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1.
Biosci. j. (Online) ; 36(1): 212-222, jan./feb. 2020. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1049243

RESUMO

The conversion of biomass from agro-industrial residues into bioproducts is of great interest, especially to Brazil, where bioenergy has a huge potential for development. Enzymes involved in biodegradation of lignocellulosic biomass are those of the cellulase system, of which ß-glucosidase is a constituent. The production and characterization of ß-glucosidase by the thermophilic fungus Myceliophthora heterothallica by solid-state cultivation on different agro-industrial residues (sugarcane bagasse, sugarcane straw, wheat bran and a mixture of these three materials (1:1:1 w/w) was evaluated. Solid-state cultivation were conducted in 250 mL Erlenmeyer flasks, with 5 g of each substrate. Different culture parameters, such as supplementary nutrient solution to the substrate, supplementary nutrient solution pH, initial substrate moisture and fungus incubation temperature, were evaluated to establish conditions of higher enzyme production by the fungus The greatest production of enzymes occurred in a mixture of wheat bran, sugarcane bagasse and straw bagasse (1:1:1). The activity of ß-glucosidase was greater under the following conditions: nutrient solution composed of NH4NO3, MgSO4.7H2O and (NH4)2SO4 (0.1%), at pH 4.5 or 6.0, fungus incubation at 40°C or 45°C, initial moisture of substrate at 80%. Enzyme presented optimum pH at pH 5.0 and good pH stability. Best temperature was 65°C and enzyme showed 100% stability for 1h, up to 60°C. The use of agro-industrial residues provided good production of ß-glucosidase by fungus, with enzyme having the characteristics desirable from the industrial application.


A conversão da biomassa vegetal proveniente de resíduos agroindustriais em bioprodutos é de grande interesse, principalmente para o Brasil, onde a agroenergia possui grande potencial de desenvolvimento. Enzimas envolvidas na biodegradação da biomassa lignocelulósica fazem parte do grupo das celulases, no qual a 훽-glucosidase é um constituinte. O presente estudo avaliou a produção e caracterização de uma ß-glicosidase pelo fungo termofílico Myceliophthora heterothallica por cultivo em estado sólido de diferentes resíduos agroindustriais (bagaço de cana-de-açúcar, palha de cana-de-açúcar, farelo de trigo e em uma mistura dos três materiais (1:1: 1 p/p). O cultivo em estado sólido foi realizado em frascos Erlenmeyer de 250 mL, contendo 5 g de cada substrato. Diferentes parâmetros de cultivo, como solução nutriente suplementar ao substrato, pH da solução nutriente suplementar, umidade inicial do substrato e temperatura de incubação do fungo foram avaliados, visando estabelecer condições para maior produção da enzima pelo fungo. A maior produção da enzima ocorreu na mistura de farelo de trigo, e bagaço e palha de cana-de-açúcar (1:1:1). A atividade da ß-glicosidase foi maior nas seguintes condições: solução nutriente composta por NH4NO3, MgSO4.7H2O e (NH4)2SO4 (0,1%) com pH 4,5 e 6,0, temperatura de incubação do fungo a 40°C e 45°C, com umidade inicial do substrato em 80%. A enzima apresentou pH ótimo de 5,0, e boa estabilidade ao pH. A temperatura ótima foi de 65°C, e a enzima apresentou 100% de estabilidade por 1h, até 60°C. A utilização de resíduos agroindustriais proporcionou boa produção de ß-glicosidase pelo fungo, com a enzima apresentando características desejáveis para aplicação industrial.


Assuntos
Biomassa , Fungos , Glucosidases
2.
Biosci. j. (Online) ; 35(5): 1552-1559, sept./oct. 2019. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1049051

RESUMO

ß-glucosidase has wide spectrum of biotechnological applications in different industries including food, textile, laundry detergents, pulp and paper, pharmaceutical and biofuel industry. The present investigation related to isolation, screening, and process optimization of fungal strain for enhanced production of ß-glucosidase (BGL). For this purpose, different fungal stains were isolated from different sources including soil, fruits, bark of tree as well as from the compost. The screening of fungal strain for BGL production was carried out via submerged fermentation. All the tested strains were identified on the basis of micro and macroscopic features. The fungal strain having greater ability for BGL synthesis among tested ones wasidentified as Aspergillus niger and given the code SBT-15. The process parameter including fermentation media, temperature, pH, rate of fermentation, carbon and nitrogen sources, volume of media were optimized. Five different fermentation media were evaluatedM3medium gave maximum production. The optimal conditions for BGL production was 72 hours of incubation at 40°C, pH 6 and 50 ml fermentation medium. Glucose (1%) and ammonium sulphate(3%) were optimized as best carbon and nitrogen sources, respectively.


A ß-glicosidase possui amplo espectro de aplicações biotecnológicas em diferentes indústrias, incluindo alimentos, têxteis, detergentes para lavanderia, papel e celulose, indústria farmacêutica e de biocombustíveis, etc. A presente investigação relaciona-se ao isolamento e triagem e otimização de processos de cepas fúngicas para produção aumentada de ß- glucosidase (BGL). Para este efeito, diferentes manchas fúngicas foram isoladas a partir de diferentes fontes, incluindo solo, frutos, casca de árvore, bem como a partir do composto. A triagem da linhagem fúngica para produção de BGL foi realizada via fermentaçãosubmersa. Todas as cepas testadas foram identificadas com base em características micro e macroscópicas. A linhagem fúngica com maior capacidade de síntese de BGL entre os testados foi identificada como Aspergillus niger e recebeu o código SBT-15. O parâmetro do processo, incluindo meios de fermentação, temperatura, pH, taxa de fermentação, fontes de carbono e nitrogênio, volume de mídia foram otimizados. Cinco meios de fermentação diferentes foram avaliados. O meio M3 deu a produção máxima. As condições ótimas para a produção de BGL foram 72 horas de incubação a 40 ° C, pH 6 e 50ml de meio de fermentação. Glicose (1%) e sulfato de amônio (3%) foram otimizados como melhores fontes de carbono e nitrogênio, respectivamente.


Assuntos
Aspergillus niger , Fermentação , Fungos , Glucosidases
4.
Electron. j. biotechnol ; 26: 46-51, Mar. 2017. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1009650

RESUMO

Background: Current commercial production of isomalto-oligosaccharides (IMOs) commonly involves a lengthy multistage process with low yields. Results: To improve the process efficiency for production of IMOs, we developed a simple and efficient method by using enzyme cocktails composed of the recombinant Bacillus naganoensis pullulanase produced by Bacillus licheniformis, α-amylase from Bacillus amyloliquefaciens, barley bran ß-amylase, and α-transglucosidase from Aspergillus niger to perform simultaneous saccharification and transglycosylation to process the liquefied starch. After 13 h of reacting time, 49.09% IMOs (calculated from the total amount of isomaltose, isomaltotriose, and panose) were produced. Conclusions: Our method of using an enzyme cocktail for the efficient production of IMOs offers an attractive alternative to the process presently in use.


Assuntos
Oligossacarídeos/metabolismo , Amido/metabolismo , Enzimas/metabolismo , Isomaltose/metabolismo , Oligossacarídeos/biossíntese , Aspergillus niger/enzimologia , Temperatura , Bacillus/enzimologia , beta-Amilase/metabolismo , Glicosilação , Liquefação , alfa-Amilases/metabolismo , Fermentação , Glucosidases/metabolismo , Glicosídeo Hidrolases/metabolismo , Concentração de Íons de Hidrogênio
5.
Rev. cuba. invest. bioméd ; 33(1): 1-11, ene.-mar. 2014. tab
Artigo em Espanhol | LILACS, CUMED | ID: lil-722953

RESUMO

INTRODUCCIÓN: el control de la calidad de las aguas es vital para la protección de la salud humana y la biodiversidad en el ambiente acuático. Varios microorganismos son utilizados como indicadores de contaminación fecal para este propósito, dentro de ellos los enterococos son considerados buenos indicadores, porque sobreviven más tiempo ante condiciones adversas en la naturaleza. OBJETIVOS: evaluar la capacidad de un nuevo método cromogénico alternativo para la detección y enumeración de enterococos en aguas por la técnica de filtración por membrana, en comparación con el método estándar ISO 7899:2. MÉTODOS: se recolectaron muestras de aguas de tres orígenes diferentes para determinar su calidad. Las muestras se ensayaron en paralelo por las dos metodologías (alternativa y referencia), empleando la técnica de filtración por membrana. Para evaluar el desempeño de los métodos se determinaron varios parámetros: sensibilidad, especificidad, exactitud, porcentaje de falsos positivos, porcentaje de falsos negativos, índice kappa. Los tres primeros parámetros se calcularon para ambos métodos antes y después de la confirmación por pruebas bioquímicas. Los resultados se analizaron desde el punto de vista estadístico, teniendo en cuenta los principales criterios definidos en las normas ISO 16140 e ISO 177994. RESULTADOS: con el método alternativo los resultados se obtuvieron a las 24 h, estos mostraron valores de sensibilidad (99 %) y exactitud (98 %) más elevados que con el de referencia (97 % y 97 %, respectivamente), el cual demoró más de 48 h. La eficiencia y exactitud de ambos métodos fue similar y se obtuvo una concordancia entre ellos casi perfecta (kappa = 0,96) con el total de las muestras de aguas ensayadas. CONCLUSIONES: los resultados alcanzados indican que el método alternativo es eficiente para el recuento de enterococos provenientes de diferentes tipos de muestras de agua. Resulta además un método simple, más rápido y económicamente factible.


INTRODUCTION: water quality control is essential for the protection of human health and biodiversity in the aquatic environment. For this purpose, several microorganisms are used as indicators of fecal contamination. Among them are enterococci, which are considered to be good indicators, since they survive for a longer time in adverse natural conditions. OBJECTIVES: evaluate the suitability of a new alternative chromogenic method for the detection and enumeration of enterococci in water by membrane filtration technique, in comparison with the ISO 7899:2 standard method. METHODS: water samples were collected from three different sources to determine their quality. The samples were assayed in parallel with the two methodologies (alternative and reference) using the membrane filtration technique. The following parameters were determined to evaluate the performance of the methods: sensitivity, specificity, accuracy, percentage of false positives, percentage of false negatives, kappa index. The first three parameters were estimated for both methods before and after confirmation by biochemical testing. Results were analyzed statistically based on the main criteria defined by ISO standards 16140 and 177994. RESULTS: with the alternative method, results were obtained at 24 h, whereas the reference method required more than 48 h. Sensitivity and accuracy were higher with the alternative method (99 % and 98 %, respectively) than with the reference method (97% and 97%, respectively). Both methods had similar efficiency and accuracy, with almost perfect concordance between them (kappa = 0.96) in all the water samples tested. CONCLUSIONS: results show that the alternative method is efficient for the enumeration of enterococci from different types of water samples. It is also a simple, faster and economically feasible method.


Assuntos
Humanos , Qualidade da Água/normas , Técnicas Microbiológicas/métodos , Filtração por Membranas/métodos , Compostos Cromogênicos , Enterococcus/patogenicidade , Glucosidases/análise
6.
Braz. j. microbiol ; 42(4): 1479-1484, Oct.-Dec. 2011. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-614613

RESUMO

The production of extracellular hydrolases by a psychrotrophic bacterium isolated from refrigerated raw milk, and identified as a Pseudomonas sp. belonging to the Pseudomonas jenssenii group, was studied. This bacterium produced proteolytic and lipolytic enzymes in all media investigated (skim milk, cheese whey, casein broth, and tryptone soy broth). High levels of á-glucosidase were produced in skim milk broth. Hydrolytic enzymes detected in skim milk broth are of particular concern, indicating that these enzymes could be produced by Pseudomonas sp. during the cold storage of raw milk, contributing to the spoilage problem in milk and dairy products.


Assuntos
Alimentos Resfriados , Glucosidases/análise , Lipase/análise , Pseudomonas/isolamento & purificação , Amostras de Alimentos , Leite
7.
Rev. colomb. biotecnol ; 13(1): 66-72, jul. 2011. tab, graf, ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-600575

RESUMO

Las beta-glucosidasas son enzimas que poseen actividad hidrolitica y transferasa o transglucosidasa. Tienen diversas aplicaciones; en la biosintesis de oligosacaridos, produccion de etanol utilizando residuos agricolas y en la industria de vinos. La aplicacion industrial, sin embargo, requiere estabilidad a temperaturas elevadas, por lo que los microorganismos termofilos tienen gran interes. El proposito de esta investigacion es el de optimizar el medio de cultivo anaerobio de bacterias termofilas, para aumentar la produccion de beta-glucosidasas. Esta enzima es producida por tres aislados bacterianos: FT3, 2B y P5 los cuales fueron aislados de la region andina de Bolivia. El aislado bacteriano FT3 mostro una actividad beta-glucosidasa de 0,35 [UI/mL]. Se tomaron como variables dentro de la optimizacion del medio de cultivo las fuentes de nitrogeno y de carbono, y el pH. Asi tambien se probaron dos sistemas de cultivo: celulas libres y encapsuladas. Empleando extracto de levadura como fuente de nitrogeno se obtuvo una actividad de 0,52 [UI/mL]. En la optimizacion del pH del medio de cultivo se obtuvo una actividad de 0,81 [UI/mL] a pH 5. Como fuente de carbono se eligieron los hidrolizados de paja de trigo y paja de quinoa lleg¨¢ndose a obtener actividades de 1,27 y 1,34 [UI/mL] respectivamente. Se establecio que la localizacion celular de la enzima beta-glucosidasa es extracelular y presenta estabilidad hasta una temperatura de 80 ºC y un pH de 7.


The beta-glucosidases possess hydrolytic and transferase activity or transglucosidase. They have various applications; such as biosynthesis of oligosaccharides, production of ethanol using agricultural residues and wine industry. However for industrial application, stability to high temperatures is needed. Therefore a great interesting in the thermophile microorganism study exist. The purpose of this research is to optimize the culture medium of thermophilic anaerobic bacteria to increase the production of beta-glucosidase. This enzyme is produced by three isolate bacterial FT3, 2B and P5 which were isolated from the Andean region of Bolivia. FT3 isolate showed beta-glucosidase activity of 0.35 [IU/mL]. In regards to the optimization of culture medium variables such as nitrogen source, carbon source and pH were taken into account and also the combination with free and encapsulated bacterial cells. Yeast extract was the selected source of nitrogen obtaining an activity of 0.52 [IU/ mL]. The optimal pH was 5 obtaining an activity of 0.81 [IU/mL]. The selected carbon source was the hydrolyzed wheat straw and quinoa straw obtaining activities of 1.27 and 1.34 [IU/mL], respectively. The cellular localization of beta-glucosidase enzyme is extracellular and provides stability to temperature of 80 ºC and stability at pH 7.


Assuntos
Glucosidases/análise , Glucosidases/biossíntese , Glutationa Transferase/análise , Glutationa Transferase/biossíntese , Glutationa Transferase/classificação , Glutationa Transferase/farmacologia , Glutationa Transferase/química , Glutationa Transferase/síntese química , Glutationa Transferase/ultraestrutura , Oligossacarídeos/isolamento & purificação , Oligossacarídeos/análise , Oligossacarídeos/genética , Oligossacarídeos/química , Oligossacarídeos/síntese química , Oligossacarídeos/ultraestrutura , Oligossacarídeos
8.
Braz. j. microbiol ; 39(4): 724-733, Dec. 2008. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-504313

RESUMO

A 2-deoxyglucose-resistant mutant (M7) of Humicola lanuginosa was obtained by exposing conidia to γ-rays and permitting expression in broth containing 0.6 percent 2-deoxyglucose (DG) and cellobiose (1 percent) before plating on DG esculin-ferric ammonium citrate agar medium from which colonies showing faster and bigger blackening zones were selected. Kinetic parameters for enhanced ß-glucosidase (BGL) synthesis by M7 were achieved when corncobs acted as the carbon source. The combination between corncobs and corn steep liquor was the best to support higher values of all product formation kinetic parameters. Effect of temperature on the kinetic and thermodynamic attributes of BGL production equilibrium in the wild organismand M7was studied using batch process at eight different temperatures in shake-flask studies. The best performance was found at 45ºC and 20 g L-1 corncobs in 64 h. Both growth and product formation (17.93 U mL-1) were remarkably high at 45ºC and both were coupled under optimum working conditions. Product yield of BGL from the mutant M7 (1556.5 U g-1 dry corncobs) was significantly higher than the values reported on all fungal and bacterial systems. Mutation had thermo-stabilization influence on the organism and mutant required lower activation energy for growth and lower magnitudes of enthalpy and entropy for product formation than those demanded by the wild organism, other mesophilic and thermo-tolerant organisms. In the inactivation phase, the organisms needed lower values of activation energy, enthalpy and entropy for product formation equilibrium, confirming thermophilic nature of metabolic network possessed by the mutant organism.


Um mutante de Hemicola lanuginosa resistente a 2-deoxiglucose(M7) foi obtido através de exposição de conídios a raios γ, permitindo a expressão em caldo contendo 0,6 por cento de 2-deoxiglucose (DG) e celobiose (1 por cento) antes da semeadura em ágar DG esculina citrato de ferro amoniacal, da qual foram selecionadas as colônias com halo negro. Os parâmetros cinéticos para produção aumentada de ß-glucosidase (BGL) foram obtidos empregando-se sabugo de milho como fonte de carbono. A combinação de espiga de milho com água de maceração de milho foi a que forneceu os valores mais altos nos parâmetros cinéticos de formação de todos os produtos. O efeito da temperatura na cinética e atributos termodinâmicos da produção de BGL pelas cepas selvagem e M7 foi avaliado empregando-se processo de batelada em oito temperaturas diferentes in frascos em agitação. O melhor desempenho foi observado a 45ºC e 20g.l-1 de espiga de milho em 64h. Tanto a multiplicação quanto a formação do produto foram muito altas a 45ºC e ambas estavam ligadas em condições ótimas de trabalho. O rendimento de BGL produzido pelo mutante M7 (1556 U.g-1 de espiga seca) foi significativamente superior aos valores reportados para todos os sistemas fúngicos e bacterianos. A mutação influenciou a termoestabilização no microrganismo, sendo que o mutante necessitou de energia de ativação mais baixa para multiplicação e valores mais baixos de entalpia e entropia para a formação do produto quando comparado à cepa selvagem e a outros microrganismos mesofilicos e termotolerantes. Na fase de inativação, os microrganismos necessitaram valores mais baixos de energia de ativação, entalpia e entropia para o equilíbrio da formação de produto, confirmando a natureza termofílica da máquina metabólica do mutante.


Assuntos
Ágar , Entropia , Estruturas Vegetais/enzimologia , Fermentação , Glucosidases/análise , Glucosidases/isolamento & purificação , Mutação , Efeitos da Radiação , Amostras de Alimentos , Cinética , Métodos , Sambucus , Técnicas , Zea mays
9.
Braz. j. microbiol ; 36(2): 170-176, Apr.-June 2005. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-421721

RESUMO

Verificou-se que Penicillium purpurogenum foi capaz de produzir a-glucosidase intracelular, com atividade máxima sobre a sacarose. Vários parâmetros culturais para producão da enzima foram otimizados. Verificou-se que a producão máxima da enzima ocorria após 96 h de cultivo a 30º;C. A adicão dos amino-ácidos histidina e cisteína induziram a síntese da enzima até certo ponto. A temperatura e pH ótimos para atividade da enzima foram 50º;C e 5,5, respectivamente. A a-glucosidase de Penicillium purpurogenum foi estável em pH 2,0, o que torna a enzima ideal para uso na indústria de sucos de frutas e vinhos.


Assuntos
Ensaios Enzimáticos Clínicos , Glucosidases , Técnicas In Vitro , Penicillium , Métodos
10.
Rev. cuba. med. gen. integr ; 13(6): 596-609, nov.-dic. 1997. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-223741

RESUMO

Se plantea que debido a la heterogeneidad patogénica de la diabetes mellitus no insulino, se debe considerar que diferentes agentes farmacológicos serán necesarios para tratar con éxito la enfermedad, por lo cual se realiza una revisión bibliográfica de las líneas de tratamiento actuales y en perspectivas para esta compleja entidad. Las modalidades terpéuticas actuales incluyen 5 grupos de agentes esenciales: los inhibidores de las alfaglucosidasas intestinales, las sulfonilureas, las biguanidas, la insulina y el recién incorporado grupo de las tiazolidinedionas, que si se utilizan en los comienzos de la enfermedad o en pacientes con resistencia insulínica, pudieran retrasar o prevenir el desarrollo de ésta, y pueden interferir en la reducción progresiva de la función pancreática. Se expone un grupo importante de agentes farmacológicos, así como sus posibles mecanismos de acción, sobre los cuales se ha estado investigando, para ampliar e incrementar la terapéutica de la diabetes, entre los que se encuentran los análogos de la insulina, los agentes insulinomiméticos y los preparados orales de insulina, los agentes insulinotrópicos no sulfonilureas, los análogos de la amilina, los péptidos similares al glucagón, los antagonistas alfa-2 adrenérgicos, los moduladores del metabolismo de la glucosa y algunas sustancias de origen vegetal con posibles efectos hipoglucémicos


Assuntos
alfa-Glucosidases/antagonistas & inibidores , alfa-Glucosidases/farmacologia , Biguanidas/farmacologia , Diabetes Mellitus Tipo 2/metabolismo , Diabetes Mellitus Tipo 2/fisiopatologia , Diabetes Mellitus Tipo 2/terapia , Glucosidases/farmacologia , Insulina , Compostos de Sulfonilureia/farmacologia , Tiazóis/farmacologia
11.
Rev. méd. Chile ; 125(8): 856-62, ago. 1997. tab, ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-207121

RESUMO

Diabetic patients received acarbose, 150 mg/day durign four weeks and this dose was increased to 300 mg/day durign 3 months. Afterwards, patients were followed for a period of 12 weeks without acarbose. Fasting and post-prandial blood glucose and glycosilated hemoglobin were measured sequentially durign the study. Results: Eighty five patients were recruited for the study but 64 complied with the treatment protocol. The age of these patients was 56 ñ 8.8 years old, their diabetes duration was 7.8 ñ 8.8 years and their body mass index was 27.6 ñ 3.6 kg/m². During acarbose treatment, glycosilated hemoglobin decreased from 8.36 ñ 1.33 to 7.71 + 1.7 percent (p < 0.001), fasting blood glucose decreased from 173 ñ 48 to 159 ñ 59 mg/dl (p < 0.03) and post-prandial blood glucose decreased from 254 ñ 80 to 241 ñ mg/dl (NS). After discontinuing acarbose glycosilated hemoglobin and blood glucose levels returned to basal levels. Body weight and blood pressure did not change during the treatment period. Fifty nine patients bad gastrointestinal symptoms (meteorism, flatulence and abdominal distention) that were mild in 59 percent and moderate in 39 percent. Episodes of hypoglycemia were not observed. Conclusions: Acarbose, associated to sylphonylureas is an effective drug to reduce blood glucose and glycosilated hemoglobin levels in patients with non insulin dependent diabetes


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Diabetes Mellitus Tipo 2/tratamento farmacológico , Glucosidases/antagonistas & inibidores , Clorpropamida/farmacologia , Dieta para Diabéticos , Glibureto/farmacologia , Compostos de Sulfonilureia/uso terapêutico , Tolbutamida/farmacologia
12.
Rev. microbiol ; 20(4): 460-5, out.-dez. 1989. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-97150

RESUMO

O fungo termo-celulolítico Humicola sp apresentou alta atividade de exo-ß-D-glucanase (C1) ligada a célula e baixa atividade de endo ß-Glucanase (Cx) ligada a célula e no sobrenadante. Celulose microcristalina foi melhor indutor de celulase e melhor fonte de carbono do que carboximetil celulose. A atividade de ß-glucosidase foi medida somente so sobrenadante da cultura e seu valor foi maior quando carboximetil celulose foi usada como fonte de carbono em pH 7.0


Assuntos
Carboximetilcelulose Sódica/metabolismo , Celulase/metabolismo , Celulose/metabolismo , Trichoderma/enzimologia , Glucosidases/metabolismo , Trichoderma/metabolismo
14.
SELEÇÃO DE REFERÊNCIAS
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