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1.
São Paulo; s.n; s.n; 2019. 65 p. tab, graf.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-1007563

RESUMO

Bacteriocinas produzidas por bactérias láticas (BAL) apresentam um importante potencial de aplicação na bioconservação de alimentos, por sua ação antimicrobiana contra algumas espécies de microrganismos patogênicos de relevância, como Listeria monocytogenes. Este estudo analisou o efeito da interação entre cepas selecionadas de BAL produtoras de bacteriocinas com outras BAL viáveis ou não viáveis (bacteriocinogênicas ou não) na indução da produção de bacteriocinas. O efeito dos metabólitos produzidos por estas cepas na indução da bacteriocinogênese também foi avaliado. As cepas produtoras de bacteriocinas selecionadas para o estudo foram Lactobacillus sakei MBSa1, produtora de sakacina A e Pediococcus acidilactici ET34, produtora de pediocina, isoladas de salame e salmão defumado, respectivamente. A produção de pediocina por P. acidilactici ET34 foi avaliada também em leite em pó desnatado reconstituído, além de meio de cultura (caldo MRS). Os resultados indicaram que, quando em co-cultura com Enterococcus faecalis ATCC12755, Lactobacillus sakei ATCC15521 ou Listeria monocytogenes (cepas 104, 711 e 637), ou na presença do sobrenadante livre de células (SLC) dessas culturas, nenhuma das duas cepas testadas produziu maior quantidade de bacteriocina do que a produzida quando em monocultura ou na ausência do SLC. A bacteriocina produzida por P. acidilactici ET34 apresentou um efeito bacteriostático contra L. monocytogenes 104 no leite em pó desnatado reconstituído nas 12 h analisadas, com extensão da fase lag, de forma dose-dependente. Os resultados indicaram, também, que P. acidilactici ET34 não foi capaz de produzir pediocina no leite em pó desnatado reconstituído quando em monocultura ou em co-cultura, ao contrário do observado para o caldo MRS. Mais investigação é necessária para esclarecer os efeitos de possíveis interações entre as BAL presentes em um alimento, bem como o efeito dos componentes dos alimentos na produção das bacteriocinas pelas BAL bacteriocinogênicas


Bacteriocins produced by lactic acid bacteria (LAB) present an important application potential in food biopreservation, by their antimicrobial activity against some species of pathogenic microorganisms of relevance, such as Listeria monocytogenes. This study analyzed the effect of the interaction between selected strains of bacteriocin-producing LAB with other viable or non-viable LAB (bacteriocinogenic or not) in the induction of bacteriocin production. The effect of the metabolites produced by these strains on the induction of bacteriocinogenesis was also evaluated. The bacteriocin-producing strains selected for the study were Lactobacillus sakei MBSa1, producer of sakacin A and Pediococcus acidilactici ET34, producer of pediocin, isolated from salami and smoked salmon, respectively. The production of pediocin by P. acidilactici ET34 was also evaluated in reconstituted skimmed milk powder as well as culture medium (MRS broth). The results indicated that when co-cultivated with Enterococcus faecalis ATCC12755, Lactobacillus sakei ATCC15521 or Listeria monocytogenes (strains 104, 711 and 637), or in the presence of the cell free supernatant (SLC) of these cultures, neither of the two strains tested produced greater amount of bacteriocin than that produced in monoculture or in the absence of SLC. The bacteriocin produced by P. acidilactici ET34 presented a bacteriostatic effect against L. monocytogenes 104 in skimmed milk powder reconstituted in 12h, with extension of lag phase, in a dose-dependent manner. The results also indicated that P. acidilactici ET34 was not able to produce pediocin in the reconstituted skimmed milk powder when in monoculture or in co-culture, unlike that observed for the MRS broth. More research is needed to clarify the effects of possible interactions between BAL present in a food and the effect of food components on bacteriocin production by bacteriocinogenic BAL


Assuntos
Bacteriocinas/análise , Ácido Láctico , Alimentos/toxicidade , Pediocinas/efeitos adversos , Listeria monocytogenes/isolamento & purificação
2.
São Paulo; s.n; s.n; 2019. 69 p. ilus, graf, tab.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-1022992

RESUMO

A deficiência de folato é um problema de saúde pública que vem sendo combatido através da fortificação obrigatória de ácido fólico. Entretanto, a ingestão excessiva pode causar efeitos colaterais indesejados. A forma natural da vitamina produzida por algumas cepas de bactérias láticas pode ser uma alternativa segura para aumentar a ingestão de folato pela população. Este trabalho visou selecionar as melhores cepas de BAL produtoras de folato, identificar as melhores condições para a produção da vitamina e avaliar a biodisponibilidade do folato produzido pelas cepas no leite fermentado, empregando-se testes em modelos animais. O estudo foi desenvolvido com cinco cepas de Streptococcus thermophilus (34v, 170v, 268v, 361v e 341 pc) e um cepa de Lactobacillus plantarum (16cv), todas boas produtoras de folato. As condições de produção e a combinação de cepas que resultaram na melhor produção folato foram utilizadas para produzir um leite biofermentado (BFM), avaliando-se a biodisponibilidade da vitamina produzida empregando-se um modelo animal de depleção/repleção, com camundongos Balb/c submetidos a 14 dias de depleção, seguido de 21 dias de repleção da vitamina. Após os 35 dias, os animais foram sacrificados, retirando-se sangue, rins, fígado, baço e intestino para quantificação de folato e avaliação histológica da mucosa intestinal. Todas as quantificações de folato foram feitas pelo método microbiológico. A melhor combinação de cepas (St. Thermophilus 34v + Lb. Plantarum 16cv) resultou na produção de 300 ng/mL de folato, sendo a temperatura de 42ºC melhor que 37ºC para a produção da vitamina. A produção de folato no leite na fermentação em pH controlado 6,0 foi 35% superior à observada no leite fermentado em pH livre. As concentrações de folato no baço e glóbulos vermelhos foram mais altas nos camundongos que ingeriram leite fermentado bioenriquecido (BFM) em relação aos demais grupos de animais. A relação vilosidade/cripta nos camundongos dos grupos BFM foi igual à observada nos animais que receberam leite suplementado com ácido fólico. Houve aumento da hemoglobina, hematócrito e hemácias nos camundongos que ingeriram BFM, evidenciando a bioeficácia do folato produzido. Esses resultados indicam que a produção de folato por bactérias láticas selecionadas em produtos fermentados pode ser uma boa alternativa para aumentar a ingestão de vitamina B9 pela população


A deficiência de folato é um problema de saúde pública que vem sendo combatido através da fortificação obrigatória de ácido fólico. Entretanto, a ingestão excessiva pode causar efeitos colaterais indesejados. A forma natural da vitamina produzida por algumas cepas de bactérias láticas pode ser uma alternativa segura para aumentar a ingestão de folato pela população. Este trabalho visou selecionar as melhores cepas de BAL produtoras de folato, identificar as melhores condições para a produção da vitamina e avaliar a biodisponibilidade do folato produzido pelas cepas no leite fermentado, empregando-se testes em modelos animais. O estudo foi desenvolvido com cinco cepas de Streptococcus thermophilus (34v, 170v, 268v, 361v e 341 pc) e um cepa de Lactobacillus plantarum (16cv), todas boas produtoras de folato. As condições de produção e a combinação de cepas que resultaram na melhor produção folato foram utilizadas para produzir um leite biofermentado (BFM), avaliando-se a biodisponibilidade da vitamina produzida empregando-se um modelo animal de depleção/repleção, com camundongos Balb/c submetidos a 14 dias de depleção, seguido de 21 dias de repleção da vitamina. Após os 35 dias, os animais foram sacrificados, retirando-se sangue, rins, fígado, baço e intestino para quantificação de folato e avaliação histológica da mucosa intestinal. Todas as quantificações de folato foram feitas pelo método microbiológico. A melhor combinação de cepas (St. Thermophilus 34v + Lb. Plantarum 16cv) resultou na produção de 300 ng/mL de folato, sendo a temperatura de 42ºC melhor que 37ºC para a produção da vitamina. A produção de folato no leite na fermentação em pH controlado 6,0 foi 35% superior à observada no leite fermentado em pH livre. As concentrações de folato no baço e glóbulos vermelhos foram mais altas nos camundongos que ingeriram leite fermentado bioenriquecido (BFM) em relação aos demais grupos de animais. A relação vilosidade/cripta nos camundongos dos grupos BFM foi igual à observada nos animais que receberam leite suplementado com ácido fólico. Houve aumento da hemoglobina, hematócrito e hemácias nos camundongos que ingeriram BFM, evidenciando a bioeficácia do folato produzido. Esses resultados indicam que a produção de folato por bactérias láticas selecionadas em produtos fermentados pode ser uma boa alternativa para aumentar a ingestão de vitamina B9 pela população


Assuntos
Animais , Masculino , Disponibilidade Biológica , Leite/efeitos adversos , Ácido Fólico/análise , Deficiência de Ácido Fólico/complicações , Bacteriocinas/efeitos adversos , Streptococcus thermophilus/classificação , Lactobacillus plantarum/classificação
3.
An. acad. bras. ciênc ; 90(1): 73-84, Mar. 2018. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-886885

RESUMO

ABSTRACT The adhesion ability of bacteria to abiotic surfaces has important implications in food industries, because these organisms can survive for long periods through the biofilm formation. They can be transferred from one place to another in the industry causing contamination of the food processing environment. In this study, the antibacterial and antibiofilm activities of the antimicrobial peptide P34, characterized as a bacteriocin-like substance (BLS P34) were tested against planktonic and sessile cells of Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis isolated from foods. The BLS P34 showed inhibitory effect against all planktonic cells of E. faecalis. The inhibition of biofilm formation and the eradication of pre-formed biofilm were evaluated with the crystal violet assay and with the reduction of 3-bromide [4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium. The BLS P34 promoted a reduction of percentage of adhered microbial cells on the surface, not being able to perform the complete elimination of biofilm formation. The metabolic activity of S. aureus biofilms decreased considerably between 41-95%. However, E. faecalis cells showed up metabolically stimulated. The BLS P34 has the potential antibiofilm for the species S. aureus. Studies suggest more detailed approaches to a better understanding of the interactions between the antimicrobial and bacterial cells within the biofilm structure.


Assuntos
Animais , Oligopeptídeos/farmacologia , Staphylococcus aureus/efeitos dos fármacos , Bacteriocinas/farmacologia , Enterococcus faecalis/efeitos dos fármacos , Biofilmes/efeitos dos fármacos , Antibacterianos/farmacologia , Bacillus/isolamento & purificação , Bacillus/metabolismo , Bacteriocinas/isolamento & purificação , Aderência Bacteriana/efeitos dos fármacos , Testes de Sensibilidade Microbiana , Análise de Variância
4.
Biosci. j. (Online) ; 34(2): 385-399, mar./apr. 2018. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-966649

RESUMO

Lactic acid bacteria are used as starter culture for the production of fermented dairy products, and that occur naturally as indigenous microbiota of the raw milk. In this study, lactic acid bacteria were isolated from raw cow milk samples. The serial dilutions of raw milk were made and plated onto LM17 agar and MRS agar adjusted to pH 5.4. The isolates were firstly identified based on cell morphology, reaction to gram stain, catalase production, growth in MRS broth containing 2%, 4%, and 6.5% NaCl, growth ability of different temperatures and formation of gas in MRS broth. Acid formation in 10% reconstituted skim milk and antimicrobial activity against foodborne pathogens Listeria monocytogenes ATCC 7644, Stapylococcus aureus ATCC 25923, and Clostridium perfringens ATCC 13124 were examined using agar well diffusion method. The total of 90 LAB isolates were classified as Lactobacillus (37.78%), Lactococcus (36.67%), Enterococcus (20.00%), Streptococcus (4.44%), and Leuconostoc (1.11%). Based on technological properties, 56 of 90 isolates (42 cocci, 14 rods) were selected, and further identified at the species level using API 20 Strep and API 50 CH identification system, respectively. The Lactobacillus isolates were identified as Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus paracasei ssp. paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus delbrueckii ssp. lactis, and Lactobacillus rhamnosus. The enzymatic profiles of the 17 selected isolates were studied with API ZYM system. The Lactobacillus spp. strains tested displayed high leucine arylamidase activity. Two Lactococcus lactis ssp. lactis AKS320.1 and AKS320.2 strains and one Enterococcus faecalis AKS424 strain were able to produce bacteriocin. In conclusion, some of these isolates could be considered as potential starter culture candidates for fermented milk products.


Bactérias de ácido lático são utilizadas como cultura inicial para a produção de produtos lácteos fermentados e que ocorrem naturalmente como microbiota indígena do leite cru. Neste estudo, as bactérias ácido lácticas foram isoladas a partir de amostras de leite cru de vaca. As diluições em série do leite cru foram feitos e plaqueadas em ágar LM17 e agar MRS ajustado para pH 5,4. Os isolados foram primeiramente identificados com base na morfologia das células, coloração pelo Método de Gram, produção de catalase, crescimento em caldo MRS contendo 2%, 4%, e 6,5% de NaCl, a capacidade de crescimento de diferentes temperaturas e formação de gás em caldo MRS. Foram avaliadas a formação de ácido em 10% de leite desnatado reconstituído e propriedades antagonistas contra os agentes patogênicos de origem alimentar Listeria monocytogenes ATCC 7644, Stapylococcus aureus ATCC 25923, e Clostridium perfringens ATCC 13124, usando o método de difusão em agar. O total de 90 isolados de laboratório foram classificados como Lactobacillus (37,78%), de Lactococcus (36,67%), Enterococcus (20,00%), Streptococcus (4,44%), e Leuconostoc (1,11%). Com base em propriedades tecnológicas, foram selecionados 56 dos 90 isolados (42 cocos, 14 hastes) e identificados ao nível das espécies usando o sistema de identificação API 20 Strep e API 50 CH, respectivamente. Os isolados de Lactobacillus foram identificados como Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus paracasei ssp. paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus delbrueckii ssp. lactis e Lactobacillus rhamnosus. Os perfis enzimáticos dos 17 isolados selecionados foram estudados por meio do sistema API ZYM. As cepas de Lactobacillus possuem alta atividade de arilamidase leucina. Duas cepas de Lactococcus lactis ssp. lactis AKS320,1 e AKS320,2 cepas e um Enterococcus faecalis AKS424 estirpe foram capazes de produzir bacteriocina. Em conclusão, alguns destes isolados poderiam ser considerados como potenciais candidatos de cultura iniciadora para produtos à base de leite fermentados.


Assuntos
Bactérias , Ácido Láctico , Leite , Bacteriocinas , Produtos Fermentados do Leite
5.
Braz. J. Pharm. Sci. (Online) ; 54(1): e17533, 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1039033

RESUMO

Abstract Bacteriocins are peptides produced by various species of bacteria, especially lactic acid bacteria, which exhibit a large spectrum of action against spoilage bacteria and foodborne pathogens. Successful application of techniques for quantitative or qualitative bacteriocin determination relies not only on the sensitivity of the test-microorganisms, but also on the agar-medium employed. Cell free supernatants are routinely used to preliminary screen for antimicrobial activity of bacteria by means of the agar well diffusion method, but the supernatant may also include other molecules (such as medium components and/or intracellular compounds) accidentally released during cell free supernatant preparation, which may interfere with the assay. Reproducibility of bacteriocin activity against the same test-microorganisms is an important factor to be considered. Unfortunately, no specific information about bioassays standardization to determine bacteriocin activity is available in the literature. In this work, growth inhibition by means of the agar well diffusion assays were carried out on different agar-media showing a strong dependence on the agar-medium used, indicating that the inhibitory effects could also depend on the diffusion of exudates that are included in the cell-free supernatant. The results presented in this communication show that selection of the agar-medium is crucial for the bioassay response.


Assuntos
Bacteriocinas/análise , Ágar/análise , Ágar/farmacocinética , Agentes de Controle de Microrganismos
6.
São Paulo; s.n; s.n; 2018. 128 p. tab, graf, ilus.
Tese em Inglês | LILACS | ID: biblio-906025

RESUMO

Bacteriocins are peptides produced by various species of bacteria, especially lactic acid bacteria (LABs), which exhibit a large spectrum of action against spoilage bacteria and foodborne pathogens. However, when this bacteriocin has not been completely characterized regarding its amino acid and the nucleotide sequences of the corresponding gene, the qualified term bacteriocin-like inhibitory substance (BLIS) is recommended. In order to increase the antimicrobial activity of bacteriocins, the ability of probiotics LABs, such as Pediococcus pentosaceus, to ferment different carbon and nitrogen sources has been studied. For the development of an improved culture medium, carbon and nitrogen sources must be considered as nutrients responsible for cell growth and bacteriocin production. The best condition, after 48 h of cultivation, for growth (3.420 g/L) and for BLIS production by Pediococcus pentosaceus ATCC 43200 was in Man, Rogosa and Sharp (MRS) culture medium supplemented with 1.5% peptone, initial pH 6.0 and under the following culture conditions: anaerobiosis, 30oC and agitation of 200 rpm. Compared with control (MRS without supplement), the growth of Pediococcus was significantly lower (1.995 g/L) as well as it reduced significantly its generation time from 2.05 h (control) to 1.28 h (MRS supplemented), a reduction of approximately 62.5%. Moreover, addiction of peptone to MRS medium promoted reduction of 4 h to the Pediococcus exponential phase onset. Regarding BLIS antimicrobial activity, addition of nitrogen source to MRS medium was also quite significant. Through the agar diffusion method, BLIS showed inhibition halos between 12.50 and 19.50 mm against LABs strains (Lactobacillus sakei ATCC 15521, Lactobacillus plantarum CECT 221 and Carnobacterium piscicola CECT 4020). Against Listeria strains (Listeria innocua NCTC 111288 and Listeria seeligeri NCTC 11289), their antimicrobial activity was better detected in liquid medium assay, evaluating the minimal inhibitory concentration of 50%. BLIS was able to inhibit 60 and 100% of L. seeligeri and L. innocua, respectively, as well as, diluted 1x (v/v) in water was able to inhibit 100% growth of both Listeria. BLIS 17 showed also good results as food preservative when applied in ready-to-eat pork ham artificially contaminated with L. seeligeri in vacuum-package at 4oC during shelf life of 10 days. BLIS was able to maintain low Listeria multiplication, lower samples weight loss, low lipid peroxidation and good color parameters during samples storage. Results demonstrated the importance of optimizing the culture medium to increase microbial mass, to produce and to improve the activity of this antimicrobial molecule. Moreover, results also suggest the possible application of BLIS as a natural food preservative


Bacteriocinas são peptídeos produzidos por várias espécies de bactérias, especialmente bactérias ácido-láticas (BALs) e apresentam um amplo espectro de ação contra bactérias deteriorantes e patógenos de origem alimentar. Entretanto, quando estas bacteriocinas não foram completamente caracterizadas quanto a sequência de seus nucleotídeos e do seu gene correspondente, é recomendada a denominação de substância semelhante a bacteriocina (BLIS). Para aumentar a atividade antimicrobiana de bacteriocinas, a habilidade de BALs probióticas, como Pediococcus pentosaceus, em fermentar diferentes fontes de carbono e nitrogênio tem sido estudado. Para o desenvolvimento de um meio de cultura melhorado, fontes de carbono e nitrogênio devem ser consideradas como nutrientes responsáveis pelo crescimento celular e pela produção de bacteriocina. A melhor condição, após 48 h de cultivo, para o crescimento (3,420 g/L) e para a produção de BLIS por P. pentosaceus ATCC 43200 foi em meio de cultivo Man, Rogosa e Sharp (MRS) suplementado com 1,5% de peptona, pH inicial 6,0 e sob as seguintes condições de cultivo: anaerobiose, 30oC e agitação de 200 rpm. Comparado ao controle (MRS sem suplementação), o crescimento de Pediococcus foi significativamente menor (1,995 g/L) assim, como também, reduziu significativamente o tempo de geração de 2,05 h (controle) para 1,28 h (MRS suplementado), uma redução de aproximadamente 62,5%. Além disso, a adição de peptona ao meio MRS promoveu redução de 4 h para o início da fase exponencial de Pediococcus. Quanto a atividade antimicrobiana de BLIS, a adição de fonte de nitrogênio ao meio MRS também foi bastante significativa. Através do método ágar difusão, BLIS apresentou halos de inibição entre 12,50 a 19,50 mm contra cepas de BALs (Lactobacillus sakei ATCC 15521, Lactobacillus plantarum CECT 221 e Carnobacterium piscicola CECT 4020). Contra cepas de Listeria (Listeria innocua NCTC 11288 e Listeria seeligeri NCTC 11289), a sua atividade inibitória foi melhor detectada em meio líquido, através da determinação da concentração mínima inibitória de 50%. BLIS sem diluição foi capaz de inibir 60 e 100% de L. seeligeri e L. innocua, 15 respectivamente, assim como, diluído 1x (v/v) em água foi capaz de inibir 100% o crescimento de ambas Listeria. BLIS também apresentou bons resultados como conservante de alimento quando aplicado em presunto contaminado artificialmente com L. seeligeri e armazenado a 4oC a vácuo por 10 dias. BLIS foi capaz de manter baixa a multiplicação de Listeria, menor perda de peso das amostras, baixa peroxidação lipídica e bons parâmetros de cor durante o armazenamento das amostras. Os resultados demonstraram a importância de se otimizar meio de cultivo tanto para o aumento da massa microbiana como para a produção e melhoramento da atividade desta molécula antimicrobiana. Além disso, os resultados também sugerem a possível aplicação de BLIS como conservante natural de alimentos


Assuntos
Anti-Infecciosos/classificação , Bacteriocinas/análise , Bacteriocinas/farmacologia , Conservantes de Alimentos , Ácido Láctico/efeitos adversos , Pediococcus pentosaceus/patogenicidade
7.
Pesqui. vet. bras ; 37(11): 1261-1269, Nov. 2017.
Artigo em Português | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-895356

RESUMO

A mastite é considerada o maior problema dos animais destinados à produção de leite. Altera a sua composição e aumenta a contagem de células somáticas (CCS). Os micro-organismos envolvidos na doença podem ser origem infecciosa, como Staphylococcus aureus, ou ambiental, tal como Escherichia coli. A cultura bacteriana é uma ferramenta de diagnóstico e auxilia na detecção do patógeno causador da mastite. No entanto, fatores como fagocitose podem desencadear um resultado negativo. Quando estabelecido um programa de controle de mastite, o diagnóstico precoce e o início do tratamento adequado dos casos clínicos são fundamentais para se atingir os objetivos e seu sucesso, está relacionado com o patógeno envolvido. A indicação do tratamento de longa duração, ou terapia estendida, tem melhorado a resposta ao tratamento em casos de mastite por S. aureus, no entanto, com 30-50% de cura. Do ponto de vista do manejo dos animais, devido a alta contagiosidade deste patógeno, sua persistência no rebanho e custo em função ao tratamento, muitas vezes, o descarte do animal tem sido priorizado a fim de controlar os casos de mastite em propriedades. As medidas de controle são muito importantes para contribuir com a redução de casos de mastite por este patógeno. A indicação do tratamento intramamário associada com sistêmico tem poder efetivo em casos de mastite por E. coli, cujos casos agudos apresentam-se com sepse e toxemia. São abordados ainda aspectos de tratamentos alternativos das mastites, utilizados principalmente no processo orgânico de produção leiteira.(AU)


Mastites are considered a major problem on animals for milk production. Changes the milk composition and increases the somatic cell count (SCC). The microorganism involved in the disease may be infectious origin such as Staphylococcus aureus or environmental such as Escherichia coli. Bacterial culture is a diagnostic tool and aids in the detection of pathogenic causing masitis. However factor such as phagocytosis may result a negative result. When established a mastitis control program early diagnose and the initiation of appropriate treatment of clinical cases are fundamental for achieving the goals and success is related to the pathogen involved. The indication of treatment of long duration, or extended therapy has improved the response to the treatment in cases of matitis by S. aureus, however with 30-50% of cure. From the view point of handling of animals, given the high infectiousness of this pathogen, its persistence in the herd and cost-effective as a function of response to treatment often has prioritized the animal's discard in order to control the mastitis cases in properties. Control measures are very important to contribute the reduction of cases of mastitis symptoms by this pathogen. The indication of intramammary treatment associated with systemic has power effective in cases of mastitis by ­E. coli, whose acute cases present with sepsis and toxemia. Also address aspects of alternative treatments of mastitis, mainly used in the organic process of milk production.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Própole/uso terapêutico , Bacteriocinas/uso terapêutico , Medicamentos Fitoterápicos , Homeopatia/veterinária , Mastite Bovina/prevenção & controle , Mastite Bovina/tratamento farmacológico
8.
São Paulo; s.n; s.n; 2017. 197p p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-874973

RESUMO

Bacteriocins are antimicrobial peptides ribosomally synthesized by various bacteria. In particular, the bacteriocins produced by lactic acid bacteria have recently received great attention due to their wide applicability and also because they are produced by microorganisms safe for human consumption. There are numerous studies reporting bacteriocin production by different lactic acid bacteria, as well as its optimization by using alternative substrate. Some of these studies point to milk/cheese whey as a potential low-cost source for the cultivation of lactic acid bacteria and the production of biocomposites, such as bacteriocins. Several researches refer to the production of bacteriocins, mainly nisin. On the other hand, the production of bacteriocins by Lactobacillus plantarum strains still limited. In this context, the present work first studied the growth and production of bacteriocin by L. plantarum strain ST16Pa when cultivated in Man, Rogosa and Sharpe (MRS) broth with and without inulin supplementation incubated under shaken and stationary conditions. The results indicated that this strain has higher growth when cultured in aerobiosis; however, the highest bacteriocin activity is obtained in stationary condition. The stability and partitioning of bacteriocin from the fermented MRS broth of L. plantarum ST16Pa in the PEG/NaPA/electrolytes aqueous two-phase systems was also studied. After 1 h in temperatures from 50 °C to 80 °C and pH from 3.0 to 8.0, the produced bacteriocin remained stable. In addition, the proposed partition system has proved to be an economical alternative for the recovery and purification of this biomolecule. Motivated by the trend in use industrial by products aiming the production of high value-added biocomposites, we investigated the performance of milk/cheese whey as alternative substrate for L. plantarum ST16Pa growth and for the production of antimicrobial biomolecules by this strain. For this purpose, the study was divided in two steps, being the first developed using whey powder supplemented according to the Plackett & Burman experimental design, with 12 trials and 4 central points. Although the proposed design was not the ideal statistical tool to optimize the bacteriocin ST16Pa production, through it was possible to obtain a formulation, which resulted in greater inhibition zones when compared with previous date reported by other authors using the same strain cultured in cheese whey. Later, still using L. plantarum strain ST16Pa, we investigated the production of bacteriocin and lactate in fresh cheese whey previously hydrolyzed by Flavourzyme or Lactozym. The cultures were optimized by supplementing this medium with different concentrations of soybean flour, which were incubated under aerobic and microaerophilic/anaerobic conditions. The highest values of bacteriocin activity (7,367.23 AU/mL) and lactate yield (Ylactate/lactose = 1.39 g/g) were obtained under anaerobic conditions using 10 g/L of soybean flour to supplement cheese whey prehydrolyzed with Flavourzyme during 3 h. Finally, the cell-free supernatant resulted from this cultivation was applied on the surfaces of chicken breast fillets artificially contaminated with Enterococcus faecium 711, showing biopreservative efficiency during 7 days of storage under refrigeration.


Bacteriocinas são peptídeos antimicrobianos sintetizados por diversas bactérias. Em particular, as bacteriocinas produzidas por bactérias ácido-láticas têm recebido crescente destaque devido sua ampla aplicabilidade e também por serem produzidas por microorganismos seguros para o consumo humano. Inúmeros estudos relatam a produção de bacteriocina por diversas bactérias ácido-láticas, bem como a otimização da produção desta biomolécula utilizando fontes alternativas de substrato. Alguns destes estudos apontam o soro de leite/queijo como uma fonte potencial e de baixo custo para o cultivo de bactérias láticas e produção de biocompostos, tais como bacteriocinas. Diversas pesquisas se referem à produção de bacteriocinas, principalmente a nisina. Por outro lado, a produção de bacteriocinas por cepas de Lactobacillus plantarum ainda é limitada. Neste âmbito, o presente trabalho estudou, primeiramente, o crescimento e produção de bacteriocina pela cepa L. plantarum ST16Pa quando cultivada em caldo Man, Rogosa e Sharpe (MRS) com e sem suplementação de inulina sob condições aeradas e sem agitação. Os resultados indicaram que este micro-organismo tem maior crescimento quando cultivado em aerobiose, entretanto, os maiores valores de atividade da bacteriocina produzida foram obtidos em cultivos não agitados. Ainda utilizando MRS para o cultivo desta cepa, investigou-se a estabilidade e partição da bacteriocina em sistema aquoso de duas fases do tipo PEG/NaPA/electrólitos. Após 1 h submetida à temperaturas entre 50 °C e 80 °C e pH entre 3,0 e 8,0, a bacteriocina produzida permaneceu estável. Além disso, o sistema de partição proposto demonstrou ser uma alternativa econômica para recuperação e purificação desta biomolécula. Motivados pela tendência do uso de subprodutos industriais para a produção de biocompostos de alto valor agregado, investigou-se o desempenho do soro de leite/queijo como substrato alternativo para o crescimento de L. plantarum ST16Pa e a consequente produção de biomoléculas antimicrobianas por esta cepa. O estudo foi divido em duas etapas, sendo a primeira desenvolvida utilizando soro de leite em pó suplementado de acordo com o delineamento experimental Plackett & Burman, com 12 ensaios e mais 4 pontos centrais. Embora o delineamento proposto não tenha sido a ferramenta estatística ideal para alcançar a otimização da produção de bacteriocina ST16Pa, através do mesmo foi possível obter uma formulação, a qual gerou maiores halos de inibição quando comparados com resultados prévios reportados por outros autores utilizando a mesma cepa cultivada em soro de queijo. Posteriormente, ainda utilizando L. plantarum ST16Pa, investigou-se a produção de bacteriocina e lactato em soro de queijo fresco previamente hidrolisado por Flavourzyme ou Lactozym. Os cultivos foram otimizado através da suplementação deste meio de cultura com diferentes concentrações de farinha de soja, os quais foram incubados sob condições aeróbicas e microaerofílicas/anaeróbicas. Os maiores valores de atividade da bacteriocina (7367,23 AU/mL) e rendimento de lactato (Ylactate/lactose = 1,39 g/g) foram obtidos sob condições anaeróbicas utilizando 10 g/L de farinha de soja para suplementar o soro de queijo hidrolizado por Flavourzyme durante 3 h. Por fim, o sobrenadante resultante deste cultivo foi aplicado sobre a superfície de filés de peito de frango artificialmente contaminados por Enterococcus faecium 711, demonstrando eficiência como bioconservante durante 7 dias de armazenamento sob refrigeração.


Assuntos
Queijo/efeitos adversos , Otimização , Soro do Leite/efeitos adversos , Bacteriocinas/análise , Lactobacillus plantarum/classificação
9.
São Paulo; s.n; s.n; 2017. 132 p p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-859191

RESUMO

A bactéria Lactococcus lactis subsp. lactis CECT-4434 foi empregada para investigar o efeito da composição do meio de cultivo na produção biotecnológica de biossurfactante e, adicionalmente bacteriocina. Utilizou-se resíduos agroindustriais, tais como soro de leite e vinhaça de uva, para formular meios de cultivos mais econômicos e naturais, suplementados sacarose e extrato de levedura. Um planejamento fatorial fracionado 24, com adição de três ensaios nos pontos centrais foi empregado para avaliar a influência destas variáveis. A produção de biossurfactante foi influenciada positivamente pela concentração soro de leite, onde 15 % deste demonstrou melhor resultado reduzindo a tensão superficial em cerca de 18,1 mN/m, alcançando produção máxima de biossurfactante equivalente em surfactina de 11,02 mg/L. Em relação à síntese de bacteriocina, a fonte de carbono adicional (sacarose) interferiu de forma antagonista, ou seja, quanto menor a concentração de sacarose, maior a síntese de bacteriocina (com aumento da zona de inibição em 14,2% contra Staphylococcus aureus CECT-239). Observou-se que o ensaio conduzido em biorreator, sob microaeração com 5% de oxigênio dissolvido, promoveu maior produção de biossurfactante (11,6 mg/L) quando comparados aos estudos conduzidos com maior concentração de oxigênio entre 30 a 100%, com produção em média de 2,3 mg/mL. Destaca-se que nenhum estudo da influência do oxigênio dissolvido, principalmente em microaerofilia, para a produção de biossurfactante por bactérias láticas já havia sido realizado. Ademais, o biossurfactante produzido se mostrou altamente estável frente a valores extremos de pH e temperatura, além de demonstrar notável propriedade antimicrobiana e antiadesiva, inibindo Listeria monocytogenes NADC 2045 e Salmonella entérica CECT-724 em mais de 90%.


Lactococcus lactis subsp. lactis CECT-4434 was used to investigate the effect of the composition of the culture media on the biotechnological production of biosurfactant and bacteriocin additionally. Agroindustrial residues, such as whey and grape vinasse, were used to formulate more economical and natural culture media, supplemented with sucrose and yeast extract. A fractional factorial design 24, with addition of three runs at the central points was used to evaluate the influence of these variables. The biosurfactant production was positively influenced by the concentration of whey, where 15% showed a better result reducing the surface tension by 18.1 mN/m, reaching a maximum production of biosurfactant equivalent in surfactin of 11.02 mg/L. In relation to bacteriocin synthesis, the sucrose interfered in an antagonistic way, that is, the lower the sucrose concentration, the greater the bacteriocin synthesis (with an increase in the zone of inhibition in 14.2% against Staphylococcus aureus CECT-239). It was observed that the bioreactor conducted under microaeration with 5% dissolved oxygen promoted a higher biosurfactant production (11.6 mg/L) when compared to studies conducted with a higher concentration of oxygen between 30 and 100%, with production on average 2.3 mg/mL. It is noteworthy that no study of the influence of dissolved oxygen, mainly in microaerophilic, for the biosurfactant production by lactic acid bacteria had already been carried out. In addition, the biosurfactant produced proved to be highly stable against extreme values of pH and temperature, and demonstrated remarkable antimicrobial and antiadhesive properties, inhibiting Listeria monocytogenes NADC 2045 and Salmonella entérica CECT-724 in more than 90%.


Assuntos
Biotecnologia , Lactococcus lactis/metabolismo , Resíduos/análise , Bacteriocinas/farmacologia , Oxigenação/classificação , Salmonella enterica
10.
Braz. j. microbiol ; 46(3): 825-834, July-Sept. 2015. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-755824

RESUMO

Lactobacillus sakei subsp. sakei 2a is a bacteriocinogenic lactic acid bacterium isolated from Brazilian pork sausage, capable of inhibiting the growth of microbial pathogens, mainly Listeria monocytogenes. In order to optimize bacteriocin production for industrial applications, this study evaluated the effect of supplementation of MRS broth with glucose, Tween 20, Tween 80, sodium citrate, potassium chloride and cysteine, and effect of the initial pH and temperature of incubation of the medium on production of bacteriocins by L. sakei 2a. Adding glucose and Tween 20 to the medium, an initial pH of 5.0 or 5.5, and incubation temperatures of 25 °C or 30 °C resulted to the highest bacteriocin yields. Thus, a 24 factorial design with the four variables was performed, and statistical analysis showed that it was an adequate model (R2 = 0.8296). In the studied range, the four parameters significantly influenced bacteriocin production, with the maximum yield produced at an initial pH between 5.5 and 7.0, a temperature between 25 and 30 °C and supplementation of the MRS broth with glucose from 3.25 to 6.0 g L−1 and Tween 20 from 0.575 to 1.15% (v/v). Response Surface Methodology analysis indicated that the highest bacteriocin production (12800 AU mL−1) occurred in the MRS broth supplemented with 5.5 g L−1 glucose and 1.05% Tween 20 at an initial pH of 6.28 and an incubation temperature of 25 °C. The amount of bacteriocin produced in commercial MRS broths under the same conditions was only 5600AU mL−1.

.


Assuntos
Antibacterianos/metabolismo , Bacteriocinas/metabolismo , Meios de Cultura/metabolismo , Lactobacillus/crescimento & desenvolvimento , Lactobacillus/metabolismo , Brasil , Glucose/metabolismo , Lactobacillus/classificação , Testes de Sensibilidade Microbiana , Polissorbatos/metabolismo , Carne Vermelha/microbiologia , Propriedades de Superfície , Temperatura
11.
Int. arch. otorhinolaryngol. (Impr.) ; 19(2): 171-175, Apr-Jun/2015.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-747141

RESUMO

Introduction Analysis of the suppression effect is a simple method to evaluate cochlear status and central auditory mechanisms and, more specifically, the medial olivocochlear system. This structure may be involved in the generation of mechanisms that cause tinnitus and in the pathophysiology of tinnitus in patients with tinnitus and normal hearing. Objective To review the literature of the etiology of tinnitus on the lights of otoacoustic emissions in patients with normal hearing. Data Synthesis Individuals with tinnitus and normal hearing have a higher prevalence of alterations in transient-evoked otoacoustic emissions and distortion-product otoacoustic emissions than normal subjects. This fact suggests that dysfunctions of the outer hair cells (OHCs) might be important in the generation of the tinnitus; however, this feature is not always present in those who have the symptoms of tinnitus. Final Comments These findings suggest that OHC dysfunction is not necessary for tinnitus development—that is, there might be mechanisms other than OHC damage in the tinnitus development. On the other hand, OHC dysfunction alone is not sufficient to cause the symptom, because a great many individuals with OHC dysfunction did not complain about tinnitus. .


Assuntos
Anti-Infecciosos/metabolismo , Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/metabolismo , Bacteriocinas/metabolismo , Receptores de Superfície Celular/metabolismo , Anti-Infecciosos/farmacologia , Endocitose , Proteínas de Escherichia coli/metabolismo , Escherichia coli/metabolismo , Modelos Moleculares , Conformação Proteica
12.
Braz. j. microbiol ; 46(1): 201-206, 05/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-748231

RESUMO

Listeria monocytogenes is a pathogen frequently found in dairy products. Its control in fresh cheeses is difficult, due to the psychrotrophic properties and salt tolerance. Bacteriocinogenic lactic acid bacteria (LAB) with proven in vitro antilisterial activity can be an innovative technological approach but their application needs to be evaluated by means of in situ tests. In this study, a novel bacteriocinogenic Lactococcus lactis strain (Lc. lactis DF4Mi), isolated from raw goat milk, was tested for control of growth of L. monocytogenes in artificially contaminated fresh Minas type goat cheese during storage under refrigeration. A bacteriostatic effect was achieved, and counts after 10 days were 3 log lower than in control cheeses with no added LAB. However, this effect did not differ significantly from that obtained with a non-bacteriocinogenic Lc. lactis strain. Addition of nisin (12.5 mg/kg) caused a rapid decrease in the number of viable L. monocytogenes in the cheeses, suggesting that further studies with the purified bacteriocin DF4Mi may open new possibilities for this strain as biopreservative in dairy products.


Assuntos
Animais , Antibiose , Bacteriocinas/metabolismo , Queijo/microbiologia , Cabras , Lactococcus lactis/isolamento & purificação , Listeria monocytogenes/efeitos dos fármacos , Leite/microbiologia , Carga Bacteriana , Conservação de Alimentos/métodos , Inocuidade dos Alimentos/métodos , Lactococcus lactis/metabolismo
13.
Rev. Asoc. Odontol. Argent ; 103(1): 4-8, mar.2015. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-758491

RESUMO

Aislar, purificar y conservar cepas de Streptococcus spp. y lactobacillus spp. de la cavidad bucal y enfrentarlas "in vitro" a bacterias lácticas. Materiales y métodos: se seleccionaron individuos con caries y se recolectaron muestras de saliva. Para recuperar Streptococcus spp. se empleó el medio Mitis Salivarius (Difco, Detroit, MI, Estados Unidos) y para Lactobacillus spp. se usó Rogosa (Blokar Diagnostics, Beauvais, Francia). Como cepas productoras de bacteriocinas se utilizaron 7 cepas de Lactococcus lactis subsp. lactis, 2 de Leuconostoc mesenteroides y 1 de Lactococcus lactis subsp. diacetylactis. La actividad antagónica de las bacterias lácticas al crecimiento in vitro de bacterias cariogénicas se determinó con el método de difusión en agar. Resultado: el desarrollo y la multiplicación de las cepas de Streptococcus spp. de origen bucal ensayadas se vieron afectados por la presencia de metabolitos generados por las cepas de Lactococcus lactis subsp. lactis. Conclusión: el crecimiento de las cepas de Streptococcus subsp. fue inhibido por efecto de L. lactis subsp. lactis...


Assuntos
Humanos , Masculino , Adolescente , Adulto , Feminino , Adulto Jovem , Antibiose/fisiologia , Cárie Dentária/microbiologia , Lactococcus lactis/isolamento & purificação , Lactococcus lactis/crescimento & desenvolvimento , Saliva/microbiologia , Streptococcus/classificação , Argentina , Bacteriocinas/isolamento & purificação , Contagem de Colônia Microbiana , Meios de Cultura , Técnicas In Vitro
14.
Rev. latinoam. enferm ; 23(1): 169-179, Jan-Feb/2015. graf
Artigo em Inglês | LILACS, BDENF - Enfermagem | ID: lil-742029

RESUMO

OBJECTIVES: to identify characteristics related to the interruption of nurses in professional practice, as well as to assess the implications of interruptions for patient safety. METHOD: integrative literature review. The following databases were searched: Pubmed/Medline, LILACS, SciELO and Cochrane Library, using the descriptors interruptions and patient safety. An initial date was not established, but the final date was December 31, 2013. A total of 29 papers met the inclusion criteria. RESULTS: all the papers included describe interruptions as a harmful factor for patient safety. Data analysis revealed three relevant categories: characteristics of interruptions, implications for patient safety, and interventions to minimize interruptions. CONCLUSION: interruptions favor the occurrence of errors in the health field. Therefore, there is a need for further studies to understand such a phenomenon and its effects on clinical practice. .


OBJETIVOS: identificar características relacionadas à interrupção de enfermeiros em sua prática profissional, bem como avaliar as implicações para a segurança do paciente. MÉTODO: foi realizada revisão de literatura do tipo integrativa, com busca nas bases de dados Pubmed/Medline, LILACS, SciELO e Biblioteca Cochrane, utilizando os descritores interruptions e patient safety. A data inicial não foi limitada e a data final foi 31 de dezembro de 2013, identificando-se 29 artigos que atenderam aos critérios de inclusão. RESULTADOS: todos os artigos revisados descreveram a interrupção como fator prejudicial à segurança do paciente. A análise destes estudos revelou três categorias relevantes: características da interrupção, implicações da interrupção para a segurança do paciente e intervenções para minimizar as interrupções. CONCLUSÃO: a interrupção favorece a ocorrência de erros na saúde. Assim, notou-se necessidade de novas pesquisas para compreender tal fenômeno e seus efeitos na prática clínica. .


OBJETIVOS: identificar características relacionadas a la interrupción que sufren los enfermeros en su práctica profesional, así como evaluar las implicaciones para la seguridad del paciente. MÉTODO: fue realizada una revisión de literatura de tipo integradora, con búsqueda en las bases de datos Pubmed/Medline, LILACS, SciELO y Biblioteca Cochrane, utilizando los descriptores interruptions y patient safety. La fecha inicial no fue limitada y la fecha final fue 31 de diciembre de 2013, se identificaron 29 artículos que atendieran a los criterios de inclusión. RESULTADOS: todos los artículos revisados describieron la interrupción como un factor perjudicial a la seguridad del paciente. El análisis de estos estudios reveló tres categorías relevantes: características de la interrupción, implicaciones de la interrupción para la seguridad del paciente e intervenciones para minimizar las interrupciones. CONCLUSIÓN: la interrupción favorece la ocurrencia de errores en la salud. Así, se notó la necesidad de realizar nuevas investigaciones para comprender ese fenómeno y los efectos del mismo en la práctica clínica. .


Assuntos
Animais , Bacteriocinas/biossíntese , Clima Desértico , Leuconostoc/isolamento & purificação , Leuconostoc/metabolismo , Leite/química , Leite/microbiologia , Proteômica/métodos , Argélia , Anti-Infecciosos/farmacologia , Bactérias/efeitos dos fármacos , Camelus , Fermentação/efeitos dos fármacos , Testes de Sensibilidade Microbiana , Fenótipo , Filogenia , Especificidade da Espécie , Espectrometria de Massas por Ionização e Dessorção a Laser Assistida por Matriz
15.
Braz. j. microbiol ; 45(4): 1541-1550, Oct.-Dec. 2014. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-741311

RESUMO

Lactic acid bacteria capable of producing bacteriocins and presenting probiotic potential open innovative technological applications in the dairy industry. In this study, a bacteriocinogenic strain (Lactococcus lactis subsp. lactis DF4Mi) was isolated from goat milk, and studied for its antimicrobial activity. The bacteriocin presented a broad spectrum of activity, was sensitive to proteolytic enzymes, resistant to heat and pH extremes, and not affected by the presence of SDS, Tween 20, Tween 80, EDTA or NaCl. Bacteriocin production was dependent on the components of the culture media, especially nitrogen source and salts. When tested by PCR, the bacteriocin gene presented 100% homology to nisin Z gene. These properties indicate that this L. lactis subsp. lactis DF4Mi can be used for enhancement of dairy foods safety and quality.


Assuntos
Animais , Antibacterianos/metabolismo , Bacteriocinas/metabolismo , Lactococcus lactis/metabolismo , Leite/microbiologia , Sequência de Aminoácidos , Antibacterianos/química , Proteínas de Bactérias/química , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Bacteriocinas/química , Bacteriocinas/genética , Meios de Cultura/química , Detergentes , DNA Bacteriano/genética , Cabras , Concentração de Íons de Hidrogênio , Lactococcus lactis/crescimento & desenvolvimento , Dados de Sequência Molecular , Reação em Cadeia da Polimerase , Estabilidade Proteica , Análise de Sequência de DNA , Homologia de Sequência de Aminoácidos , Cloreto de Sódio/metabolismo , Temperatura
16.
Braz. j. microbiol ; 45(3): 1007-1015, July-Sept. 2014. ilus, graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-727032

RESUMO

In the present study, a bacterium isolated from Marcha- a herbal cake used as traditional starter culture to ferment local wine in North East India, was evaluated for bacteriocin like inhibitory substance production and was tested against six food borne/spoilage causing pathogens viz. Listeria monocytogenes MTCC 839, Bacillus subtilis MTCC 121, Clostridium perfringens MTCC 450, Staphylococcus aureus, Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides MTCC 107 by using bit/disc method followed by well diffusion method. The bacterial isolate was identified as Brevibacillus borstelensis on the basis of phenotypic, biochemical and molecular characteristics using 16Sr RNA gene technique. Bacteriocin like inhibitory substance produced by Brevibacillus borstelensis AG1 was purified by gel exclusion chromatography. The molecular mass of the Brevibacillus borstelensis AG1 was found to be 12 kDa. Purified bacteriocin like inhibitory substance of Brevibacillus borstelensis was further characterized by studying the effect of temperature, pH, proteolytic enzyme and stability. Bacteriocin like inhibitory substance was found to be thermostable upto 100 °C, active at neutral pH, sensitive to trypsin, and partially stable till third week of storage thus showing a bright prospective to be used as a potential food biopreservative.


Assuntos
Bacteriocinas/isolamento & purificação , Bacteriocinas/farmacologia , Brevibacillus/isolamento & purificação , Brevibacillus/metabolismo , Bactérias Gram-Positivas/efeitos dos fármacos , Bacteriocinas/química , Cromatografia em Gel , Análise por Conglomerados , DNA Bacteriano/química , DNA Bacteriano/genética , DNA Ribossômico/química , DNA Ribossômico/genética , Microbiologia de Alimentos , Índia , Testes de Sensibilidade Microbiana , Dados de Sequência Molecular , Peso Molecular , Filogenia , Estabilidade Proteica/efeitos da radiação , /genética , Análise de Sequência de DNA , Temperatura
17.
Braz. j. microbiol ; 45(3): 1047-1054, July-Sept. 2014. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-727037

RESUMO

Lactic acid bacteria capable of producing bacteriocins and presenting probiotic potential open innovative technological applications in the dairy industry. In this study, a bacteriocinogenic strain (Lactococcus lactis subsp. lactis DF4Mi) was isolated from goat milk, and studied for its probiotic potential. Lc. lactis DF4Mi was resistant to acidic pH and oxbile, presented co-aggregation with Listeria monocytogenes, and was not affected by several drugs from different generic groups, being sensitive to most tested antibiotics. These properties indicate that this Lc. lactis strain can be used for enhancement of dairy foods safety and quality, in combination with potential probiotic properties.


Assuntos
Animais , Bacteriocinas/metabolismo , Cabras , Lactococcus lactis/isolamento & purificação , Lactococcus lactis/metabolismo , Leite/microbiologia , Probióticos , Aderência Bacteriana , Bile/metabolismo , Inocuidade dos Alimentos/métodos , Concentração de Íons de Hidrogênio , Lactococcus lactis/efeitos dos fármacos , Listeria monocytogenes/fisiologia , Viabilidade Microbiana/efeitos dos fármacos
18.
Braz. j. microbiol ; 44(4): 1199-1206, Oct.-Dec. 2013. ilus, graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-705261

RESUMO

Lactic acid bacteria are non pathogenic organism widely distributed in nature typically involved in a large number of spontaneous food fermentation. The purpose of this study was to characterize the bacteriocinogenic lactobacilli from fermented idli batter which can find application in biopreservation and biomedicine. Eight most promising lactobacilli were chosen from twenty two isolates based on their spectrum of activity against other lactic acid bacteria and pathogens. The eight lactobacilli were characterized based on the various classical phenotypic tests, physiological tests and biochemical tests including various carbohydrate utilization profiles. All isolates were homo fermentative, catalase, and gelatin negative. Molecular characterization was performed by RAPD, 16S rRNA analysis, 16S ARDRA, and Multiplex PCR for species identification. RAPD was carried out using the primer R2 and M13. Five different clusters were obtained based on RAPD indicating strain level variation. 16S rRNA analysis showed 99 to 100% homology towards Lactobacillus plantarum. The restriction digestion pattern was similar for all the isolates with the restriction enzyme AluI. The subspecies were identified by performing Multiplex PCR using species specific primer. Among the five clusters, three clusters were clearly identified as Lactobacillus plantarum subsp. plantarum, Lactobacillus pentosus, and Lactobacillus plantarum subsp. argentoratensis.


Assuntos
Bacteriocinas/metabolismo , Microbiologia de Alimentos , Lactobacillus/classificação , Lactobacillus/metabolismo , Técnicas de Tipagem Bacteriana , Metabolismo dos Carboidratos , Análise por Conglomerados , DNA Bacteriano/química , DNA Bacteriano/genética , DNA Ribossômico/química , DNA Ribossômico/genética , Enzimas/análise , Lactobacillus plantarum , Lactobacillus/genética , Lactobacillus/isolamento & purificação , Dados de Sequência Molecular , Tipagem Molecular , Reação em Cadeia da Polimerase Multiplex , Filogenia , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA Polimórfico , /genética , Análise de Sequência de DNA , Homologia de Sequência do Ácido Nucleico
19.
Braz. j. microbiol ; 44(4): 1291-1298, Oct.-Dec. 2013. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-705286

RESUMO

The amidated analog of Plantaricin149, an antimicrobial peptide from Lactobacillus plantarum NRIC 149, directly interacts with negatively charged liposomes and bacterial membranes, leading to their lysis. In this study, four Pln149-analogs were synthesized with different hydrophobic groups at their N-terminus with the goal of evaluating the effect of the modifications at this region in the peptide's antimicrobial properties. The interaction of these peptides with membrane models, surface activity, their hemolytic effect on red blood cells, and antibacterial activity against microorganisms were evaluated. The analogs presented similar action of Plantaricin149a; three of them with no hemolytic effect (< 5%) until 0.5 mM, in addition to the induction of a helical element when binding to negative liposomes. The N-terminus difference between the analogs and Plantaricin149a retained the antibacterial effect on S. aureus and P. aeruginosa for all peptides (MIC50 of 19 µM and 155 µM to Plantaricin149a, respectively) but resulted in a different mechanism of action against the microorganisms, that was bactericidal for Plantaricin149a and bacteriostatic for the analogs. This difference was confirmed by a reduction in leakage action for the analogs. The lytic activity of Plantaricin149a is suggested to be a result of the peptide-lipid interactions from the amphipathic helix and the hydrophobic residues at the N-terminus of the antimicrobial peptide.


Assuntos
Peptídeos Catiônicos Antimicrobianos/metabolismo , Bactérias/efeitos dos fármacos , Bacteriocinas/metabolismo , Membrana Celular/efeitos dos fármacos , Bicamadas Lipídicas/metabolismo , Peptídeos Catiônicos Antimicrobianos/genética , Bacteriocinas/genética , Lactobacillus plantarum/metabolismo , Testes de Sensibilidade Microbiana , Pseudomonas aeruginosa/efeitos dos fármacos , Staphylococcus aureus/efeitos dos fármacos
20.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 65(5): 1537-1544, out. 2013. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-689774

RESUMO

The production of Toxic Shock Syndrome Toxin-1 (TSST-1), enterotoxins and bacteriocin-like substances was evaluated in 95 strains of Staphylococcus aureus recovered from raw bovine milk (n=31) and from food samples involved in staphylococcal food poisoning (n=64). Enterotoxigenicity tests with the membrane over agar associated to optimal sensibility plate assays were performed and showed that 96.77% of strains recovered from milk and 95.31% from food samples produced enterotoxins A, B, C, D or TSST-1. Reference strains S. epidermidis, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, Enterococcus faecalis and Bacteroides fragilis were used as indicator bacteria in the antagonistic assays, the first five being sensitive to antagonistic substances. Brain heart infusion agar, in pH values ranging from 5.0 to 7.0 in aerobic atmosphere showed to be the optimum condition for antagonistic activity as evaluated with the best producer strains against the most sensitive indicator bacterium, L. monocytogenes. Sensitivity to enzymes confirmed the proteinaceous nature of these substances. Neither bacteriophage activity nor fatty acids were detected and the antagonistic activity was not due to residual chloroform. Results did not establish a positive correlation between the bacteriocinogenic profile and toxigenicity in the tested S. aureus strains.


Avaliou-se a produção de toxina-1 da síndrome do choque tóxico (TSST-1), enterotoxinas e substâncias antagonistas tipo bacteriocina em 95 amostras de Staphylococcus aureus recuperadas de leite bovino in natura (n=31) e de alimentos envolvidos em surto de intoxicação (n=64). Testes de enterotoxigenicidade pelo método da membrana sobre ágar, associado à técnica da sensibilidade ótima em placa, revelaram que 96,77% das amostras do leite e 95,31% daquelas dos alimentos produziram enterotoxinas estafilocócicas tipos A, B, C, D ou TSST-1. Nos ensaios de antagonismo, foram utilizadas como reveladoras amostras de referência de S. epidermidis, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Enterococcus faecalis e Bacteroides fragilis, sendo as cinco primeiras sensíveis às substâncias produzidas. As condições ótimas para a atividade antagonista, avaliadas com as melhores produtoras contra a indicadora mais sensível, L. monocytogenes, foram observadas em aerobiose, em ágar infuso de cérebro-coração, nos valores de pH entre 5,0 e 7,0. A sensibilidade a enzimas confirmou a natureza proteica destas substâncias. Não foram detectadas atividades de bacteriófagos nem de ácidos graxos, e a atividade antagonista não foi devido ao clorofórmio residual. Os resultados não mostraram correlação entre o perfil bacteriocinogênico e a toxigenicidade nas amostras de Staphylococcus testadas.


Assuntos
Animais , Bovinos , Bacteriocinas , Bacteriocinas/análise , Choque Séptico/veterinária , Doenças Transmitidas por Alimentos/veterinária , Enterotoxinas/administração & dosagem , Enterotoxinas/análise , Listeria monocytogenes , Mastite Bovina , Alimentos , Staphylococcus aureus
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