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1.
Pesqui. bras. odontopediatria clín. integr ; 19(1): 4991, 01 Fevereiro 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-998272

RESUMO

Objective: To analyze osteopontin mRNA expression levels in subjects with periodontitis prior to (baseline) and 7, 14, and 28 days following scaling and root planing (SRP). Material and Methods: Gingival crevicular fluid was collected as clinical samples from four subjects with periodontitis (pocket depth, 4-5 mm) aged 35-54 years old as well as from three healthy subjects (controls). The osteopontin mRNA expression levels were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction. Spearman's rank correlation between osteopontin levels in gingival crevicular fluid and the modified gingival index (MGI) was also performed. Results: The Wilcoxon signed-rank test showed no significant difference in osteopontin mRNA expression levels between baseline and 28 days following SRP (p=0.068). The Friedman test showed no significant difference in osteopontin mRNA expression levels between baseline and following SRP (7, 14, or 28 days) (p>0.05). Spearman's rank correlation showed no significant correlation between osteopontin mRNA expression levels and MGI (r=0.087; p=0.749). Conclusion: Following SRP of periodontal tissue, there was a decreasing trend in osteopontin mRNA expression; however, this finding was not statistically significant. Nevertheless, osteopontin can be used as a biomarker to monitor the healing process; however, further studies are required to clarify our results.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Periodontite , RNA Mensageiro , Aplainamento Radicular/métodos , Osteopontina , Estudos de Casos e Controles , Estatísticas não Paramétricas , Indonésia
2.
Acta cir. bras ; 34(7): e201900704, 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1038112

RESUMO

Abstract Purpose: The effects of resveratrol administration on calvarial bone defects with alloplastic graft material was investigated for osteoinductive reaction and bone development in rats. Methods: Healthy male rats were randomly divided into 3 groups consisting of 10 rats. Groups were as follows: control (defect) group, defect + graft group, and defect + graft + resveratrol group. A calvarial bone defect was created in all groups, alloplastic bone grafts were applied to the defect in the 2nd and 3rd group, resveratrol (5 mg/kg/day) was added to the drinking water of the animals following graft application for 28 days in the 3rd group. Results: Increase in osteoclasts and necrotic changes were observed histopathologically in the control group. In the 2nd group, reduction of inflammation, congestion of blood vessels, increased osteblastic activity, osteoinductive effect, progression of osteocyte development and increased collagen fibers in connective tissue were observed. In the 3rd group, osteoblasts seemed to secrete bone matrix and accelerate osteoinductive effect with increased osteopregenitor activity and positive osteopontin and osteonectin expressions. Conclusion: Resveratrol treatment was thought to be an alternative and supportive drug for implant application by inducing new bone formation in the calvaral defect region as a result of short-term treatment.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Crânio/cirurgia , Regeneração Óssea/efeitos dos fármacos , Transplante Ósseo/métodos , Substitutos Ósseos/administração & dosagem , Resveratrol/administração & dosagem , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteogênese/efeitos dos fármacos , Crânio/efeitos dos fármacos , Esquema de Medicação , Osteonectina/administração & dosagem , Osseointegração/efeitos dos fármacos , Substitutos Ósseos/uso terapêutico , Modelos Animais de Doenças , Osteopontina/administração & dosagem
3.
Int. j. morphol ; 36(1): 206-211, Mar. 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-893212

RESUMO

SUMMARY: The purpose of this study was to investigate effects of diabetes mellitus (DM) on the alveolar bone with histopathological and immunohistochemical methods. Wistar rats were divided into two groups, control and diabetes group. Control group was fed standard rat chow and drinking water for 8 weeks. Single dose (Streptozotocin) STZ (55 mg/kg), was dissolved in sodium citrate buffer and introduced intraperitoneal injection. Diabetes group and control group were compared in terms of glucose values. The blood glucose concentration in diabetic rats was significantly high (p <0.05). In diabetes group; periodontal membrane and the dilation of blood vessels, hemorrhage has also been a significant increase in inflammatory cells. In the diabetes group, osteonectin showed positive expression in periodontal membrane and showed negative expression in osteocytes of alveolar bone. Osteopontin expression in fibroblast cells and periodontal membrane collagen fibrils was positive, alveolar cells, osteocytes and bone matrix bone was found positive. Diabetes results showed that there formed periodontitis; due to the increase in inflammation inhibiting bone formation delaying the development of early bone cells.


RESUMEN: El objetivo de este estudio fue investigar los efectos de la diabetes mellitus (DM) sobre el hueso alveolar con métodos histopatológicos e inmunohistoquímicos. Las ratas Wistar se dividieron en dos grupos, grupo control y grupo de diabetes. El grupo control fue alimentado con comida estándar y agua potable durante 8 semanas. La dosis única Streptozotocina (STZ) (55 mg/ kg), se disolvió en tampón de citrato de sodio y se introdujo mediante inyección intraperitoneal. El grupo diabetes y el grupo control se compararon en términos de valores de glucosa. La concentración de glucosa en sangre en ratas diabéticas fue significativamente alta (p <0,05). En el grupo diabetes hubo un aumento significativo de la membrana periodontal y dilatación de los vasos sanguíneos y hemorragia, con un aumento significativo de células inflamatorias. En el grupo diabetes, la osteonectina mostró una expresión positiva en la membrana periodontal además se observó expresión negativa en los osteocitos del hueso alveolar. La expresión de osteopontina en fibroblastos y fibrillas de colágeno en membrana periodontal fue positiva, las células alveolares, osteocitos y hueso de la matriz ósea dio positivo. Los resultados de la diabetes mostraron que existía periodontitis, debido al aumento de la inflamación que inhibió la formación ósea retardando el desarrollo de células óseas tempranas.


Assuntos
Animais , Ratos , Processo Alveolar/metabolismo , Processo Alveolar/patologia , Diabetes Mellitus Experimental/patologia , Glicemia , Western Blotting , Diabetes Mellitus Experimental/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Osteonectina/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Ratos Wistar
4.
Acta odontol. latinoam ; 31(2): 110-116, 2018. ilus, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-970843

RESUMO

The in vivo response of osteocytes to different force magnitudes soon after they are applied remains to be elucidated. The aim of this study was to examine the early effects of applying a very light (LF: 0,16 N) and a very strong (SF: 2,26 N) orthodontic force during one hour on apoptosis and osteopontin (OPN) expression on alveolar bone osteocytes, in rats. Results: LF: compared to the control group, they showed a significant increase in OPN expression, and a significant decrease in the number of TUNELpositive osteocytes. SF: compared to the control group, they showed a significant increase in OPN expression and a significant decrease in the number of TUNELpositive osteocytes. Our results show that osteocytes respond very early to the application of tension and pressure forces of different magnitudes, and application of forces decreases the number of apoptotic osteocytes and increases OPN expression. These results allow concluding that osteocytes activate rapidly when subjected to locally applied forces, whether these forces be pressure or tension, light or strong forces. Grants: UBACyT 200201301002270 BA and School of Dentistry, University of Buenos Aires (AU)


Hasta el momento no se ha dilucidado la respuesta temprana in vivo de los osteocitos a la aplicación de fuerzas de diferentes magnitudes sobre el hueso. El objetivo de este estudio fue examinar la respuesta temprana de la aplicación de una fuerza ortodóncica muy liviana (FL: 0,16 N) y muy fuerte (FF: 2,26 N) durante una hora sobre la expresión de apoptosis y osteopontina (OPN) en los osteocitos del hueso alveolar, en ratas. Resultados: FL: en comparación con el grupo control, mostraron un aumento significativo en la expresión de OPN y una disminución significativa en el número de osteocitos TUNELpositivos. FF: en comparación con el grupo control, mostraron un aumento significativo en la expresión de OPN y una disminución signi ficativa en el número de osteocitos TUNELpositivos. Nuestros resultados muestran que los osteocitos responden muy temprano a la aplicación de fuerzas de tensión y presión de diferentes magnitudes, y la aplicación de fuerzas disminuye el número de osteocitos apoptóticos y aumenta la expresión de OPN. Estos resultados permiten concluir que los osteocitos se activan rápidamente cuando se los somete a fuerzas aplicadas localmente, ya sean estas fuerzas de presión o tensión, livianas o fuertes (AU)


Assuntos
Animais , Ratos , Osteócitos , Estresse Mecânico , Técnicas de Movimentação Dentária , Apoptose , Osteopontina , Imuno-Histoquímica , Análise Estatística , Marcação In Situ das Extremidades Cortadas , Mecanotransdução Celular , Processo Alveolar
6.
Braz. dent. j ; 28(3): 307-316, May-June 2017. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-888646

RESUMO

Abstract This study aimed to investigate the influence of a three-dimensional cell culture model and bioactive glass (BG) particles on the expression of osteoblastic phenotypes in rat calvaria osteogenic cells culture. Cells were seeded on two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) collagen with BG particles for up to 14 days. Cell viability and alkaline phosphatase (ALP) activity was performed. Cell morphology and immunolabeling of noncollagenous bone matrix proteins were assessed by epifluorescence and confocal microscopy. The expressions of osteogenic markers were analyzed using RT-PCR. Mineralized bone-like nodule formation was visualized by microscopy and calcium content was assessed quantitatively by alizarin red assay. Experimental cultures produced a growing cell viability rate up to 14 days. Although ALP activity at 7 days was higher on BG cultures, cells on 3D and 3D+BG had an activity decrease of ALP at 14 days. Three-dimensional conditions favored the immunolabeling for OPN and BSP and the expression of ALP and COL I mRNAs. BG particles influenced positively the OC and OPN mRNAs expression and calcified nodule formation in vitro. The results indicated that the 3D cultures and BG particles contribute to the expression of osteoblastic phenotype and to differentiated and mineralized matrix formation.


Resumo O objetivo deste estudo foi investigar a influência do modelo de cultura celular tridimensional e das partículas de vidro bioativo (BG) sobre a expressão fenotípica de culturas de células osteogênicas da calvária de ratos. As células foram mantidas em culturas sobre superfícies colágenas bi-dimensionais (2D) e em géis de colágeno tridimensional (3D) com e sem partículas de BG até 14 dias. Foram avaliadas: viabilidade celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP), morfologia celular e imunomarcação de proteínas da matriz não-colágena do osso através de epifluorescência e microscopia confocal. As expressões de marcadores osteogênicos foram analisadas utilizando RT-PCR. A formação de nódulos mineralizados foi visualizada através de microscopia e o conteúdo de cálcio foi avaliado quantitativamente pelo Alizarina Red. As culturas experimentais produziram uma taxa crescente de viabilidade até 14 dias. Embora a atividade ALP em 7 dias tenha sido maior em culturas com BG, as células em 3D e 3D+BG apresentaram uma diminuição da atividade ALP aos 14 dias. As condições tridimensionais favoreceram a imunomarcação para OPN e BSP e a expressão de mRNAs para ALP e COL I. As partículas de BG influenciaram positivamente a expressão do mRNAs para OPN e OC e a formação de nódulos calcificados in vitro. Os resultados indicaram que as culturas em 3D e partículas BG contribuíram para a expressão do fenótipo osteoblástico e para a diferenciação e formação de matriz mineralizada.


Assuntos
Animais , Materiais Biocompatíveis , Vidro , Osteoblastos/citologia , Osteogênese , Crânio/citologia , Fosfatase Alcalina/genética , Fosfatase Alcalina/metabolismo , Biomarcadores/metabolismo , Cálcio/metabolismo , Técnicas de Cultura de Células , Sobrevivência Celular , Colágeno Tipo I/genética , Colágeno Tipo I/metabolismo , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo , Perfilação da Expressão Gênica , Sialoproteína de Ligação à Integrina/metabolismo , Microscopia Confocal , Microscopia de Fluorescência , Osteoblastos/enzimologia , Osteoblastos/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Ratos Wistar , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , RNA Mensageiro/genética , Crânio/enzimologia , Crânio/metabolismo , Tecidos Suporte
7.
J. appl. oral sci ; 25(1): 42-52, Jan.-Feb. 2017. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-841161

RESUMO

Abstract Sodium alendronate is a bisphosphonate drug that exerts antiresorptive action and is used to treat osteoporosis. Objective The aim of this study was to evaluate the bone repair process at the bone/implant interface of osteoporotic rats treated with sodium alendronate through the analysis of microtomography, real time polymerase chain reactions and immunohistochemistry (RUNX2 protein, bone sialoprotein (BSP), alkaline phosphatase, osteopontin and osteocalcin). Material and Methods A total of 42 rats were used and divided in to the following experimental groups: CTL: control group (rats submitted to fictitious surgery and fed with a balanced diet), OST: osteoporosis group (rats submitted to a bilateral ovariectomy and fed with a low calcium diet) and ALE: alendronate group (rats submitted to a bilateral ovariectomy, fed with a low calcium diet and treated with sodium alendronate). A surface treated implant was installed in both tibial metaphyses of each rat. Euthanasia of the animals was conducted at 14 (immunhostochemistry) and 42 days (immunohistochemistry, micro CT and PCR). Data were subjected to statistical analysis with a 5% significance level. Results Bone volume (BV) and total pore volume were higher for ALE group (P<0.05). Molecular data for RUNX2 and BSP proteins were significantly expressed in the ALE group (P<0.05), in comparison with the other groups. ALP expression was higher in the CTL group (P<0.05). The immunostaining for RUNX2 and osteopontin was positive in the osteoblastic lineage cells of neoformed bone for the CTL and ALE groups in both periods (14 and 42 days). Alkaline phosphatase presented a lower staining area in the OST group compared to the CTL in both periods and the ALE at 42 days. Conclusion There was a decrease of osteocalcin precipitation at 42 days for the ALE and OST groups. Therefore, treatment with short-term sodium alendronate improved bone repair around the implants installed in the tibia of osteoporotic rats.


Assuntos
Animais , Feminino , Osteoporose/tratamento farmacológico , Implantes Dentários , Osseointegração/efeitos dos fármacos , Alendronato/farmacologia , Conservadores da Densidade Óssea/farmacologia , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteoporose/fisiopatologia , Tíbia/cirurgia , Fatores de Tempo , Imuno-Histoquímica , Ovariectomia , Densidade Óssea/efeitos dos fármacos , Osteocalcina/análise , Osteocalcina/efeitos dos fármacos , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Reprodutibilidade dos Testes , Ratos Wistar , Implantes Experimentais , Implantação Dentária Endo-Óssea , Fosfatase Alcalina/análise , Fosfatase Alcalina/efeitos dos fármacos , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/análise , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/efeitos dos fármacos , Osteopontina/análise , Osteopontina/efeitos dos fármacos , Microtomografia por Raio-X , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
8.
Int. j. morphol ; 34(2): 763-769, June 2016. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-787066

RESUMO

The aim of this study was to evaluate the effects of melatonin healing in a tibial bone defect model in rats by means of histopathological and immunohistochemistry analysis. Twenty one male Wistar albino rats were used in this study. In each animal, bone defects (6 mm length ) were created in the tibias. The animals were divided into three groups. In group 1 control group (rats which tibial defects). Group 2 melatonin (10 mg/kg) + 14 days in the tibial defect group) was administered intraperitoneally to rats. Group 3 melatonin (10 mg/kg) + 28 days in the tibial defect group) was administered intraperitoneally to rats. Histopathological analysis of samples was performed to evaluate the process of osteoblastic activity, matrix formation, trabecular bone formation and myeloid tissue in bone defects. Immunohistochemical and immunoblot analysis demonstrated non-collagenous proteins (osteopontin and osteonectin) differences in tibial bone defects. The expression of osteopontin on tibia was increased by 14 days melatonin treatment. The expression of osteonectin on tibia was dramatically increased by 14 days melatonin treatment.


El objetivo fue evaluar por medio de análisis histopatológico e inmunohistoquímico los efectos cicatrizantes de la melatonina en un modelo de defecto óseo tibial en ratas. Se utilizaron 21 ratas albinas Wistar macho. En cada animal, se crearon defectos óseos en las tibias de 6 mm de longitud. Los animales se dividieron en tres grupos. El Grupo 1 correspondió al grupo control (defectos tibiales sin tratamiento). Al Grupo 2 se administró melatonina por vía intraperitoneal (10 mg/kg) 14 días posteriores al defecto tibial. Al Grupo 3 se administró melatonina por vía intraperitoneal (10 mg/kg) 28 días posteriores al defecto tibial. Se realizó un análisis histopatológico para evaluar los procesos de actividad osteoblástica, formación de matriz, formación de hueso trabecular y tejido mieloide en los defectos óseos. Los análisis inmunohistoquímicos y de inmunotransferencia mostraron diferencias de proteínas no colágenas (osteopontina y osteonectina). La expresión de osteopontina en defectos óseos tibiales se incrementó en el Grupo 2. La expresión de osteonectina en la tibia se incrementó fuertemente bajo el tratamiento con melatonina por 14 días.


Assuntos
Animais , Ratos , Melatonina/farmacologia , Fraturas da Tíbia/tratamento farmacológico , Tíbia/efeitos dos fármacos , Modelos Animais de Doenças , Melatonina/administração & dosagem , Osteonectina/efeitos dos fármacos , Osteonectina/metabolismo , Osteopontina/efeitos dos fármacos , Osteopontina/metabolismo , Ratos Sprague-Dawley , Fraturas da Tíbia/patologia , Tíbia/patologia , Cicatrização/efeitos dos fármacos
9.
Belo Horizonte; s.n; 2016. 59 p. ilus.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-913268

RESUMO

Apesar de sua capacidade de reparo, o tecido ósseo pode ser submetido a alguns tipos de fraturas, cirurgias ou patologias que podem levar a grandes defeitos ósseos. As principais estratégias de tratamento de defeitos ósseos são baseados em osteoindução ou osteocondução. Matriz dentinária desmineralizada humana (MDDH) é uma alternativa biocompatível para preencher defeitos ósseos, melhorando a qualidade e quantidade de osso produzido. 24 Ratos Wistar foram selecionados, submetidos à extração de ambos os segundos molares superiores (direito e esquerdo). Os alvéolos foram separados em dois grupos: controle (direita) preenchido com coágulo sanguíneo e experimental (esquerda) preenchido com MDDH. Os animais foram sacrificados aos 5, 10 e 21 dias. Foram realizadas análises histológicas, histomorfométricas (análise de variância - ANOVA e teste de Tukey) e imunohistoquímica para osteopontina (OPN) como indicador de osteogênese. Aos 5 dias MDDH foi incorporada pelas novas trabéculas ósseas. Aos 10 dias observou-se organização do tecido conjuntivo e trabéculas no grupo experimental. Detectou-se coloração intensa para OPN em área adjacente à MDDH no grupo experimental. Aos 21 dias no grupo experimental verificou-se trabéculas maduras. Houve diferença estatísticamente significatva (p <0,05). Maior número de trabéculas em grupos experimentais que nos grupos controle em todos os períodos de análise. MDDH implantadas em alvéolos de ratos, induz a aceleração da osteogênese. Presença OPN observada mais intensamente aos 10 dias próximo à MDDH


BACKGROUND - Despite its good capacity for regeneration, bone tissue subjected to some types of fractures or surgery that can lead to large bone defects. The major bone defects treatment strategies are based in osteoinduction or osteoconduction. Demineralized human dentin matrix (DHDM) is a biocompatible alternative to fill bone defect, improving the quantity and quality of bone produced. METHODS - Wistar rats were selected, submitted to the extraction of both second molars (right and left). Alveoli were separated into two groups: control (right) filled with blood clot and experimental (left) filled with DHDM. Animals were sacrificed at 5, 10 and 21 days. Histological and histoquantitative analyzes (analysis of variance - ANOVA, and Tukey's test) were performed and immunostaining for osteopontin (OPN) as osteogenesis indicator. RESULTS - 5 days - DHDM incorporated by new trabeculae. 10 days - connective tissue organization and new trabeculae in the experimental group. Intense staining for OPN close to DHDM in the experimental group. 21 days - experimental group showing mature trabeculae. Statistical difference observed (p<0.05). Higher number of trabeculae in experimental groups in all periods of analysis. CONCLUSIONS - DHDM implanted in alveoli induces the acceleration of osteogenesis. Presence of OPN observed more intensely at 10 days close to DHDM


Assuntos
Animais , Ratos , Processo Alveolar/anormalidades , Matriz Óssea/anormalidades , Regeneração Óssea/fisiologia , Dente Molar/anatomia & histologia , Osteopontina/análise , Osteopontina/genética , Análise de Variância , Interpretação Estatística de Dados
10.
Rev. argent. mastología ; 34(124): 67-109, Oct.2015. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-796698

RESUMO

El cáncer de mama es, en la actualidad, una de las principales causas de muerte en las mujeres, aunque se ha observado una sustancial reducción de las tasas de mortalidad en las últimas décadas merced a la detección de esta neoplasia en estadios más precoces y a la aplicación de tratamientos médicos adyuvantes cada vez másefectivos. La mejoría de los resultados también implica desafíos respecto de la elección del tratamiento óptimo para cada caso, evitando tanto el sobre como el sub tratamiento o el tratamiento incorrecto, siendo por ello necesario definir características específicas que orienten al médico respecto de una optimización terapéuticaindividual. Las características clásicas clínico-patológicas vinculadas conel pronóstico de la paciente −que incluyen el tamaño tumoral, el subtipo y grado histológicos, las metástasis ganglionares y la invasiónlinfovascular, así como el sistema TNM (tamaño tumoral, ganglios, metástasis)− han permitido integrar estos factores en estadios tumorales con un valor pronóstico fundamental. Pese a ello, se proponen e investigan continuamente nuevos biomarcadores con fines pronósticos y predictivos. Los marcadores tumorales son sustancias biológicas de distinta naturaleza química, sintetizadas y liberadas por las células tumorales, o producidas por el huésped en respuesta a la presencia del tumor...


Assuntos
Biomarcadores Farmacológicos , Neoplasias da Mama , Linfonodos , Mamoglobina A , Osteopontina
11.
J. appl. oral sci ; 23(1): 26-32, Jan-Feb/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-741597

RESUMO

Reactive proliferations of the gingiva comprise lesions such as pyogenic granuloma (PG), inflammatory fibroepithelial hyperplasia (IFH), peripheral ossifying fibroma (POF), and peripheral giant cell lesion. Osteopontin (OPN) has a dual role, it promotes mineralization when it is bound to solid substrate, and on the other hand, it inhibits mineralization when it is seen in association with solution. Objectives The study aimed to evaluate the expression of osteopontin in normal gingival tissue and different types of focal reactive proliferations of gingival tissue, and its role in the development of calcification within it. Material and Methods The presence and distribution of osteopontin was assessed using immunohistochemistry in five cases of normal gingival tissue and 30 cases of focal reactive proliferations of gingiva. Results There was no expression of osteopontin in normal subjects. Few cases of pyogenic granuloma, inflammatory fibroepithelial hyperplasia, and all the cases of peripheral ossifying fibroma showed positivity for osteopontin in the inflammatory cells, stromal cells, extracellular matrix, and in the calcifications. Conclusion The expression of osteopontin in all the cases of peripheral ossifying fibroma speculates that the majority of the cases of peripheral ossifying fibroma originate from the periodontal ligament cells. The treatment modalities for peripheral ossifying fibroma should differ from other focal reactive proliferations of gingiva. .


Assuntos
Humanos , Gengiva/metabolismo , Doenças da Gengiva/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Neoplasias Ósseas/metabolismo , Estudos de Casos e Controles , Fibroma Ossificante/metabolismo , Tumores de Células Gigantes/metabolismo , Granuloma Piogênico/metabolismo , Hiperplasia/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Valores de Referência
12.
Clinics ; 68(10): 1325-1332, out. 2013. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-689983

RESUMO

OBJECTIVES: Suppressor of cytokine signaling 3, myxovirus resistance protein and osteopontin gene polymorphisms may influence the therapeutic response in patients with chronic hepatitis C, and an association with IL28 might increase the power to predict sustained virologic response. Our aims were to evaluate the association between myxovirus resistance protein, osteopontin and suppressor of cytokine signaling 3 gene polymorphisms in combination with IL28B and to assess the therapy response in hepatitis C patients treated with pegylated-interferon plus ribavirin. METHOD: Myxovirus resistance protein, osteopontin, suppressor of cytokine signaling 3 and IL28B polymorphisms were analyzed by PCR-restriction fragment length polymorphism, direct sequencing and real-time PCR. Ancestry was determined using genetic markers. RESULTS: We analyzed 181 individuals, including 52 who were sustained virologic responders. The protective genotype frequencies among the sustained virologic response group were as follows: the G/G suppressor of cytokine signaling 3 (rs4969170) (62.2%); T/T osteopontin (rs2853744) (60%); T/T osteopontin (rs11730582) (64.3%); and the G/T myxovirus resistance protein (rs2071430) genotype (54%). The patients who had ≥3 of the protective genotypes from the myxovirus resistance protein, the suppressor of cytokine signaling 3 and osteopontin had a greater than 90% probability of achieving a sustained response (p<0.0001). The C/C IL28B genotype was present in 58.8% of the subjects in this group. The sustained virological response rates increased to 85.7% and 91.7% by analyzing C/C IL28B with the T/T osteopontin genotype at rs11730582 and the G/G suppressor of cytokine signaling 3 genotype, respectively. Genetic ancestry analysis revealed an admixed population. CONCLUSION: Hepatitis C genotype 1 patients who were responders to interferon-based therapy had a high frequency of multiple protective polymorphisms in the myxovirus ...


Assuntos
Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Hepatite C Crônica/tratamento farmacológico , Interleucinas/genética , Proteínas de Resistência a Myxovirus/genética , Osteopontina/genética , Polimorfismo Genético/genética , Proteínas Supressoras da Sinalização de Citocina/genética , Antivirais/uso terapêutico , Frequência do Gene , Marcadores Genéticos , Genótipo , Hepacivirus/efeitos dos fármacos , Interferon-alfa/uso terapêutico , Proteínas de Resistência a Myxovirus/efeitos dos fármacos , Osteopontina/efeitos dos fármacos , Valor Preditivo dos Testes , Polietilenoglicóis/uso terapêutico , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Proteínas Recombinantes/uso terapêutico , Ribavirina/uso terapêutico , Proteínas Supressoras da Sinalização de Citocina/efeitos dos fármacos , Resultado do Tratamento
13.
Braz. j. med. biol. res ; 46(8): 676-680, ago. 2013. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-684529

RESUMO

Multipotent mesenchymal stromal cells (MSCs) were first isolated from bone marrow and then from various adult tissues including placenta, cord blood, deciduous teeth, and amniotic fluid. MSCs are defined or characterized by their ability to adhere to plastic, to express specific surface antigens, and to differentiate into osteogenic, chondrogenic, adipogenic, and myogenic lineages. Although the molecular mechanisms that control MSC proliferation and differentiation are not well understood, the involvement of microRNAs has been reported. In the present study, we investigated the role of miR-125b during osteoblastic differentiation in humans. We found that miR-125b increased during osteoblastic differentiation, as well as Runx2 and ALPL genes. To study whether the gain or loss of miR-125b function influenced osteoblastic differentiation, we transfected MSCs with pre-miR-125b or anti-miR-125b and cultured the transfected cells in an osteoblastic differentiation medium. After transfection, no change was observed in osteoblastic differentiation, and Runx2, OPN, and ALPL gene expression were not changed. These results suggest that the gain or loss of miR-125b function does not influence levels of Runx2, OPN, and ALPL during osteoblastic differentiation.


Assuntos
Feminino , Humanos , Masculino , Fosfatase Alcalina/metabolismo , Diferenciação Celular/fisiologia , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/metabolismo , MicroRNAs/metabolismo , Osteoblastos/citologia , Osteopontina/metabolismo , Fosfatase Alcalina/genética , Antígenos de Diferenciação/isolamento & purificação , Células da Medula Óssea/citologia , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/genética , Expressão Gênica/fisiologia , Leucócitos Mononucleares/citologia , Células-Tronco Mesenquimais/citologia , MicroRNAs/genética , Osteoblastos/metabolismo , Osteogênese/fisiologia , Osteopontina/genética , Cultura Primária de Células , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Transfecção
14.
Araçatuba; s.n; 2013. 83 p. ilus.
Tese em Português | LILACS | ID: lil-756118

RESUMO

Avaliar o processo de reparo alveolar em ratas ovarectomizadas após implante com Biosilicato cristalino. Materiais e Métodos: Sessenta ratas foram divididas em quatro grupos (n = 15) de acordo com o tratamento: Grupo 1- ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com coágulo; Grupo 2-ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino; Grupo 3-ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com coágulo; e Grupo 4- ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino. Após 7, 14 e 28 dias os animais foram sacrificados e análises histomorfométricas (histologia e histometria) e imunoistoquímicas (Osteopontina e Osteocalcina) foram realizadas. A comparação dos resultados foi realizada utilizando o programa estatístico Assistat 2013 para Windows através da Análise de Variância e teste de Mann-Whitney, com resultados significantes sendo encontrados quando p≤0.05. Resultados: No período de 7 dias, os Grupos 1 e 3 apresentaram resultados superiores e estatisticamente maiores do que os Grupos 2 e 4 (p<0.05) quanto à formação óssea. Após o período de 14 dias as diferenças estatísticas mantiveram-se, com os Grupos 1 e 3 apresentando diferença estatisticamente significante maiores aos Grupos 2 e 4 (p<0.05). Aos 28 dias, a diferença estatística significativa permaneceu entre os mesmo Grupos estudados, sendo que nos grupos implantados com o Biosilicato cerca de 60% do alvéolo já havia sido preenchido por osso novo. A imunoistoquímica revelou expressão das proteínas Osteocalcina e Osteopontina, principalmente nos animais submetidos à cirurgia de ovarectomia. Conclusões: Os Grupos 1 e 3 foram os que apresentaram os melhores resultados durante todo o estudo, com o Biosilicato cristalino apresentando resultado favorável na reparação óssea sem contudo ser observada a absorção do biovidro. As análises imunoistoquímicas demonstraram que os animais submetidos a ovarectomia apresentaram uma maior...


To evaluate the process of alveolar repair in ovariectomized rats after implantation with Biosilicate. Materials and Methods: Sixty rats were divided into four groups (n = 15) according to treatment: Group 1 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with blood clot; Group 2 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with crystalline Biosilicate; Group 3 - ovariectomized rats with alveoli filled with blood clot; Group 4 - ovariectomized rats with alveoli filled with crystalline Biosilicate. After 7, 14 and 28 days the animals were sacrificed and histomorphometric analysis (histology and histometric) and immunohistochemical (Osteopontin and Osteocalcin) were measured . The comparison of the results was performed using the statistical program Assistat 2013 for Windows by Analysis of Variance and Mann-Whitney tests, with significant results being found when p ≤ 0:05 . Results: During the 7- day period, Groups 1 and 3 showed better and significantly higher results in bone formation than Groups 2 and 4 (p<0.05). After 14 days the statistical differences remained between Groups 1 and 3 and Groups 2 and 4 (p<0,05). At 28 days, the statically difference remained significant between the same Groups, while the groups implanted with Biosilicate presented about 60% of the socket filled by new bone. Immunohistochemistry revealed expression of proteins osteocalcin and osteopontin, especially in animals subjected to ovariectomy surgery. Conclusions: Groups 1 and 3 were those with the best results throughout the study, with the crystalline Biosilicate presenting favorable result in bone repair without bioglass resorption. The immunohistochemical analysis showed that animals subjected to ovariectomy had a higher signaling in Ostecalcina and Osteopontin proteins...


Assuntos
Animais , Ratos , Osteocalcina , Osteopontina , Osteoporose , Ovariectomia , Silicatos , Imuno-Histoquímica , Ratos Wistar
15.
Botucatu; s.n; 2013. 62 p. ilus.
Tese em Português | LILACS | ID: lil-756928

RESUMO

A osteopontina (OPN) é uma glicofosfoproteína secretável que tem sido relacionada com diferentes processos fisiológicos e de doença nos seres humanos. Sabe-se que a OPN está relacionada com a progressão neoplásica e metástase em diversos cânceres humanos, porém esta relação ainda é pouco explorada na literatura veterinária. O objetivo do presente estudo foi avaliar a expressão de osteopontina nos carcinomas mamários caninos e sua relação com biomarcadores tumorais bem estabelecidos nessas neoplasias. Para isso, a expressão de OPN, EGFR, HER2 e c-Kit foi avaliada em conjunto com a análise da taxa de Ki67 em 43 carcinomas mamários provenientes de cadelas diferentes. Demonstrou-se que a expressão acentuada de OPN está relacionada com a expressão de EGFR (P < 0.001) e com a superexpressão de HER2 (P = 0.012). Em conclusão, a osteopontina aparenta estar relacionada com prognóstico ruim e ativação da via MAPK, este ultimo fato podendo implicar na futura utilização de tratamentos baseados em drogas direcionadas para esta via de sinalização particular nas neoplasias mamárias de cadelas com expressão acentuada de osteopontina...


Osteopontin (OPN) is a secreted glycophosphoprotein that has been implicated in a number of different normal physiologic and pathologic processes in humans. OPN is known to be involved in the progression and metastasis of various humans cancers, but this relation is still little explored in the veterinary literature. The aim of this study was to evaluate the expression of osteopontin in canine mammary carcinomas and its relation with well established canine mammary tumor biomarkers. For that, the expression of OPN, EGFR, HER2, and c-Kit were evaluated along with Ki67 rate in 43 mammary carcinomas from different female dogs. OPN was demonstrated to be expressed by neoplastic epithelial cells in all carcinomas as well as in stromal cells from the tumor microenvironment. Relation between OPN high expression and EGFR positivity (P < 0.001) and high HER2 expression (P = 0.012) was demonstrated. In conclusion, osteopontin seems to be related to poor prognosis and MAPK pathway activation, the latter a feature that could imply in the future use of treatments with drugs directed against this particular signaling pathway in highly OPN expressing canine mammary tumors...


Assuntos
Animais , Feminino , Cães , Neoplasias Mamárias Animais/diagnóstico , Osteopontina , Cães
16.
Araçatuba; s.n; 2013. 83 p. ilus.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-867180

RESUMO

Objetivos: Avaliar o processo de reparo alveolar em ratas ovarectomizadas após implante com Biosilicato cristalino. Materiais e Métodos: Sessenta ratas foram divididas em quatro grupos (n = 15) de acordo com o tratamento: Grupo 1- ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com coágulo; Grupo 2-ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino; Grupo 3-ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com coágulo; e Grupo 4- ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino. Após 7, 14 e 28 dias os animais foram sacrificados e análises histomorfométricas (histologia e histometria) e imunoistoquímicas (Osteopontina e Osteocalcina) foram realizadas. A comparação dos resultados foi realizada utilizando o programa estatístico Assistat 2013 para Windows através da Análise de Variância e teste de Mann-Whitney, com resultados significantes sendo encontrados quando p≤0.05. Resultados: No período de 7 dias, os Grupos 1 e 3 apresentaram resultados superiores e estatisticamente maiores do que os Grupos 2 e 4 (p<0.05) quanto à formação óssea. Após o período de 14 dias as diferenças estatísticas mantiveram-se, com os Grupos 1 e 3 apresentando diferença estatisticamente significante maiores aos Grupos 2 e 4 (p<0.05). Aos 28 dias, a diferença estatística significativa permaneceu entre os mesmo Grupos estudados, sendo que nos grupos implantados com o Biosilicato cerca de 60% do alvéolo já havia sido preenchido por osso novo. A imunoistoquímica revelou expressão das proteínas Osteocalcina e Osteopontina, principalmente nos animais submetidos à cirurgia de ovarectomia. Conclusões: Os Grupos 1 e 3 foram os que apresentaram os melhores resultados durante todo o estudo, com o Biosilicato cristalino apresentando resultado favorável na reparação óssea sem contudo ser observada a absorção do biovidro. As análises imunoistoquímicas demonstraram que os animais submetidos a ovarectomia apresentaram uma maior...


Objectives: To evaluate the process of alveolar repair in ovariectomized rats after implantation with Biosilicate. Materials and Methods: Sixty rats were divided into four groups (n = 15) according to treatment: Group 1 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with blood clot; Group 2 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with crystalline Biosilicate; Group 3 - ovariectomized rats with alveoli filled with blood clot; Group 4 - ovariectomized rats with alveoli filled with crystalline Biosilicate. After 7, 14 and 28 days the animals were sacrificed and histomorphometric analysis (histology and histometric) and immunohistochemical (Osteopontin and Osteocalcin) were measured . The comparison of the results was performed using the statistical program Assistat 2013 for Windows by Analysis of Variance and Mann-Whitney tests, with significant results being found when p ≤ 0:05 . Results: During the 7- day period, Groups 1 and 3 showed better and significantly higher results in bone formation than Groups 2 and 4 (p<0.05). After 14 days the statistical differences remained between Groups 1 and 3 and Groups 2 and 4 (p<0,05). At 28 days, the statically difference remained significant between the same Groups, while the groups implanted with Biosilicate presented about 60% of the socket filled by new bone. Immunohistochemistry revealed expression of proteins osteocalcin and osteopontin, especially in animals subjected to ovariectomy surgery. Conclusions: Groups 1 and 3 were those with the best results throughout the study, with the crystalline Biosilicate presenting favorable result in bone repair without bioglass resorption. The immunohistochemical analysis showed that animals subjected to ovariectomy had a higher signaling in Ostecalcina and Osteopontin proteins


Assuntos
Animais , Ratos , Osteocalcina , Osteopontina , Osteoporose , Ovariectomia , Silicatos , Imuno-Histoquímica , Ratos Wistar
17.
São Paulo; s.n; s.n; 2013. 160 p. tab, graf, ilus.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-846932

RESUMO

A pele está em contínua auto-renovação graças a vários nichos de células-tronco presentes neste tecido. Células progenitoras epidérmicas surgem durante o desenvolvimento embrionário e contribuem para a reposição celular da epiderme durante todo o período de vida dos mamíferos. Neste trabalho, buscou-se analisar o papel da depleção de glutationa durante a estratificação da epiderme embrionária e na manutenção da homeostase no tecido adulto. Encontramos evidências de que este tiol tem um importante papel durante a proliferação da epiderme e formação do folículo capilar. As alterações observadas na ausência de GSH foram relacionados com um padrão diferencial de fosforilação dos fatores de transcrição forkhead-homeobox- tipo-O (FOXO). Em resumo, foi estabelecida uma correlação entre o estado de GSH, a fosforilação de FOXO e o desenvolvimento da epiderme. Para melhor estudar a importância do balanço de GSH, na pele do adulto, e seu papel na manutenção deste tecido, camundongos foram tratados com um inibidor da síntese de GSH e, com N-aceti-lcisteína. Foi observado um aumento da fosforilação de Akt, padrões alterados de fosforilação FOXO e aumento da expressão de genes de genes relacionados à diferenciação. Estes resultados mostram que a via Akt/FOXO desempenha um papel importante na manutenção e diferenciação de células-tronco epidermais. O envelhecimento cronológico leva a alterações morfológicas/funcionais que conduzem à diminuição da auto-renovação, o que ocorre concomitantemente com uma diminuição dos níveis de GSH na pele. Utilizamos, também, animais idosos e avaliamos quais mecanismos eram compartilhados pelo envelhecimento e a depleção deste tiol. Observou-se que uma resposta hiperproliferativa ligada à exaustão de células-tronco pode ser o elo entre a depleção de GSH e o envelhecimento. A influência desse processo também foi investigada no compartimento dérmico, através da análise do impacto da depleção de glutationa sobre a osteogênese de células-tronco mesenquimais murinas. Quando induzidas a se diferenciarem em osso (Alizarin-Red+/Von-Kossa-stain +, aumento dos níveis de mRNA para fosfatase alcalina/osteopontina/osterix), o balanço GSH/GSSG e seu sistema antioxidante correlato é diferencialmente regulado em células-tronco mesenquimais derivadas da derme. Sendo regulado de uma forma redox-dependente através da via de MAPKs. A depleção de GSH leva à diminuição nos níveis de osteogênese em favor da adipogênese, levando ao processo comumente associado ao envelhecimento denominado "adipogenic switc". Em conclusão, os dados obtidos permitem propor um papel central para a glutationa na manutenção/comprometimento de células-tronco na pele


The skin is continuously self-renewing thanks to several stem cell niches. Epidermal progenitor cells arise during embryonic development and contribute to the replenishment of the epidermis during the lifetime of mammals. We set out to analyze the glutathione (GSH) antioxidant system during embryonic epidermis stratification and follicle development and the effect of glutathione withdrawal in this process. We found that glutathione plays an important role during epidermis proliferation and hairshaft formation. The changes observed in the absence of GSH were related to a differential phosphorylation pattern of the forkhead-homeobox-type-O (FOXO) transcription factors. In brief, a correlation between GSH status, FOXO phosphorylation and skin development was established. To further study the importance of GSH in adult skin maintenance and understand the effects of ROS in the Akt/FOXO pathway, we treated cells and mice with an inhibitor of GSH synthesis, and with N-acetyl-cysteine. Increased Akt phosphorylation, altered FOXO phosphorylation patterns and increased gene expression of differentiation-related genes were observed. Our results show that the Akt/FOXO pathway plays an important role in maintenance/differentiation of epidermal stem cells. Chronological ageing leads to morphological/functional changes causing a decline in self-renewal, as well as decreased levels of GSH. We also observed that a cell cycle hyperproliferative response was the link between stem cell exaustion in GSH-depletion and ageing. Dermal mesenchymal stem cells (MSCs), are capable of adipo-chondro- and osteogenesis. Little is known about the impact of ROS in MSC differentiation. We induced murine skin MSCs to differentiate into bone (Alizarin-Red/Von-Kossastain+, increased levels of mRNA for alkalinephosphatase/ osteopontin/osterix). In brief, the balance of GSH/GSSG and related antioxidant system is differentially regulated during this process, found to be regulated in a redox-dependent fashion through the MAPK pathway. When depleted, GSH leads to an adipogenic switch in MSC differentiation. In conclusion, our data leads us to propose a central role for glutathione in the maintenance/commitment of stem cells in skin


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Camundongos , Bases de Dados de Compostos Químicos , Glutationa/análise , Células-Tronco/metabolismo , Epiderme , Expressão Gênica , Homeostase/genética , Células-Tronco Embrionárias Murinas , Osteopontina , Envelhecimento da Pele/genética
18.
Braz. dent. j ; 23(4): 328-336, 2012. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-658006

RESUMO

The aim of this study was to evaluate the odontogenic potential of undifferentiated pulp cells (OD-21 cell line) through chemical stimuli in vitro. Cells were divided into uninduced cells (OD-21), induced cells (OD-21 cultured in supplemented medium/OD-21+OM) and odontoblast-like cells (MDPC-23 cell line). After 3, 7, 10 and 14 days of culture, it was evaluated: proliferation and cell viability, alkaline phosphatase activity, total protein content, mineralization, immunolocalization of dentin matrix acidic phosphoprotein 1 (DMP1), alkaline phosphatase (ALP) and osteopontin (OPN) and quantification of genes ALP, OSTERIX (Osx), DMP1 and runt-related transcription factor 2 (RUNX2) through real-time polymerase chain reaction (PCR). Data were analyzed by Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U tests (p<0.05). There was a decrease in cell proliferation in OD-21 + OM, whereas cell viability was similar in all groups, except at 7 days. The amount of total protein was higher in group OD-21 + OM in all periods; the same occurred with ALP activity after 10 days when compared with OD-21, with no significant differences from the MDPC-23 group. Mineralization was higher in OD-21+OM when compared with the negative control. Immunolocalization demonstrated that DMP1 and ALP were highly expressed in MDPC-23 cells and OD-21 + OM cells, whereas OPN was high in all groups. Real-time PCR revealed that DMP1 and ALP expression was higher in MDPC-23 cell cultures, whereas RUNX2 was lower for these cells and higher for OD-21 negative control. Osx expression was lower for OD-21 + OM. These results suggest that OD-21 undifferentiated pulp cells have odontogenic potential and could be used in dental tissue engineering.


O objetivo foi avaliar o potencial odontogênico de células indiferenciadas da polpa (OD-21) por meio de indução química in vitro. As células foram divididas em grupos: controle (OD-21), induzido (OD-21 em meio suplementado/OD-21 + OM), e células odontoblastóides (MDPC-23). Após 3, 7, 10 e 14 dias, avaliou-se proliferação e viabilidade celular, proteína total e fosfatase alcalina (ALP), mineralização, imunolocalização da proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), ALP e osteopontina (OPN), assim como a expressão dos genes ALP, OSTERIX (Osx), DMP1 e fator de transcrição RUNX2 por PCR em tempo real. Os dados foram avaliados pelo teste de Kruskal-Wallis seguido pelo teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Houve diminuição na proliferação celular em OD-21 + OM, com viabilidade celular similar em todos os grupos, exceto aos sete dias. O conteúdo de proteína total foi maior no grupo OD-21 + OM em todos os períodos; o mesmo ocorreu com a atividade de ALP quando comparada com o grupo OD-21, além de apresentar resultados similares ao grupo MDPC-23. A mineralização foi maior em OD-21 + OM quando comparada com o controle negativo. A imunolocalização demonstrou expressão de DMP1 e ALP em MDPC-23 e OD-21 + OM, enquanto que todos os grupos foram positivos para OPN. A expressão gênica de DMP1 e ALP foi maior nas culturas de MDPC-23, enquanto que a de RUNX2 foi menor para estas células e maior no controle negativo. A expressão de OSTERIX foi menor em OD-21 + OM quando comparada aos outros grupos. Sugere-se que as células indiferenciadas da polpa da linhagem OD-21 apresentam potencial odontogênico e poderiam ser usadas para a engenharia tecidual.


Assuntos
Animais , Camundongos , Polpa Dentária/citologia , Odontogênese/fisiologia , Fosfatase Alcalina/análise , Contagem de Células , Técnicas de Cultura de Células , Linhagem Celular , Meios de Cultura , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Subunidade alfa 1 de Fator de Ligação ao Core/análise , Proteínas da Matriz Extracelular/análise , Odontoblastos/efeitos dos fármacos , Osteopontina/análise , Fosfoproteínas/análise , Proteínas/análise , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Fatores de Tempo , Calcificação de Dente/efeitos dos fármacos , Fatores de Transcrição/análise
19.
Int. j. morphol ; 29(4): 1438-1443, dic. 2011. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-627029

RESUMO

The molecules that constitute the extracellular matrix are important in several functions related to tissue support and cell-cell, cell-extracellular matrix interaction. Among the macromolecules that constitute the mentioned matrix we find osteopontin, fibrinogen and collagen. The present study was undertaken to analyze the rol of osteopontin, fibrinogen and collagen in uterine-placental interface during normal porcine gestation. Uterine and placental tissues from crossbred gilts of 30 (n=5), 60 (n=5), 70 (n=5) and 114 (at term, n=5) days of gestation were used. Macroscopic analysis of the embryos/fetuses allowed us to determine their gestational age by means of the crown-rump lenght. Haematoxylin-Eosin and Masson's Trichrome dyes along with light microscopy were used to structure analysis of every selected period of gestation. A spacial and temporal study of osteopontin and fibrinogen was performed through immunohistochemical technique. Determination of collagen fibers was carried out through Picrosirius red technique and polarizing microscopy. Results were expressed as semi-quantitative. Higher expression of osteopontin was observed at early periods of gestation, mainly in uterine and placental villi, endometrial gland epithelium and histotroph. Fibrinogen expressed abundantly in fetal mesenchyme in every period analyzed and in fetal and maternal vessels at Day 70. Negative expression of collagen fibers was observed in villi, however increasing expression of thick fibers throughout pregnancy was detected in uterine stroma and myometrium. These results confirm the importance of osteopontin, fibrinogen and collagen in the support of uterine and placental structures and in the suitable maintenance of pregnancy.


Las moléculas que constituyen la matriz extracelular son importantes en varias funciones relacionadas con el soporte del tejido y la interacción célula-célula, célula-matriz extracelular. Entre las macromoléculas que constituyen la matriz mencionada se encuentra la osteopontina, el fibrinógeno y el colágeno. Este estudio se realizó para analizar el rol de la osteopontina, el fibrinógeno y el colágeno en la interface útero-placentaria durante la gestación porcina normal. Tejidos uterinos y la placentarios de hembras porcinas cruzadas de 30 (n=5), 60 (n=5), 70 (n=5) y 114 (a término, n=5) días de gestación fueron utilizados. El análisis macroscópico de los embriones/fetos nos permitió determinar la edad gestacional por medio de la longitud cráneo-rabadilla. Tinciones de Hematoxilina-Eosina y Tricrómico de Masson con microscopía de luz se utilizó para estructurar el análisis de cada periodo de tiempo seleccionado de la gestación. Un estudio espacial y temporal de la osteopontina y el fibrinógeno se realizó mediante técnicas de inmunohistoquímica. La determinación de fibras colágenas se llevó a cabo a través de la técnica Picrosirius rojo por microscopia de polarización. Los resultados se expresaron como semi-cuantitativos. La expresión de osteopontina se observó en los primeros períodos de gestación, principalmente en las vellosidades del útero y la placenta, epitelio de las glándulas endometriales e histotrofos. El fibrinógeno se expresa abundantemente en mesénquima fetal en todos los períodos analizados y en los vasos fetales y maternos el día 70. Una expresión negativa de fibras colágenas se observó en las vellosidades, sin embargo, un aumento de expresión de las fibras gruesas durante la gestación se detectó en el estroma uterino y el miometrio. Estos resultados confirman la importancia de la osteopontina, fibrinógeno y colágeno en el soporte de las estructuras del útero y placenta, así como el mantenimiento adecuado durante la gestación.


Assuntos
Animais , Feminino , Gravidez , Colágeno/metabolismo , Fibrinogênio/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Placenta/metabolismo , Suínos , Matriz Extracelular , Imuno-Histoquímica , Prenhez/metabolismo , Útero/metabolismo
20.
Braz. j. med. biol. res ; 44(7): 694-699, July 2011. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-595703

RESUMO

The maxilla and masseter muscles are components of the stomatognathic system involved in chewing, which is frequently affected by physical forces such as gravity, and by dental, orthodontic and orthopedic procedures. Thyroid hormones (TH) are known to regulate the expression of genes that control bone mass and the oxidative properties of muscles; however, little is known about the effects of TH on the stomatognathic system. This study investigated this issue by evaluating: i) osteoprotegerin (OPG) and osteopontine (OPN) mRNA expression in the maxilla and ii) myoglobin (Mb) mRNA and protein expression, as well as fiber composition of the masseter. Male Wistar rats (~250 g) were divided into thyroidectomized (Tx) and sham-operated (SO) groups (N = 24/group) treated with T3 or saline (0.9 percent) for 15 days. Thyroidectomy increased OPG (~40 percent) and OPN (~75 percent) mRNA expression, while T3 treatment reduced OPG (~40 percent) and OPN (~75 percent) in Tx, and both (~50 percent) in SO rats. Masseter Mb mRNA expression and fiber type composition remained unchanged, despite the induction of hypo- and hyperthyroidism. However, Mb content was decreased in Tx rats even after T3 treatment. Since OPG and OPN are key proteins involved in the osteoclastogenesis inhibition and bone mineralization, respectively, and that Mb functions as a muscle store of O2 allowing muscles to be more resistant to fatigue, the present data indicate that TH also interfere with maxilla remodeling and the oxidative properties of the masseter, influencing the function of the stomatognathic system, which may require attention during dental, orthodontic and orthopedic procedures in patients with thyroid diseases.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Músculo Masseter/efeitos dos fármacos , Maxila/efeitos dos fármacos , Mioglobina/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Osteoprotegerina/metabolismo , Hormônios Tireóideos/fisiologia , Tri-Iodotironina/farmacologia , Northern Blotting , Hipertireoidismo/fisiopatologia , Músculo Masseter/anatomia & histologia , Músculo Masseter/metabolismo , Maxila/metabolismo , Mioglobina/genética , Osteopontina/genética , Osteoprotegerina/genética , Ratos Wistar , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , RNA , RNA Mensageiro/metabolismo , Tireoidectomia , Hormônios Tireóideos/metabolismo
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