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Braz. j. microbiol ; 49(1): 200-206, Jan.-Mar. 2018. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-889189


ABSTRACT Bacteroides fragilis is the strict anaerobic bacteria most commonly found in human infections, and has a high mortality rate. Among other virulence factors, the remarkable ability to acquire resistance to a variety of antimicrobial agents and to tolerate nanomolar concentrations of oxygen explains in part their success in causing infection and colonizing the mucosa. Much attention has been given to genes related to multiple drug resistance derived from plasmids, integrons or transposon, but such genes are also detected in chromosomal systems, like the mar (multiple antibiotic resistance) locus, that confer resistance to a range of drugs. Regulators like MarR, that control expression of the locus mar, also regulate resistance to organic solvents, disinfectants and oxygen reactive species are important players in these events. Strains derived from the parental strain 638R, with mutations in the genes hereby known as marRI (BF638R_3159) and marRII (BF638R_3706) were constructed by gene disruption using a suicide plasmid. Phenotypic response of the mutant strains to hydrogen peroxide, cell survival assay against exposure to oxygen, biofilm formation, resistance to bile salts and resistance to antibiotics was evaluated. The results showed that the mutant strains exhibit statistically significant differences in their response to oxygen stress, but no changes were observed in survival when exposed to bile salts. Biofilm formation was not affected by either gene disruption. Both mutant strains however, became more sensitive to multiple antimicrobial drugs tested. This indicates that as observed in other bacterial species, MarR are an important resistance mechanism in B. fragilis.

Humanos , Antibacterianos/farmacologia , Proteínas de Bactérias/genética , Bacteroides fragilis/efeitos dos fármacos , Bacteroides fragilis/genética , Infecções por Bacteroides/microbiologia , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Bacteroides fragilis/isolamento & purificação , Bacteroides fragilis/metabolismo , Regulação Bacteriana da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Inativação Gênica , Testes de Sensibilidade Microbiana , Proteínas Repressoras/metabolismo
Braz. j. med. biol. res ; 49(12): e5805, 2016. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-828178


Machado-Joseph disease (MJD) or spinocerebellar ataxia type 3 (SCA3) is an autosomal dominant neurodegenerative disorder caused by expansion of the polyglutamine domain of the ataxin-3 (ATX3) protein. MJD/SCA3 is the most frequent autosomal dominant ataxia in many countries. The mechanism underlying MJD/SCA3 is thought to be mainly related to protein misfolding and aggregation leading to neuronal dysfunction followed by cell death. Currently, there are no effective treatments for patients with MJD/SCA3. Here, we report on the potential use of lithium carbonate and coenzyme Q10 to reduce cell death caused by the expanded ATX3 in cell culture. Cell viability and apoptosis were evaluated by MTT assay and by flow cytometry after staining with annexin V-FITC/propidium iodide. Treatment with lithium carbonate and coenzyme Q10 led to a significant increase in viability of cells expressing expanded ATX3 (Q84). In addition, we found that the increase in cell viability resulted from a significant reduction in the proportion of apoptotic cells. Furthermore, there was a significant change in the expanded ATX3 monomer/aggregate ratio after lithium carbonate and coenzyme Q10 treatment, with an increase in the monomer fraction and decrease in aggregates. The safety and tolerance of both drugs are well established; thus, our results indicate that lithium carbonate and coenzyme Q10 are good candidates for further in vivo therapeutic trials.

Humanos , Ataxina-3/efeitos dos fármacos , Morte Celular/efeitos dos fármacos , Carbonato de Lítio/farmacologia , Doença de Machado-Joseph , Proteínas Repressoras/efeitos dos fármacos , Ubiquinona/análogos & derivados , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Doença de Machado-Joseph/tratamento farmacológico , Ubiquinona/farmacologia
Radiol. bras ; 48(2): 93-100, Mar-Apr/2015. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-746612


Objective: To present a detailed explanation on the processing of magnetic susceptibility weighted imaging (SWI), demonstrating the effects of echo time and sensitive mask on the differentiation between calcification and hemosiderin. Materials and Methods: Computed tomography and magnetic resonance (magnitude and phase) images of six patients (age range 41– 54 years; four men) were retrospectively selected. The SWI images processing was performed using the Matlab’s own routine. Results: Four out of the six patients showed calcifications at computed tomography images and their SWI images demonstrated hyperintense signal at the calcification regions. The other patients did not show any calcifications at computed tomography, and SWI revealed the presence of hemosiderin deposits with hypointense signal. Conclusion: The selection of echo time and of the mask may change all the information on SWI images, and compromise the diagnostic reliability. Amongst the possible masks, the authors highlight that the sigmoid mask allows for contrasting calcifications and hemosiderin on a single SWI image. .

Objetivo: Expor em detalhes o processamento da imagem ponderada em suscetibilidade magnética (susceptibility weighted imaging – SWI), destacando o efeito da escolha do tempo de eco e da máscara sensível à diferenciação de calcificação e hemossiderina simultaneamente. Materiais e Métodos: Imagens de tomografia computadorizada e por ressonância magnética (magnitude e fase) foram selecionadas, retrospectivamente, de seis pacientes (idades entre 41 e 54 anos; quatro homens). O processamento das imagens SWI foi realizado em rotina própria no programa Matlab. Resultados: Dos seis pacientes estudados, quatro apresentaram calcificações nas imagens de tomografia computadorizada. Nestes, as imagens SWI mostraram sinal hiperintenso para as regiões de calcificações. Os outros dois pacientes não apresentaram calcificações nas imagens de tomografia computadorizada e apresentaram depósito de hemossiderina com sinal hipointenso na imagem SWI. Conclusão: A escolha do tempo de eco e da máscara pode alterar toda a informação da imagem SWI e comprometer a confiabilidade diagnóstica. Dentre as possíveis máscaras, destacamos que a máscara sigmoide permite contrastar calcificação e hemossiderina em uma única imagem SWI. .

Animais , Camundongos , Processamento Alternativo/genética , Proteínas de Transporte/genética , Proteínas de Transporte/metabolismo , Proteínas Nucleares/genética , Proteínas Nucleares/metabolismo , Proteína de Ligação a Regiões Ricas em Polipirimidinas/genética , Tropomiosina/genética , Sequência de Bases , Sítios de Ligação , Primers do DNA , Éxons , Vetores Genéticos , Ligantes , Fases de Leitura Aberta , Reação em Cadeia da Polimerase , Proteína de Ligação a Regiões Ricas em Polipirimidinas/metabolismo , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Proteínas Repressoras/metabolismo , Transfecção
Cad. saúde pública ; 31(4): 722-732, 04/2015.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-744848


We aimed to verify doctor's perception of the qualitative research method, via a qualitative study of interviews with questions on the academic profile of doctors and on the methodology. We interviewed 42 professionals, of which 18 had experience with the qualitative method and 24 with the quantitative method. The results showed that knowledge on the qualitative method was virtually nil among "quantitative researchers", who did not value qualitative research, although some of those realized that it would be important to be more accepting in clinical practice. Others only considered the method as subsidiary to quantitative. The majority considered qualitative methods as lacking academic structure, taking too long to conduct empirical studies, and being difficult to publish. All of them criticized the misuse of the method, and the "quantitatives" pointed out the problem of being unable to reproduce. We concluded that widening the use of the qualitative method by doctors requires investment from the beginning of the academic career and participation in qualitative research projects.

El objetivo es verificar la percepción de médicos sobre el método de investigación cualitativa. Se trata de un estudio cualitativo por medio de entrevistas con preguntas sobre el perfil de los médicos y sobre el método. Entrevistamos a 42 profesionales, 18 con experiencia en el método cualitativo y 24 con el cuantitativo. Los resultados mostraron que el conocimiento sobre lo cualitativo es casi nulo entre los "cuantitativistas", que no valoran la investigación cualitativa, aunque algunos se dan cuenta de que sería importante tener un enfoque más amplio en la práctica clínica. Otros la ven como subsidiaria a lo cuantitativo. Sus dificultades para utilizar ese abordaje son: falta de formación, cantidad de tiempo que exigen y problemas de publicación. Todos han criticado el mal uso del método. Los "cuantitativistas" han destacado como fragilidad, la no reproductibilidad. Llegamos a la conclusión de que para ampliar el uso de los abordajes cualitativos entre los médicos es importante invertir en su formación desde el inicio del curso y la participación en proyectos de investigación cualitativa.

Objetivamos verificar a percepção de médicos sobre o método qualitativo de pesquisa. Estudo qualitativo por meio de entrevistas com questões sobre o perfil acadêmico do médico e perguntas abertas a respeito do método. Entrevistamos 42 profissionais, sendo 18 com experiência no método qualitativo e 24 com o quantitativo. Os resultados evidenciaram que o conhecimento sobre o qualitativo é quase nulo entre os pesquisadores "quantitativistas", os quais não valorizam a pesquisa qualitativa, embora alguns percebam que seria importante ter uma postura mais compreensiva na prática clínica. Outros só a veem como subsidiária ao quantitativo. As principais dificuldades da maioria são: falta de formação, tempo longo despendido nos estudos empíricos e dificuldade de publicação. Todos os entrevistados criticaram o mau uso do método, e os "quantitativistas" ressaltaram, como problema, sua não reprodutibilidade. Concluímos que ampliar o uso do método qualitativo por médicos exige investimento na formação desde o início da graduação e participação em projetos de pesquisa qualitativa.

Animais , Humanos , Camundongos , Anilidas/farmacologia , Benzodiazepinonas/farmacologia , /farmacologia , Inibidores de Proteínas Quinases/farmacologia , Proteínas Serina-Treonina Quinases/antagonistas & inibidores , Pirimidinas/farmacologia , Proteínas Repressoras/antagonistas & inibidores , Células Cultivadas , Movimento Celular/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Avaliação Pré-Clínica de Medicamentos , Ativação Enzimática/efeitos dos fármacos , Neoplasias/patologia , Proteínas Quinases/genética , Proteínas Serina-Treonina Quinases/genética , Proteínas Serina-Treonina Quinases/metabolismo , Proteínas Serina-Treonina Quinases/fisiologia , Proteínas Repressoras/agonistas , Proteínas Repressoras/genética , Especificidade por Substrato , Proteínas Supressoras de Tumor/fisiologia
Rev. bras. psiquiatr ; 37(1): 49-54, Jan-Mar/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-741937


Objective: Peritraumatic reactions feature prominently among the main predictors for development of posttraumatic stress disorder (PTSD). Peritraumatic tonic immobility (PTI), a less investigated but equally important type of peritraumatic response, has been recently attracting the attention of researchers and clinicians for its close association with traumatic reactions and PTSD. Our objective was to investigate the role of PTI, peritraumatic panic, and dissociation as predictors of PTSD symptoms in a cohort of police recruits (n=132). Methods: Participants were asked to complete the following questionnaires during academy training and after the first year of work: Posttraumatic Stress Disorder Checklist - Civilian Version (PCL-C), Physical Reactions Subscale (PRS), Peritraumatic Dissociative Experiences Questionnaire (PDEQ), Tonic Immobility Scale (TIS), and Critical Incident History Questionnaire. Results: Employing a zero-inflated negative binomial regression model, we found that each additional point in the TIS was associated with a 9% increment in PCL-C mean scores (RM = 1.09), whereas for PRS, the increment was 7% (RM = 1.07). As the severity of peritraumatic dissociation increased one point in the PDEQ, the chance of having at least one symptom in the PCL-C increased 22% (OR = 1.22). Conclusions: Our findings highlight the need to expand investigation on the incidence and impact of PTI on the mental health of police officers. .

Animais , Humanos , Camundongos , Proteínas Cromossômicas não Histona/fisiologia , Leucemia/patologia , Proteína de Leucina Linfoide-Mieloide/genética , Células-Tronco Neoplásicas/patologia , Oncogenes , Proteínas Repressoras/fisiologia , Apoptose , Proteínas Cromossômicas não Histona/genética , Citometria de Fluxo , Leucemia/genética , Leucemia/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase , Proteínas Repressoras/genética
Arq. neuropsiquiatr ; 73(1): 12-17, 01/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-732211


Objective To present a seven-cases serie of Mowat-Wilson syndrome (MWS). Method All patients with positive mutation for the ZEB2 were evaluated by a geneticist and a neurologist, with clinical and laboratorial characterization. Results A peculiar facies and mental retardation were present in all patients. The Denver II scale showed intense delay in all aspects, especially fine motor and adaptive. Acquired microcephaly was observed in five patients. Only one patient did not present epilepsy. Epilepsy was focal and predominating in sleep, with status epilepticus in three patients. The initial seizure was associated with fever in most patients (4/6). The EEG showed epileptic focal activity (5/7). The imaging studies revealed total agenesis (4/7) and partial agenesis of the corpus callosum (1/7). Conclusion Physicians who care for patients with mental retardation and epilepsy should be aware of SMW. .

Objetivo Apresentar uma série de sete casos da síndrome de Mowat-Wilson (SMW). Método Todos os pacientes com estudo positivo para a mutação ZEB2 foram avaliados por um geneticista e um neurologista, com a caracterização clínica e laboratorial. Resultados Todos apresentavam fácies peculiar e retardo mental. A escala de Denver II evidenciou intenso atraso em todos os aspectos, sobretudo motor fino e adaptativo. Microcefalia adquirida foi observada em cinco pacientes. Apenas um paciente não apresentava epilepsia, sendo esta focal e predominando no sono, sendo relatado estado de mal em três pacientes. A crise inicial estava associada à febre na maioria dos pacientes (4/6). O EEG evidenciou atividade epiléptica focal na maioria (5/7). Ao estudo de imagem foi observada agenesia total (4/7) e parcial do corpo caloso (1/7). Conclusão Médicos que lidam com pacientes com retardo mental e epilepsia devem saber distinguir as características peculiares da SMW. .

Criança , Pré-Escolar , Feminino , Humanos , Lactente , Masculino , Doença de Hirschsprung/genética , Proteínas de Homeodomínio/genética , Deficiência Intelectual/genética , Mutação , Microcefalia/genética , Proteínas Repressoras/genética , Facies , Doença de Hirschsprung/fisiopatologia , Deficiência Intelectual/fisiopatologia , Microcefalia/fisiopatologia , Estudos Retrospectivos
Hist. ciênc. saúde-Manguinhos ; 21(4): 1151-1177, Oct-Dec/2014.
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-732520


Investiga o estatuto e as condições de emergência da categoria nosológica de síndrome do coração irritável presente nos discursos médicos anglo-americanos na segunda metade do século XIX. No contexto da Guerra Civil Americana, examina elementos sócio-históricos que configuraram a atenção médica sobre os sintomas de ordem cardíaca de soldados. Destacam-se os valores morais de médicos-militares frente aos sintomas de medo em combatentes, assim como as hipóteses etiológicas britânicas e norte-americanas que consolidaram o estatuto nosológico do sofrimento dos soldados com palpitações. Propõe análise da especificidade da síndrome do coração irritável frente às categorias nosológicas do medo descritas pela nosologia psiquiátrica atual.

This paper examines the characteristics and the conditions for the emergence of the nosological category known as irritable heart syndrome to be found in Anglo-American medical literature in the second half of the nineteenth century. In the context of the American Civil War, it looks at some of the socio-historical elements, which comprised the medical care given to certain cardiac symptoms shown by soldiers. It emphasizes the moral values influencing the medical attitudes of military physicians towards symptoms of fear experienced by combatants, as well as the British and American etiological theories, which contributed to the nosological characterization of the suffering of soldiers afflicted with palpitations. Finally, it offers a brief analysis of the specific nature of the medical category known as irritable heart syndrome in the light of the categories of fear described by current psychiatric nosology.

Acetilcoenzima A/fisiologia , Aspergillus nidulans/metabolismo , Proteínas Fúngicas/fisiologia , Fenilacetatos/metabolismo , Proteínas Repressoras/fisiologia , Ácido Acético/farmacologia , Transporte Biológico
Rev. bras. enferm ; 67(5): 722-729, Sep-Oct/2014. tab
Artigo em Português | LILACS, BDENF - Enfermagem | ID: lil-731212


Objetivou-se estimar o tempo de decisão para procura de atendimento (TD) para homens e mulheres com infarto agudo do miocárdio (IAM); analisar a influência de variáveis ambientais no TD e a interação entre gênero e variáveis ambientais para o desfecho TD. Estudo transversal, envolvendo cem pacientes, entrevistados em hospitais de Salvador. Na análise dos dados empregou-se o Qui-quadrado ou Exato de Fisher e o Modelo de Regressão Linear Robusto. Predominou o IAM ocorrido no domicílio, familiares no entorno, e os pacientes sendo alvo de ações equivocadas. Observou-se TD elevado para mulheres (0,9h) e homens (1,4h). Aqueles em casa no início dos sintomas tiveram maior TD, comparados aos no trabalho e menor em relação aos em via pública (p=0,047). Houve interação estatisticamente significante entre gênero e viver acompanhado; e entre gênero e ter companheiro e filhos no entorno, para o desfecho TD. O cuidar em enfermagem focalizado nas especificidades de fatores ambientais e de gênero pode otimizar o atendimento precoce.

The purpose was to estimate the decision time (DT) for searching for attendance for men and women suffering from acute myocardial infarction (AMI); and to analyze the influence of surrounding variables in the DT. Transversal study, involving one hundred patients interviewed in hospitals of Salvador-BA, Brazil. For data analysis, it was used the chi-squared or Fisher’s exact test, and the Robust Linear Regression Model. AMI at the home predominated, with family members and patients receiving mistaken actions. A high DT was observed both, for women (0.9h) and men (1.4h). Those at home during the initial symptoms had higher DT, compared to those at work; and lower in relation to those in public spaces (p=0.047). Statistically significant interaction occurred among gender and the fact of living with company; and among gender and having a companion and children, for the outcome of the DT. Nursing care focused on the specificity of surrounding factors and gender can optimize early attendance.

Se objetivó estimar el tiempo de decisión para buscar atendimiento (TD) para hombres y mujeres con infarto agudo de miocardio (IAM); analizar la influencia de variables ambientales en TD y la interacción entre genero y variables ambientales para el desfecho del TD. Estudio transversal, envolviendo cien pacientes entrevistados en hospitales de Salvador-BA, Brasil. En el análisis se utilizó el chi-cuadrado o el Teste Exacto de Fisher y el Modelo de Regresión Linear Robusto. Predominó el IAM en el domicilio, familiares en el entorno y con pacientes siendo objeto de acciones equivocadas. Se observó TD elevados para mujeres (0,9h) y hombres (1,4h). Aquellos en sus casas en el inicio de los síntomas tuvieron mayor TD, comparados a los en el trabajo, y menor en relación aquellos en vía pública (p=0,047). Hubo interacción estadísticamente significante entre genero y vivir acompañado y entre genero y tener compañero e hijos en el entorno, para el desfecho del TD. El cuidar en enfermería focalizado en especificidades de factores ambientales y de géneros puede optimizar el atendimiento precoce.

Animais , Masculino , Ratos , Hormônio do Crescimento/farmacologia , /farmacologia , Lipopolissacarídeos/toxicidade , Proteínas Repressoras , Fatores de Transcrição , Fator de Necrose Tumoral alfa/farmacologia , Resistência a Medicamentos , Fator de Crescimento Insulin-Like I/genética , Proteínas/genética , Ratos Sprague-Dawley , RNA Mensageiro/genética , RNA Mensageiro/metabolismo , Receptores da Somatotropina/genética , Proteínas Supressoras da Sinalização de Citocina
Rev. Esc. Enferm. USP ; 48(spe): 16-22, 08/2014. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-731304


Objective To analyze the determinants of emergency contraception non-use among women in unplanned and ambivalent pregnancies. Method Cross-sectional study with a probabilistic sample of 366 pregnant women from 12 primary health care units in the city of São Paulo, Brazil. A multinomial logistic regression was performed, comparing three groups: women who used emergency contraception to prevent ongoing pregnancies (reference); women who made no use of emergency contraception, but used other contraceptive methods; and women who made no use of any contraceptive methods at all. Results Cohabitation with a partner was the common determinant of emergency contraception non-use. No pregnancy risk awareness, ambivalent pregnancies and no previous use of emergency contraception also contributed to emergency contraception non-use. Conclusion Apart from what is pointed out in the literature, knowledge of emergency contraception and the fertile period were not associated to its use. .

Objetivo Analizar los determinantes del no uso de la anticoncepción de emergencia entre las mujeres con embarazo no planeado o ambivalente. Método Estudio transversal en una muestra probabilística de 366 mujeres embarazadas de 12 Unidades Básicas de Salud de São Paulo. Mediante regresión logística multinomial, se comparó tres grupos de mujeres: aquellas que usaron la anticoncepción de emergencia para prevenir el embarazo en curso (referencia), aquellas que usaron algún método anticonceptivo, pero no la anticoncepción de emergência; y aquellas que no usaron ningún método. Resultados Los hallazgos mostraron que vivir com la pareja fue el determinante común del no uso de la anticoncepción de emergencia. No tener conciencia del riesgo de embarazo, estar en un embarazo ambivalente y nunca tener utilizado la anticoncepción de emergencia también fueron associados con su no uso para prevenir el embarazo en curso. Conclusión Contrariamente a lo que reporta la literatura, el conocimiento de la anticoncepción de emergencia y el período fértil no mostró asociación con el no uso. .

Objetivo Analisar os determinantes do não uso da anticoncepção de emergência entre mulheres com gravidez não planejada ou ambivalente. Método Estudo transversal com amostra probabilística de 366 gestantes de 12 Unidades Básicas de Saúde da cidade de São Paulo. Por meio de regressão logística multinomial, compararam-se três grupos de mulheres: as que usaram anticoncepção de emergência para prevenir a gravidez em curso (referência); as que usaram algum método contraceptivo, mas não anticoncepção de emergência; e as que não usaram nenhum método. Resultados Os achados mostraram que morar com o parceiro foi o determinante comum do não uso da anticoncepção de emergência. Não ter consciência do risco de engravidar, estar em uma gravidez ambivalente e nunca ter usado anticoncepção de emergência também foram associados ao seu não uso para prevenir a gravidez em curso. Conclusão Diferentemente do que relata a literatura, o conhecimento sobre anticoncepção de emergência e sobre o período fértil não mostrou qualquer associação ao não uso. .

Proteínas de Ligação a DNA , Escherichia coli/genética , Mapeamento de Interação de Proteínas/métodos , Técnicas do Sistema de Duplo-Híbrido , Bacteriófago lambda/genética , DNA Bacteriano/genética , RNA Polimerases Dirigidas por DNA/biossíntese , RNA Polimerases Dirigidas por DNA/genética , RNA Polimerases Dirigidas por DNA/fisiologia , Proteínas de Escherichia coli/biossíntese , Proteínas de Escherichia coli/genética , Proteínas de Escherichia coli/fisiologia , Escherichia coli/enzimologia , Genes Reporter/genética , Fosforilação , Plasmídeos/biossíntese , Plasmídeos/genética , Regiões Promotoras Genéticas/genética , RNA Bacteriano/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/fisiologia , Proteínas Repressoras/biossíntese , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas Repressoras/fisiologia , Transcrição Genética/genética , Transcrição Genética/fisiologia , Proteínas Virais Reguladoras e Acessórias , Proteínas Virais/biossíntese , Proteínas Virais/genética , Proteínas Virais/fisiologia , beta-Galactosidase/biossíntese , beta-Lactamases/biossíntese
Rio de Janeiro; s.n; 2014. 135 p p.
Tese em Português | LILACS, Inca | ID: biblio-1117754


A LMA é uma neoplasia hematológica caracterizada pela proliferação anormal de precursores mielóides na medula óssea decorrente de uma parada no processo de diferenciação destas células. A etiologia da leucemia ainda é desconhecida, mas alguns fatores, incluindo a presença de translocações cromossômicas podem contribuir para o aparecimento desta neoplasia.Três subgrupos de alterações genéticas vêm sendo definidos nos últimos anos como os de maior freqüência em LMA primária da criança. O grupo que envolve rearranjos do gene CBF (core binding factor): t(8;21)(q22;q22) e inv(16)(p13;q22); as leucemias associadas a alterações no gene MLL (anormalidades da região 11q23); e as leucemias associadas ao rearranjo PML-RAR: t(15;17)(q22;q12). Apesar de todo o conhecimento já acumulado sobre as bases moleculares dos processos leucemogênicos da LMA, alterações em reguladores epigenéticos vem ganhando destaque na patologia da leucemia. Neste contexto, os genes pertencentes ao complexo Gênico Polycomb (PcG) estão associados ao silenciamento epigenético durante o desenvolvimento embrionário e durante a carcinogênese de diversos tumores, incluindo a leucemia mielóide aguda (LMA). Portanto, o objetivo deste estudo foi realizar uma análise citogenética e de expressão dos genes do complexo PcG em crianças diagnosticadas com LMA para contribuir para o entendimento da biologia desta neoplasia tão heterogênea. As amostras de medula óssea de 84 pacientes foram tratadas de acordo com os protocolos padrões e, as técnicas de citogenética, envolvendo técnicas moleculares foram realizadas, sendo possível evidenciar uma alta taxa de anormalidades cromossômicas de 89%. Além disso, uma alta taxa da t(15;17)(q22;q12) pode ser observada, assim como, várias alterações não-recorrentes puderam ser identificadas, já que várias técnicas de citogenética molecular de alta resolução foram utilizadas. Dos 84 pacientes, 52 pacientes foram avaliados quanto ao perfil de expressão de alguns dos genes PcG, utilizando a metodologia de PCR em tempo real (RT-qPCR). Com isso, foi possível observar altos níveis relativos de mRNA dos genes PcG nos pacientes quando comparados com os doadores saudáveis. Quando foram comparados os níveis de expressão destes genes de acordo com os subtipos morfológicos, o subtipo LMA-M3 apresentou os níveis mais aumentados, principalmente nos pacientes menores de 8 anos de idade. Com relação aos dados clínicos, apesar da grande variação, a LMA apresentou altos níveis de mRNA dos genes PcG em pacientes com mais de 50.000 leucócitos e a LMA-M3 apresentou níveis aumentados de mRNA destes genes nos pacientes com baixa contagem de plaquetas. Com isso, podemos concluir que apesar da variação nos níveis de mRNA dos genes PcG estudados na LMA, foi possível observar uma correlação destes níveis com os dados clínicos dos pacientes, como os subtipos morfológicos, com a idade, contagem leucocitária e plaquetas na LMA-M3. (AU)

AML is a hematologic malignancy characterized by the abnormal proliferation of myeloid precursors in the bone marrow due to an arrest of differentiation process of these cells. The etiology of leukemia is unknown, but some factors, including the presence of chromosomal translocations may contribute to the emergence of this neoplasia. Three subgroups of genetic alterations have been defined in recent years as the most frequent in primary childhood AML. The group involving core binding factor gene rearrangements: t(8;21)(q22; q22), and inv(16)(p13;q22); leukemias associated with alterations in the MLL gene (11q23 abnormalities in the region ); leukemias associated with PML-RARa rearrangement: t(15;17)(q22;q12). Despite all the knowledge already accumulated regarding the molecular basis of AML leukemogenic processes, changes in epigenetic regulators have been gaining attention in the pathology of leukemia. In this context, the Polycomb Complex genes (PcG) are associated with epigenetic silencing during embryonic development and during carcinogenesis of several tumors, including acute myeloid leukemia (AML). Therefore, the aim of this study was to evaluate a cytogenetic and PcG genes expression profiles in children diagnosed with AML to contribute to the understanding of the biology of this heterogeneous tumor. The bone marrow samples of 84 patients were treated according to standard protocols, and the cytogenetic analysis involving molecular techniques were performed, and were able to demonstrate a high rate of chromosomal abnormalities in 89% of cases. In addition, a high rate of t(15;17)(q22;q12) may be observed, as well as several non -recurring changes could be identified, since several high resolution molecular cytogenetic techniques were used. From the 84 patients' samples, 52 were evaluated for the expression of some of the PcG genes profile, using the real-time PCR methodology. Thus, it was possible to observe mRNA high relative levels of PcG genes in patients compared with healthy donors. When the expression levels of these genes according to the morphological subtypes were compared, AML-M3 subtype showed the most increased levels, mainly in children under the age of 8. Regarding clinical data, despite the wide variation AML showed high mRNA levels of PcG genes in patients with more than 50,000 leukocytes and AML - M3 showed increased mRNA levels of these genes in patients with low platelet counts. Thus, we conclude that despite the variation in mRNA levels of PcG genes studied in AML, we observed a correlation of these levels with clinical patient data, such as morphological subtypes, with age, white blood count and platelets in AML - M3. (AU)

Humanos , Criança , Adolescente , Leucemia Mieloide Aguda/genética , Proteínas Repressoras , Criança , Adolescente , Análise Citogenética
São Paulo; s.n; s.n; 2014. 181 p. tab, graf, ilus.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-847078


As proteína quinases C (PKC) pertencem à família das serina/treonina quinases, que vem sendo apontadas como importantes enzimas para os processos de proliferação e diferenciação das células tronco embrionárias (CTE), todavia, a função exata de cada isoforma dessa família ainda não está clara. Dados anteriores do nosso laboratório indicam que dentre as PKCs expressas em CTE, formas cataliticamente ativas da PKCßI são altamente expressas no núcleo das CTE murinas. Estas ao se diferenciarem expressam essa quinase no seu citoplasma ou deixam de expressar a mesma, e que a maioria dos alvos da PKCßI em CTE indiferenciada estão envolvidos em processos de regulação da transcrição de proteínas envolvidas em processos de proliferação/ diferenciação. Dando continuidade aos resultados anteriores do laboratório, no presente trabalho, com técnicas de proteômica e fosfoproteômica identificamos outros alvos nucleares da PKCßI em CTE indiferenciadas. Vimos que de fato inibindo-se a PKCßI diminuiu-se a fostorilação de fatores envolvidos com a indiferenciação das CTE. Dentre os alvos da PKCßI encontramos a proteína adaptadora, TIF1 que recruta proteínas remodeladoras de cromatina. Essa proteína é essencial para a manutenção do estado indiferenciado das CTE. In vitro a PKCßI foi capaz de fosforilar a TIF1ß e inibindo-se a PKCßI por RNAi vimos uma diminuição na expressão da TIF1ß e no fator de indiferenciação Nanog cuja expressão já foi demonstrada ser regulada pela TIF1ß. Além disso vimos que inibindo-se a PKCßI com o peptídeo inibidor da PKCßI aumentou a expressão de proteínas reguladas pelo c-Myc. E que o RNAi para a PKCßI aumentou a expressão de proteínas que regulam a expressão do c-Myc. Não vimos nenhum efeito na fosforilação ou expressão do c-Myc após a inibição da PKCßI o que sugere que a PKCßI ative proteínas repressoras do c-Myc. Nossos estudos sugerem que a PKCßI regula a manutenção do estado indiferenciado das CTE regulando a expressão e atividade da Tif1ß um possível alvo direto da PKCßI. Levando a modificações da cromatina e regulação da expressão de genes que mantém as CTE indiferenciadas. Outro ponto de regulação da PKCßI parece ser a nibição da atividade de c-Myc o que seria importante para a manutenção do estado indiferenciado visto que o c-Myc é um amplificador das vias de sinalização que mantém as células proliferando. Desta forma a PKCßI parece ter um papel central na regulação da expressão gênica de CTE à nível de modificações epigenéticas e a nível transcricional mantendo as CTE indiferenciadas

The Protein kinase C (PKC) family of serine/treonine kinases, are being described as important enzymes for proliferation and diferentiation of embryonic stem cells (ESC), however, the exact function of the different isoenzymes of this family still is unclear. Previous data from our laboratory indicates that amongst the PKCs expressed in ESC, catalytically active forms of PKCßI are highly expressed in nucleus of murine ESC. When these cells differentiate this kinase can be found in the cytoplasm or not expressed at all, and that the majority of PKCßI targets in undifferentiated ESC are involved in the regulation of proteins involved in transcription of proteins involved in proliferation/ diferentiation. Continuing our previous work herewith using proteomics and phosphoproteomics techniques we identified other nuclear PKCßI targets in undifferentiated ESC. We indeed saw that inhibiting PKCßI decreased the phosphorylation of factors involved with maintainance of the undifferentiated state of ESC. Amongst the targets of PKCßI we found the adaptor protein, TIF1ßI, that recruits cromatin remodeling proteins. This protein is essential for the maintenance of the undifferentiated state of ESC. In vitro PKCßI phosphorylated TIF1ß and inhibiting PKCßI with RNAi decreased the expression of TIF1ß and of the undifferentiation factor Nanog whose expression has been shown to be regulated by TIF1ß. We also saw that inhibiting PKCßI with a peptide inhibitor increased the expression of proteins regulated by c-Myc, and that RNAi for PKCßI increased the expression of proteins that regulate the expression of c-Myc. We did not see any effect on the phosphorylation or expression of c-Myc after inhibition of PKCßI suggesting that PKCßI activates c-Myc repressor proteins. Our studies sugest that PKCßI regulates the maintenance of the undiferentiated state of ESC regulating the expression and activity of Tif1ß a possibly a direct target of PKCßI, leading to chromatin modifications and regulation of genes that maintain ESC undiferentiated. Another form of regulation of PKCßI seems to be by inhibiting the activity of c-Myc which is importante to maintain ESC undifferentiated since c-Myc is na an amplifyer of signaling patheways that maintain ESC proliferating. Together PKCßI has a central role in the regulation of the gene expression of ESC at the level of epigenetic modifications and transcriptional regulation

Células-Tronco Embrionárias/citologia , Proteína Quinase C/metabolismo , Diferenciação Celular , Cromatina/genética , Espectrometria de Massas/métodos , Fosforilação , Proteína Quinase C beta/análise , Proteômica/instrumentação , Proteínas Repressoras/genética , Substratos/classificação
Medicina (B.Aires) ; 73(6): 552-554, Dec. 2013. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-708578


La ataxia espinocerebelosa tipo 3 o enfermedad de Machado-Joseph (SCA-3/EMJ) es la forma más frecuente de ataxia espinocerebelosa autosómica dominante. Se caracteriza por una marcada variabilidad fenotípica, pudiendo causar formas no cerebelosas de presentación. En base a algunos casos comunicados, se ha propuesto una forma de presentación clínica similar a la de una paraparesia espástica hereditaria, con la presencia de signos de disfunción piramidal predominantes como la manifestación clínica inicial. Presentamos dos nuevos casos de SCA-3/EMJ con un cuadro clínico inicial sugerente de paraparesia espástica hereditaria y una revisión de los casos clínicos similares previamente informados. Nuestros hallazgos apoyan la propuesta de un subtipo de SCA-3/EMJ caracterizado por la presencia de marcada disfunción piramidal como manifestación inicial, simulando un cuadro clínico de paraparesia espástica hereditaria.

Machado-Joseph disease (MJD) is the most frequent dominantly inherited spinocerebellar ataxia. A marked phenotypic variability is a characteristic of this disorder that could involve non-cerebellar presentations. Based on several case reports describing pyramidal dysfunction as the main symptom at onset, a clinical form resembling hereditary spastic paraplegia has been proposed. We report here two further cases of MJD patients whose initial clinical presentation suggested hereditary spastic paraplegia, and a summary of the main findings of previously similar published reports. Our findings lent support to the proposal of a MJD subtype distinguished by a marked pyramidal dysfunction at onset, simulating a clinical picture of hereditary spastic paraplegia.

Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Doença de Machado-Joseph/genética , Proteínas do Tecido Nervoso/genética , Proteínas Nucleares/genética , Fenótipo , Proteínas Repressoras/genética , Paraplegia Espástica Hereditária/genética , Diagnóstico Diferencial , Doença de Machado-Joseph/diagnóstico , Linhagem , Paraplegia Espástica Hereditária/diagnóstico
Biocell ; 36(3): 113-120, Dec. 2012. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-694711


Berberine, a constituent of some traditional Chinese medicinal plants, has been reported to have cytotoxicity effects on different human cancer cell lines. There is no available information about the effects and mechanism of action of berberine on human colon cancer cell line HCT-8. In this paper, the cytotoxicity of berberine on HCT-8 cancer cells was investigated by MTT assay, fluorescence microscopy and flow cytometry analysis. Our data revealed that berberine could significantly inhibit the growth of HCT-8 cells in a dose- and time-dependent manner. Morphology of apoptotic cells was studied with acridine orange/ethidium bromide staining. The concentrations of lactate dehydrogenase and both acid and alkaline phosphatases were significantly increased in cell supernatants after berberine treatment, suggesting cell death. Furthermore, flow cytometry analysis showed that berberine could arrest HCT-8 cells at S phase in a time-dependent manner. To further investigate the apoptotic molecular mechanism, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and western blotting methods were used. The up-regulated mRNA and/or protein expressions of Fas, FasL, TNF-a, caspase-3 and down-regulation of pro-caspase-3 suggest that the death receptor pathway may be involved in the apoptotic pathway induced by berberine. Decrease of Bcl-2 and increase of Bax in mRNA and/or protein expressions showed that the Bcl-2 family proteins were involved in berberine-induced apoptosis. We also found that berberine-induced apoptosis was associated with an up-regulated expressions of p53 and prohibitin (PHB), and decreased vimentin expression. These results suggest that berberine can suppress cell growth and reduce cell survival by arresting the cell-cycle and by inducing apoptosis of HCT-8 cells.

Humanos , Berberina/farmacologia , Neoplasias do Colo/tratamento farmacológico , Neoplasias do Colo/metabolismo , Apoptose , Berberina/metabolismo , Ciclo Celular , Linhagem Celular Tumoral , Citometria de Fluxo , L-Lactato Desidrogenase/metabolismo , Medicina Tradicional Chinesa , Microscopia de Fluorescência , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteínas Repressoras/farmacologia , Fase S , Fatores de Tempo , Sais de Tetrazólio/farmacologia , Tiazóis/farmacologia , /metabolismo , Vimentina/metabolismo , /metabolismo
Braz. j. med. biol. res ; 43(1): 43-51, Jan. 2010. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-535635


Myocardial ischemic preconditioning up-regulated protein 1 (Mipu1), a novel zinc finger protein, was originally cloned using bioinformatic analysis and 5' RACE technology of rat heart after a transient myocardial ischemia/reperfusion procedure in our laboratory. In order to investigate the functions of Mipu1, the recombinant prokaryotic expression vector pQE31-Mipu1 was constructed and transformed into Escherichia coli M15(pREP4), and Mipu1-6His fusion protein was expressed and purified. The identity of the purified protein was confirmed by mass spectrometry. The molecular mass of the Mipu1 protein was 70.03779 kDa. The fusion protein was intracutaneously injected to immunize New Zealand rabbits to produce a polyclonal antibody. The antibody titer was approximately 1:16,000. The antibody was tested by Western blotting for specificity and sensitivity. Using the antibody, it was found that Mipu1 was highly expressed in the heart and brain of rats and was localized in the nucleus of H9c2 myogenic cells. The present study lays the foundation for further study of the biological functions of Mipu1.

Animais , Coelhos , Ratos , Anticorpos Monoclonais/biossíntese , Química Encefálica , Isquemia Miocárdica/genética , Miocárdio/química , Proteínas Nucleares/metabolismo , Proteínas Repressoras/metabolismo , Clonagem Molecular , Escherichia coli/genética , Regulação da Expressão Gênica , Vetores Genéticos/genética , Vetores Genéticos/metabolismo , Espectrometria de Massas , Reperfusão Miocárdica , Proteínas Nucleares/genética , Proteínas Repressoras/genética , Sensibilidade e Especificidade , Transfecção
Arq. bras. endocrinol. metab ; 52(8): 1221-1227, Nov. 2008. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-503287


Morning glory syndrome (MGS) is a congenital optic disc dysplasia often associated with craniofacial anomalies, especially basal encephalocele and hypopituitarism. Clinical signs are varied and often occult. The PAX6 gene is involved in ocular morphogenesis and is expressed in numerous ocular tissues during development especially in the developing central nervous system. The aim of the present study is to evaluate PAX6 in MGS associated with isolated growth hormone deficiency. Three pre-pubertal males (A, B and C) with MGS and short stature due to growth hormone deficiency, treated with recombinant human growth hormone with limited response, were reported. Two of them had basal encephalocele. Coding and non-coding sequences corresponding of PAX6 different transcripts were analyzed by direct sequencing. Nucleotide variations causing putative aminoacid change were not observed. Patient A presented the new IVS2+9G>A transition, whereas patients A and C were heterozygous for known single nucleotide polymorphisms (SNP) within the intron 4. In addition, two SNP heterozygoses were observed for patient C in both intron 9 and 13. Sequencing also revealed several nucleotide variations in patient B. Two heterozygoses for known polymorphisms were identified along with a novel C>A nucleotide change in intron 4. This patient also presented a low number on the TG repeat in intron 9 and a new IVS11+33A>T transversion. Gene regulation and transcription of PAX6 are complex processes; there are two major protein isoforms, PAX6(-5a) and PAX6(+5a), and nine transcripts described. Furthermore, extra transcription regulatory elements have been postulated within PAX6 introns. Considering that neither population distributions on PAX6 polymorphism nor their linkeages with diseases have been reported, a functional effect due to alterations described here cannot be discarded.

A síndrome de Morning Glory (SMG) é uma displasia óptica congênita associada a anomalias craniofaciais, principalmente encefalocele basal e hipopituitarismo. Os sinais clínicos são variados e muitas vezes ocultos. O gene PAX6 está envolvido na morfogênese ocular e se expressa em vários tecidos oculares durante o desenvolvimento do sistema nervoso central. O objetivo deste estudo foi avaliar o gene PAX6 na SMG associada com deficiência isolada de hormônio de crescimento. Foram relatados três pacientes pré-púberes (A, B e C) com SMG e baixa estatura por deficiência de hormônio de crescimento tratados com hormônio de crescimento recombinante humano. As seqüências codificadoras e não-codificadoras correspondentes ao PAX6 em diferentes transcritos foram analisadas por seqüenciamento direto. Variações nucleotídeas com trocas pontuais de aminoácidos não foram encontradas. O paciente A apresentou uma transição nova IVS2+9G>A, enquanto os pacientes A e C foram heterozigotos para um polimorfismo (SNP) no íntron 4. Ainda, dois SNPs em heterozigose nos íntrons 9 e 13 foram observados no paciente C. O seqüenciamento também mostrou várias variações nucleotídeas no paciente B. Dois SNPs conhecidos com a alteração nucleotídea nova C>A no íntron 4 foram observados em heterozigose. Este paciente também apresentou um baixo número de repetições TG no íntron 9 e uma nova transversão IVS11+33A>T. A regulação e a transcrição do gene PAX6 são um processo complexo; existem 2 isoformas principais da proteína, PAX6(-5a) e PAX6(+5a) e 9 transcritos descritos. Considerando que nem a distribuição de SNPs no PAX6 e nem as suas ligações com as doenças foram relatadas, um defeito funcional devido às alterações descritas não pode ser descartado.

Criança , Humanos , Proteínas do Olho/genética , Proteínas de Homeodomínio/genética , Hormônio do Crescimento Humano/deficiência , Mutação , Disco Óptico/anormalidades , Doenças do Nervo Óptico/genética , Fatores de Transcrição Box Pareados/genética , Proteínas Repressoras/genética , Sequência de Bases , Encefalocele/diagnóstico , Heterozigoto , Hormônio do Crescimento Humano/uso terapêutico , Íntrons/genética , Doenças do Nervo Óptico/congênito , Polimorfismo Genético , Análise de Sequência de DNA , Síndrome
Arq. bras. endocrinol. metab ; 52(8): 1304-1312, Nov. 2008. ilus, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-503296


Resistance to thyroid hormone (RTH) is a rare disorder characterized by variable tissue hyporesponsiveness to thyroid hormone, usually caused by mutations in the thyroid hormone receptor beta (TRβ). We describe a large Brazilian family harboring a novel mutation affecting TRβ gene and inducing RTH. A 14-year-old girl was found to have elevated free T4 and free T3 plasma concentrations in coexistence with unsuppressed TSH and a questionable goiter. The diagnosis of RTH was verified by identification of a novel mutation (I431V) in the TRβ gene. Sixteen asymptomatic relatives of the proposita are also affected by the mutation. Functional studies showed that I431V mutation exerts dominant-negative effect on wild type TRβ, mainly by impairment of ligand-dependent release of corepressor SMRT. The presence of this mutation reduces potency, but does not affect efficacy of thyroid hormone action, in accordance with the clinical picture of eumetabolism of the affected individuals.

A resistência ao hormônio tireoideano (RHT) é uma doença rara, causada por variável hiporresponsividade dos tecidos aos hormônios tireoideanos, usualmente causada por mutações no receptor beta do hormônio tireoideano (TRβ). Descrevemos uma grande família brasileira portadora de uma nova mutação afetando o gene do TRβ, induzindo RHT. Uma paciente de 14 anos de idade apresentou concentrações plasmáticas elevadas de T4 e T3 livres, associadas a TSH não-suprimido e bócio questionável. O diagnóstico de RHT foi estabelecido pela identificação da mutação I431V no gene do TRβ. Dezesseis parentes assintomáticos da probanda também são afetados pela mutação. Estudos funcionais mostram que a mutação I431V exerce efeito dominante negativo sobre o TR selvagem, basicamente, por prejudicar a liberação do correpressor SMRT ligante-dependente. A presença desta mutação reduz a potência, mas não afeta a eficácia da ação do hormônio tireoideano, o que está de acordo com a apresentação clínica de eumetabolismo dos indivíduos afetados.

Adolescente , Feminino , Humanos , Masculino , Mutação/genética , Proteínas Repressoras/metabolismo , Receptores beta dos Hormônios Tireóideos/genética , Síndrome da Resistência aos Hormônios Tireóideos/genética , Brasil , Técnicas de Cultura de Células , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , Linhagem , Proteínas Repressoras/genética , Receptores beta dos Hormônios Tireóideos/metabolismo , Síndrome da Resistência aos Hormônios Tireóideos/patologia
Genet. mol. res. (Online) ; 6(4): 1019-1025, 2007. tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-520048


Gliomas are the most common tumors of the central nervous system. In spite of the marked advances in the characterization of the molecular pathogenesis of gliomas, these tumors remain incurable and, in most of the cases, resistant to treatments, due to their molecular heterogeneity. Gene PAX6, which encodes a transcription factor that plays an important role in the development of the central nervous system, was recently recognized as a tumor suppressor in gliomas. The objective of the present study was to analyze the mutational status of the coding and regulating regions of PAX6 in 94 gliomas: 81 astrocytomas (11 grade I, 23 grade II, 8 grade III, and 39 grade IV glioblastomas), 5 oligodendrogliomas (3 grade II, and 2 grade III), and 8 ependymomas (5 grade II, and 3 grade III). Two regulating regions (SX250 and EIE) and the 11 coding regions (exons 4-13, plus exon 5a resulting from alternative splicing) of gene PAX6 were analyzed and no mutation was found. Therefore, we conclude that the tumor suppressor role of PAX6, reported in previous studies on gliomas, is not due to mutation in its coding and regulating regions, suggesting the involvement of epigenetic mechanisms in the silencing of PAX6 in these tumors.

Humanos , Masculino , Feminino , Pré-Escolar , Criança , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , DNA de Neoplasias/genética , Glioma/genética , Mutação , Neoplasias do Sistema Nervoso Central/genética , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas de Homeodomínio/genética , Proteínas do Olho/genética , Astrocitoma , Sequência de Bases , Análise Mutacional de DNA , Epigênese Genética , Ependimoma/genética , Fatores de Transcrição Box Pareados/genética , Inativação Gênica , Oligodendroglioma/genética , Reação em Cadeia da Polimerase , Primers do DNA/genética
Genet. mol. res. (Online) ; 6(2): 277-283, 2007. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-482043


Adrenal hypoplasia congenita (AHC) is a rare disease that can be caused by many abnormalities, including an X-linked form. Mutations in the DAX1 gene have been assigned as the genetic cause of AHC. We describe here three siblings with AHC, clinically presented at different ages, two in the neonatal period and one oligosymptomatic during infancy. Molecular analysis was able to detect a novel mutation in exon 1 of the DAX1 gene, consisting of a transition of C to T at position 359, determining a stop codon at position 359 (Q359X). The mutated gene encodes a truncated protein missing a large portion of the ligand-binding domain (C-terminal domain). The recognition of the disease in the index case suggested the diagnosis in the other siblings. Interestingly, the same mutation is presented with different phenotypes, suggesting that first-degree family members of patients with DAX1 mutations should be carefully evaluated routinely.

Feminino , Humanos , Lactente , Masculino , Criança , Pré-Escolar , Códon sem Sentido , Insuficiência Adrenal/genética , Mutação Puntual , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Receptores do Ácido Retinoico/genética , Éxons , Família , Linhagem , Fenótipo , Irmãos
Biol. Res ; 39(1): 87-93, 2006. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-430701


Copper is an essential and toxic trace metal for bacteria and, therefore, must be tightly regulated in the cell. Enterococcus hirae is a broadly studied model for copper homeostasis. The intracellular copper levels in E. hirae are regulated by the cop operon, which is formed by four genes: copA and copB that encode ATPases for influx and efflux of copper, respectively; copZ that encodes a copper chaperone; and copY, a copper responsive repressor. Since the complete genome sequence for E. hirae is not available, it is possible that other genes may encode proteins involved in copper homeostasis. Here, we identified a cop-like operon in nine species of Lactobacillale order with a known genome sequence. All of them always encoded a CopY-like repressor and a copper ATPase. The alignment of the cop-like operon promoter region revealed two CopY binding sites, one of which was conserved in all strains, and the second was only present in species of Streptococcus genus and L. johnsonii. Additional proteins associated to copper metabolism, CutC and Cupredoxin, also were detected. This study allowed for the description of the structure and organization of the cop operon and discussion of a phylogenetic hypothesis based on the differences observed in this operon's organization and its regulation in Lactobacillale order.

Cobre/metabolismo , Enterococcus/genética , Homeostase/genética , Óperon/genética , Adenosina Trifosfatases/genética , Adenosina Trifosfatases/metabolismo , Sequência de Bases , Sítios de Ligação , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Proteínas de Transporte de Cátions/genética , Proteínas de Transporte de Cátions/metabolismo , Enterococcus/metabolismo , Dados de Sequência Molecular , Chaperonas Moleculares/genética , Chaperonas Moleculares/metabolismo , Ligação Proteica , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas Repressoras/metabolismo , Transativadores/genética , Transativadores/metabolismo