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1.
Int. j. morphol ; 37(4): 1463-1468, Dec. 2019. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1040154

RESUMO

Acute effect of purified mimosine (MiMo) extracted from Leucaena leucocephala on testicular histopathology has been documented with seminal vesicle (SV) atrophy. Since protein phosphorylation and seminal secretions play important roles in sperm physiology, this study aimed to study the alteration of substances including tyrosine phosphorylated (TyrPho) proteins in seminal vesicle treated with MiMo. Male mice were divided into a control and experimental groups treated with purified MiMo at 3 doses of 15, 30, and 60 mg/KgBW, respectively for 35 consecutive days. The morphology and weights of SV were compared among groups. The levels of magnesium and fructosamine in SV fluid were assayed. The profiles of equally SV total proteins were compared using SDS-PAGE. The expression of seminal TyrPho proteins was detected by western blotting. Recent results showed the decreased weights of SV in MiMo treated mice compared to control. However MiMo in all doses did not affect the levels of magnesium and fructosamine in SV fluid. The SV protein expression of 130 and 55 kDas was obviously decreased in a high dose MiMo. In dose-dependent response, the expressions of 72 and 55 kDas TyrPho proteins of SV were increased. In conclusion, MiMo could affect SV morphological size and protein secretions especially TyrPho proteins.


El efecto agudo de la mimosina purificada (MiMo) extraída de Leucaena leucocephala en la histopatología testicular se ha documentado con atrofia de vesícula seminal (VS). Debido a que la fosforilación de proteínas y las secreciones seminales tienen un papel importante en la fisiología de los espermatozoides, este estudio tuvo como objetivo estudiar la alteración de sustancias como la proteína tirosina fosforilada (TyrPho) en vesículas seminales tratadas con MiMo. Los ratones se dividieron en un grupo control y un grupo experimental y se trataron con MiMo purificado en 3 dosis de 15, 30 y 60 mg / KgBW, respectivamente, durante 35 días seguidos. La morfología y los pesos de VS se compararon entre los grupos. Fueron analizados los niveles de magnesio y fructosamina en el fluido VS. Los perfiles de las proteínas totales de VS se compararon utilizando SDS-PAGE. La expresión de la proteína TyrPho en las vesículas seminales se detectó mediante transferencia de Western blot. Los resultados recientes muestran la disminución del peso de las VS en ratones tratados con MiMo, en comparación con el grupo control. Sin embargo, en ninguna de las dosis se vieron afectados por mimosina purificada los niveles de magnesio y fructosamina en el líquido de las VS. La expresión de la proteína en VS de 130 y 55 kDas disminuyó notablemente en una dosis alta de MiMo. En la respuesta dependiente de la dosis, aumentaron las expresiones de 72 y 55 kDas de las proteínas TyrPho en las VS. En conclusión, la mimosina purificada podría afectar el tamaño morfológico de las VS y la expresión de proteínas, especialmente las proteínas TyrPho.


Assuntos
Animais , Masculino , Camundongos , Fosfoproteínas/efeitos dos fármacos , Glândulas Seminais/efeitos dos fármacos , Mimosina/administração & dosagem , Tamanho do Órgão , Fosfoproteínas/metabolismo , Fosforilação , Glândulas Seminais/patologia , Tirosina/análogos & derivados , Western Blotting , Fosfotirosina , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Camundongos Endogâmicos ICR , Mimosina/farmacologia
2.
Arch. argent. pediatr ; 117(4): 382-386, ago. 2019. ilus
Artigo em Inglês, Espanhol | LILACS, BINACIS | ID: biblio-1054941

RESUMO

La miopatía nemalínica es un trastorno heterogéneo definido por la presencia de estructuras con forma de bastones, conocidas como cuerpos nemalínicos (o bastones de nemalina). El diagnóstico se funda en la debilidad muscular, además de la visualización de cuerpos nemalínicos en la biopsia muscular. La miopatía nemalínica no tiene cura. Las estrategias terapéuticas para este trastorno son sintomáticas y empíricas. En este artículo, presentamos el caso de una recién nacida con insuficiencia respiratoria grave y debilidad muscular generalizada, a la que se le diagnosticó miopatía nemalínica a través de la biopsia muscular. La paciente tuvo una notable disminución de la sialorrea y una mejora de los movimientos espontáneos después del tratamiento con L-tirosina. Este caso se presenta para destacar la importancia de la biopsia muscular en el diagnóstico diferencial de la hipotonía grave durante el período neonatal y el posible beneficio del aporte suplementario de L-tirosina para disminuir la sialorrea y restaurar la fuerza muscular.


Nemaline myopathy (NM) is a heterogeneous disorder defined by the presence of rod-shaped structures known as nemaline bodies or rods. The diagnosis is based on muscle weakness, combined with visualization of nemaline bodies on muscle biopsy. There is no curative treatment for nemaline myopathy. Therapeutic strategies for this condition are symptomatic and empirical. Herein, we present a newborn with severe respiratory failure and generalized muscle weakness, who was diagnosed as NM by muscle biopsy. The patient experienced remarkable decrease in sialorrhea and improvement of spontaneous movements after L-tyrosine treatment. This case is presented to emphasize the importance of muscle biopsy in the differential diagnosis of severe hypotonia during neonatal period and a possible benefit of L-tyrosine supplementation for decreasing sialorrhea and restoring muscle strength.


Assuntos
Humanos , Feminino , Recém-Nascido , Tirosina/uso terapêutico , Miopatias da Nemalina/diagnóstico , Biópsia , Miopatias da Nemalina/terapia , Evolução Fatal , Hipotonia Muscular
3.
Int. j. morphol ; 36(3): 835-840, Sept. 2018. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-954194

RESUMO

Tyrosine phosphorylated proteins have been localized and identified in male reproductive tissues such as testis and capacitated/ acrosome reacted sperm except epididymis. The changes of such proteins are associated with decreased sperm quality of valproic acid treatment. This study aimed to investigate the presence and alterations of protein phosphorylation in epididymal epithelium and fluid of rats treated VPA. Sixteen adult male rats were divided into control and VPA-treated groups (n=8/ each). Treated rats were injected with VPA (500 mg/ kgBW, intraperitoneally) for 10 consecutive days. At the end of experiment, the monoclonal antiphosphotyrosine (clone 4G10) was used for immunohistochemistry to probe tyrosine phosphorylated proteins and also to examine the expression of such proteins using immuno-Western blotting in epididymal tissue and fluid. The result showed that positive reactivity of phosphorylated proteins was clearly observed in cytoplasmic principle cells, nuclei of apical & basal cells and sperm mass surrounded with epididymal fluids. The profiles of phosphorylated proteins in epididymal fluid were 182, 127, 80, 70, 57, 45, 34, and 31 kDas, respectively. Interestingly, VPA affected the changes of phosphorylated proteins and β actin in head, body, and tail epididymal fluids. We conclude that tyrosine phosphorylated proteins were detected in epididymal epithelium and fluid. The expressions of those proteins and actin were altered under VPA treating.


Las proteínas tirosina fosforiladas han sido localizadas e identificadas en tejidos reproductores masculinos tales como testículos y espermatozoides, capacitados a nivel acrosómico, excepto en el epidídimo. Los cambios de estas proteínas están asociadas con una disminución de la calidad del esperma en el tratamiento con ácido valproico (AVP). Este estudio tuvo como objetivo investigar la presencia y las alteraciones de la fosforilación de proteínas en el epitelio epididimal y en el fluido espermático de ratas tratadas con AVP. Dieciséis ratas macho adultas se dividieron en dos grupos: control y tratadas con AVP (n = 8 / cada uno). A las ratas tratadas se les inyectó AVP por vía intraperitoneal (500 mg / kg de peso corporal) durante 10 días consecutivos. Al final del experimento, se realizó inmunohistoquímica con la anti-fosfotirosina monoclonal (clon 4G10) para sondear las proteínas tirosina fosforiladas y también para examinar la expresión de tales proteínas usando inmunotransferencia Western, en tejido y fluido epididimarios. El resultado mostró reactividad positiva de proteínas fosforiladas en células citoplásmicas principales, en los núcleos de las células apicales y basales y en la masa de esperma rodeada por fluidos epididimarios. Los perfiles de proteínas fosforiladas en el fluido epididimal fueron 182, 127, 80, 70, 57, 45, 34 y 31 kDas, respectivamente. El AVP provocó cambios en las proteínas fosforiladas y en la β actina de los fluidos epididimarios de cabeza, cuerpo y cola del epidídimo. Concluimos que las proteínas tirosina fosforiladas se detectaron en el epitelio y el fluido epididimarios. Las expresiones de esas proteínas y de la β actina se alteraron bajo tratamiento con AVP.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Fosfoproteínas/efeitos dos fármacos , Tirosina/efeitos dos fármacos , Ácido Valproico/administração & dosagem , Actinas/efeitos dos fármacos , Anticonvulsivantes/administração & dosagem , Fosfoproteínas/metabolismo , Fosforilação , Tirosina/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Western Blotting , Actinas/metabolismo , Ratos Sprague-Dawley , Fosfotirosina , Epididimo
4.
Int. j. morphol ; 35(4): 1322-1327, Dec. 2017. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-893135

RESUMO

SUMMARY: Spermatogenesis is a major process in testis occurring from puberty through life span of males. The tyrosine phosphorylation is assumed to play roles in spermatogenesis because this process is important for cell proliferations, divisions, and differentiations. However, the localizations and identifications of phosphorylated proteins in testicular tissue of adult male rats are still unclear. Therefore, this study attempted to immuno-localize and identify such proteins in testicular tissues of Sprague-Dawley rats. The monoclonal anti-phosphotyrosine (clone 4G10) was used to probe tyrosine phosphorylated proteins and also to examine the expression of such proteins using immuno-Western blotting in rat testis. The result showed that positive reactivity of tyrosine phosphorylated proteins was clearly observed in interstitial endocrine cells (Leydig cells), sustentocytes (Sertoli cells), spermatogonia, spermatocytes, and spermatids (round and elongated), respectively. The expressions of testicular tyrosine phosphorylated proteins were 200, 131, 93, 70, 60, and 48 kDas, respectively. In conclusion, testicular tyrosine phosphorylated proteins were localized in both germinal epithelium and interstitial endocrine cells of adult Sprague-Dawley rats.


RESUMEN: La espermatogénesis es un proceso importante en los testículos que ocurre desde la pubertad a lo largo de la vida de los machos. Se supone que la fosforilación de la tirosina desempeña papeles en la espermatogénesis, debido a que este proceso es importante para las proliferaciones, divisiones y diferenciaciones celulares. Sin embargo, las localizaciones e identificaciones de proteínas fosforiladas en el tejido testicular de ratas macho adultas todavía no están claras. Por lo tanto, este estudio intentó inmuno-localizar e identificar dichas proteínas en tejidos testiculares de ratas Sprague-Dawley. La anti-fosfotirosina monoclonal (clon 4G10) se usó para sondar proteínas tirosina fosforiladas y también para examinar la expresión de tales proteínas usando inmunotransferencia Western en testículo de rata. El resultado mostró que la actividad positiva de las proteínas tirosina fosforiladas se observó claramente en endocrinocitos intersticiales (células de Leydig), sustentocitos (células de Sertoli), espermatogonias, espermatocitos y espermátidas (redondas y alargadas), respectivamente. Las expresiones de las proteínas tirosina fosforiladas testiculares fueron de 200, 131, 93, 70, 60 y 48 kDas, respectivamente. En conclusión, las proteínas tirosina fosforiladas fueron localizadas en ambos epitelios germinales y endocrinocitos intersticiales de ratas adultas Sprague-Dawley.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Fosfoproteínas/análise , Fosfoproteínas/metabolismo , Testículo/química , Tirosina/análise , Tirosina/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Western Blotting , Ratos Sprague-Dawley
5.
Electron. j. biotechnol ; 29: 1-6, sept. 2017. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1016090

RESUMO

Background: During salt stress, the yeast Debaryomyces hansenii synthesizes tyrosine as a strategy to avoid the oxidation of proteins. Tyrosine reacts with nitrogen radicals to form 3-nitrotyrosine. 3-nitrotyrosine prevents the effects of associated oxidative stress and thus contributes to the high halotolerace of the yeast. However, the mechanism of how D. hansenii counteracts the presence of this toxic compound is unclear. In this work, we evaluated D. hansenii's capacity to assimilate 3-nitrotyrosine as a unique nitrogen source and measured its denitrase activity under salt stress. To identify putative genes related to the assimilation of 3-nitrotyrosine, we performed an in silico search in the promoter regions of D. hansenii genome. Results: We identified 15 genes whose promoters had binding site sequences for transcriptional factors of sodium, nitrogen, and oxidative stress with oxidoreductase and monooxygenase GO annotations. Two of these genes, DEHA2E24178g and DEHA2C00286g, coding for putative denitrases and having GATA sequences, were evaluated by RT-PCR and showed high expression under salt and nitrogen stress. Conclusions: D. hansenii can grow in the presence of 3-nitrotyrosine as the only nitrogen source and has a high specific denitrase activity to degrade 3-nitrotyrosine in 1 and 2 M NaCl stress conditions. The results suggest that given the lack of information on transcriptional factors in D. hansenii, the genes identified in our in silico analysis may help explain 3-nitrotyrosine assimilation mechanisms.


Assuntos
Tirosina/análogos & derivados , Tirosina/metabolismo , Debaromyces/genética , Debaromyces/metabolismo , Tirosina/genética , Transcrição Genética , Leveduras , Sequências Reguladoras de Ácido Nucleico , Regiões Promotoras Genéticas , Estresse Oxidativo , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Osmorregulação , Extremófilos , Nitrogênio/metabolismo
6.
Int. j. morphol ; 35(2): 667-675, June 2017. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-893038

RESUMO

The aim of present study was to investigate the effect of Momordica cochinchinensis (Gag) aril (GA) aqueous extract on male reproductive system of streptozotocin (STZ)-induced hyperglycemia (HG) mice. GA were extracted with distilled water (DW) and analyzed for in vitro antioxidant capacities. ICR male mice were divided into 7 groups: 1) control, 2) DW, 3) GA 1000 mg/kg BW, 4) HG, 5) HG + glibenclamide, 6 and 7) HG + GA 500 and 1000 mg/kg BW respectively (7 mice/ group). In HG groups, mice were induced by STZ at single dose (150 mg/kg BW). They were treated for consecutive 35 days. All groups were compared for blood glucose levels, weights and histopathologies of reproductive organs, sperm concentration including testicular tyrosine phosphorylation protein patterns by Immuno-Western blotting. The results showed that GA processed antioxidant activities and could significantly decrease blood glucose levels and increase sperm concentration in HG mice. Moreover, GA could change the density of a testicular 70 kDa protein in HG-GA groups. In conclusion, GA extract could improve hyperglycemia and male reproductive damages in STZ-induced HG mice.


El objetivo de este estudio fue investigar el efecto del extracto acuoso de Momordica cochinchinensis (Gag) aril (GA) en el sistema reproductor masculino de ratones hiperglucémicos inducidos por estreptozotocina (STZ). GA fue extraída con agua destilada (DW) y se analizaron las capacidades antioxidantes in vitro. Ratones ICR machos fueron divididos en 7 grupos: 1) control, 2) DW, 3) GA 1000 mg / kg PC, 4) HG, 5) HG + glibenclamida, 6 y 7) HG + GA 500 y 1000 mg / kg PC, respectivamente (7 ratones / grupo). En los grupos HG, los ratones fueron inducidos con STZ en dosis única (150 mg / kg BW). Fueron tratados durante 35 días consecutivos. En todos los grupos se compararon los niveles de glucosa en sangre, los pesos y las histopatologías de los órganos reproductores, la concentración de espermatozoides, incluídos los patrones testiculares de proteínas tirosina fosforilada por Inmuno-Western blot. Los resultados mostraron que GA procesaba actividades antioxidantes y podían disminuir significativamente los niveles de glucosa en sangre y aumentar la concentración de espermatozoides en ratones HG. Además, GA podría cambiar la densidad de una proteína testicular de 70 kDa en grupos HG-GA. En conclusión, el extracto de GA podría mejorar la hiperglucemia y los daños reproductivos masculinos inducidos por STZ en ratones HG.


Assuntos
Animais , Masculino , Camundongos , Doenças Testiculares/tratamento farmacológico , Extratos Vegetais/administração & dosagem , Momordica/química , Hiperglicemia/tratamento farmacológico , Hipoglicemiantes/administração & dosagem , Antioxidantes/administração & dosagem , Fenóis/análise , Fosforilação/efeitos dos fármacos , Contagem de Espermatozoides , Espermatozoides/efeitos dos fármacos , Testículo/efeitos dos fármacos , Tirosina , Flavonoides/análise , Western Blotting , Diabetes Mellitus Experimental , Camundongos Endogâmicos ICR , Antioxidantes/química
7.
São Paulo; s.n; s.n; 2017. 337 p. graf, tab, ilus.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-878544

RESUMO

Tirosina, um aminoácido proteinogênico, de fundamental importância para nossa sobrevivência, foi objeto de estudo para a confecção da presente tese. Investigado frente às três reações de acoplamento cruzado mais exploradas nos últimos anos, Suzuki-Miyaura, Heck e Sonogashira, a 3-iodotirosina comportou-se como um excelente substrato na formação de unidades biarílicas, derivados estilbeno, formação de heterociclos do tipo 1,2,3-triazóis, quinolinas, benzofuranos e flavonas, bem como a formação de dipeptídeos Tyr-Tyr. A reação entre a 3-iodotirosina com diferentes nucleófilos de boro via reação de Suzuki- Miyaura, além de dar origem às unidades biarílicas, forneceu derivados do estilbeno, usados como substratos na construção de quinolinas, alcançadas por meio da reação multicomponente de Povarov, com catálise de prata em apenas 40 minutos sob irradiação de micro-ondas. Alguns desses derivados estilbeno, apresentaram ainda uma acentuada fluorescência, a qual foi medida em diferentes polaridades. Ao explorarmos a reação entre a 3-iodotirosina e acetilenos, derivados alquinílicos puderam ser convenientemente preparados, permitindo seu uso como materiais de partida na reação de cicloadição de Huisgen, no preparo de anéis triazólicos. Produtos provenientes da adição estereosseletiva de oxa-Michael, entre o anel fenólico da tirosina e aldeídos propargílicos, forneceram compostos carbonílicos α,ß-insaturados capazes de reagirem via acoplamento intramolecular de Heck, levando a derivados 2-aril-3- formil-5-alanilbenzofuranos ou ainda, apenas alterando a atmosfera inerte de nitrogênio por monóxido de carbono, a formação de 2-aril-6-alanilflavonas via acilação intramolecular redutiva. Além da metodologia de síntese explorada na tese, alguns dos compostos obtidos apresentaram atividade biológica seletiva contra células de melanoma e leucemia, bem como atividade antiparasitária frente ao Plasmodium falciparum, não afetando a proliferação de células sadias. Dessa forma, os resultados apresentados, agregam ainda mais valor sintético e biológico ao aminoácido tirosina, explorados de forma inédita


Tyrosine, a proteinogenic amino acid of fundamental importance for life, was the object of study for the research that is presented in this thesis. When 3-iodotyrosine was used in the three different types of cross-coupling reactions that have been exploited the most in recent years, namely the Suzuki-Miyaura, Heck and Sonogashira coupling reactions, 3-iodotyrosine as an excellent substrate for the formation of biaryl units, stilbene derivatives, 1,2,3-triazoletype heterocycles, quinolines, benzofurans and flavones, and Tyr-Tyr dipeptides. This work is organized into sections in order to facilitate ease of reading. The reaction between 3-iodotyrosine and different boron nucleophiles via the Suzuki- Miyaura coupling reaction, in addition to giving the biaryl units, also provided stilbene derivatives, which were used as substrates for the construction of quinolines via multicomponent Povarov reactions. The Povarov was performed with silver catalysis under 40 minutes of microwave irradiation. Some of these stilbene derivatives showed a marked fluorescence, which was measured in solvents with different polarities. By exploring the Sonogashira coupling reaction between 3-iodotyrosine and acetylenes, alkynyl derivatives could be conveniently prepared, which in turn could be used as starting materials in Huisgen cycloaddition reactions to synthesize1,2,3-triazole rings. Products from the stereoselective addition of oxa-Michael, between the phenolic ring of tyrosine and propargyl aldehydes, provided 945;,946;-unsaturated carbonyl compounds capable of reacting via Heck intramolecular coupling, leading to 2-aryl-3-formyl-5-alanylbenzofurans or by simply changing the inert atmosphere of nitrogen by carbon monoxide, the formation of 2- aryl-6-alanylflavones via reductive intramolecular acylation. In addition to the synthesis methodology explored in the thesis, some of the compounds showed selective biological activity against melanoma and leukemia cells, as well as antiparasitic activity against Plasmodium falciparum, without affecting the proliferation of healthy cells. In this way, the presented results add even more synthetic and biological value to the amino acid tyrosine, explored in an unprecedented way


Assuntos
Tirosina/análise , Antimaláricos , Ensaios de Seleção de Medicamentos Antitumorais , Fluorescência
8.
Santiago; Chile. Ministerio de Salud; 2017. tab.
Monografia em Espanhol | LILACS, BRISA/RedTESA | ID: biblio-882711

RESUMO

INTRODUCCIÓN: La fenilcetonuria es una enfermedad congénita del metabolismo, causada en la mayoría de los casos por el déficit de la enzima hepática fenilalanina hidroxilasa, responsable de transformar la fenilalanina a tirosina, esto da como resultado concentraciones elevadas de fenilalanina y sus metabolitos, fenilacetato y fenilactato en sangre. Además la fenilalanina tendrá interferida su vía de transformación en tirosina, ya que la fenilalanina hidroxilasa no se habrá formado bien, lo que se traduce en un retardo mental. La incidencia de fenilcetonuria es de 13.500 a 19.000 nacimientos en EEUU. TECNOLOGÍAS SANITARIAS ANALIZADAS: La información sobre los efectos de la Sapropterina está basada en dos estudios. El resumen de los resultados es el siguiente. Los resultados arrojan que existe un beneficio del tratamiento de la Fenilcetonuria con Sapropterina para pacientes que responden a la misma. El tratamiento resultó eficaz en disminuir considerablemente la concentración de Fenililanina en sangre y una tolerancia mayor a la misma. A pesar de lo anterior, cabe destacar que es necesario estudios que consideren la efectividad de la Sapropterina en el largo plazo, que estudie desenlaces finales y no solo intermedios. A pesar de que existen estudios que consideran un período relativamente largo de estudio, dando indicios de buenos resultados del tratamiento con Sapropterina, se necesitan estudios que aborden la investigación con mayor control sobre la población (ensayos aleatorios controlados) para evaluar la efectividad en el largo plazo con mayor certeza. Es también importante mayor investigación que genere evidencia sobre los efectos del tratamiento según sea la severidad de la enfermedad, ya que los estudios encontrados no permiten tales aseveraciones. EFICACIA DE LOS TRATAMENTOS: La información sobre los efectos de la Sapropterina está basada en dos estudios. El resumen de los resultados es el siguiente. Los resultados arrojan que existe un beneficio del tratamiento de la Fenilcetonuria con Sapropterina para pacientes que responden a la misma. El tratamiento resultó eficaz en disminuir considerablemente la concentración de Fenililanina en sangre y una tolerancia mayor a la misma. A pesar de lo anterior, cabe destacar que es necesario estudios que consideren la efectividad de la Sapropterina en el largo plazo, que estudie desenlaces finales y no solo intermedios. A pesar de que existen estudios que consideran un período relativamente largo de estúdio , dando indicios de buenos resultados del tratamiento con Sapropterina, se necesitan estudios que aborden la investigación con mayor control sobre la población (ensayos aleatorios controlados) para evaluar la efectividad en el largo plazo con mayor certeza. Es también importante mayor investigación que genere evidencia sobre los efectos del tratamiento según sea la severidad de la enfermedad, ya que los estudios encontrados no permiten tales aseveraciones.. EVALUACIÓN ECONÓMICA: Se encontró una evaluación económica para sapropterina y dos reportes del CADTH y NHS. La evaluación económica corresponde a un análisis de costo-utilidad, realizado en Egipto, donde se compara Sapropterina versus dieta libre de fenilalanina en pacientes con diagnóstico de fenilcetonuria. Los autores concluyen que Sapropterina, en Egipto, no presenta una buena relación precio-calidad en comparación a dieta libre de fenilalanina. El impacto presupuestario supera la disponibilidad del fondo, por lo que no se continúa con la evaluación. CONCLUSIÓN: Para dar cumplimiento al artículo 28° del Reglamento que establece el proceso destinado a determinar los diagnósticos y tratamientos de alto costo con Sistema de Protección Financiera, según lo establecido en los artículos 7°y 8° de la ley N°20.850, aprobado por el decreto N°13 del Ministerio de Salud, se concluye que el presente informe de evaluación se considera no favorable, dado que su impacto presupuestario supera el 80% del fondo disponible, de acuerdo a lo establecido en el Título III. de las Evaluaciones Favorables de la Norma Técnica N° 0192 de este mismo Ministerio.


Assuntos
Humanos , Fenilcetonúrias/tratamento farmacológico , Tirosina/uso terapêutico , Avaliação em Saúde/economia , Avaliação da Tecnologia Biomédica/economia
9.
Braz. j. med. biol. res ; 50(12): e6733, 2017. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-888967

RESUMO

Myostatin is a novel negative regulator of skeletal muscle mass. Myostatin expression is also found in heart in a much less extent, but it can be upregulated in pathological conditions, such as heart failure. Myostatin may be involved in inhibiting protein synthesis and/or increasing protein degradation in skeletal and cardiac muscles. Herein, we used cell cultures and isolated muscles from rats to determine protein degradation and synthesis. Muscles incubated with myostatin exhibited an increase in proteolysis with an increase of Atrogin-1, MuRF1 and LC3 genes. Extensor digitorum longus muscles and C2C12 myotubes exhibited a reduction in protein turnover. Cardiomyocytes showed an increase in proteolysis by activating autophagy and the ubiquitin proteasome system, and a decrease in protein synthesis by decreasing P70S6K. The effect of myostatin on protein metabolism is related to fiber type composition, which may be associated to the extent of atrophy mediated effect of myostatin on muscle.


Assuntos
Animais , Masculino , Fibras Musculares Esqueléticas/efeitos dos fármacos , Fibras Musculares Esqueléticas/metabolismo , Miócitos Cardíacos/efeitos dos fármacos , Miócitos Cardíacos/metabolismo , Miostatina/farmacologia , Proteínas Musculares/efeitos dos fármacos , Proteínas Musculares/metabolismo , Fosforilação/efeitos dos fármacos , Fosforilação/fisiologia , Fatores de Tempo , Tirosina/efeitos dos fármacos , Tirosina/metabolismo , Expressão Gênica , Células Cultivadas , Western Blotting , Reprodutibilidade dos Testes , Ratos Wistar , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Proteólise/efeitos dos fármacos
10.
J. appl. oral sci ; 23(2): 135-144, Mar-Apr/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-746539

RESUMO

The mandible condylar process cartilage (CP) of Wistar rats is a secondary cartilage and acts as a mandibular growth site. This phenomenon depends on adequate proteins intake and hormone actions, including insulin. Objectives The present study evaluated the morphological aspects and the expression of the insulin receptor (IR) in the cartilage of the condylar process (CP) of rats subjected to protein undernourishment. Material and Methods The nourished group received a 20% casein diet, while the undernourished group (U) received a 5% casein diet. The re-nourished groups, R and RR, were used to assess the effects of re-nutrition during puberty and adulthood, respectively. CPs were processed and stained with picro-sirius red, safranin-O and azocarmine. Scanning electron microscopy and immunohistochemistry were also performed. Results The area of the CP cartilage and the number of cells in the chondroblastic layer decreased in the U group, as did the thickness of the CP layer in the joint and hypertrophic layer. Renourishment during the pubertal stage, but not during the adult phase, restored these parameters. The cell number was restored when re-nutrition occurred in the pubertal stage, but not in the adult phase. The extracellular matrix also decreased in the U group, but was restored by re-nutrition during the pubertal stage and further increased in the adult phase. IR expression was observed in all CPs, being higher in the chondroblastic and hypertrophic cartilage layers. The lowest expression was found in the U and RR groups. Conclusions Protein malnutrition altered the cellularity, the area, and the fibrous cartilage complex, as well as the expression of the IRs. .


Assuntos
Animais , Camundongos , Anti-Inflamatórios não Esteroides/metabolismo , Ciclo-Oxigenase 1/metabolismo , Inibidores de Ciclo-Oxigenase/metabolismo , /metabolismo , Piroxicam/análogos & derivados , Tiazinas/metabolismo , Tiazóis/metabolismo , Substituição de Aminoácidos , Anti-Inflamatórios não Esteroides/química , Arginina/química , Arginina/genética , Arginina/metabolismo , Sítios de Ligação , Domínio Catalítico , Ciclo-Oxigenase 1/química , Ciclo-Oxigenase 1/genética , Inibidores de Ciclo-Oxigenase/química , /química , /genética , Ligação de Hidrogênio , Leucina/química , Leucina/genética , Leucina/metabolismo , Mutação , Estrutura Secundária de Proteína , Piroxicam/química , Piroxicam/metabolismo , Serina/química , Serina/genética , Serina/metabolismo , Tiazinas/química , Tiazóis/química , Tirosina/química , Tirosina/genética , Tirosina/metabolismo , Água
11.
Salud pública Méx ; 57(1): 4-13, ene.-feb. 2015. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-736456

RESUMO

Objective. To describe food expenditure and consumption of foods prepared away from home among Mexican adults. Materials and methods. Data were from 45 241 adult participants in the National Health and Nutrition Survey 2006, a nationally-representative, cross-sectional survey of Mexican households. Descriptive statistics and multivariable linear and logistic regression were used to assess the relationship between location of residence, educational attainment, socioeconomic status and the following: 1) expenditure on all food and at restaurants, and 2) frequency of consumption of comida corrida or restaurant food and street food. Results. Food expenditure and consumption of food prepared away from home were positively associated with socioeconomic status, educational attainment, and urban vs. rural residence (p<0.001 for all relationships in bivariate analyses). Conclusions. Consumption of food prepared outside home may be an important part of the diet among urban Mexican adults and those with high socioeconomic status and educational attainment.


Objetivo. Describir los gastos en alimentos y el consumo de alimentos preparados fuera de casa en población mexicana. Material y métodos. Los datos fueron de 45 241 adultos mexicanos en la Encuesta Nacional de Salud y Nutrición de 2006, representativa al nivel nacional. Se utilizaron estadísticas descriptivas y regresión linear y logística para estimar la relación entre el lugar de residencia, el nivel educativo y el nivel socioeconómico, con el gasto en todos los alimentos y en restaurantes, y con la frecuencia de consumo de comida corrida, en restaurantes y de la calle. Resultados. El gasto en alimentos y el consumo de alimentos preparados se asociaron positivamente con el nivel socioeconómico, el nivel educativo y la residencia rural (p<0,001 para todas las relaciones). Conclusiones. El consumo de alimentos preparados puede ser una parte importante de la dieta de los adultos urbanos y de aquéllos con altos niveles socioeconómicos y educativos.


Assuntos
Animais , Cricetinae , Feminino , Humanos , Masculino , Camundongos , Canais de Potássio Corretores do Fluxo de Internalização Acoplados a Proteínas G/química , Doenças Neurodegenerativas/patologia , Medula Espinal/metabolismo , Tirosina/química , Anisomicina/química , Anticorpos/química , Comportamento , Western Blotting , Linhagem Celular , Linhagem Celular Tumoral , Células CHO , DNA , Relação Dose-Resposta a Droga , Eletrofisiologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Canais de Potássio Corretores do Fluxo de Internalização Acoplados a Proteínas G/fisiologia , Proteínas de Ligação ao GTP/metabolismo , Átrios do Coração/metabolismo , Ventrículos do Coração/citologia , Ventrículos do Coração/patologia , Immunoblotting , Imuno-Histoquímica , Inflamação , Microscopia Confocal , Microscopia de Fluorescência , Células Musculares/metabolismo , Neurônios/metabolismo , Fosforilação , Estrutura Terciária de Proteína , Plasmídeos/metabolismo , Estresse Fisiológico , Nervo Isquiático/metabolismo , Medula Espinal/patologia , Xenopus laevis
12.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 30(1): 70-76, Jan-Mar/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-742901

RESUMO

Objective: An unclear issue is whether gender may influence at cardiac remodeling after myocardial infarction (MI). We evaluated left ventricle remodeling in female and male rats post-MI. Methods: Rats were submitted to anterior descending coronary occlusion. Echocardiographic evaluations were performed on the first and sixth week post-occlusion to determine myocardial infarction size and left ventricle systolic function (FAC, fractional area change). Pulsed Doppler was applied to analyze left ventricle diastolic function using the following parameters: E wave, A wave, E/A ratio. Two-way ANOVA was applied for comparisons, complemented by the Bonferroni test. A P≤=0.05 was considered significant. Results: There were no significant differences between genders for morphometric parameters on first (MI [Female (FE): 44.0±5.0 vs. Male (MA): 42.0±3.0%]; diastolic [FE: 0.04±0.003 vs. MA: 0.037±0.005, mm/g] and systolic [FE: 0.03±0.0004 vs. MA: 0.028±0.005, mm/g] diameters of left ventricle) and sixth (MI [FE: 44.0±5.0 vs. MA: 42.0±3.0, %]; diastolic [FE: 0.043±0.01 vs. MA: 0.034±0.005, mm/g] and systolic [FE: 0.035±0.01 vs. MA: 0.027±0.005, mm/g] of LV) week. Similar findings were reported for left ventricle functional parameters on first (FAC [FE: 34.0±6.0 vs. MA: 32.0±4.0, %]; wave E [FE: 70.0±18.0 vs. MA: 73.0±14.0, cm/s]; wave A [FE: 20.0±12.0 vs. MA: 28.0±13.0, cm/s]; E/A [FE: 4.9±3.4 vs. MA: 3.3±1.8]) and sixth (FAC [FE: 29.0±7.0 vs. MA: 31.0±7.0, %]; wave E [FE: 85.0±18.0 vs. MA: 87.0±20.0, cm/s]; wave A [FE: 20.0±11.0 vs. MA: 28.0±17.0, cm/s]; E/A [FE: 6.2±4.0 vs. MA: 4.6±3.4]) week. Conclusion: Gender does not influence left ventricle remodeling post-MI in rats. .


Objetivo: A influência do gênero no remodelamento cardíaco após o infarto do miocárdio é uma questão em intenso debate. Nós avaliamos o remodelamento ventricular esquerdo em ratos infartados de ambos os gêneros. Métodos: O infarto do miocárdio foi induzido por oclusão da artéria coronária descendente anterior (fêmeas [FM]; machos [MC]). A ecocardiografia foi realizada na primeira e sexta semana pós-oclusão para determinar o tamanho do infarto do miocárdio e a função sistólica do ventricular esquerdo (mudança na área fracional [FAC]). A função diastólica derivou dos seguintes parâmetros: onda E; onda A; razão E/A. ANOVA duas vias com pós-teste de Bonferroni foi aplicado nas comparações (P≤=0,05). Resultados: Todas variáveis morfométricas foram similares (P>0,05) entre os gêneros com uma (infarto do miocárdio [FM: 44,0±5,0 vs. MC: 42,0±3,0, %]; diâmetro diastólico [FM: 0,04±0,003 vs. MC: 0,037±0,005, mm/g] e sistólico [FM: 0,03±0,0004 vs. MC: 0,028±0,005, mm/g] do VE) e seis (IM [FM: 44,0±5,0 vs. MC: 42,0±3,0, %]; diâmetro diastólico [FM: 0,043±0,01 vs. MC: 0,034±0,005, mm/g] e sistólico [FM: 0,035±0,01 vs. MC: 0,027±0,005, mm/g] do ventricular esquerdo) semanas. Achado similar ocorreu para os dados funcionais com uma (FAC [FM: 34,0±6,0 vs. MC: 32,0±4,0, %]; onda E [FM: 70,0±18,0 vs. MC: 73,0±14,0, cm/s]; onda A [FM: 20,0±12,0 vs. MC: 28,0±13,0, cm/s]; E/A [FM: 4,9±3,4 vs. MC: 3,3±1,8]) e seis (FAC [FM: 29,0±7,0 vs. MC: 31,0±7,0, %]; onda E [FM: 85,0±18,0 vs. MC: 87,0±20,0, cm/s]; onda A [FM: 20,0±11,0 vs. MC: 28,0±17,0 cm/s]; E/A [FM: 6,2±4,0 vs. MC: 4,6±3,4]) semanas. Conclusão: O gênero não é determinante para o remodelamento ventricular esquerdo pós-infarto do miocárdio em ratos. .


Assuntos
Animais , Humanos , Recém-Nascido , Ratos , Enterocolite Necrosante/tratamento farmacológico , Inibidores Enzimáticos/farmacologia , Mucosa Intestinal/efeitos dos fármacos , Intestinos/efeitos dos fármacos , Niacinamida/farmacologia , Poli(ADP-Ribose) Polimerases/antagonistas & inibidores , Análise de Variância , Animais Recém-Nascidos , Morte Celular/efeitos dos fármacos , Modelos Animais de Doenças , Ativação Enzimática , Enterocolite Necrosante/enzimologia , Enterocolite Necrosante/patologia , Mucosa Intestinal/enzimologia , Mucosa Intestinal/patologia , Intestinos/enzimologia , Intestinos/patologia , Óxido Nítrico Sintase Tipo II/antagonistas & inibidores , Óxido Nítrico Sintase Tipo II/metabolismo , Óxido Nítrico/metabolismo , Poli(ADP-Ribose) Polimerases/metabolismo , Ratos Sprague-Dawley , Tirosina/análogos & derivados , Tirosina/metabolismo
13.
Medicina (B.Aires) ; 75(1): 1-5, Feb. 2015. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-750503

RESUMO

Concomitant tumor resistance (CR) is a phenomenon in which a tumor-bearing host is resistant to the growth of secondary tumor implants and metastasis. While former studies have indicated that T-cell dependent processes mediate CR in hosts bearing immunogenic small tumors, the most universal manifestation of CR induced by immunogenic and non-immunogenic large tumors had been associated with an antitumor serum factor that remained an enigma for many years. In a recent paper, we identified that elusive factor(s) as an equi-molar mixture of meta-tyrosine and ortho-tyrosine, two isomers of tyrosine that are not present in normal proteins and that proved to be responsible for 90% and 10%, respectively, of the total serum anti-tumor activity. In this work, we have extended our previous findings demonstrating that a periodic intravenous administration of meta-tyrosine induced a dramatic reduction of lung and hepatic metastases generated in mice bearing two different metastatic murine tumors and decreased the rate of death from 100% up to 25% in tumor-excised mice that already exhibited established metastases at the time of surgery. These anti-metastatic effects were achieved even at very low concentrations and without displaying any detectable toxic-side effects, suggesting that the use of meta-tyrosine may help to develop new and less harmful means of managing malignant diseases, especially those aimed to control the growth of metastases that is the most serious problem in cancer pathology.


La resistencia concomitante antitumoral (RC) es el fenómeno según el cual un individuo portador de tumor inhibe el crecimiento de implantes tumorales secundarios y metástasis. Si bien desde hace tiempo se sabe que la RC inducida por tumores inmunogénicos de pequeño tamaño es generada por mecanismos inmunológicos dependientes de células T, por otro lado, la manifestación más universal de la RC, generada tanto por tumores inmunogénicos como no-inmunogénicos de gran tamaño, había sido asociada con un (unos) factor sérico antitumoral cuya naturaleza permaneció elusiva por años. En un trabajo reciente, nuestro grupo de trabajo identificó este factor como la mezcla equi-molar de meta-tirosina y orto-tirosina, dos isómeros de tirosina que no están presentes en proteínas normales y que demostraron ser responsables del 90% y 10%, respectivamente, de la actividad antitumoral total del suero. En este trabajo, continuamos nuestras investigaciones demostrando que la administración periódica de meta-tirosina reducía drásticamente el número de metástasis pulmonares y hepáticas en ratones portadores de dos tumores murinos altamente metastásicos y disminuía dramáticamente la mortandad (de 100% a 25%) de ratones con metástasis ya establecidas al momento de la extirpación quirúrgica del tumor. Estos efectos anti-metastásicos se lograron aun con muy bajas concentraciones de meta-tirosina y sin efectos tóxicos perceptibles, lo que sugiere que su uso puede ayudar a diseñar nuevas y menos nocivas estrategias para el tratamiento del cáncer, especialmente aquellas destinadas a controlar el crecimiento metastásico, que es el problema más grave en la enfermedad oncológica.


Assuntos
Animais , Antineoplásicos/administração & dosagem , Carcinoma/patologia , Carcinoma/prevenção & controle , Neoplasias Hepáticas/prevenção & controle , Neoplasias Pulmonares/prevenção & controle , Neoplasias Mamárias Experimentais/patologia , Tirosina/administração & dosagem , Antineoplásicos/sangue , Antineoplásicos/química , Relação Dose-Resposta a Droga , Isomerismo , Neoplasias Hepáticas/secundário , Neoplasias Pulmonares/secundário , Camundongos Endogâmicos BALB C , Tirosina/efeitos adversos , Tirosina/química
14.
Iatreia ; 27(4): 417-427, oct.-dic. 2014. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-726839

RESUMO

Los errores innatos del metabolismo (EIM) son más de 550 enfermedades en las que se presenta una deficiencia o ausencia de proteínas con actividad enzimática, transportadora, receptora o estructural. Cada una de estas enfermedades es rara, pero su gran variedad hace que, consideradas en conjunto, sean la principal patología neonatal. Para la detección de los metabolitos producidos en los EIM se pueden utilizar pruebas cualitativas. Su utilidad radica en que son muy rápidas y de fácil acceso, y en que sirven como pruebas presuntivas para proceder a hacer exámenes más especializados o para enfocar el diagnóstico. Teniendo en cuenta su importancia para un diagnóstico temprano de los EIM, el objetivo del presente artículo es describir el funcionamiento de las pruebas bioquímicas de resorcinol, dinitrofenilhidrazina, nitrosonaftol, nitroprusiato y Hoesch, haciendo énfasis en los metabolitos que detectan.


Inborn errors of metabolism (IEM) are more than 550 diseases in which there is a deficiency or absence of proteins with enzymatic, transporter, receptor or structural activity. Individually these diseases are rare, but because of their wide variety they are, considered together, the largest neonatal disease. To detect metabolites produced in IEM qualitative tests can be used. They are easily accessible and fast to carry out, and serve as presumptive elements before proceeding to more specialized tests or to focus diagnosis. Given their importance for the early diagnosis of IEM, this article aims to describe the functioning of the following biochemical tests: dinitrophenylhydrazine, resorcinol, nitrosonaphtol, nitroprusside and Hoesch, emphasizing in the metabolites that they detect.


Os erros inatos do metabolismo (EIM) são mais de 550 doenças nas que se apresenta uma deficiência ou ausência de proteínas com atividade enzimática, transportadora, receptora ou estrutural. Cada uma destas doenças é rara, mas sua grande variedade faz que, consideradas em conjunto, sejam a principal patologia neonatal. Para a detecção dos metabólitos produzidos nos EIM se podem utilizar provas qualitativas. Sua utilidade radica em que são muito rápidas e de fácil acesso, e em que servem como provas presuntivas para proceder a fazer exames mais especializados ou para enfocar o diagnóstico. Tendo em conta sua importância para um diagnóstico precoce dos EIM, o objetivo do presente artigo é descrever o funcionamento das provas bioquímicas de resorcinol, dinitrofenilhidrazina, nitrosonaftol, nitroprusiato e Hoesch, fazendo ênfases nos metabólitos que detectam.


Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Dinitrofenóis , Frutose , Cetoácidos , Erros Inatos do Metabolismo , Nitroprussiato/química , Porfobilinogênio , Resorcinóis/química , Tirosina
15.
São Paulo; s.n; s.n; 2013. 87 p. tab, graf, ilus.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-846928

RESUMO

O receptor P2X4 (canal iônico controlado por adenosina-5'-trifosfato-ATP) está amplamente distribuído no sistema nervoso central e, após sua ativação, pode regular os níveis de cálcio intracelulares via permeação direta e por ativação de canais de cálcio voltagem-dependentes. Tem sido proposto que a atividade do receptor pode ser importante na plasticidade sináptica. Tendo em vista a importância do receptor P2X4, sobretudo na fisiologia do sistema nervoso central, é útil caracterizá-lo farmacologicamente e entender os mecanismos moleculares que regulam sua atividade. Examinamos o papel que resíduos específicos N- e C-terminais desempenham na atividade do receptor P2X4 humano, combinando técnicas de biologia molecular, bioquímica e patch-clamp em células de rim de embrião humano (células HEK-293T). Células HEK-293T expressando o receptor P2X4 wild-type apresentaram correntes iônicas, cujas amplitudes dependeram da concentração de ATP, fornecendo um valor de EC50 de 1,37 ± 0,21 µM. Os receptores mutantes E14A e D16A exibiram respostas ao ATP equiparáveis àquelas do receptor selvagem, ao passo que os mutantes Y15A e T17A não foram funcionais, apesar de serem expressos na membrana plasmática das células. A inibição de tirosina fosfatases por pervanadato diminuiu fortemente correntes induzidas por ATP. Subsequente análise de citometria de fluxo na presença de um anticorpo contra resíduos de fosfotirosina indicaram que, entre as células que expressam o receptor P2X4, a percentagem de células fosfo-tirosina-positivas é a mesma para os mutantes Y372A (86 ± 10%) e Y378A (79 ± 6.9%), mas substancialmente menor para os mutantes Y15A (35 ± 12%), Y367A (48 ± 6.4%) e Y372F (31 ± 1.7%), quando comparados com células que expressam o receptor wild-type (76 ± 5.6%). Resultados semelhantes foram obtidos quando quantificamos a expressão relativa de proteínas fosforiladas em resíduos de tirosina e expressamos através dos valores de intensidade de fluorescência média. Ensaios de western-blot revelaram que mesmo o mutante T17A é fosforilado em resíduos de treonina, sugerindo que o receptor P2X4 contém outros sítios de fosforilação. Entretanto, nenhum sinal de fosfotirosina foi detectado no receptor wild-type e nos mutantes, em que resíduos de tirosina foram substituídos por alanina ou fenilalanina. Não parece ser o resíduo Y15 o alvo de tal fosforilação, cabendo a ele um papel estrutural mais importante. Nossos dados também sugerem que a fosforilação em resíduos de tirosina de proteínas intermediárias regula a atividade do receptor P2X4


The human P2X4 receptor (ATP-gated ion channel) is widely distributed in the CNS and, after activation, participates in regulation of levels of intracellular calcium through direct permeation and activation of voltage-dependent calcium channels with well-defined functions including synaptic plasticity. Given the importance of the P2X4 receptor, especially in CNS physiology, we investigated the role that specific N- and C-termini residues play in human P2X4 receptor activity, by combining techniques of molecular biology, biochemistry and patch-clamping in human embryonic kidney cells (HEK-293T cells). HEK-293T cells expressing the wild-type P2X4 receptor showed ionic currents whose amplitudes depended on the ATP concentration, providing an EC50 value of 1.37 ± 0.21 mM. E14A and D16A receptor mutants exhibited responses to ATP comparable to those ones of wild-type receptor, whereas Y15A and T17A mutants were not functional, despite being expressed in the plasma membrane of cells. The inhibition of tyrosine phosphatases by pervanadate decreased strongly ATP-induced currents. Subsequent flow cytometry analysis in the presence of an antibody against phosphotyrosine residues indicated that, among the cells that express the P2X4 receptor, the percentage of phosphotyrosine-positive cells was the same for Y372A (86 ± 10%) and Y378A (79 ± 6.9%) mutants, however, substantially lower for Y15A (35 ± 12%), Y367A (48 ± 6.4%) and Y372F (31 ± 1.7%) mutants when compared with cells expressing the wild-type receptor (76 ± 5.6%). Similar results were obtained by quantifying the relative expression of phosphotyrosine proteins. Western blot assays revealed that even the T17A mutant was phosphorylated at threonine residues, suggesting that the human P2X4 receptor also contains further phosphorylation sites. However, no phosphotyrosine-antibody signal was detected in the wild-type receptor and mutants in which tyrosine residues were replaced by alanine or phenylalanine. The residue Y15 is supposedly not the target of such phosphorylation, despite its important structural role. However, the present work indicates that tyrosine phosphorylation of intermediate signaling proteins regulates P2X4 receptor activity


Assuntos
Receptores Purinérgicos P2X4/genética , Treonina/análise , Tirosina/análise , Western Blotting/instrumentação , Sistema Nervoso Central/fisiologia , Citometria de Fluxo/métodos , Técnicas de Patch-Clamp/métodos , Fosforilação
16.
Braz. j. infect. dis ; 16(3): 250-255, May-June 2012. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-638558

RESUMO

OBJECTIVE: This study aimed to determine the natural prevalence of variants of tyrosine-methionine-aspartic acid-aspartic acid (YMDD) motif in patients with chronic hepatitis B (CHB), and to explore its relation with demographic and clinical features, hepatitis B virus (HBV) genotypes, and HBV DNA levels. METHODS: A total of 1,042 antiviral treatment naïve CHB patients (including with lamivudine [LAM]) in the past year were recruited from outpatient and inpatient departments of six centers from December 2008 to June 2010. YMDD variants were analyzed using the HBV drug resistance line probe assay (Inno-Lipa HBV-DR). HBV genotypes were detected with polymerase chain reaction (PCR) microcosmic nucleic acid cross-ELISA, and HBV deoxyribonucleic acid (DNA) was quantitated with real-time PCR. All serum samples underwent tests for HBV, HCV, and HDV with ELISA. RESULTS: YMDD variants were detected in 23.3% (243/1042) of CHB patients. YMDD mutation was accompanied by L180M mutation in 154 (76.9%) patients. Both wild-type HBV and YMDD variant HBV were present in 231 of 243 patients. Interestingly, 12 patients had only YIDD and/or YVDD variants without wild YMDD motif. In addition, 27.2% (98/359) of HbeAg-positive patients had YMDD mutations, which was higher than that in HbeAg-negative patients (21.2%, 145/683). The incidence of YMDD varied among patients with different HBV genotypes, but the difference was not significant. Moreover, the incidence of YMDD in patients with high HBV DNA level was significantly higher than that in those with low HBV DNA level. CONCLUSION: Mutation of YMDD motif was detectable at a high rate in CHB patients in this study. The incidence of YMDD may be correlated with HBeAg and HBV DNA level.


Assuntos
Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Antivirais/uso terapêutico , Ácido Aspártico/genética , Vírus da Hepatite B/genética , Hepatite B Crônica/tratamento farmacológico , Metionina/genética , Mutação/genética , Tirosina/genética , Motivos de Aminoácidos/efeitos dos fármacos , Motivos de Aminoácidos/genética , DNA Viral/análise , Genótipo , Vírus da Hepatite B/efeitos dos fármacos , Hepatite B Crônica/virologia , Reação em Cadeia da Polimerase
17.
Pesqui. vet. bras ; 32(3): 221-226, Mar. 2012. ilus, graf, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-624113

RESUMO

Scrapie ou paraplexia enzoótica dos ovinos é uma doença neurodegenerativa fatal que acomete ovinos e raramente caprinos. A doença é influenciada por polimorfismos nos códons 136, 154 e 171 do gene prnp que codifica a proteína priônica. Os animais podem ser susceptíveis ou resistentes, de acordo com as sequências alélicas observadas nos referidos códons. No Brasil ocorreram apenas casos de animais que foram importados, sendo o país considerado livre da doença. Neste trabalho foi realizada a genotipagem dos diferentes polimorfismos associados ao desenvolvimento do scrapie e a categorização em animais susceptíveis e resistentes. Foram sequenciadas 118 amostras provenientes de ovinos da raça Santa Inês criados em propriedades localizadas no Estado de São Paulo. Destas amostras foram identificados 6 alelos e 11 genótipos (ARQ/ARQ, ARR/ARQ, ARQ/AHQ, ARQ/VRQ, AHQ/AHQ, ARR/ARR, ARR/AHQ, VRQ/VRQ, ARQ/TRQ, TRR/TRR, TRQ/TRQ), dentre os quais o genótipo ARQ/ARQ teve ocorrência de 56,7%. Em nosso estudo foi detectada a presença da tirosina no códon 136, observação rara na medida em que não existem relatos nacionais e internacionais envolvendo a raça Santa Inês descrevendo este polimorfismo. Com os resultados obtidos, foi possível determinar a existência de grande variabilidade genética relacionada à raça Santa Inês no Estado de São Paulo. Apesar da variabilidade, apenas 1,69% dos genótipos observados mostraram-se extremamente resistentes ao scrapie. Estes dados demonstram que a raça nativa Santa Inês pode ser considerada potencialmente susceptível ao scrapie.


Enzootic paraplexia or scrapie is a fatal neurodegenerative disease affecting mainly sheep and rarely goats. The disease is influenced by polymorphisms at codons 136, 154 and 171 of prnp gene that encodes the prion protein. The animals may be susceptible or resistant to the development of the disease according to the allelic sequences observed in these codons. In Brazil there were only cases of scrapie in imported animals, therefore the country is considered free of the disease. This study performed the genotyping of different polymorphisms associated to the development of scrapie. Then, based on these findings the animals were categorized in resistant and susceptible. A total of 118 samples were sequenced from the Santa Ines sheep raised on properties located in the State of Sao Paulo. From these samples, 6 alleles and 11 genotypes were identified (ARQ / ARQ, ARR / ARQ, ARQ / AHQ, ARQ / VRQ, AHQ / AHQ, ARR / ARR, ARR / AHQ, VRQ / VRQ, ARQ / TRQ, TRR / TRR, TRQ / TRQ), the genotype ARQ / ARQ presented a frequency of 56.7%. It was also detected the presence of tyrosine at codon 136, which may be considered a rare observation, since there is no report regarding Santa Ines breeding presenting this polymorphism. These results showed the great genetic variability in Santa Ines in Sao Paulo and only 1,69% of the genotypes observed are extremely resistant to scrapie. These data demonstrate that the Santa Ines sheep can be considered potentially susceptible to scrapie.


Assuntos
Animais , Bovinos , Ovinos/anormalidades , Scrapie/genética , Suscetibilidade a Doenças/veterinária , Tirosina , Doenças Endêmicas/veterinária , Doenças Neurodegenerativas/veterinária , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária
18.
Rev. bras. hematol. hemoter ; 33(6): 455-460, Dec. 2011. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-611383

RESUMO

Tyrosine kinase inhibitors have changed the management and outcomes of chronic myeloid leukemia patients. Quantitative polymerase chain reaction is used to monitor molecular responses to tyrosine kinase inhibitors. Molecular monitoring represents the most sensitive tool to judge chronic myeloid leukemia disease course and allows early detection of relapse. Evidence of achieving molecular response is important for several reasons: 1. early molecular response is associated with major molecular response rates at 18-24 months; 2. patients achieving major molecular response are less likely to lose their complete cytogenetic response; 3. a durable, stable major molecular response is associated with increased progression-free survival. However, standardization of molecular techniques is still challenging.


Assuntos
Humanos , Acetato Quinase , Citogenética , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva , Monitoramento , Mutação , Reação em Cadeia da Polimerase , Tirosina
19.
Invest. clín ; 52(3): 239-251, sep. 2011. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-659214

RESUMO

Las enfermedades sistémicas crónicas afectan el músculo esquelético, siendo la inflamación y el estrés oxidativo algunos de los mecanismos involucrados. El efecto de la hipertensión arterial esencial sobre el músculo esquelético no es bien conocido. Se estudiaron los músculos soleo y extensor digitorum longus (EDL) de ratas espontáneamente hipertensas (SHR), comparadas con las controles normotensas Wistar Kyoto (WKY). Se determinaron los niveles de nitritos y nitratos en µmoles/mg-proteína; las sintasas del óxido nítrico: endotelial (eNOS); neuronal (nNOS); e inducible (iNOS), nitrotirosina y el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-α) en ng/mg-proteína. En las SHR, en el soleo y el EDL respectivamente, se incrementó la nitrotirosina (24,4 ± 5,0 vs. 3,3 ± 0,3, p<0,001; 20,2 ± 4,3 vs. 4,5 ± 0,4, p<0,0037), iNOS (26,6 ± 3,7 vs. 8,3 ± 0,9; 21,3 ± 3,7 vs. 11,0 ± 0,8 ambos p<0,0001), y TNF-α (2,2 ± 0,5 vs. 0,6 ± 0,1, p<0,05; 1,9 ± 0,2 vs. 0,6 ± 0,1, p<0,02); hubo disminución de eNOS en el soleo (20,6 ± 1,4 vs. 30,3 ± 1,2, p<0,00001); de nNOS (soleo 16,8 ± 1,4 vs. 20,7 ± 1,8, p< 0,05; EDL 13,6 ± 1,3 vs. 21,9 ± 1,8, p<0,005) y de nitrito en el EDL (5,8 ± 0,3 vs. 7,1 ± 0,5, p<0,026). En las SHR se observó correlación positiva entre TNF-α vs. nitrotirosina: soleo (r=0,798; p<0,031) y tendencia en EDL (r=0,739; p<0,057); iNOS vs. nitrotirosina (soleo: r=0,908 p<0,0001; EDL: r=0,707; p=0,01), tendencia entre TNF-α vs. iNOS en EDL (r=0,736; p=0,059); y correlación negativa entre eNOS vs. nitrotirosina en soleo (r=-0,816; p=0,0012). En conclusión, las SHR presentan un proceso inflamatorio muscular, evidenciado por el incremento de TNF-α, nitrotirosina, e iNOS. La disminución de las sintasas constitutivas, con incremento de la iNOS es evidencia de la disfunción endotelial.


Systemic diseases affect skeletal muscle, and inflammation and oxidative stress are some of the involved mechanisms. There is scarce information about the effects of essential hypertension on skeletal muscle. The soleus and extensor digitorum longus (EDL) muscles of spontaneously hypertensive rats (SHR) were studied compared to control Wistar Kyoto (WKY) rats. The levels of nitrite and nitrate in µmol/mg-protein; endothelial (eNOS), neuronal (nNOS), and inducible (iNOS) nitric oxide synthases, nitrotyrosine and tumour necrosis factor alpha (TNF-α) in ng/mg-protein were determined. Compared with controls, the SHR showed increased levels of nitrotyrosine (soleus 24.4 ± 5.0 vs. 3.3±0.3, p<0.001; EDL 20.2 ± 4.3 vs. 4.5 ± 0.4, p<0.0037), iNOS (soleus 26.6 ± 3.7 vs. 8.3 ± 0.9; EDL 21.3 ± 3.7 vs. 11.0 ± 0.8, both p<0.0001) and TNF-α (soleus 2.2 ± 0.5 vs. 0.6 ± 0.1, p<0.05; EDL 1.9 ± 0.2 vs. 0.6 ± 0.1, p<0.02). A decrease of eNOS was found in soleus muscle (20.6 ± 1.4 vs. 30.3 ± 1.2, p<0.00001); of nNOS (soleus 16.8 ± 1.4 vs. 20.7 ± 1.8, p< 0.05; EDL 13.6 ± 1.3 vs. 21.9 ± 1.8, p<0.005) and nitrite in EDL (5.8 ± 0.3 vs. 7.1 ± 0.5, p<0.026).There was a positive correlation between TNF-α vs. nitrotyrosine in soleus (r=0.798; p<0.031) and a tendency in EDL (r=0.739; p=0.059); iNOS vs. nitrotyrosine (soleus: r=0.908; p<0.0001; EDL: r=0.707; p<0.01), a tendency between TNF-α and iNOS (EDL: r=0.736; p<0.059); and a negative correlation between eNOS vs. nitrotyrosine in soleus muscle (r=-0.816; p<0.0012). In conclusion, in skeletal muscles of SHR an inflammatory process was found evidenced by the increase in TNF-α, nitrotyrosine and iNOS. The decreased levels of constitutive synthases, together with the higher level of iNOS, are indicative of endothelial dysfunction.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Hipertensão/metabolismo , Músculo Esquelético/metabolismo , Estresse Oxidativo , Endotélio Vascular/fisiopatologia , Músculo Esquelético/química , Miosite/metabolismo , Óxido Nítrico Sintase Tipo I/análise , Óxido Nítrico Sintase Tipo II/análise , Óxido Nítrico Sintase Tipo III/análise , Ratos Endogâmicos SHR , Ratos Endogâmicos WKY , Fator de Necrose Tumoral alfa/análise , Tirosina/análise , Tirosina/análogos & derivados
20.
Clinics ; 66(3): 469-476, 2011. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-585960

RESUMO

OBJECTIVES: In this study, we tested the hypothesis that hypertonic saline exerts anti-inflammatory effects by modulating hepatic oxidative stress in pancreatitis. INTRODUCTION: The incidence of hepatic injury is related to severe pancreatitis, and hypertonic saline reduces pancreatic injury and mortality in pancreatitis. METHODS: Wistar rats were divided into four groups: control (not subjected to treatment), untreated pancreatitis (NT, pancreatitis induced by a retrograde transduodenal infusion of 2.5 percent sodium taurocholate into the pancreatic duct with no further treatment administered), pancreatitis with normal saline (NS, pancreatitis induced as described above and followed by resuscitation with 0.9 percent NaCl), and pancreatitis with hypertonic saline (HS, pancreatitis induced as described above and followed by resuscitation with 7.5 percent NaCl). At 4, 12, and 24 h after pancreatitis induction, liver levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS), heat-shock protein 70, nitrotyrosine (formation of peroxynitrite), nitrite/nitrate production, lipid peroxidation, and alanine aminotransferase (ALT) release were determined. RESULTS: Twelve hours after pancreatitis induction, animals in the HS group presented significantly lower iNOS expression (P<0.01 vs. NS), nitrite/nitrate levels (P<0.01 vs. NS), lipid peroxidation (P<0.05 vs. NT), and ALT release (P<0.01 vs. NS). Twenty-four hours after pancreatitis induction, nitrotyrosine expression was significantly lower in the HS group than in the NS group (P<0.05). DISCUSSION: The protective effect of hypertonic saline was related to the establishment of a superoxide-NO balance that was unfavorable to nitrotyrosine formation. CONCLUSIONS: Hypertonic saline decreases hepatic oxidative stress and thereby minimizes liver damage in pancreatitis.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Estresse Oxidativo/efeitos dos fármacos , Pancreatite/metabolismo , Ácido Peroxinitroso/biossíntese , Solução Salina Hipertônica/farmacologia , Alanina Transaminase/sangue , Western Blotting , Expressão Gênica , Peroxidação de Lipídeos/efeitos dos fármacos , Fígado/metabolismo , Fígado/patologia , Óxido Nítrico Sintase Tipo II/metabolismo , Ratos Wistar , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Fatores de Tempo , Tirosina/análogos & derivados , Tirosina/metabolismo
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