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Sci Rep ; 9(1): 11191, 2019 08 01.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-31371771

RESUMEN

During vertebrate embryogenesis, the cranial neural crest (CNC) forms at the neural plate border and subsequently migrates and differentiates into many types of cells. The transcription factor Snai2, which is induced by canonical Wnt signaling to be expressed in the early CNC, is pivotal for CNC induction and migration in Xenopus. However, snai2 expression is silenced during CNC migration, and its roles at later developmental stages remain unclear. We generated a transgenic X. tropicalis line that expresses enhanced green fluorescent protein (eGFP) driven by the snai2 promoter/enhancer, and observed eGFP expression not only in the pre-migratory and migrating CNC, but also the differentiating CNC. This transgenic line can be used directly to detect deficiencies in CNC development at various stages, including subtle perturbation of CNC differentiation. In situ hybridization and immunohistochemistry confirm that Snai2 is re-expressed in the differentiating CNC. Using a separate transgenic Wnt reporter line, we show that canonical Wnt signaling is also active in the differentiating CNC. Blocking Wnt signaling shortly after CNC migration causes reduced snai2 expression and impaired differentiation of CNC-derived head cartilage structures. These results suggest that Wnt signaling is required for snai2 re-expression and CNC differentiation.


Asunto(s)
Encéfalo/embriología , Cresta Neural/fisiología , Factores de Transcripción/metabolismo , Proteínas Wnt/metabolismo , Proteínas de Xenopus/metabolismo , Xenopus laevis/embriología , Proteínas ADAM/genética , Proteínas ADAM/metabolismo , Animales , Animales Modificados Genéticamente , Diferenciación Celular/efectos de los fármacos , Diferenciación Celular/genética , Embrión no Mamífero , Desarrollo Embrionario/efectos de los fármacos , Desarrollo Embrionario/fisiología , Regulación del Desarrollo de la Expresión Génica/efectos de los fármacos , Regulación del Desarrollo de la Expresión Génica/genética , Técnicas de Silenciamiento del Gen , Genes Reporteros/genética , Proteínas Fluorescentes Verdes/química , Proteínas Fluorescentes Verdes/genética , Compuestos Heterocíclicos con 3 Anillos/farmacología , Imidas/farmacología , Proteínas de la Membrana/genética , Proteínas de la Membrana/metabolismo , Cresta Neural/citología , Quinolinas/farmacología , Proteínas Wnt/antagonistas & inhibidores , Proteínas Wnt/genética , Vía de Señalización Wnt/efectos de los fármacos , Vía de Señalización Wnt/genética , Vía de Señalización Wnt/fisiología , Proteínas de Xenopus/genética , Xenopus laevis/genética
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