RESUMEN
Conventional in vitro fertilization has not yet been implemented in the equine species. One of the main reasons has been the inability to develop a culture medium and incubation conditions supporting high levels of stallion sperm capacitation and hyperactivation in vitro. Although different culture media have been used for this purpose, human tubal fluid (HTF) medium, widely used in the manipulation of human and mice gametes, has not been reported so far in stallion sperm culture. The first part of this study aimed to compare HTF and Whitten's media on different stallion sperm quality and capacitation variables. Additionally, the effect of procaine, aminopyridine and caffeine in both media was evaluated on sperm motility parameters at different incubation times. Integrity and destabilization of the plasma membrane were evaluated by merocyanine 540/SYTOX Green (MC540), mitochondrial membrane potential (∆Ψm) using tetramethylrhodamine methyl ester perchlorate (TMRM), acrosome membrane integrity by PNA/FITC and tyrosine phosphorylation by P-tyrosine mouse mAb conjugated to Alexa Fluor® by flow cytometry. Motility parameters were evaluated using the integrated semen analysis system (ISAS®). We found no differences between Whitten's and HTF media and incubation time in terms of sperm viability, uninduced acrosome membrane damage or mitochondrial membrane potential at 30- and 120-min incubation. Membrane fluidity (MC540) increased in both media at 30- and 120-min incubation compared to noncapacitating conditions. Similarly, tyrosine phosphorylation increased in both media in capacitating conditions at 2- and 4-hr incubation compared to noncapacitating conditions. Although procaine showed the best result in terms of sperm hyperactivated motility in both media, aminopyridine also showed parameters consistent with the hyperactivation including an increase in curvilinear velocity and decrease in straightness. In conclusion, HTF medium and aminopyridine equally support capacitation-related parameters in stallion sperm.
Asunto(s)
Medios de Cultivo/farmacología , Fármacos para la Fertilidad Masculina/farmacología , Caballos , Análisis de Semen/veterinaria , Capacitación Espermática/efectos de los fármacos , Motilidad Espermática/efectos de los fármacos , Reacción Acrosómica/efectos de los fármacos , Aminopiridinas/farmacología , Animales , Cafeína/farmacología , Fertilización In Vitro/veterinaria , Fluoresceínas/farmacología , Masculino , Potencial de la Membrana Mitocondrial , Aglutinina de Mani/farmacología , Fosforilación , Procaína/farmacología , Semen/efectos de los fármacos , Análisis de Semen/métodos , Espermatozoides/efectos de los fármacosRESUMEN
La tuberculosis pulmonar, enfermedad causada por la especie Mycobacterium tuberculosis, es una importante causa de muerte en Chile. Se notifican unos 3,8 millones de nuevos casos en el mundo, correspondiendo a unos 600000 casos en Latinoamérica. Objetivo: Identificar grupos de riesgo según sexo, edad y procedencia, para mejorar la salud local de Llanquihue. Se analizó el total de baciloscopías realizadas en el Hospital de Llanquihue, entre enero 2001 y junio 2004 de forma retrospectiva, utilizando el registro de estadística del laboratorio del Hospital. Las baciloscopías positivas se clasificaron según: edad, procedencia, año de diagnóstico y eficacia del tratamiento. Hubo 1662 baciloscopías, de las cuales 43 (2,6 por ciento) fueron positivas (32 pacientes); 56.2 por ciento correspondientes a hombres y 43,8 por ciento a mujeres. Más frecuentemente, los pacientes se afectaron entre los 40-59 años de edad. Casos curados: 78 por ciento. Entre 2001 y junio 2004, hubo cada año 6,17, 7 y 2 casos de baciloscopías positivas que correspondieron a un 18.8 por ciento, 53.1 por ciento, 21.9 por ciento y 6.2 por ciento, respectivamente; 75 por ciento de estos casos eran personas que vivían en Llanquihue, de los cuales un 50 por ciento residía en población Los Volcanes. Conclusiones: Grupo de riesgo: hombres, entre los 40 y 59 años de edad, domiciliados en un área común de Llanquihue, identificados como grupo de riesgo para detección precoz. El perfil epidemiológico coincide con el patrón hacia la eliminación, es decir, se afectan mayormente hombres mayores de 40 años y no se registra en menores de 15 años. La eficacia del tratamiento se encuentra dentro del promedio nacional.
