Ovarian Tissue Culture to Preserve Fertility in Transgender Male Patients after Hormonal Treatment / Cultura de tecido ovariano para preservação da fertilidade em pacientes transexuais masculinos após tratamento hormonal

Abstract Objective To evaluate the reproductive and histological characteristics of fresh cultured ovarian tissue from transgender male patients. Methods An in vitro pilot study in which samples were collected during sex reassignment surgery for transgender male patients. The ovarian cortex was cut into fragments of 2 mm, 3mm, and 4 mm, and placed in a 96-well plate suitable for cultivation at days 0, 2, 4, 6, and 8, when the histology was analyzed. Results Stromal hyperplasia was observed in all samples, and it was not associated with the obtainment of primordial or primary follicles. Peripheral reduction in cell count was also a recurrent finding. Primordial and primary follicles were identified with a heterogeneous pattern in fragments from the same patient and from different patients, and follicles in more advanced stages of development (secondary and antral) were not found. There was an association between the diameter of the ovarian fragments and the identification of primary follicles (p=0.036). The number of days in culture was associated with histological signs of tissue damaging in the fragments (p=0.002). The total number of follicles identified in the samples with 2mm in diameter was significantly lower than in those that measured 4mm in diameter (p=0.031). Conclusion A diameter of 4mm is suitable for ovarian tissue culture with the benefit of ease of handling. Even after prolonged exposure to testosterone, the ovarian fragments presented primordial and primary follicles, maintaining viability throughout the days they were exposed to the culture. Freezing the ovarian cortex of transgender patients who will undergo surgery for gender reassignment would be an interesting option, in the future, for the preservation of fertility.

Resumo Objetivo Avaliar as características reprodutivas e histológicas de tecido ovariano cultivado a fresco de pacientes transexuais masculinos. Métodos Estudo experimental in vitro e piloto, no qual amostras foram coletadas durante a cirurgia de redesignação de sexo para pacientes transexuais masculinos. O córtex ovariano foi cortado em fragmentos de 2mm, 3mm, e 4mm, e colocado em placa de 96 poços própria para cultivo nos dias 0, 2, 4, 6 e 8, quando a histologia foi analisada. Resultados Hiperplasia estromal foi observada em todas as amostras, e não esteve associada à obtenção de folículos primordiais ou primários. A redução periférica no número de células também foi um achado recorrente. Folículos primordiais e primários foramidentificados com padrão heterogêneo emfragmentos domesmo paciente e em fragmentos de pacientes diferentes, não sendo encontrados folículos em estágios mais avançados de desenvolvimento (secundários e antrais). Houve associação entre o diâmetro dos fragmentos ovarianos e a identificação dos folículos primários (p=0,036). O número de dias de cultura esteve associado a sinais histológicos de lesão tecidual nos fragmentos (p=0,002). O número total de folículos identificados nas amostras de 2mm de diâmetro foi significativamente menor do que nas de 4mm de diâmetro (p=0,031). Conclusão O diâmetro de 4mm parece ser mais adequado para a cultura de tecido ovariano com a vantagem de fácil manejo. Mesmo após exposição prolongada à testosterona, os fragmentos ovarianos apresentavam folículos primordiais e primários, e manteve a viabilidade ao longo dos dias de exposição à cultura. No futuro, o congelamento da cortical do ovário de pacientes transgêneros que se submeterão à cirurgia de redesignação sexual poderia ser uma opção interessante para a preservação da fertilidade.

Ovarian Tissue Culture to Preserve Fertility in Transgender Male Patients after Hormonal Treatment.

OBJECTIVE: To evaluate the reproductive and histological characteristics of fresh cultured ovarian tissue from transgender male patients. METHODS: An in vitro pilot study in which samples were collected during sex reassignment surgery for transgender male patients. The ovarian cortex was cut into fragments of 2 mm, 3 mm, and 4 mm, and placed in a 96-well plate suitable for cultivation at days 0, 2, 4, 6, and 8, when the histology was analyzed. RESULTS: Stromal hyperplasia was observed in all samples, and it was not associated with the obtainment of primordial or primary follicles. Peripheral reduction in cell count was also a recurrent finding. Primordial and primary follicles were identified with a heterogeneous pattern in fragments from the same patient and from different patients, and follicles in more advanced stages of development (secondary and antral) were not found. There was an association between the diameter of the ovarian fragments and the identification of primary follicles (p = 0.036). The number of days in culture was associated with histological signs of tissue damaging in the fragments (p = 0.002). The total number of follicles identified in the samples with 2 mm in diameter was significantly lower than in those that measured 4 mm in diameter (p = 0.031). CONCLUSION: A diameter of 4 mm is suitable for ovarian tissue culture with the benefit of ease of handling. Even after prolonged exposure to testosterone, the ovarian fragments presented primordial and primary follicles, maintaining viability throughout the days they were exposed to the culture. Freezing the ovarian cortex of transgender patients who will undergo surgery for gender reassignment would be an interesting option, in the future, for the preservation of fertility.

OBJETIVO: Avaliar as características reprodutivas e histológicas de tecido ovariano cultivado a fresco de pacientes transexuais masculinos. MéTODOS: Estudo experimental in vitro e piloto, no qual amostras foram coletadas durante a cirurgia de redesignação de sexo para pacientes transexuais masculinos. O córtex ovariano foi cortado em fragmentos de 2 mm, 3 mm, e 4 mm, e colocado em placa de 96 poços própria para cultivo nos dias 0, 2, 4, 6 e 8, quando a histologia foi analisada. RESULTADOS: Hiperplasia estromal foi observada em todas as amostras, e não esteve associada à obtenção de folículos primordiais ou primários. A redução periférica no número de células também foi um achado recorrente. Folículos primordiais e primários foram identificados com padrão heterogêneo em fragmentos do mesmo paciente e em fragmentos de pacientes diferentes, não sendo encontrados folículos em estágios mais avançados de desenvolvimento (secundários e antrais). Houve associação entre o diâmetro dos fragmentos ovarianos e a identificação dos folículos primários (p = 0,036). O número de dias de cultura esteve associado a sinais histológicos de lesão tecidual nos fragmentos (p = 0,002). O número total de folículos identificados nas amostras de 2 mm de diâmetro foi significativamente menor do que nas de 4 mm de diâmetro (p = 0,031). CONCLUSãO: O diâmetro de 4 mm parece ser mais adequado para a cultura de tecido ovariano com a vantagem de fácil manejo. Mesmo após exposição prolongada à testosterona, os fragmentos ovarianos apresentavam folículos primordiais e primários, e manteve a viabilidade ao longo dos dias de exposição à cultura. No futuro, o congelamento da cortical do ovário de pacientes transgêneros que se submeterão à cirurgia de redesignação sexual poderia ser uma opção interessante para a preservação da fertilidade.

Gene expression and tyrosine kinase activity of insulin receptor in uterine leiomyoma and matched myometrium.

OBJECTIVE: Our objective was to determine the insulin receptor (IR) mRNA levels and IR tyrosine kinase activity in normal myometrium and leiomyoma. DESIGN: Experimental study. SETTING: Academic research center. PATIENTS: Five women with leiomyoma submitted to hysterectomy. INTERVENTION: Plasma membrane fraction of human myometrium and leiomyoma were prepared and samples were incubated with and without insulin. mRNA was isolated and RT-PCR with specific primers was performed. MAIN OUTCOME MEASURE: Western blots of plasma membranes incubated with and without insulin were performed. Chemoluminescent methods followed by densitometry were used to assess IR autophosphorylation. RT-PCR with specific primers for IR gene sequences was used to determine IR mRNA levels. RESULTS: IR mRNA levels in myometrium (0.634+/-0.038) and in leiomyoma (0.649+/-0.047; p=0.813) were not different. The degree of insulin-stimulated IR autophosphorylation (relative optical density of the 95 kDa band) was also not different between myometrium (1.496+/-0.310) and leiomyoma (1.593+/-0.129; p=0.650). CONCLUSIONS: There was no difference in IR receptor expression and IR autophosphorylation between normal myometrium and leiomyoma. Other steps of insulin signaling chain may participate in the altered proliferation of leiomyomas.

Bases biomoleculares da oncogênese cervical / Molecular basis of cervical oncogenesis

A incidência e a mortalidade de câncer cervical têm diminuído, em parte pelo diagnóstico precoce e tratamento de lesões precursoras do câncer cervical. Neste trabalho são apresentadas as bases para a compreensão da oncogênese cervical. Diversos estudos demonstraram que o maior risco para desenvolver câncer de colo uterino é a não realização de exames citopatológicos, rotineiramente. O ciclo celular é controlado por genes supressores e estimuladores da proliferação celular. Quando ocorrem mutações, proto-oncogenes tornam-se oncogenes, que são carcinogênicos e causam multiplicação celular excessiva. Os genes supressores, em contraste, contribuem para o desenvolvimento de câncer quando são inativados por mutações. A perda da ação de genes supressores funcionais pode levar a célula ao crescimento inadequado. O ciclo celular também pode ser alterado pela ação de vírus, entre eles o HPV (human papilloma virus), de especial interesse na oncogênese cervical. Os tipos HPV 16 e 18 são os de maior interesse, freqüentemente associados a câncer cervical e anal. O mecanismo pelo qual os tipos de HPV transformam as células ainda não é completamente compreendido. O conhecimento das bases moleculares que estão envolvidas na oncogênese cervical tem sido possível devido a utilização de técnicas avançadas de biologia molecular. Algumas destas técnicas permitem identificar grupos de HPV de alto ou baixo risco (captura híbrida) ou identificação de tipos virais específicos (PCR). São técnicas de fácil utilização em laboratórios equipados, embora ainda com custo elevado.

A Mulher na rede (mundial de computadores - WWW) / The woman in the world wide web

A saúde da mulher envolve uma grande variedade de tópicos, inter-relaciona especialidades e disciplinas. Informaçöes sobre a saúde da mulher estäo ao nosso alcance na Internet. Entretanto buscar informaçöes de qualidade rapidamente pode tornar-se um trabalho enorme. Neste artigo säo apresentadas algumas páginas que fornecem informaçöes e serviços para promoçäo da saúde da mulher. Também säo apresentadas listas de correio para discussäo de tópicos específicos. A Internet é instrumento valioso para manter-se informado e atualizado. O conhecimento e a habilidade na utilizaçäo da rede auxiliará na atualizaçäo dos profissionais da saúde.