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1.
Biomédica (Bogotá) ; 33(supl.1): 89-98, set. 2013. ilus, graf, mapas, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-695800

RESUMO

Introducción. Aedes aegypti es el principal vector del dengue en zonas urbanas. A pesar de su importancia epidemiológica, se desconoce la variabilidad genética de las poblaciones del vector en Colombia. Objetivo. Determinar la variabilidad genética del gen mitocondrial ND4 , que codifica para la subunidad 4 de la enzima NADH-deshidrogenasa, entre poblaciones de Ae. aegypti de los municipios de Sincelejo y Guaranda, donde se registra alta y baja incidencia de dengue, respectivamente. Materiales y métodos. A partir del material genético extraído de 36 hembras de Ae. aegypti , se determinó la secuencia parcial del gen mitocondrial ND4 y se estimaron los parámetros de diversidad de nucleótidos, diversidad haplotípica, estructura genética y flujo de genes entre las poblaciones de Sincelejo y Guaranda. También, se analizó la varianza molecular y se construyó una red haplotípica. Resultados. Se obtuvieron 36 secuencias de nucleótidos de 282 pb; éstas presentaron doce sitios polimórficos y se agruparon en diez haplotipos, dos presentes en ambas poblaciones, tres exclusivos de la población de Sincelejo y cinco de la población de Guaranda. Los estimadores de estructura genética ( F ST =0,15) y de flujo de genes ( Nm =1,40) evidencian diferenciación genética y un limitado intercambio de genes entre las poblaciones. Conclusión. Las poblaciones de Ae. aegypti de Sincelejo y Guaranda son genéticamente divergentes.


Introduction: Aedes aegypti is the principal vector of dengue in urban areas. Despite its epidemiological importance, the genetic variability of Colombian populations of this species is unknown. Objetive: To determine the genetic variability of mitocondrial gene ND4, which codes for subunit 4 of the enzyme NADH deshydrogenase, between populations of Ae. aegypti from municipalities of Sincelejo and Guaranda. The incidences of dengue reported from these two localities are high and low, respectively. Materials and methods: Genetic material extracted from 36 females of Ae. aegypti was used to determine the partial sequence of the mitocondrial gene ND4 as well as to estimate the parameters of nucleotidic and haplotypic diversities, genetic structure and gene flow between the Sincelejo and Guaranda populations. The molecular variance was also analysed and a haplotypic network constructed. Results: In all 36 nucleotide sequences of 282pb were obtained. These presented 12 polymorphic sites and could grouped into 10 haplotypes, two of them present in both populations, three exclusive to the Sincelejo population and five to that of Guaranda. The estimators of genetic structure ( F ST = 0.15) and gene flow ( Nm = 1.40) are both indicative of genetic differentiation and a limited exchange of genes between the populations. Conclusions: The Sincelejo and Guaranda populations of Ae. aegypti are genetically divergent.


Assuntos
Animais , Feminino , Aedes/genética , Dengue/epidemiologia , Insetos Vetores/genética , Aedes/classificação , Colômbia/epidemiologia , DNA Mitocondrial/genética , Dengue/transmissão , Ecossistema , Transferência Genética Horizontal , Genes de Insetos , Variação Genética , Haplótipos , Incidência , Proteínas de Insetos/genética , NADH Desidrogenase/genética , Polimorfismo Genético , Análise de Sequência de DNA , Especificidade da Espécie , Saúde da População Urbana
2.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 108(supl.1): 3-10, 2013. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-697827

RESUMO

The increasing population of Aedes aegypti mosquitoes on Madeira Island (Portugal) resulted in the first autochthonous dengue outbreak, which occurred in October 2012. Our study establishes the first genetic evaluation based on the mitochondrial DNA (mtDNA) genes [cytochrome oxidase subunit I (COI) and NADH dehydrogenase subunit 4 (ND4)] and knockdown resistance ( kdr ) mutations exploring the colonisation history and the genetic diversity of this insular vector population. We included mosquito populations from Brazil and Venezuela in the analysis as putative geographic sources. The Ae. aegypti population from Madeira showed extremely low mtDNA genetic variability, with a single haplotype for COI and ND4. We also detected the presence of two important kdr mutations and the quasi-fixation of one of these mutations (F1534C). These results are consistent with a unique recent founder event that occurred on the island of Ae. aegypti mosquitoes that carry kdr mutations associated with insecticide resistance. Finally, we also report the presence of the F1534C kdr mutation in the Brazil and Venezuela populations. To our knowledge, this is the first time this mutation has been found in South American Ae. aegypti mosquitoes. Given the present risk of Ae. aegypti re-invading continental Europe from Madeira and the recent dengue outbreaks on the island, this information is important to plan surveillance and control measures.


Assuntos
Animais , Aedes/genética , Complexo IV da Cadeia de Transporte de Elétrons/genética , Insetos Vetores/genética , Mutação/genética , NADH Desidrogenase/genética , Distribuição Animal , Brasil , Surtos de Doenças , DNA Mitocondrial/genética , Dengue/epidemiologia , Haplótipos/genética , Resistência a Inseticidas/genética , Portugal/epidemiologia , Venezuela
3.
Rev. Inst. Med. Trop. Säo Paulo ; 54(6): 325-329, Nov.-Dec. 2012. ilus
Artigo em Inglês | LILACS, Sec. Est. Saúde SP | ID: lil-656268

RESUMO

Culex quinquefasciatus is a vector of human pathogens, including filarial nematodes and several viruses. Although its epidemiological relevance is known to vary across geographical regions, an understanding of its population genetic structure is still incipient. In light of this, we evaluated the genetic diversity of Cx. quinquefasciatus and Cx. pipiens x Cx. quinquefasciatus hybrids collected from nine localities in Brazil and one site in Argentina. We used mitochondrial genes cox1 and nd4, along with the coxA and wsp genes of the maternally-inherited Wolbachia endosymbiont. The nd4 fragment was invariant between samples, whilst cox1 exhibited four haplotypes that separated two types of Cx. quinquefasciatus, one clustered in southern Brazil. Low sequence diversity was generally observed, being discussed. Both Brazilian and Argentinian mosquitoes were infected with a single Wolbachia strain. As reported in previous studies with these populations, cox1 and nd4 diversity is not congruent with the population structure revealed by nuclear markers or alar morphology. Future Cx. quinquefasciatus research should, if possible, evaluate mtDNA diversity in light of other markers.


Culex quinquefasciatus é vetor de patógenos humanos, incluindo nematódeos filarídeos e vários vírus. Embora a sua relevância epidemiológica varie entre as diferentes regiões geográficas, o conhecimento da estrutura genética da população é ainda incipiente. Em vista disso, foram avaliados os níveis de diversidade genética de Cx. quinquefasciatus e de híbridos Cx. quinquefasciatus x Cx. pipiens de nove cidades do Brasil e em La Plata, na Argentina. Para os testes foram utilizados fragmentos dos genes mitocondriais cox1 e nd4, juntamente com coxA e wsp do endossimbionte Wolbachia, herdado maternalmente. O fragmento nd4 não apresentou variação entre as amostras, e o cox1 exibiu quatro haplótipos que separaram dois tipos de Cx. quinquefasciatus, com um deles agrupado no sul do Brasil. Os dados de sequência mostraram baixa diversidade, sendo esta discutida. Ambas as amostras de mosquitos brasileiros e argentinos estão infectados com uma única cepa de Wolbachia. A diversidade apresentada por nd4 e cox1 não é congruente com a estrutura da população revelada por marcadores nucleares e morfologia alar de estudos anteriores com estas mesmas populações. Pesquisas com Cx. quinquefasciatus devem, se possível, avaliar a diversidade por DNA mitocondrial na luz de outros marcadores.


Assuntos
Animais , Culex/genética , Culex/microbiologia , Complexo IV da Cadeia de Transporte de Elétrons/genética , Variação Genética/genética , NADH Desidrogenase/genética , Wolbachia , Argentina , Brasil , Genes de Insetos/genética , Genes Mitocondriais/genética
4.
Biomédica (Bogotá) ; 30(2): 207-214, jun. 2010. tab, graf, ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-560976

RESUMO

Introducción. Triatoma dimidiata es el segundo vector más importante de la enfermedad de Chagas en Colombia, después de Rhodnius prolixus. El conocimiento de la composición genética y la diferenciación de poblaciones es fundamental para el adecuado diseño e implementación de estrategias de control y vigilancia vectorial. Objetivo. Determinar el nivel de variabilidad y diferenciación genética en tres poblaciones colombianas de T. dimidiata provenientes de distintas localidades y hábitats, mediante el análisis molecular de un fragmento del gen mitocondrial ND4. Materiales y métodos. Se analizó el nivel de polimorfismo y la estructura genética de dos poblaciones silvestres de los departamentos de La Guajira (n=10) y Santander (n=10), y de una población intradomiciliaria (n=15) y peridomiciliaria (n=5) del Cesar. Para tal fin, se analizaron las secuencias de nucleótidos de un fragmento del gen mitocondrial ND4. Resultados. T. dimidiata en Colombia demostró tener gran diversidad genética, tanto a nivel de nucleótidos (π: 0,034) como de haplotipo (Hd: 0,863), además de una significativa estructuración de población (fST: 0,761) con un bajo número de migrantes (Nm: 0,157). Las distancias genéticas y las diferencias en los niveles de variabilidad genética entre las tres poblaciones fueron coherentes con una posible subdivisión de población.Conclusión. Este trabajo demostró diferenciación genética entre las poblaciones de T. dimidiata de La Guajira, Cesar y Santander. Se sugiere una posible relación entre tal subdivisión y algunas características eco-epidemiológicas que posee T. dimidiata en el centro-oriente y en el norte de Colombia. Finalmente, este trabajo describe, por primera vez, la utilidad del ND4 como un marcador molecular para el estudio de poblaciones naturales de T. dimidiata.


Introduction. Triatoma dimidiata is the second most important vector of Chagas disease in Colombia after Rhodnius prolixus. Population genetic studies are essential for the adequate design and implementation of vector control and surveillance strategies. Objective. The level of genetic variability and population differentiation was surveyed among three Colombian populations of T. dimidiata from different geographic locations and ecotopes, using ND4 mitochondrial gene. Materials and methods. Genetic comparison was made between two wild populations from La Guajira (n=10) and Santander (n=10) provinces, and one intra (n=15) and one peridomiciliary (n=5) population from the Cesar province. The polymorphism frequencies of the ND4 mitochondrial gene sequence were analyzed to deduce population structure based on the 40 samples. Results. Colombian T. dimidiata showed a high nucleotide (π: 0.034) and haplotype diversity (Hd: 0.863), as well as significant population subdivision (fST: 0.761) and a low migration rate (Nm: 0.157). Genetic distances and variability differences among populations indicate distinct population subdivision amongst the three provinces. Conclusion. ND4 proved useful in elucidating the significant genetic differentiation that has occurred among T. dimidiata populations from La Guajira, Cesar and Santander. The analysis suggested a relationship between population subdivision and some eco-epidemiological attributes of this vector from the central eastern and northwestern regions of Colombia.


Assuntos
Doença de Chagas , Genética Populacional , Triatoma , Triatominae , NADH Desidrogenase , Polimorfismo Genético
5.
Pesqui. vet. bras ; 28(5): 241-248, maio 2008. ilus, graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-485061

RESUMO

Whole-mount preparations were prepared and submitted to NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase histochemistry techniques. The myenteric plexus arrangement and the number of neurons were comparatively evaluated among the different portions of the cecum. The neurons from the apical and basal regions were distributed in classes at intervals of 100µm², the means of the corresponding intervals being compared. The ganglia, in both techniques, were often connected by fine bundles, which became thicker in the mesenteric region and in the region next to the cecal ampulla. The number of positive NADH-d neurons was higher than that of NADPH-d neurons in all portions, from both regions. The numbers of reactive NADH-d e NADPH-d neurons were significantly different among the different portions of the cecum, except for the antimesenteric basal and intermediate basal regions, considering the NADH-d neurons. The profile area for the reactive NADH-d e NADPH-d neurons was higher in the apical region than in the basal area. Differences in arrangement, distribution and size of positive NADH-d e NADPH-d neurons in the different cecum portions evidenced the importance of the subdivision of the analyzed organ.


Estudaram-se o arranjo do plexo mioentérico, o número de neurônios e a área do perfil do corpo celular (µm²) dos neurônios mioentéricos, nas regiões apical e basal do ceco de ratos Wistar com 6 meses de idade. Estas regiões foram subdivididas nas seguintes porções: apical mesentérica (AM); apical intermediária (AI); apical antimesentérica (AA); próximo à ampola cecal (PA); basal intermediária (BI), e basal antimesentérica (BA). Foram montados preparados de membrana que receberam as técnicas histoquímica de NADH-diaforase (NADH-d) e NADPH-diaforase (NADPH-d). O arranjo do plexo mioentérico e o número de neurônios foram avaliados comparativamente entre as diferentes porções das regiões do ceco. Os neurônios das regiões apical e basal foram distribuídos em classes com intervalos de 100µm², sendo comparadas às médias da mensuração dos pares. Os gânglios, em ambas as técnicas, apresentavam-se, em geral, conectados por feixes delicados, tornando-se mais espessos na porção mesentérica e naquela próxima à ampola cecal. O número de neurônios NADH-d positivos foi maior do que o de NADPH-d em todas as porções, de ambas as regiões. O número de neurônios reativos a NADH-d e NADPH-d foi significativamente diferente entre as diferentes porções do ceco, com exceção das comparações entre as porções basal antimesentérica e basal intermediária, para os primeiros; e entre a basal intermediária e porção próxima à ampola cecal, e comparando-se a apical mesentérica e porção próxima à ampola cecal, para os neurônios NADPH-d positivos. A área do perfil dos neurônios NADH-d e NADPH-d reativos foi maior na região apical do que na basal. Pela primeira vez, o número de neurônios do plexo mioentérico é reportado em porções pré-estabelecidas do ceco de ratos. Nossos resultados reiteram a importância da indicação precisa da porção estudada em pesquisas envolvendo este segmento intestinal.


Assuntos
Animais , Ceco/anatomia & histologia , Contagem de Células/métodos , Contagem de Células/veterinária , NADH Desidrogenase , NADPH Desidrogenase , Neurônios/fisiologia , Plexo Mientérico/citologia , Ratos Wistar
6.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 102(5): 573-580, Aug. 2007. tab, graf, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, Sec. Est. Saúde SP | ID: lil-458624

RESUMO

To analyze the genetic relatedness and phylogeographic structure of Aedes aegypti, we collected samples from 36 localities throughout the Americas (Brazil, Peru, Venezuela, Guatemala, US), three from Africa (Guinea, Senegal, Uganda), and three from Asia (Singapore, Cambodia, Tahiti). Amplification and sequencing of a fragment of the mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 4 gene identified 20 distinct haplotypes, of which 14 are exclusive to the Americas, four to African/Asian countries, one is common to the Americas and Africa, and one to the Americas and Asia. Nested clade analysis (NCA), pairwise distribution, statistical parsimony, and maximum parsimony analyses were used to infer evolutionary and historic processes, and to estimate phylogenetic relationships among haplotypes. Two clusters were found in all the analyses. Haplotypes clustered in the two clades were separated by eight mutational steps. Phylogeographic structure detected by the NCA was consistent with distant colonization within one clade and fragmentation followed by range expansion via long distance dispersal in the other. Three percent of nucleotide divergence between these two clades is suggestive of a gene pool division that may support the hypothesis of occurrence of two subspecies of Ae. aegypti in the Americas.


Assuntos
Animais , Variação Genética , Aedes/genética , DNA Mitocondrial/genética , Genética Populacional , Insetos Vetores/genética , NADH Desidrogenase/genética , Aedes/enzimologia , África , América , Ásia , Haplótipos/genética , Insetos Vetores/enzimologia , Reação em Cadeia da Polimerase
7.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 102(1): 59-61, Feb. 2007. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-440635

RESUMO

Resistance in Mycobacterium tuberculosis to isoniazid (INH) is caused by mutations in the catalase-peroxidase gene (katG) , and within the inhA promoter and/or in structural gene. A small percentage (~ 10 percent) of INH-resistant strains do not present mutations in both of these loci. Other genes have been associated with INH resistance including the gene encoding for NADH dehydrogenase (ndh) . Here we report the detection of two ndh locus mutations (CGT to TGT change in codon 13 and GTG to GCG change in codon 18) by analyzing 23 INH-resistant and in none of 13 susceptible isolates from Brazilian tuberculosis patients. We also detected two isolates without a mutation in ndh, or any of the other INH resistance-associated loci examined, suggesting the existence of additional, as yet to be described, INH resistance mechanisms.


Assuntos
Humanos , Antituberculosos/farmacologia , Isoniazida/farmacologia , Mutação/genética , Mycobacterium tuberculosis/efeitos dos fármacos , Mycobacterium tuberculosis/genética , NADH Desidrogenase/genética , Brasil , Farmacorresistência Bacteriana/genética , Testes de Sensibilidade Microbiana , Mycobacterium tuberculosis/isolamento & purificação , Reação em Cadeia da Polimerase , Polimorfismo Conformacional de Fita Simples
8.
Parasitol. latinoam ; 61(3/4): 101-110, dic. 2006. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-453317

RESUMO

Utilizando las técnicas moleculares de SSCP y RAPD se pudo evidenciar rápida y claramente la variabilidad genética en Colombia de larvas del céstodo Taenia solium analizando fragmentos de genes de ADN mitocondrial y fragmentos aleatorios de ADN nuclear. El ADN estudiado se obtuvo de ocho aislados de cisticercos de cerdo provenientes de tres departamentos de Colombia: Antioquia, Nariño y Sucre. Los fragmentos obtenidos por PCR de los genes NADH deshidrogenasa 1 (ND1) y citocromo oxidasa c subunidad I (COI) al ser denaturados y analizados en geles no denaturantes de acrilamida, mostraron al menos tres patrones diferentes por cada gen analizado, verificando que estos genes conservados mitocondriales son polimórficos en T. solium colombiana. Por otra parte, los cebadores decaméricos de RAPD produjeron patrones polimórficos, corroboraron la diversidad genética entre los diferentes aislamientos analizados.


Assuntos
Animais , Marcadores Genéticos , Variação Genética , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Taenia solium/crescimento & desenvolvimento , Taenia solium/genética , DNA Mitocondrial/análise , Colômbia , Complexo II de Transporte de Elétrons/análise , Dados de Sequência Molecular , NADH Desidrogenase/análise , Polimorfismo Genético , Polimorfismo Conformacional de Fita Simples , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA Polimórfico , Suínos , Taenia solium/isolamento & purificação
9.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 101(6): 625-633, Sept. 2006. mapas, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-437055

RESUMO

The mosquito Aedes aegypti is the main vector of dengue in Venezuela. The genetic structure of this vector was investigated in 24 samples collected from eight geographic regions separated by up to 1160 km. We examined the distribution of a 359-basepair region of the NADH dehydrogenase subunit 4 mitochondrial gene among 1144 Ae. aegypti from eight collections. This gene was amplified by the polymerase chain reaction and tested for variation using single strand conformation polymorphism analysis. Seven haplotypes were detected throughout Venezuela and these were sorted into two clades. Significant differentiation was detected among collections and these were genetically isolated by distance.


Assuntos
Animais , Aedes/genética , DNA Mitocondrial/genética , Variação Genética , Insetos Vetores/genética , NADH Desidrogenase/genética , Aedes/enzimologia , Dengue/transmissão , Geografia , Haplótipos/genética , Insetos Vetores/enzimologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Polimorfismo Conformacional de Fita Simples , Venezuela
10.
Braz. j. med. biol. res ; 39(6): 725-730, June 2006. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-428272

RESUMO

Leber's hereditary optic neuropathy (LHON) is a maternally inherited form of retinal ganglion cell degeneration leading to optic atrophy in young adults. Several mutations in different genes can cause LHON (heterogeneity). The ND6 gene is one of the mitochondrial genes that encodes subunit 6 of complex I of the respiratory chain. This gene is a hot spot gene. Fourteen Persian LHON patients were analyzed with single-strand conformational polymorphism and DNA sequencing techniques. None of these patients had four primary mutations, G3460A, G11788A, T14484C, and G14459A, related to this disease. We identified twelve nucleotide substitutions, G13702C, T13879C, T14110C, C14167T, G14199T, A14233G, G14272C, A14290G, G14365C, G14368C, T14766C, and T14798C. Eleven of twelve nucleotide substitutions had already been reported as polymorphism. One of the nucleotide substitutions (A14290G) has not been reported. The A14290G nucleotide substitution does not change its amino acid (glutamic acid). We looked for base conservation using DNA star software (MEGALIGN program) as a criterion for pathogenic or nonpathogenic nucleotide substitution in A14290G. The results of ND6 gene alignment in humans and in other species (mouse, cow, elegans worm, and Neurospora crassa mold) revealed that the 14290th base was not conserved. Fifty normal controls were also investigated for this polymorphism in the Iranian population and two had A14290G polymorphism (4 percent). This study provides evidence that the mtDNA A14290G allele is a new nonpathogenic polymorphism. We suggest follow-up studies regarding this polymorphism in different populations.


Assuntos
Humanos , DNA Mitocondrial/genética , NADH Desidrogenase/genética , Atrofia Óptica Hereditária de Leber/genética , Polimorfismo Genético/genética , Alelos , Estudos de Casos e Controles , Análise Mutacional de DNA , Polimorfismo Conformacional de Fita Simples , Análise de Sequência de DNA
11.
Biomédica (Bogotá) ; 23(3): 351-363, sept. 2003. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-356785

RESUMO

La mitocondria en las células eucarióticas juega un papel central en el metabolismo energético. En Plasmodium, la mitocondria se adapta morfológica y fisiológicamente a las condiciones metabólicas de sus hospederos. Así, en el mosquito, los gametocitos tienen un metabolismo aerobio y una mitocondria de apariencia típica, mientras que en vertebrados, los esporozoítos y merozoitos responden a un metabolismo microaerofílico, su mitocondria tiene pocas crestas y matriz menos densa. Como consecuencia de estos cambios metabólicos, la cadena transportadora de electrones y la susceptibilidad a los inhibidores mitocondriales difiere sustancialmente. La dependencia de la síntesis de novo de pirimidinas a inhibidores metabólicos ha sido de particular interés en el desarrollo de drogas antimaláricas. El objeto de esta breve revisión es describir las adaptaciones de la mitocondria de Plasmodium durante su desarrollo y su potencial como blanco terapéutico. Se mencionan los aspectos bioquímicos importantes de la función mitocondrial en Plasmodium.


Assuntos
Mitocôndrias , Plasmodium , Malária , NADH Desidrogenase
12.
Arq. neuropsiquiatr ; 61(2A): 220-225, Jun. 2003. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-339490

RESUMO

The purpose of this study was to analyze the neuronal density of the myenteric plexus of the intermediate and antimesocolic regions of the descending colon of rats. Whole-mounts were stained with three different techniques of neuronal evidenciation. Through counts of the number of neurons in an area of 6.64 mmý under light microscopy, we found 1,271 ± 227.54 neurons with Giemsa in the intermediate region and 1,234 ± 225.92 neurons in the antimesocolic region; with the NADH-diaphorase technique we found 530 ± 92.97 neurons in the intermediate region and 539 ± 146.72 neurons in the antimesocolic region; and through the NADPH-diaphorase histochemistry, we found 417 ± 34.42 neurons in the intermediate region and 547 ± 84.01 neurons in the antimesocolic region. We conclude that there is a variation in the density of NADPH-diaphorase positive neurons in the intestinal circumference; that the NADH-diaphorase positive neuronal subpopulation represented 42.7 percent of that stained with Giemsa; and that the NADPH-diaphorase positive neurons represented 37.8 percent of the whole myenteric population


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Colo , Plexo Mientérico , Neurônios , Contagem de Células , NADH Desidrogenase , NADPH Desidrogenase , Neurônios , Ratos Wistar
13.
Arq. neuropsiquiatr ; 55(2): 249-57, jun. 1997. tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-209180

RESUMO

Foi determinada a atividade das enzimas NADH desidrogenase, NADH citocromo e redutase, succinato desidrogenase, succinato citocromo e redutase, citocromo e oxidase e citrato sintase em mitocôndrias de músculo esquelético humano normal e doente (suspeito de miopatia mitocondrial). O grupo controle foi constituído de 13 indivíduos normais e que nao faziam uso contínuo de fármacos. O grupo doente era constituído de 10 pacientes cujo diagnóstico anatomopatológico indicava suspeita de miopatia mitocondrial. Observou-se reduçao na atividade das enzimas em todos os pacientes: 7 com anormalidades em todas as enzimas ensaiadas; 2 com deficiências em todas as enzimas exceto na citocromo e oxidase; e 1 paciente com disfunçao apenas na atividade da succinato desidrogenase e succinato citocromo e redutase. Este perfil possibilitou caracterizar múltiplas deficiências ou deficiência combinada da cadeia respiratória, além da disfunçao na citrato sintase em 9 pacientes. Um dos casos constituiu exceçao, sendo a deficiência enzimática restrita ao complexo II. Foi possível concluir que a metodologia usada é adequada e facilmente aplicável aos objetivos clínicos. Os resultados obtidos possibilitam a caracterizaçao dos complexos enzimáticos mitocondriais deficientes, mostrando que tais enfermidades sao originadas de disfunçao no metabolismo energético.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pré-Escolar , Criança , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Técnicas In Vitro , Mitocôndrias Musculares/enzimologia , Miopatias Mitocondriais/enzimologia , Músculo Esquelético/patologia , Citrato (si)-Sintase/análise , Complexo IV da Cadeia de Transporte de Elétrons/análise , NADH Desidrogenase/análise , Succinato Citocromo c Oxirredutase/análise , Succinato Desidrogenase/análise
15.
Antioxid. calid. vida ; 1(3): 16-9, dic. 1994. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-215683

RESUMO

La generación de especies oxidantes es un proceso inevitable que ocurre como consecuencia de la adaptación de organismos a la vida en aerobiosis. La protección natural contra estos oxidantes es limitada y puede ser sobrepasada, en diferentes condiciones, llevando a lesiones y llevar, eventualmente, a la muerte celular


Assuntos
Humanos , Animais , Mitocôndrias/metabolismo , Oxidantes/metabolismo , Microcorpos/metabolismo , NADH Desidrogenase/fisiologia , Oxidantes/efeitos adversos , Oxirredução , Oxigênio/efeitos adversos
16.
Arch. latinoam. nutr ; 41(1): 62-71, mar. 1991. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-108033

RESUMO

Ratas hembras vírgenes, cepa Wistar, se dividieron en tres grupos de 18 animales cada uno. Un grupo fue alimentado con una dieta que aporta (45% de las calorías como grasa(45g%), otro se alimentó con una dieta baja en grasa (15%), y el tercero sirvió como testigo. Para ambos niveles, alto y bajo, la relación ácidos grasos poliinsaturados a saturados (P/S) se ajustó a 2.0 sustituyendo los ácidos grasos saturados por aceite de maíz (Omega 6). A un grupo control se le ofreció una dieta preparada con 30% (30g%) de las calorías grasas, con una relación P/S de 1.0. Cada grupo consumió sólo una de la dietas desde antes, y durante la preñez. A los 20 días de edad gestacional todas as ratas fueron sacrificadas y se les extrajeron los fetos, placentes, y hígado materno, y se aislaron las membranas mitocondriales de palcentes e hígado. Luego se analizó la composición de los ácidos grasos de los fosfolípidos mitocondriales y la actividad de citocromo-c-oxidasa en la membrana interna, y de NADH citocromo o reductasa insensible a la totenona en la membrana mitocondrial externa. La citocromo-c-oxidasa de vio activada por el aumento de los Omega 6 en los fosfolípidos, originado por la dieta de 45g% P/S2. La acticiad de NADH citocromo-c-reductasa se redujo en el grupo que recibió 15 g%, P/S2, y en ese grupo no se alteró la actividad de citocromo-c-oxidasa en relación al grupo control. El peso fetal del grupo de madrs que consumió 45g% P/S1, experimentó un significativo aumento ponderal en relación a los otros dos grupos. Este estudio indica que dietas análogas en el contenido e grasa y poliinsaturados Omega 6 a a los potencialmente consumidos por humanos, pueden inducir cambios en los constituyentes estructurales de las membranas y en las funciones de las proteínas lípido-dependiente de membrana. Por lo tanto, se postula que un aumento de los poliinsaturados 6 en los fosfolípidos de la membrana mitocondrial favoreció la función celular de los órganos estudiados, reflejándose en el estímulo del crecimiento uterino fetal


Assuntos
Gravidez , Ratos , Animais , Feminino , Dieta , Ácidos Graxos Insaturados/farmacologia , Mitocôndrias Hepáticas/ultraestrutura , Placenta/ultraestrutura , Complexo IV da Cadeia de Transporte de Elétrons/metabolismo , Mitocôndrias Hepáticas/enzimologia , NADH Desidrogenase/metabolismo , Fosfolipídeos/química , Placenta/enzimologia , Ratos Endogâmicos , Ganho de Peso
17.
Rev. Inst. Med. Trop. Säo Paulo ; 32(2): 78-83, mar.-abr. 1990. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-91891

RESUMO

No presente estudo tres tecnicas para isolamento de fracoes enriquecidas em membrana externa de Y. pestis foram avaliadas. As tecnicas utilizadas foram: centrifugacao em gradiente de densidade em sacarose e solubilizacao diferencial com Sarkosyl ou Triton X-100. A analise por eletroforese em gel de poliacrilamida na presenca de dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) das membranas externas extraidas pelos diferentes metodos evidenciou perfis proteicos semelhantes. A determinacao das atividades de NADH-desidrogenase e succinato-desidrogenase (enzimas de membrana interna) indicou que todas as preparacoes estudadas eram adequadas a estudos analiticos. Obteve-se evidencias preliminares sobre o possivel uso de perfis proteicos de membrana externa na identificacao de variantes geograficos entre isolados selvagens de Y. pestis


Assuntos
Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/isolamento & purificação , Yersinia pestis/metabolismo , Membrana Celular/enzimologia , Centrifugação com Gradiente de Concentração , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , NADH Desidrogenase/metabolismo , Succinato Desidrogenase/metabolismo
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