agregação Plaquetária , Aspirina/administração & dosagem , Aspirina/agonistas , Aspirina/sangue , Chile , Colágeno , Relação Dose-Resposta a Droga , Tempo de Sangramento/métodos
5.
Braz. j. med. biol. res ; 34(10): 1247-1256, Oct. 2001. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-299840

RESUMO

Sertoli cells have been shown to be targets for extracellular purines such as ATP and adenosine. These purines evoke responses in Sertoli cells through two subtypes of purinoreceptors, P2Y2 and P A1. The signals to purinoreceptors are usually terminated by the action of ectonucleotidases. To demonstrate these enzymatic activities, we cultured rat Sertoli cells for four days and then used them for different assays. ATP, ADP and AMP hydrolysis was estimated by measuring the Pi released using a colorimetric method. Adenosine deaminase activity (EC 3.5.4.4) was determined by HPLC. The cells were not disrupted after 40 min of incubation and the enzymatic activities were considered to be ectocellularly localized. ATP and ADP hydrolysis was markedly increased by the addition of divalent cations to the reaction medium. A competition plot demonstrated that only one enzymatic site is responsible for the hydrolysis of ATP and ADP. This result indicates that the enzyme that acts on the degradation of tri- and diphosphate nucleosides on the surface of Sertoli cells is a true ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5) (specific activities of 113 + or - 6 and 21 + or - 2 nmol Pi mg-1 min-1 for ATP and ADP, respectively). The ecto-5'-nucleotidase (EC 3.1.3.5) and ectoadenosine deaminase activities (specific activities of 32 + or - 2 nmol Pi mg-1 min-1 for AMP and 1.52 + or - 0.13 nmol adenosine mg-1 min-1, respectively) were shown to be able to terminate the effects of purines and may be relevant for the physiological control of extracellular levels of nucleotides and nucleosides inside the seminiferous tubules


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , 5'-Nucleotidase , Nucleotídeos de Adenina , Células de Sertoli , Adenosina Desaminase , Difosfato de Adenosina , Monofosfato de Adenosina , Trifosfato de Adenosina , Cromatografia Líquida de Alta Pressão , Hidrólise , Ratos Wistar
6.
Arq. bras. cardiol ; 75(2): 97-105, Aug. 2000. tab, graf
Artigo em Português, Inglês | LILACS | ID: lil-269929

RESUMO

OBJECTIVE: Studies have demonstrated that methylxanthines, such as caffeine, are A1 and A2 adenosine receptor antagonists found in the brain, heart, lungs, peripheral vessels, and platelets. Considering the high consumption of products with caffeine in their composition, in Brazil and throughout the rest of the world, the authors proposed to observe the effects of this substance on blood pressure and platelet aggregation. METHODS: Thirteen young adults, ranging from 21 to 27 years of age, participated in this study. Each individual took 750mg/day of caffeine (250mg tid), over a period of seven days. The effects on blood pressure were analyzed through the pressor test with handgrip, and platelet aggregation was analyzed using adenosine diphosphate, collagen, and adrenaline. RESULTS: Diastolic pressure showed a significant increase 24 hours after the first intake (p<0.05). This effect, however, disappeared in the subsequent days. The platelet aggregation tests did not reveal statistically significant alterations, at any time during the study. CONCLUSION: The data suggest that caffeine increases diastolic blood pressure at the beginning of caffeine intake. This hypertensive effect disappears with chronic use. The absence of alterations in platelet aggregation indicates the need for larger randomized studies.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pressão Sanguínea/efeitos dos fármacos , Cafeína/efeitos adversos , Estimulantes do Sistema Nervoso Central/efeitos adversos , Inibidores de Fosfodiesterase/efeitos adversos , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Difosfato de Adenosina/efeitos adversos , Monofosfato de Adenosina/metabolismo , Análise de Variância , Colágeno/efeitos adversos , Epinefrina/efeitos adversos , Hipertensão/induzido quimicamente , Receptores Purinérgicos P1/antagonistas & inibidores
7.
Braz. j. med. biol. res ; 33(7): 725-9, July 2000. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-262672

RESUMO

Potato apyrase, a soluble ATP-diphosphohydrolase, was purified to homogeneity from several clonal varieties of Solanum tuberosum. Depending on the source of the enzyme, differences in kinetic and physicochemical properties have been described, which cannot be explained by the amino acid residues present in the active site. In order to understand the different kinetic behavior of the Pimpernel (ATPase/ADPase = 10) and Desirée (ATPase/ADPase = 1) isoenzymes, the nucleotide-binding site of these apyrases was explored using the intrinsic fluorescence of tryptophan. The intrinsic fluorescence of the two apyrases was slightly different. The maximum emission wavelengths of the Desirée and Pimpernel enzymes were 336 and 340 nm, respectively, suggesting small differences in the microenvironment of Trp residues. The Pimpernel enzyme emitted more fluorescence than the Desirée apyrase at the same concentration although both enzymes have the same number of Trp residues. The binding of the nonhydrolyzable substrate analogs decreased the fluorescence emission of both apyrases, indicating the presence of conformational changes in the neighborhood of Trp residues. Experiments with quenchers of different polarities, such as acrylamide, Cs+ and I- indicated the existence of differences in the nucleotide-binding site, as further shown by quenching experiments in the presence of nonhydrolyzable substrate analogs. Differences in the nucleotide-binding site may explain, at least in part, the kinetic differences of the Pimpernel and Desirée isoapyrases.


Assuntos
Difosfato de Adenosina/metabolismo , Apirase/metabolismo , Nucleotídeos/metabolismo , Solanum tuberosum/enzimologia , Apirase/química , Apirase/isolamento & purificação , Césio/química , Césio/metabolismo , Iodo/química , Iodo/metabolismo , Isoenzimas/química , Solanum tuberosum/química , Espectrometria de Fluorescência
9.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 12(1): 68-76, jan.-mar. 1997. ilus, graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-193722

RESUMO

Estudos prévios demonstraram que o comprometimento da produçäo de EDRF/NO mediada por receptores, após isquemia global e reperfusäo, possa ser devido a uma disfunçäo de G-proteínas que liga os receptores da célula endotelial à via da síntese de EDRF/NO. O presente trabalho experimental sugere que a criocardioplegia cristalóide, associada a hipotermia tópica, previne ou pode reverter, em parte, a disfunçäo endotelial nas mesmas condiçöes. Mais estudos seräo necessários para conclusöes mais definitivas, pois as análises estatísticas mais acuradas sugeriram aumento da amostragem. Este detalhe talvez seja devido às grandes dificuldades de uniformizaçäo relacionada a este tipo de experimentos. Além disso, demonstrou-se pela primeira vez que a hipotermia, por si só, pode estimular a liberaçäo de EDRF/NO pelo endotélio vascular. Isto sugere que o endotélio possa ser um importante sensor de mudanças da temperatura sangüínea e tem importantes implicaçöes para o entendimento da fisiologia da CEC e dos mecanismos locais de auto-regulaçäo.


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Cães , Acetilcolina/farmacologia , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Vasos Coronários/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular , Circulação Extracorpórea , Fluoreto de Sódio/farmacologia , Hipotermia Induzida , Ionóforos/farmacologia , Isoproterenol/farmacologia , Isquemia Miocárdica , Reperfusão Miocárdica , Nitroprussiato/farmacologia , Parada Cardíaca Induzida/métodos , Soluções Cardioplégicas/farmacologia , Traumatismo por Reperfusão/prevenção & controle , Fosfolipases Tipo C/farmacologia , Relação Dose-Resposta a Droga , Relaxamento
10.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 11(2): 115-22, abr.-jun. 1996. ilus, graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-177628

RESUMO

O presente ensaio experimental estudou o efeito da infusao de soluçao cardioplégica cristalóide a altas pressoes sobre a funçao endotelial de artérias epicárdicas de caes. Nao se encontraram alteraçoes a nível de receptores (curvas dose-respostas à ACH e ADP; da transduçao do sinal iniciado nos receptores/sitema de G-proteínas (fluoreto de sódio) e nos processos intracelulares da produçao de EDRF/NO (fosfolipase C e ionóforo do cálcio A23187). A funçao da musculatura lisa vascular nao foi afetada quando se analisaram as respostas relaxantes (nitroprussiato de sódio e isoproterenol) e contráteis (KCI e prostaglandina 2alfa). Estes achados permitem as seguintes consideraçoes especulativas: a) O barotrauma produzido pela infusao da cardioplegia cristalóide a altas pressoes ocorreria apenas em circulaçoes coronarianas previamente doentes? b) Uma vez que as infusoes duraram de 2 a 3 minutos, seria o barotrauma coronariano um fenômeno dependente do tempo de infusao? c) Para que ocorra o barotrauma seriam necessários níveis mais elevados de Potássio? d) Questionara existência do fenômeno do barotrauma coronariano produzido pela infusao de soluçoes cadioplégicas pelo menos nas condiçoes experimentais utilizadas. e) A metodologia empregada estuda apenas as reatividades vasculares de artérias coronarias epicárdicas. estas artérias seriam menos sensíveis aos efeitos da pressao de infusao da cardioplegia do que a microcirculaçao coronariana? f) Seria a circulaçao coronária do cao menos sensível a altas pressoes do que do homem? Estas observaçoes experimentais sugerem que a infusao de cardioplegia cristalóide, moderadamente hipocalêmica, a altas pressoes em um tempo de 2 a 3 minutos, nao interfere com a produçao de EDRF/NO pelo endotélio de coronárias epicárdicas do cao.


Assuntos
Animais , Cães , Barotrauma , Vasos Coronários/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos , Parada Cardíaca Induzida/métodos , Pericárdio/efeitos dos fármacos , Soluções Cardioplégicas/farmacologia , Acetilcolina/farmacologia , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Cálcio/farmacologia , Cloreto de Potássio/farmacologia , Dinoprosta/farmacologia , Endotélio Vascular/fisiologia , Fatores Relaxantes Dependentes do Endotélio , Fluoreto de Sódio/farmacologia , Ionóforos/farmacologia , Isoproterenol/farmacologia , Óxido Nítrico , Nitroprussiato/farmacologia , Pericárdio/lesões , Pressão/efeitos adversos , Fosfolipases Tipo C/farmacologia
11.
Biol. Res ; 29(1): 31-46, 1996.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-228547

RESUMO

Photoaffinity labeling is a special type of chemical modification, where the label is activated by the action of light. This article presents the general principles and limitations of this technique, its application to the study of Micrococcus luteus ATPase and the use of photoaffinity crosslinking to probe the structure of this enzyme


Assuntos
Difosfato de Adenosina/química , Trifosfato de Adenosina/química , Marcadores de Afinidade/química , Ativação Enzimática/fisiologia , Radicais Livres/química , Ligantes , Micrococcus luteus/enzimologia , Peptídeos/química , Conformação Proteica , ATPases Translocadoras de Prótons/química , ATPases Translocadoras de Prótons/ultraestrutura
12.
Rev. bras. alergia imunopatol ; 18(6): 223-7, nov.-dez. 1995. tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-163277

RESUMO

As plaquetas podem estar envolvidas na fisiopatologia da asma liberando mediadores inflamatórios e/ou espasmogênicos, bem como interagindo com outras células inflamatórias. O objetivo deste trabalho foi investigar a agregaçao plaquetária de crianças com asma crônica grave. Foram selecionadas 16 crianças entre 7 e 15 anos de idade, tratadas com brocodilatadores inalatórios e beclometasona (no máximo 750 mug/dia). Doadores de sangue foram selecionados como controles-sadios. Plasma em plaquetas (PRP) e plasma pobre em plaquetas (PPP) foram preparados de acordo com procedimento padrao. A agregaçao de plaquetas foi estudada em agregômetro Payton de dois canais, calibrados com PRP (0 por cento) e PPP (100 por cento) segundo a transmitância de luz. Os estímulos utilizados para induzir a agregaçao plaquetária foram adrenalina (1-30 muM) ou adenosina bifosfato (ADP,1-30 muM). Os resultados foram expressos como percentagem da transmitância máxima. As medianas da agregaçao plaquetária dos pacientes foram respectivamente (adrenalina/ADP 1,3,10 e 30 muM): 0/0, 30/48/41/52, 45/58. As medianas da agregaçao plaquetária dos controles-sadios foram respectivamente (adrenalina/ADP 1,3,10 e 30 muM): 0/0, 12/44, 29/65, 54/74. A análise estatística demontra que a agregaçao de plaquetas dos pacientes foi significativamente menor que a de controles-sadios quando o estímulo foi ADP nas concentraçoes 10 e 30 muM. Em contrapartida, frente aos estímulos adrenalina (1-30 muM) ou mesmo ADP em concentraçoes menores (1-3 muM), a agregaçao de plaquetas dos pacientes foi similar a de controles-sadios. Concluímos que plaquetas de crianças com asma crônica grave sao hiporresponsivas quando o estímulo é ADP em altas concentraçoes. Os mecanismos bioquímicos e molecular envolvidos nesse fenômeno encontram-se sob investigaçao.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Criança , Adolescente , Agregação Plaquetária/fisiologia , Asma/fisiopatologia , Difosfato de Adenosina/efeitos adversos , Asma/sangue , Doença Crônica , Epinefrina/efeitos adversos
14.
Braz. j. med. biol. res ; 27(9): 2163-7, Sept. 1994. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-144468

RESUMO

1. In platelet rich plasma (PRP), chondroitin 4-sulfate release from platelets occurred after stimulation with ADP (5µM), collagen (5-10µM). Release started within 60 s and maximum release (0.7-2.0 mg/l) was reached within 180 s. TXA2 formation and dense granule release reached a maximum within 90 s after stimulation. 2. Using washed platelets (1.5 x 10**8 cells/ml), the platelet responses were faster. Release of chondroitin 4-sulfate and TXA2 started within 20-30 s after thrombin addition (100 mU/ml). Maximum release was reached within 60 s in both cases. Dense granule release started in the first 5 s of stimulation (34.6 ñ 12.4 por cento) reaching maximum secretion (74.4 ñ 8.7 por cento) within 60 s. 3. Our results demonstrate that maximal chondroitin 4-sulfate release occurs after the dense granule release reaction in both PRP and washed platelets. This observation suggests that chondroitin 4-sulfates is unlikely to be stored in the dense granules but may be stored in the alfagranules


Assuntos
Humanos , Plaquetas/química , Sulfatos de Condroitina/metabolismo , Grânulos Citoplasmáticos , Tromboxano A2/biossíntese , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Agregação Plaquetária , Plaquetas/efeitos dos fármacos , Colágeno/farmacologia , Trombina/farmacologia , Fatores de Tempo
15.
Braz. j. med. biol. res ; 27(5): 1111-1115, May 1994.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-319815

RESUMO

ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5; apyrase) is an enzyme that can promote ATP and ADP hydrolysis to AMP plus inorganic phosphate and depends on divalent cations such as Ca2+ or Mg2+. In previous papers we described this enzyme in the synaptosomal fraction from the central and peripheral nervous system. The present report examines whether cadmium acetate could affect the in vitro activity of the enzyme in the synaptosomal fraction from the cerebral cortex of adult male Wistar rats. Cadmium (Cd2+), a heavy metal with neurotoxic effects, inhibited the enzyme in a concentration-dependent manner. All concentrations tested (0.05-1.0 mM) significantly inhibited the hydrolysis of both substrates (ATP and ADP), with the exception of 0.05 mM on ATP hydrolysis. The kinetic data indicate a noncompetitive inhibition between the cations Cd2+ and Ca2+.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Apirase , Cádmio , Córtex Cerebral/enzimologia , Sinaptossomos , Difosfato de Adenosina , Adenosina Trifosfatases , Trifosfato de Adenosina , Apirase , Hidrólise , Cinética , Ratos Wistar , Especificidade por Substrato
16.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 8(3): 195-214, jul.-set. 1993. graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-161194

RESUMO

Este estudo mostra alguns aspectos da funçäo endotelial relacionados, diretamente, com a cirurgia cardíaca: 1) Após isquemia miocárdica global seguida de reperfusäo, o endotélio coronariano perde a habilidade de expressar vasodilataçäo endotélio-dependente mediada por receptores, ao passo que o relaxamento endotélio-dependente mediado pelo cálcio ionóforo A23187 e a fosfolipasec C, que näo dependem de estimulaçäo de receptores, encontra-se inalterada. O relaxamento produzido pelo fluoreto de sódio, o qual atua através de G-proteína(s), encontra-se comprometido. Estes experimentos indicam que o comprometimento da produçäo de EDRF/NO mediada por receptores após a lesäo de reperfusäo possa ser devido a uma disfunçäo de G-proteínas que liga os receptores da célula endotelial à via da sínese de EDRF/NO; 2) Quarenta e cinco minutos de parada cardioplégica de coraçöes de cäes, pela soluçäo St. Thomas näo comprometem a produçäo de EDRF/NO em artérias epicárdicas coronárias. Estudos farmacológicos in vitro semelhantes, testando-se os efeitos da soluçäo UW, suportaram o conceito de que ela näo lesa o endotélio coronariano, sendo segura para a preservaçäo cardíaca durantes transplantes cardíacos; 3) Em segmentos de artérias coronárias, renais, femorais, e em segmentos de artéria pulmonar, a protamina induziu vasodilataçäo endotélio-dependente, mediada pela estimulaçäo da liberaçäo de EDRF/NO. Nas circulaçöes coronariana e sistêmica, ao contrário do que se verificou nos experimentos envolvendo a circulaçäo pulmonar, este efeito foi independente da presença de heparina; 4) Em 83 por cento dos ensaios biológicos, o efluente da AMI esquerda induziu um relaxamento maior do anel coronariano bioensaiado do que o efluente da AMI direita, por liberaçäo basal de EDRF/NO. Este inibe a adesividade e a agregaçäo plaquetárias e a aterogêne, contribuindo para os resultados superiores obtidos quando se utiliza esta artéria para a revascularizaçäo do miocárdi. Quando expostos à hipoxia, as atividades vasodilatadoras da AMI e da veia safena foram maiores. Esta acentuaçäo da vasodilataçäo causada pela hipóxia foi inibida pelo tratamento com a indometacina, e, rapidamente, revertida, quando se restabeleceu a normóxia.


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Cães , Endotélio Vascular/fisiologia , Fatores Relaxantes Dependentes do Endotélio , Cirurgia Torácica , Acetilcolina/efeitos adversos , Difosfato de Adenosina/efeitos adversos , Análise de Variância , Soluções Cardioplégicas , Vasos Coronários/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos , Circulação Extracorpórea , Fluoreto de Sódio/efeitos adversos , Ionóforos/efeitos adversos , Isoproterenol/efeitos adversos , Artéria Torácica Interna/efeitos dos fármacos , Veia Safena/efeitos dos fármacos , Fosfolipases Tipo C/efeitos adversos
17.
Säo Paulo; s.n; 1993. 62 p. ilus, tab.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-138497

RESUMO

Objetivando avaliar a hemostasia em pacientes com Síndrome de Down, a autora apresenta nesta tese uma casuíatica de 21 pacientes, os quais foram submetidos aos seguintes exames pré-operatórios: TTPA, TP, TT, contagem de plaquetas e agregaçäo plaquetária estimulada por agonistas (Adrenalina, ADP, AA, Colágeno, PAF e 5HT). Os resultados apresentaram-se dentro dos limites da normalidade para as provas de coagulaçäo e contagem de plaquetas. Encontramos tendência hipoagregante frente a estimulaçäo por adrenalina, ADP, AA, colágeno e PAF, e näo observamos diferenças significantes para a agregaçäo plaquetária estimulada pelo 5HT, quando comparada com o grupo controle normal


Assuntos
Humanos , Animais , Coelhos , Hemostasia/efeitos dos fármacos , Síndrome de Down/complicações , Difosfato de Adenosina/administração & dosagem , Agregação Plaquetária , Coagulação Sanguínea , Colágeno/administração & dosagem , Epinefrina/administração & dosagem , Fator de Ativação de Plaquetas , Contagem de Plaquetas/efeitos dos fármacos , Serotonina/administração & dosagem
18.
Braz. j. med. biol. res ; 25(11): 1113-6, 1992. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-134607

RESUMO

The Ca2+ release mechanism that triggers muscle contraction is still not completely understood. We compared Ca2+ accumulation and acetyl phosphate hydrolysis by the Ca(2+)-ATPases present in the longitudinal and junctional membrane of the sarcoplasmic reticulum of rabbit skeletal muscle and found that Ca(2+)-ATPase is more sensitive to ADP inhibition when the enzyme is located on the junctional membrane than when the enzyme is located on the longitudinal membrane (K0.5 = 144 microM for the junctional enzyme vs K0.5 = 415 microM for the longitudinal enzyme). When the enzyme was solubilized in non-ionic detergent (2% v/v Triton X-100) and tested again using 2 mM AcP as substrate, the difference in ADP sensitivity observed with native preparations disappeared. We conclude that the enzyme is regulated differently depending on its localization on the membrane of the sarcoplasmic reticulum


Assuntos
Animais , Difosfato de Adenosina/farmacologia , /efeitos dos fármacos , Retículo Sarcoplasmático/efeitos dos fármacos , Retículo Sarcoplasmático/enzimologia , Cálcio/metabolismo , Relação Dose-Resposta a Droga , Hidrólise , Organofosfatos/metabolismo , Coelhos
19.
Braz. j. med. biol. res ; 24(5): 515-26, 1991. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-99484

RESUMO

Early undernutrition can cause permanent functional changes in the nervous system. Alterations in enzymes involved in neurotransmiter metabolism have been reported to result from early undernutrition. In a previous study, we demonstrated that undernutrition during suckling decreaseATP and ADP hydrolysis by synaptosomes from cerebral cortex by abouth 20% of the value found in 20-day-old well-nourished rats (j.B.T. Rocha, C.F. Melo, J.J.F.Sarkis and R.D. Dias, British Journal of Nutrition, 63:273-283, 1990). In the present study, we investigated whether this deficit persists in synaptosomes from cerebral cortex of nutritionally rehabilitated adult rats. rats were undernourished from birth to 25 days of life by feeding their dams a 7% casein (w/w) diet, while well-nourished offspring were fed by mothers maintained on a 28% casein diet. In contrast to the results previously obtained in young rats, the synaptosomes obtained from the cerebral cortex of early undernourished adult rats hydrolyzed ATP and ADP more efficiently than did those obtained from well-nourished rats. Specific activity (nmol min-1 mg protein-1, mean ñ SD) was 114.9ñ9.5 for undernourished rats (N=8) for ATP, and 50.4ñ6.1 (N=8) vs 38.8ñ4.5 (N=8) for ADP. These results suggest that the deficits found in young rats disappear in rehabilitation adult rats


Assuntos
Ratos , Animais , Difosfato de Adenosina/metabolismo , Trifosfato de Adenosina/metabolismo , Córtex Cerebral/metabolismo , Desnutrição Proteico-Calórica/metabolismo , Sinaptossomos/metabolismo , Fatores Etários , Apirase/metabolismo , Biomarcadores , Peso Corporal , Encéfalo/enzimologia , Encéfalo/crescimento & desenvolvimento , Córtex Cerebral/enzimologia , Hidrólise , Tamanho do Órgão , Desnutrição Proteico-Calórica/enzimologia , Transmissão Sináptica , Sinaptossomos/enzimologia
20.
Braz. j. med. biol. res ; 24(8): 833-6, 1991. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-102073

RESUMO

Lipoperoxidation was investigated as a step for membrane protein thiol oxidation of rat liver mitochondria incubated in the presence of Ca2 and t-butylhydroproxide, by the determination of thiobarbituric acid reactive substances. Lipoperoxidation occured only when the incubation medium contained 125 µM t-butylhdroperoxide (t-buOOH) in the presence of Ca2+ and phosphate (Pi). No lipoperoxidation was observed when acetate replaced Pi as permeant anion, or when the oxidant was omitted, even at high Ca2 and Pi concentrations (up to 120 µMCa2+ and 5mMPi), conditions under which the mitochondria are fully permeabilized. In both cases, ADP protected efficiently against permeabilization, indicating the possible involvement of the ADP/ATP carrier in the earlier stages of the process


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Cálcio/farmacocinética , Mitocôndrias Hepáticas/metabolismo , Peroxidação de Lipídeos , Difosfato de Adenosina/metabolismo , Trifosfato de Adenosina/metabolismo , Permeabilidade da Membrana Celular , Ratos Endogâmicos
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